姜黄素防治大鼠高脂血症致肾脏损害的实验研究-高脂血症能治好吗.docx

姜黄素防治大鼠高脂血症致肾脏损害的实验研究|高脂血症能治好吗 摘要：目的：探讨姜黄素防治大鼠高脂血症致肾脏损害的作用。方法：喂食高脂饲料(膏粱厚味)造成大鼠高脂血症致肾脏损害模型，姜黄素(高、中、低剂量)同时干预给药，分别检测血脂(TG、TC、HDLC、LDIC)、血液流变学、24h尿蛋白量、尿N乙酰D氨基葡萄糖苷酶(NAG)、肾功能(Scr、BUN)、肾组织病理(肾脏指数、系膜基底膜面密度、毛细血管襻面密度)。结果：姜黄素能改善高脂血症大鼠TC、TG、LDLC、全血黏度、血浆黏度，并能降低尿蛋白量、尿NAG、肾脏指数、系膜基底膜面密度，提高毛细血管襻面密度，呈现量效依靠关系。结论：姜黄素能防治大鼠高脂血症致肾脏损害，以高剂量姜黄素作用最为显著。 关键词：高脂血症致肾脏损害；姜黄素；血脂；血液流变学；尿蛋白量；尿NAG；肾功能；肾脏病理 中图分类号：R285.5文献标识码：A文章编号：16737717(2007)09187804 高脂血症为现代医学病名，依据其发病机制及临床表现，可归属于中医“痰浊”、“瘀血”等范畴。痰浊、瘀血既是高脂血症的基本病理变更，又作为新的致病因素阻碍气机，损伤脉络，导致肾脏损害，出现系膜基质增多和肾小球硬化，因而，祛除痰瘀至关重要。姜黄功能行气破瘀，行气能行津消痰，破瘀能活血除瘀；姜黄素是姜黄的有效药理成分，药理学探讨表明：其降血脂、抗凝血和促纤溶等作用显著。据此，笔者开展了姜黄素防治大鼠高脂血症致肾脏损害的试验探讨。 1材料与方法 11试验材料 111试验动物Wistar大鼠，雄性，体重(210±20)g，购自上海斯莱克试验动物有限责任公司，许可证号SCXK(沪)20030003。 112药品与试剂 胆固醇(上海伯奥生物科技有限公司，批号：050204)，胆酸钠(杭州微生物试剂有限公司，批号：20050322)，干鸡蛋黄粉(南通康德生物制品有限公司)，猪油(杭州联华在水方超市)，姜黄素(上海三爱思试剂有限公司，批号：20040916)，舒降之(杭州默沙东制药有限公司，批号：P1207)，羧甲基纤维素钠(江苏省宜兴市通达化学有限公司，批号：040425)，总胆固醇、甘油三酯、高密度脂蛋白胆固醇、尿素氮测定试剂(宁波市慈城生化试剂厂)，低密度脂蛋白胆固醇测定试剂(日本第一化学药品株式会社)，肌酐测定试剂(济南希森美康医用电子有限公司)，考马斯亮蓝C250(国药集团化学试剂有限公司)，尿N乙酰D氨基葡萄糖苷酶测定试剂(日本协和医药株式会社)。 12试验方法 121动物分组试验大鼠先适应性饲养1周，然后随机分为6组(每组10只)：正常比照组(A组)、模型比照组(B组)、姜黄素高剂量组(C组)、姜黄素中剂量组(D组)、姜黄素低剂量组(E组)、舒降之组(F组)。 122试验方法分组后，正常比照组喂食一般饲料，模型比照组喂食高脂饲料(一般饲料中加入3胆固醇、1胆酸钠、7.5蛋黄粉和10猪油)，同时予1羧甲基纤维素钠溶液每天灌胃1次；舒降之组、姜黄素低、中、高剂量组在喂食高脂饲料同时即干预给药，舒降之组：舒降之用1羧甲基纤维素钠配成混悬液，按1.6mg/(kgd)灌胃给药；姜黄素低剂量组：姜黄素用1羧甲基纤维素钠配成混悬液，按40mg/(kgd)灌胃给药；姜黄素中剂量组：姜黄素用1羧甲基纤维素钠配成混悬液，按80mg/(kgd)灌胃给药；姜黄素高剂量组：姜黄素用1羧甲基纤维素钠配成混悬液，按160mg/(kgd)灌胃给药。用药各组采纳等容积不等浓度药液每天给药1次。灌胃前后1h禁食、禁水。各组视察治疗12周。 13检测指标 131血脂肾功能腹主静脉取血，采纳全自动生化分析仪检测血清总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDLC)、低密度脂蛋白胆固醇(LDLC)、肌酐(Ccr)和尿素氮(BUN)。 132血液流变学腹主静脉取血5mL，放人抗凝管中摇匀，在全自动血液流变快测仪上测定。 13324h尿蛋白量将大鼠置于清洁的代谢笼中，收集24h尿液，用尿蛋白定量考马斯亮蓝染料测定法在721型分光光度仪上测定。 134尿N乙酰D氨基葡萄糖苷酶(NAG)将大鼠置于清洁的代谢笼中，收集尿液，在全自动生化分析仪上采纳N乙酰氨基葡萄糖苷酶测定试剂(酶法)测定。 135肾组织病理称大鼠体重与肾重，计算肾脏指数(肾重/体重)。肾组织作HE和PAS染色，视察肾脏病理改变。400×光镜下采集HE染色肾组织病理图像，采纳三高CMIAS9813型多功能彩色计算图像分析系统进行肾小球病理分析，每张切片随机采集5个不重叠视野，分别测量每个视野中系膜基底膜面密度和毛细血管襻面密度，最终以每组的均值进行比较。 14统计方法 采纳SPSS11.5 for Windows统计软件，对试验数据进行单因素方差分析，试验数据以均数±标准差(x±s)表示，P0.05为有统计学显著性差异。 2结果 21血脂状况 模型比照组血清TC、LDLC、TG较正常比照组显著增高(P0.01)。经姜黄素治疗后，姜黄素高、中剂量组TC、LDL-C较模型比照组显著降低(P0.01)，与舒降之组比较无显著性差异；姜黄素高剂量组TC、LDL-C明显低于低剂量组(P0.050.01)；姜黄素高剂量组TG较模型比照组显著下降(P0.01)，也明显低于舒降之组(P0.05)。舒降之组TG与模型比照组比较无显著性差异(P0.05)。各治疗组血清HDLC较模型比照组虽无显著性差异(P0.05)，但有上升趋势。 22血液流变学状况 模型比照组全血黏度高切、中切、低切和血浆黏度较正常比照组显著增高(P0.01)。经姜黄素治疗后，姜黄素高剂量组全血黏度高切较模型比照组明显降低(P0.05)，姜黄素高、中剂量组全血黏度中切、低切和血浆黏度较模型比照组显著降低(P0.010.05)，姜黄素高剂量组全血黏度中切、低切和血浆黏度明显低于低剂量组(P0.050.01)，姜黄素高剂量组血浆黏度明显低于舒降之组(P0.05)。各组红细胞压积比较无显著性差异(P0.05)。 23尿蛋自量状况 模型比照组尿蛋白量较正常比照组显著增高(P0.01)。姜黄素高、中、低剂量组尿蛋白量较模型比照组明显降低(P0.010.05)，姜黄素高剂量组尿蛋白量显著低于低剂量组(P0.01)。舒降之组尿蛋白量较模型比照组也显著降低(P0.01)，与姜黄素高、中剂量组比较无显著性差异(P0.05)，但明显低于姜黄素低剂量组(P 0.05)。 24尿N乙酰BD氨基葡萄糖苷酶(NAG)状况 模型比照组尿NAG较正常比照组显著增高姜黄素高、中剂量组尿NAG较模型比照组显著降低(P0.01)，姜黄素高剂量组尿NAG明显低于低剂量组(P0.01)，舒降之组尿NAG较模型比照组也显著降低(P0.01)。 25肾功能状况 模型比照组Ser、BUN与正常比照组比较有上升趋势，但无显著性差异(P0.05)。各治疗组Scr、BUN与模型比照组比较无显著性差异(P0.05)，但有下降趋势。 26 肾组织病理状况 模型比照组肾脏指数较正常比照组显著增高(P0.01)；姜黄素高剂量组肾脏指数较模型比照组明显降低(P0.01)，也明显低于低剂量组(P0.05)。HE和PAS染色后，光镜下视察肾脏病理改变：模型比照组肾小球体积增大，系膜细胞轻中度增生，系膜基质轻中度增多，系膜区扩大，基底膜轻度不规则增厚，肾小球局部有空泡形成，偶见肾小球局灶节段性硬化等；各治疗组肾小球体积增大、系膜细胞增生和基质增多等变更呈不同程度地减轻，以姜黄索高剂量组减轻尤为显著，其次分别为舒降之组、姜黄素中剂量组、姜黄素低剂量组。模型比照组系膜基底膜面密度较正常比照组显著增高(P0.01)，姜黄素高韵量组系膜基底膜面密度较模型比照组显著降低(P0.01)，舒降之组系膜基底膜面密度较模型比照组也明显降低(P0.05)；模型比照组毛细血管襻面密度较正常比照组显著降低(P0.01)，姜黄素高剂量组毛细血管襻面密度较模型比照组显著增高(P0.01)，舒降之组毛细血管襻面密度较模型比照组也明显增高(P0.05)。 3讨论 高脂血症病因主要为饮食不节，脏腑功能失调；病机主要为气机障碍，痰瘀阻于脉络。进食膏粱厚味(高脂饮食)，腻脾碍胃，脾胃气机升降失常，运化失职，水谷不化精微，反生痰浊，“痰瘀同源”，痰阻络脉，致生瘀血。痰瘀互结，阻滞血脉，形成高脂血症。痰瘀阻滞肾络，造成肾脏损害。据此原理，本试验采纳高脂饲料(膏粱厚味)喂食大鼠造成高脂血症致肾脏损害模型。高脂饲料喂食大鼠12周后，模型比照组TC、TG和LDL显著增高，表明大鼠高脂血症造模成立。宋剑南等证明，TC、TG及LDL的上升是中医痰浊的主要特征和生化物质基础，因此，意味着产生了中医痰浊的病理改变。痰可致瘀，通过检测血液流变学发觉，模型比照组全血黏度高切、中切、低切和血浆黏度显著增高。蒋森认为，全血黏度、血浆黏度增高是血瘀证的重要指征。至此，大鼠高脂血症痰瘀同病既已形成。痰瘀阳滞肾络，造成肾脏损害。模型比照组尿蛋白量、尿NAG、肾脏指数显著增高，肾脏病理显示：肾小球体积增大，系膜细胞轻中度增生，系膜基质轻中度增多，系膜区大，基底膜轻度不规则增厚，肾小球局部有空泡形成，偶见肾小球局灶节段性硬化。上述改变证明高脂血症已致肾脏损害，且与中医“痰浊”、“瘀血”亲密相关，因而祛除痰瘀至关重要。姜黄功能行气、破血，行气能行津消痰，破瘀能活血除瘀，颇合上述医理。姜黄素是姜黄的有效药理成分，经治疗后，姜黄素高、中剂量组TC、LDLC较模型比照组显著降低(P0.01)，高剂量组TC、LDLC明显低于低剂量组(P0.05)，表明姜黄素具有准确的降低TC、LDLC作用，且存在量效依靠关系。姜黄素高剂量组TG较模型比照组显著下降(P0.01)，舒降之组与模型比照组比较无显著性差异，表明姜黄索降低血脂作用比舒降之更为全面。姜黄素高剂量组全血黏度高切较模型比照组明显降低(P0.05)，高、中剂量组全血黏度中切、低切和血浆黏度较模型比照组显著降低(P0.010.05)，高剂量组全血黏度中切、低切和血浆黏度明显低于低剂量组(P0.050.01)，表明姜黄素具有降低血液黏度的作用，且呈现量效依靠关系。姜黄素高剂量组血浆黏度明显低于舒降之组(P0.05)，表明高剂量姜黄素降低血液黏度疗效好于舒降之。姜黄素既能降低血脂，又能改善血液黏度，从而达到消痰除瘀，防治高脂血症致肾脏损害。试验探讨表明：姜黄素高、中、低剂量组尿蛋白量较模型比照组显著削减(P0.05)，高剂量组尿蛋白量明显少于低剂量组(P0.01)；姜黄素高、中剂量组尿NAG较模型比照组明显削减(P0.01)，高剂量组尿NAG显著少于低剂量组(P0.01)；姜黄素各剂量组肾小球系膜细胞增生和基质增多等病理变更呈不同程度地减轻，以高剂量组为最显著，其次分别为中剂量组、低剂量组；姜黄素高剂量组肾脏指数较模型比照组明显降低(P0.01)，也明显低于低剂量组(P0.05)；姜黄素高剂量组系膜基底膜面密度显著降低、毛细血管襻面密度显著增高，与模型比照组比较，P0.01。上述结果表明姜黄素具有防治高脂血症致肾脏损害、改善肾脏病理改变的作用，并且存在量效依靠关系。模型比照组Ser、BUN与正常比照组比较虽有上升趋势，但无显著性差异，表明本试验模型高脂血症尚未造成肾脏功能严峻损害；姜黄素各剂量组Scr、BUN与模型比照组比较虽无显著性差异，但有下降趋势，表明姜黄索具有潜在的爱护肾脏功能的作用。