医药工业洁净室（区）悬浮粒子、浮游菌和沉降菌的测试方法hiif.docx

ICS 13.0400.300C 100中华人民民共和国国国家标标准GB/TT 1662922166294419996医药工业业洁净室室（区）悬悬浮粒子子、浮游菌和和沉降菌菌的测试试方法Testt meethood ffor airrborrne parrticcless, aairbbornne mmicrrobeeand setttliing miccrobbe iin ccleaan rroomm(arrea)of tthe phaarmaaceuuticcal inddusttry19966-044-100发布 119966-100-011实施国家技术术监督局局发布目次GB/TT 166292219996 医药工工业洁净净室（区区）悬浮浮粒子的的测试方方法GB/TT 166293319996 医药工工业洁净净室（区区）浮游游菌的测测试方法法GB/TT 166294419996 医药工工业洁净净室（区区）沉降降菌的测测试方法法GB/TT 166292219996前言本标准等等效采用用美国联联邦标准准FS-2099E19992洁洁净室和和洁净区区内空气气浮游粒粒子洁净净等级，并并参考JJGJ 7190洁洁净室施施工及验验收规范范制定定的。悬浮粒子子和微生生物的测测试是评评价医药药工业洁洁净室（区区）空气气洁净度度的主要要指标。本本标准用用悬浮粒粒子的测测试来评评价洁净净室（区区）空气气中的尘尘粒数。医药工业业洁净室室（区）的的悬浮粒粒子测试试方法，应应采用本本标准。本标准从从生效之之日起，废废止YYY/T 0144193。本标准的的附录AA是标准准的附录录。本标准的的附录BB是提示示的附录录。本标准由由国家医医药管理理局提出出并归口口。本标准起起草单位位：上海海医药管管理局药药品测试试所。本标准主主要起草草人：纪纪炜、徐徐进庆、沈沈建华。中华人民民共和国国国家标标准GB/T162921996医药工业业洁净室室（区）悬悬浮粒子子的测试方法法Testt meethood ffor airrborrne parrticcless inn clleannroomm (aareaa) oof tthe phaarmaaceuuticcal inddusttry1 范范围本标准规规定了医医药工业业洁净室室（区）中中悬浮粒粒子的测测试方法法和悬浮浮粒子而而言的空空气洁净净度的评评定。本标准适适用于医医药工业业洁净（区区）中悬悬浮粒子子洁净度度的监测测和洁净净度等级级的验证证。2 引引用标准准下列标准准所包含含的条文文，通过过在本标标准中引引用而构构成为本本标准的的条文。本本标准出出版时，所所示版本本均为有有效，所所有标准准都会被被修订，使使用本标标准的各各方应探探讨使用用下列标标准最新新版本的的可能性性。JGJ 7190 洁净室室施工及及验收规规范3 定定义本标准采采用下列列定义。3.1 洁净净室（区区） cleean rooom（areea）对尘粒及及微生物物污染规规定需进进行环境境控制的的房间或或区域。其其建筑结结构、装装备及其其使用均均具有减减少对该该区域内内污染源源的介入入、产生生和滞留留的功能能。3.2 局部部空气净净化 loccaliizedd aiir ppuriificcatiion仅使室内内工作区区域特定定的局部部空间的的空气含含悬浮粒粒子浓度度达到规规定的空空气洁净净度级别别，这种种方式称称局部空空气净化化。3.3 粒子子 ppartticlle一般尺寸寸为0.001110000m的固态态和液态态物质。3.4 洁净度度 ccleaanliinesss洁净环境境内单位位体积空空气中含含大于或或等于某某一粒径径的悬浮浮粒子的的允许统统计数。3.5 单向向流 uniidirrecttionnal airr fllow（普普称为层层流laaminnar floow）沿着平行行流线，以以一定流流速、单单一通路路、单一一方向流流动的气气流。3.6 非单单向流 noonunnidiirecctioonall aiir ffloww（曾称称为乱流流turrbullentt fllow）具有多个个通路循循环特性性或气流流方向不不平行的的，不满满足单向向流定义义的气流流。3.7 t分分布 tt diistrribuutioon正态总体体中的一一种抽样样分布，其其分布函函数为 t·················(11)3.8 置信信上限（UCL） upper confidence limit从正态分分布抽样样得到的的实际均均值按给给定的置置信度（此此外为995%）计计算得到到的估计计上限将将大于此此实际均均值，则则称计算算得到的的这一均均值估计计上限为为置信上上限。3.9 静态态测试 att-reest tesst洁净室（区区）净化化空气调调节系统统已处于于正常运运行状态态，工艺艺设备已已安装，洁洁净室（区区）内没没有生产产人员的的情况下下进行的的测试。3.100 动动态测试试 ooperratiionaal ttestt洁净室（区区）已处处于正常常生产状状态下进进行的测测试。4 测测试方法法4.1 方法法提要本测试方方法采用用计数浓浓度法，即即通过测测定洁净净环境内内单位体体积空气气中含大大于或等等于某粒粒径的悬悬浮粒子子数，来来评定洁洁净室（区区）的悬悬浮粒子子洁净度度等级。4.2 仪器器 a）光光散射粒粒子计数数器（用用于粒径径大于或或等于00.5m的悬浮浮粒子计计数）；b）滤膜膜显微镜镜（用于于粒径大大于或等等于5m的悬浮浮粒子计计数）。4.2.1 光散射射粒子计计数器原原理空气中的的悬浮粒粒子在光光的照射射下产生生光散射射现象，散散射光的的强度与与粒子的的表面积积成正比比。4.2.2 光散射射粒子计计数器使使用要点点使用仪器器时应严严格按照照仪器说说明书操操作。4.2.2.11 仪仪器开机机，预热热至稳定定后，方方可按说说明书的的规定对对仪器进进行校正正。4.2.2.22 采采样管口口置采样样点采样样时，在在确认计计数稳定定后方可可开始连连续读数数。4.2.2.33 采采样管必必须干净净，严禁禁渗漏。4.2.2.44 采采样管的的长度应应根据仪仪器的允允许长度度。除另另有规定定外，长长度不得得大于11.5mm。4.2.2.55 计计数器采采样口和和仪器工工作位置置应处在在同一气气压和温温度下，以以免产生生测量误误差。4.2.2.66 必必须按照照仪器的的检定周周期，定定期对仪仪器作检检定。以以保证测测试数据据的可靠靠性。5 测测试规则则5.1 测试试条件5.1.1 温度和和湿度洁净室（区区）的温温度和相相对湿度度应与其其生产及及工艺要要求相适适应（温温度控制制在188244,相对对湿度控控制在445%60%之间为为宜）。5.1.2 压差空气洁净净度不同同的洁净净室（区区）之间间的压差差应4.99Pa，空空气洁净净度级别别要求高高的洁净净室（区区）对相相邻的空空气洁净净度级别别低的洁洁净室（区区）一般般要求呈呈相对正正压。5.2 测试试状态有静态测测试和动动态测试试。静态测试试时，室室内测试试人员不不得多于于2人。测试报告告中应标标明测试试时所采采用的状状态。5.3 测试试时间5.3.1 对单向向流，测测试应在在净化空空气调节节系统正正常运行行时间不不少于110miin后开开始。5.3.2 对非单单向流，测测试应在在净化空空气调节节系统正正常运行行时间不不少于330miin后开开始。5.4 悬浮浮粒子计计数5.4.1 采样点点数目及及其布置置悬浮粒子子洁净度度监测的的采样点点数目及及其布置置应根据据产品的的生产及及工艺关关键操作作区设置置。采样样点布置置规则见见附录AA（标准准的附录录）。悬浮粒子子洁净度度等级验验证的采采样点数数目应按按5.44.1.1和55.4.1.22布置。5.4.1.11 最最少采样样点数目目悬浮粒子子洁净度度测试的的最少采采样点数数目可查查表1确确定。表1 最少采采样点数数目面 积m2洁 净 度 级级 别1001000001000000<10232210<20042220<40082240<100016421000<2200401032000<4400802064000<110000160401310000<<20000400100322 000080020063注：表中中的面积积，对于于单向流流洁净室室，指的的是送风风面积，对对非单向向流洁净净室，指指的是房房间面积积。5.4.1.22 采采样点的的位置 a）采采样点一一般在离离地面00.8mm高度的的水平面面上均匀匀布置。b）采样样点多于于5点时时，也可可以在离离地面00.8mm1.5m高高度的区区域内分分层布置置，但每每层不少少于5点点。5.4.2 采样点点的限定定对任何小小洁净室室或局部部空气净净化区域域，采样样点的数数目不得得少于22个，总总采样次次数不得得少于5次次。每个个采样点点的采样样次数可可以多于于1次，且且不同采采样点的的采样次次数可以以不同。5.4.3 采样量量不同洁净净度级别别每次最最小的采采样量见见表2。表2 最小采采样量洁净度级级别采样量，L/次0.55m5mm1005.6661000002.8338.510000002.8338.55.4.4 采样注注意事项项5.4.4.11 在在确认洁洁净室（区区）送风风量和压压差达到到要求后后，方可可进行采采样。5.4.4.22 对对于单向向流，计计数器采采样管口口朝向应应正对气气流方向向，对于于非单向向流，采采样管口口宜向上上。5.4.4.33 布布置采样样点时，应应避开回回风口。5.4.4.44 采采样时，测测试人员员应在采采样口的的下风侧侧。6 结结果计算算悬浮粒子子浓度的的采样数数据应按按下述步步骤作统统计计算算：6.1 采样样点的平平均粒子子浓度 AA= ····················（2）式中：AA某一一采样点点的平均均粒子浓浓度，粒粒/m3; CCi某一一采样点点的粒子子浓度（i=1，2，···，N），粒/ m3； NN某一一采样点点上的采采样次数数，次。6.2 平均均值的均均值 MM= ····················（3）式中：MM平均均值的均均值，即即洁净室室（区）的的平均粒粒子浓度度，粒/m3； AAi某一采采样点的的平均粒粒子浓度度（i=1，2，····，L），粒粒/m3； LL某一一洁净室室（区）内内的总采采样点数数，个。6.3 标准准误差 SEE= ·············（44）式中：SSE平均值值均值的的标准误误差，粒粒/ mm3 。6.4 置信信上限 UCLL=M+t×SE ····················（5）式中：UUCL平均均值均值值的955%置信信上限，粒粒/ mm3； tt995%置置信上限限的t分布系系数，见见表3。表3 95%置信上上限的tt分布系系数采样点数数L23456789>9t6.3112.9222.3552.1332.0221.9441.9001.866注：当采采样点数数多于99点时，不不需要计计算UCCL。7 结结果评定定判断悬浮浮粒子洁洁净度级级别应依依据下述述二个条条件。7.1 每个个采样点点的平均均粒子浓浓度必须须低于或或等于规规定的级级别界限限，即AAi级别界界限。7.2 全部部采样点点的粒子子浓度平平均值均均值的995%置置信上限限必须低低于或等等于规定定的级别别界限，即即UCLL级别界界限。附 录录 AA（标准准的附录录）洁净室（区区）采样样点布置置A1 洁净室室（区）采采样点布布置力求求均匀，避避免采样样点在某某局部区区域过于于稀疏。下下列采样样点的图图示可作作参考。 · ·· ·注：·为为采样点点。图A1A2 洁净棚棚（层流流罩），洁洁净工作作台等局局部空气气净化设设施的采采样点布布置：A2.11 水水平单向向流A2.22 垂垂直单向向流图A2图A3采样点数数参见55.4.1.11，采样样点一般般在工作作台面上上0.22m高度度的平面面上均匀匀布置。附录 B（提提示的附附录）国内外有有关悬浮浮粒子的的测定的的标准洁净度级级别中国卫生生部GMMP（19992年修修订）美国联邦邦标准FS-2209EE世界卫生生组织（WHO）及欧共体体（ECC）GMPP尘粒数/m3等级限值值/ mm3尘粒的最最大允许许数/ m30.55m5mm0.55m5mm0.55m5mm1003500003530035000100000350000002000035300002470035000002000010000003500000002000003 533000002470003 50000000200000GB/TT 166293319996前言本标准依依照国内内外药药品生产产管理规规范（GMP）的要求，非等效采用美国国家航空及宇宙航行局NASA标准NHB5340-2关于洁净室和洁净室工作台微生物的控制标准，并参考JGJ 7190洁净室施工验收规范制定的。悬浮粒子子和微生生物的测测试是评评价医药药工业洁洁净室和和洁净区区空气洁洁净度的的主要指指标。本本标准用用浮游菌菌评价洁洁净室和和洁净区区空气中中的微生生物。医药工业业洁净室室（区）浮浮游菌的的测试应应采用本本标准的的规定。本标准的的附录AA、附录录B、附录录C都是标标准的附附录。本标准的的附录DD是提示示的附录录。本标准由由国家医医药管理理局提出出并归口口。本标准起起草单位位：中美美上海施施贵宝制制药有限限公司、上上海医药药局药品品测试所所、上海海四药股股份有限限公司。本标准主主要起草草人：顾顾锋、钱钱周、步步伯荪、唐唐小珍。中华人民民共和国国国家标标准GB/T162931996医药工业业洁净室室（区）浮浮游菌的的测试方法法Testt meethood ffor airrborrne miccrobbe iin ccleaanroomm(arrea) off thhe ppharrmacceutticaal iinduustrry1 范范围本标准规规定了医医药工业业洁净室室和洁净净区中浮浮游菌测测试条件件、测试试方法。本标准适适用于医医药工业业洁净室室和洁净净区，无无菌室或或无菌区区域（包包括洁净净工作台台）的浮浮游菌的的测定和和环境的的验证。2 引引用标准准下列标准准包含的的条文，通通过在本本标准中中引用而而构成为为本标准准的条文文。本标标准出版版时，所所示版本本均为有有效。所所有标准准都会被被修订，使使用本标标准的各各方应探探讨使用用下列标标准最新新版本的的可能性性。YY/TT 01188.619995 药品检检验操作作规程第第6部分：药品生生物测定定法3 定定义本标准采采用下列列定义。3.1 洁净净室（区区） cleean rooom（areea）对尘粒及及微生物物污染规规定需进进行环境境控制的的房间或或区域。其其建筑结结构、装装备及其其使用均均具有减减少对该该区域内内污染源源的介入入、产生生和滞留留的功能能。3.2 洁净净工作台台 ccleaaninng wworkk sttatiion一种工作作台或者者与之类类似的一一个封闭闭围挡工工作区。其其特点是是自身能能够供给给经过过过滤的空空气或气气体，如如垂直层层流罩、水水平层流流罩、垂垂直层流流洁净工工作台、水水平层流流洁净工工作台、自自净器等等。3.3 菌落落 ccoloony forrminng uunitts细菌培养养后，由由一个或或几个细细菌繁殖殖而形成成的一细细菌集落落，简称称CFUU。通常常用个数数表示。3.4 浮游游菌 airrborrne miccrobbe用本标准准提及的的方法收收集悬浮浮在空气气中的活活微生物物粒子，通通过专门门的培养养基，在在适宜的的生长条条件下繁繁殖到可可见的菌菌落数。3.5 浮游游菌浓度度 aairbbornne mmicrrobee coonceentrratiion单位体积积空气中中含浮游游菌菌落落数的多多少，以以计数浓浓度表示示，单位位是个/m3或个/LL。3.6 悬浮浮粒子 aiirboornee paartiiclees可悬浮在在空气中中的尺寸寸一般在在0.0001m110000m之间间的固体体、液体体或两者者的混合合物质，包包括生物物性粒子子和非生生物性粒粒子。3.7 洁净净度 cleeanllineess洁净环境境内单位位体积空空气中含含大于或或等于某某一粒径径的悬浮浮粒子的的允许统统计数。3.8 单向向流 uniidirrecttionnal airr fllow（曾曾称为层层流laaminnar floow）沿着平行行流线，以以单一通通路以一一定流速速向单一一方向流流动的气气流。3.9 非单单向流 noonunnidiirecctioonall aiir ffloww（曾称称为乱流流turrbullentt fllow）具有多个个通路循循环特性性或气流流方向不不平行的的，不满满足单向向流定义义的气流流。3.100 静静态测试试 aat-rrestt teest洁净室（区区）净化化空气调调节系统统已处于于正常运运行状态态，工艺艺设备已已安装，洁洁净室（区区）内没没有生产产人员的的情况下下进行的的测试。3.111 动动态测试试 ooperratiionaal ttestt洁净室（区区）已处处于正常常生产状状态下进进行的测测试。4 测测试方法法4.1 方法法提要本方法采采用计数数浓度法法，即通通过收集集悬游在在空气中中的生物物性粒子子于专门门的培养养基，经经若干时时间，在在适宜的的生长条条件下让让其繁殖殖到可见见的菌落落进行计计数，从从而判定定洁净环环境内单单位体积积空气中中的活微微生物数数，以此此来评定定洁净室室（区）的的洁净度度。4.2 所用用的仪器器、设备备和培养养基 a）浮浮游菌采采样器；b）真空空抽气泵泵；c）培养养皿；d）培养养基；e）恒温温培养箱箱。4.3 浮游游菌采样样器浮游菌采采样器宜宜采用撞撞击法机机理的采采样器，一一般采用用狭缝式式采样器器或离心心式采样样器。4.3.1 采用的的浮游菌菌采样器器必须要要有流量量计和定定时器。4.3.2 狭缝式式采样器器的原理理狭缝式采采样器由由附加的的真空抽抽气泵抽抽气，通通过采样样器的缝缝隙式平平板，将将采集的的空气喷喷射并撞撞击到缓缓慢旋转转的平板板培养基基表面上上，附着着的活微微生物粒粒子经培培养后形形成菌落落，予以以计数。4.3.3 离心式式采样器器的原理理离心式采采样器由由于内部部风机的的高速旋旋转，气气流从采采样器前前部吸入入从后部部流出，在在离心力力的作用用下，空空气中的的活微生生物粒子子有足够够的时间间撞击到到专用的的固形培培养条上上，经培培养后形形成菌落落，予以以计数。4.3.4 狭缝式式采样器器的使用用要点应严格按按仪器说说明书的的要求进进行操作作。4.3.4.11校验采样器必必须按仪仪器的检检定周期期，定期期对仪器器作检定定，以保保证测试试数据的的可靠性性。校验验的项目目有：定定时器、转转盘转速速、流量量计。4.3.2 每次测测试前应应按说明明书上的的规定，先先接通电电源，启启动真空空抽气泵泵，然后后调节流流量计及及定时器器。4.3.4.33 空空气采样样量根据据需要选选定。已已知采样样器的流流量（LL/miin），设设定采样样时间（min），两者相乘即采样量（L）。4.3.4.44 注注意事项项4.3.4.44.1 采样样口必须须用便于于消毒及及化学性性能稳定定的材料料制造。4.3.4.44.2 采样样管严禁禁渗漏，内内壁应光光滑。4.3.4.44.3采采样管的的长度应应根据测测点的高高度定，尽尽量减少少弯曲。4.4 真空空抽气泵泵4.4.1 真空抽抽气泵的的排气量量应与采采样器匹匹配。4.4.2 宜采采用无油油真空抽抽气泵，必必要时可可在非气气口安装装气体过过滤器。4.4.3 真空抽抽气泵安安装的位位置必须须适当，一一般装在在采样器器下面。4.5 培养养皿4.5.1 狭缝式式采样器器一般采采用Æ 1550mmm×15mmm、ÆÆ 900mm××15mmm、ÆÆ 655mm××15mmm三种种规格的的硼硅酸酸玻璃培培养皿。可可根据所所选用采采样器选选择合适适的培养养皿。4.5.2 离心式式采样器器采用专专用的固固形培养养条。4.6 培养养基普通肉汤汤琼脂培培养基或或其他药药典认可可的培养养基。其其配制方方法见附附录A（标标准的附附录）。4.7 恒温温培养箱箱必须定期期对培养养箱的温温度计进进行检定定。4.8 测试试步骤4.8.1 测试前前仪器、培培养皿表表面必须须严格消消毒。4.8.1.11 采采样器进进入被测测房间前前先用消消毒房间间的消毒毒剂灭菌菌，用于于1000级洁净净室的采采样器宜宜一直放放在被测测房间内内。4.8.1.22 用用消毒剂剂擦净培培养皿的的外表面面。4.8.1.33 采采样前，先先用消毒毒剂消毒毒采样器器的顶盖盖、转盘盘以及罩罩子的内内外面，采采样结束束，再用用消毒剂剂轻轻喷喷射罩子子的内壁壁和转盘盘。4.8.1.44 采采样口及及采样管管，使用用前必须须高温灭灭菌。如如用消毒毒剂对采采样管的的外壁及及内壁进进行消毒毒时，应应将管中中的残留留液倒掉掉并晾干干。4.8.1.55 采采样者应应穿戴与与被测洁洁净区域域相应的的工作服服，在转转盘上放放入或调调换培养养皿前，双双手用消消毒剂消消毒。4.8.2 狭缝式式采样器器的采样样程序4.8.2.11 仪仪器经消消毒后先先不放入入培养皿皿，开动动真空泵泵抽气，使使仪器中中的残余余消毒剂剂蒸发，时时间不少少于5mmin，并并调好流流量、转转盘转速速。4.8.2.22 关关闭真空空泵，放放入培养养皿，盖盖上盖子子后调节节采样器器缝隙高高度。4.8.2.33 置置采样口口于采样样点后，依依次开启启采样器器、真空空泵，转转动定时时器，根根据采样样量设定定采样时时间。4.8.3 培养4.8.3.11 全全部采样样结束后后，将培培养皿倒倒置于恒恒温培养养箱中培培养。4.8.3.22 在在30355培养箱箱中培养养，时间间不少于于48hh。4.8.3.33 每每批培养养基应有有对照试试验，检检验培养养基本身身是否污污染。可可每批选选定3只只培养皿皿作对照照培养。4.8.4 菌落计计数4.8.4.11 用用肉眼直直接计数数、标记记或在菌菌落计数数器上点点计，然然后用55100倍放大大镜检查查，有否否遗漏。4.8.4.22 若若平板上上有2个个或2个个以上的的菌落重重叠，可可分辨时时仍以22个或22个以上上的菌落落计数。4.8.5 注意事事项4.8.5.11 使使用前仔仔细检查查每个培培养皿的的质量，培培养基及及培养皿皿有变质质、破损损或污染染的不能能使用。4.8.5.22 采采取一切切措施防防止采样样管的污污染和其其他人为为对样本本的污染染。4.8.5.33 对对培养基基、培养养条件及及其他参参数作详详细的记记录。4.8.5.44 由由于细菌菌种类繁繁多，差差别甚大大，计数数时一般般用透射射光于培培养皿背背面或正正面仔细细观察，不不要漏计计培养皿皿边缘生生长的菌菌落，并并须注意意细菌菌菌落或培培养基沉沉淀物的的区别，必必要时用用显微镜镜鉴别。5 测测试规则则5.1 测试试状态5.1.1 浮游菌菌测试前前，被测测试洁净净室（或或洁净区区）温、湿湿度须达达到规定定的要求求，静压压差、换换气次数数、空气气流速必必须控制制在规定定值内。5.1.2 浮游菌菌测试前前，被测测试洁净净室（或或洁净区区）已经经过消毒毒。5.1.3 测试状状态有静静态和动动态两种种，测试试状态的的选择必必须符合合生产的的要求，并并在报告告中注明明测试状状态。5.2 测试试人员5.2.1 测试人人员必须须穿戴符符合环境境级别的的工作服服。5.2.2 静态测测试时，室室内测试试人员不不得多于于2人。5.3 测试试时间5.3.1 对单向向流，如如1000级净化化房间及及层流工工作台，测测试应在在净化空空调系统统正常运运行不少少于100 miin后开开始。5.3.2 对非单单向流，如如100000级级，10000000级以以上的净净化房间间，测试试应在净净化空调调系统正正常运行行不少于于30 minn后开始始。5.4 浮游游菌浓度度计算5.4.1 采样点点数量及及其布置置5.4.1.11 最最少采样样点数目目浮游菌测测试的最最少采样样点数目目分为日日常监测测及环境境验证两两种情况况，见表表1。表1 最少采采样点数数目面 积m2洁 净净 度度 级级 别别1001000001000000验证监测验证监测验证监测<1023121210<2004221220<4008321240<10001644121000<2200401032000<4400802064001604013注：1）表表1中的的面积，对对于1000级的的单向流流洁净室室（包括括层流工工作台），指指的是送送风口表表面积，对对于1000000级，11000000级级的非单单向流洁洁净室，指指的是房房间面积积。 2）日日常监测测的采样样点数目目由生产产工艺的的关键操操作点来来确定。 a）对对每个1100级级洁净操操作区域域（如层层流罩、层层流工作作台），可可在离药药物敞开开口处330cmm处设测测点，每每班一次次。b）对每每个1000000级洁净净工作区区域（如如药物开开口工作作区）可可在工作作面处设设测点，每每班一次次。5.4.1.22 采采样点的的位置采样点位位置可以以同悬浮浮粒子测测试点。a）工作作区测点点位置离离地0.811.5mm左右（略略高于工工作面）。b）送风风口测点点位置离离开送风风面300cm左左右。c）可在在关键设设备或关关键工作作活动范范围处增增加测点点。采样点布布置的规规则见附附录B（标标准的附附录）。5.4.2 最小采采样量采样量根根据日常常检测及及环境验验证定，每每次最小小采样量量见表22。表2 最小采采样量洁净度级级别采样量，LL/次日常监测测环境验证证100级级6001 000010 0000级级400500100 0000级01005.4.3 采样次次数每个采样样点一般般采样一一次。5.4.4 采样注注意事项项5.4.4.11 对对于单向向流或送送风口，采采样器采采样管口口朝向应应正对气气流方向向；对于于非单向向流，采采样管口口向上。5.4.4.22 布布置采样样点时，至至少应离离开尘粒粒较集中中的回风风口1mm以上。5.4.4.33 采采样时，测测试人员员应站在在采样口口的下风风侧。5.5 记录录测试报告告中应记记录房间间温度、相相对湿度度、压差差及测试试状态。测试报告告的编写写见附录录C（标标准的附附录）。5.6 结果果计算5.6.1 用计数数方法得得出各个个培养皿皿的菌落落数。5.6.2 每个测测点的浮浮游菌平平均浓度度的计算算，见式式（1）。平均浓度度（个/m3）= ····················（1）例1：某某测点采采样量为为4000L，菌菌落数为为1，则则： 平均均浓度= =22.5个个/m33例2：某某测点采采样量为为2m33，菌落落数为33，则： 平均均浓度= =1.5个/m35.7 结果果评定用浮游菌菌平均浓浓度判断断洁净室室（区）空空气中的的微生物物。5.7.1 每个测测点的浮浮游菌平平均浓度度必须低低于所选选定的评评定标准准中关于于细菌浓浓度的界界限。5.7.2 若某测测点的浮浮游菌平平均浓度度超过评评定标准准，则必必须对此此区域先先行消毒毒，然后后重新采采样两次次，两次次测试结结果必须须合格。附 录 A（标标准的附附录）培养基的的准备及及灭菌A1 培养基基的准备备培养基可可以外购购或自行行配制。自自行配制制方法见见YY/T01188.6第66章无菌菌检查部部分中关关于此类类培养基基的配备备和操作作步骤。其其他符合合药典灵灵敏度要要求的培培养基亦亦可以自自行配制制。A2 培养基基平皿的的制备A2.11 将将培养皿皿置于1121湿热灭灭菌200minn或1880干热灭灭菌2hh。A2.22 将将培养基基加热熔熔化，冷冷却至445时，在在无菌操操作要求求下将培培养基注注入培养养皿。 注入入量：jj65mmm培养养皿 约110mLLj90mmm培养养皿 约220mLLj1500mm培培养皿 约660mLLA3 细菌的的培养待琼脂凝凝固后，将将培养基基平皿倒倒置于330355的恒温温培养箱箱中培养养48hh，若培培养基平平皿上确确无菌落落生长，即即可供采采样用。注：培养养基平皿皿宜在228的环境境中存放放。附 录 BB（标准准的附录录）采样点布布置洁净室和和洁净区区采样点点的布置置力求均均匀，避避免采样样点在某某局部区区域过于于集中，某某局部区区域于稀稀疏。下下列采样样点布置置的图示示可作参参考。· · · · 注：·为为采样点点附 录 C（标标准的附附录）浮游菌测测试报告告测试单位位测试日日期测试依据据生产批批号测试区域域（房间间或层流流工作台台）洁净度级级别 面积 mm2测试状状态 温度相相对湿度度%静压差 Pa采采样器名名称型号培养养基名称称送风口工作区采样点编编号Noo.采样速率率，L/minn采样量，mm3开始时间间菌落数，CCFU平均浓度度，CFFU/mm3最高浓度度CFUU/m33 最低低浓度CCFU/m3评定标准准 结论测试人日日期结果报告告人日期期批准人日日期附 录 D（提提示的附附录）国内外有有关浮游游菌测定定的标准准表 D11洁净度级级别美国NAASA标标准NHB5534002世界卫生生组织（WWHO）GGMP及欧洲共共同体（EEC）GGMP中国卫生生部GMMP（119922年修订订）生物性粒粒子最大大允许数数/m33微生物的的最大允允许数/m3活微生物物数/mm31003.55510000017661001000100000088.445005000GB/TT 166294419996前 言本标准依依照国内内外药药品生产产管理规规范（GGMP）的的要求，非非等效采采用美国国国家航航空及宇宇宙航行行局NAASA标标准NHHB53340-2关关于洁净净室和洁洁净工作作台微生生物的控控制标准准，并并参考JJGJ-90洁洁净室施施工验收收规范制制定。悬浮粒子子和微生生物的测测试是评评价医药药工业洁洁净室和和洁净区区空气洁洁净度的的主要指指标，本本标准用用沉降菌菌评价洁洁净室和和洁净区区空气中中的微生生物。医药工业业洁净室室（区）沉沉降菌的的测试应应采用本本标准的的规定。本标准的的附录AA、附录录B、附附录C都都是标准准的附