ATP荧光法细菌总数快速检测系统-实时荧光定量pcr快速检测.docx

ATP荧光法细菌总数快速检测系统|实时荧光定量pcr快速检测 全面提高我国食品卫生水平是解决食品平安问题的重要方面，不仅须要法制建设、执法管理、科技保障和全民科学、道德教化等诸多方面的努力，还要赖于建立一套能对食品原料、生产设备。流通营销环节的包装材料、窗口等进行有效卫生监督和预警的技术手段。ATP荧光法细菌总数快检仪是一种利用新型微生物ATP生物发光法测定食品中细菌污染程度的快速检测设备。其依据萤火虫发光原理研制，经国家有关部门鉴定，是具有自主学问产权的第一款国产细菌快检设备。相对于传统的试验室培育法(48-72小时)，该仪器在15分钟内即可完成测试，而且精确度高、操作简洁、携带便利，与电脑连接，可即时检测样品，数分钟便可得到结果。 组成部件 体细胞裂解试剂组(TRA)：能专而有效地裂解样品中的非细菌细胞(体细胞)并释出ATP，然后通过过滤比色杯底部的滤膜将其解除。 细菌细胞裂解试剂组(XRA)：能专一而有效地裂解样品中细菌细胞并释出ATP。 荧光反应试剂组(LLR)：能与样品中的细菌ATP相互作用并有效地发出荧光。 功能特点 ATP荧光法细菌总数快检仪可分度裂解及过滤除去非细菌的干扰，检测时间199秒自由设定，量程范围01010cfumL，实际检测的灵敏度(ATP)为5×10-16moL。 由于采纳了光电信增管光子计数技术并且有效地遮掩了体ATP的干扰，该系统具有很高的灵敏度，此外由于试剂组和微量荧光检测能检测低限相当于大约500个细菌ATP荧光值(RLU)，加上拥有样品浓缩装置，系统灵敏性得到了进一步提高，可以检测水和液体制品，构成该系统的组成部件可安放在一个小型手提工具箱内(图1)，总重量不超过2.5克，携带便利，系统操作简洁。 检测步骤 检测操作应在无菌室内进行，为避开操作过程中的交叉污染，操作人员应戴手套，待检样品要按无菌操作程序采集和处理，用PBS溶液制备咸肉眼可见的凝絮、颗粒，过分黏稠样品须适当稀释。某些检测试剂组用前10分钟应从冰箱内取出置室温平衡。荧光检测仪、试剂组、检测样品应井然有序，合理安放。 (1)取出双层塑料质比色杯架，底层上垫放5张专用吸水纸，并将带滤膜比色杯放入架眼内，用移液器吸取检样50mL注入杯底。检测前打开荧光检测仪电源，此时液晶显示屏显“0”值。 (2)用移液器从带蓝盖的TRA试剂瓶吸取体细胞裂解试剂组溶液，向杯底滴加4滴，透亮塑料加压器置杯顶加压，使杯中非细菌ATP、游离ATP通过底部滤膜排出，由吸水纸吸净。重复加压步骤一次，取下比色杯置于可拉动抽屉内。 (3)用移液器从带粉色盖的XRA试剂瓶中吸取细菌细胞裂解试剂组液体两滴，垂直滴入杯底。 (4)用移液器从LLR试剂瓶吸取荧光反应试剂组50mL加入杯底(图2)，缓和的吸挤3次，混匀反应液(从滴加LLR起先通过默数计时，直至抽屉推入检测室为止，务求时间一样对达到平行样品数据一样非常关键)。 (5)记录屏幕显示的相对荧光值(RLU)。 应用领域及优点 ATP荧光法细菌总数快检仪可供食品加工生产的全程监测，快速检测各种样品中的微生物细菌总数。表1列出“快检系统”和“常规平皿计数”方法的差别和利弊。 快检系统的优点和应用效益：可依据检测得到的实时资料，马上实行对应措施，削减奢侈；可在综合分析检测数据的基础上预料将来可能发生的事故；削减清洁消毒的盲目性，提高决策的科学性；大幅度减轻常规细菌总数平皿检测的工作量，提高检测效率；有利于实施HACCP认证体系和管理标准化；为卫生监督员的现场处理供应牢靠依据；可广泛应用于食品、饮料生产企业及宾馆饭店的日常卫生规范。 结论 国产便携式ATP细菌快速检测系统可以完成液体、固体、表面干净度等全面的细菌快速检测，并能按国标法将光值自由换算成细菌总数，适用于卫监、工商、食药、环境、工商等相关食品平安执法部门做为执法手段，也可以用于各行业的企业做为微生物检测的手段，限制微生物指标。本系统也可自动储存数据，且连接电脑操作简便，更增加了智能化的效果。该仪器可满意常规检测的要求，达到国外同类产品的性能，并具有价格优势，将为提高我国食品平安水平，建立食品保持期科学预报和溯源制度、公共卫生生物突发事务预警体系，以及食品平安监管发面发挥重要作用。