葡萄球菌病教案资料.ppt

葡萄球菌病生物学性状生物学性状n形态与染色形态与染色球形，葡萄串状，革兰染色阳性球形，葡萄串状，革兰染色阳性（G+）病原学病原学培养特性培养特性n易培养易培养普通平板普通平板血平板血平板n有色素有色素金黄色金黄色白色白色柠檬色柠檬色n有些菌溶血有些菌溶血产生溶血环产生溶血环生化反应生化反应n触酶阳性触酶阳性n多数菌分解葡萄糖、麦芽糖和蔗糖，产酸不产气多数菌分解葡萄糖、麦芽糖和蔗糖，产酸不产气n致病菌分解甘露醇致病菌分解甘露醇抗原构造抗原构造capsulepolysaccharide(teichoic acid)SPASPA（staphylococcal protein A）SPASPAIgGIgGFc receptorFc receptorPHAGOCYTEPHAGOCYTEBACTERIUMBACTERIUM FabFc 金黄色葡萄球菌（金黄色葡萄球菌（S.aureus）表皮葡萄球菌（表皮葡萄球菌（S.epidermidis）腐生葡萄球菌（腐生葡萄球菌（S.saprophyticus）性状性状金黄色葡萄球菌金黄色葡萄球菌表皮葡萄球菌表皮葡萄球菌腐生葡萄球菌腐生葡萄球菌菌落色素菌落色素金黄色金黄色白色白色白色或柠檬色白色或柠檬色发酵甘露醇发酵甘露醇+-凝固酶凝固酶+-溶素溶素+-耐热核酸酶耐热核酸酶+-致病性致病性+-分类分类n色素、生化反应色素、生化反应（致病性葡萄球菌的鉴别）（致病性葡萄球菌的鉴别）分类n凝固酶 阴性菌 阳性菌n噬菌体 群 群引起葡萄球菌肠毒素食物中毒nDNA相关性 32种抵抗力n对外界因素的抵抗力强于其他无芽胞菌对外界因素的抵抗力强于其他无芽胞菌n对碱性染料（龙胆紫）敏感n易产生耐药性，特别对青霉素致病物质致病物质毒素毒素葡萄球菌溶素葡萄球菌溶素毒性休克综合征毒素毒性休克综合征毒素1杀白细胞素杀白细胞素肠毒素肠毒素表皮剥脱毒素表皮剥脱毒素酶酶凝固酶凝固酶耐热核酸酶耐热核酸酶凝固酶（coagulase）n概念q使含有抗凝剂的人或兔血浆发生凝固的酶类物质q游离凝固酶free coagulaseq结合凝固酶bound coagulasen意义q鉴别有无致病性的重要指标n致病机理：q抵抗吞噬细胞的吞噬q保护病菌不受血清中杀菌物质的破坏q是感染局限化和形成血栓表皮剥脱毒素（exfoliative toxin）n引起机体发热，增加对内毒素的敏感性n可引起多个器官系统的功能紊乱或毒性休克综合征（TSS）n引起烫伤样皮肤综合征（staphylococcal scalded skin syndrome，SSSS）毒性休克综合征毒素-1（TSST-1）肠毒素肠毒素（enterotoxin）n约约1/3临床分离金黄色葡萄球菌可产生临床分离金黄色葡萄球菌可产生n引起急性胃肠炎，即引起急性胃肠炎，即食物中毒食物中毒n耐热耐热，抗胃肠液中蛋白酶，抗胃肠液中蛋白酶n作用机制：刺激呕吐中枢导致以呕吐为主要症作用机制：刺激呕吐中枢导致以呕吐为主要症状的食物中毒状的食物中毒葡萄球菌溶素（葡萄球菌溶素（staphylolysin）n溶素溶素n损伤细胞膜的毒素（细胞毒素）损伤细胞膜的毒素（细胞毒素）n细胞毒素细胞毒素n攻击中性粒细胞和巨噬细胞攻击中性粒细胞和巨噬细胞n抵抗宿主吞噬细胞，增强细菌侵袭力抵抗宿主吞噬细胞，增强细菌侵袭力杀白细胞素（杀白细胞素（leukocidin）所致疾病n化脓性炎症化脓性炎症q局部皮肤：疖、痈、毛囊炎、伤口化脓等局部皮肤：疖、痈、毛囊炎、伤口化脓等q脏器：心内膜炎、脑膜炎脏器：心内膜炎、脑膜炎q全身：败血症、脓毒血症全身：败血症、脓毒血症n毒素性疾病毒素性疾病q食物中毒食物中毒q烫伤样皮肤综合征烫伤样皮肤综合征(SSSS)q毒性休克综合征毒性休克综合征(TSS)n葡萄球菌性肠炎葡萄球菌性肠炎凝固酶阴性葡萄球菌凝固酶阴性葡萄球菌CNSn泌尿系感染泌尿系感染n细菌性心内膜炎细菌性心内膜炎n败血症败血症金黄色葡萄球菌金黄色葡萄球菌生物学特性生物学特性-菌体形态及培养特征菌体形态及培养特征n革兰氏革兰氏阳性球菌阳性球菌，直径为，直径为0.8-1.0微米，镜检时微米，镜检时呈单个、成对、四联或不规则的呈单个、成对、四联或不规则的簇群簇群；n无芽孢，不运动；无芽孢，不运动；n兼性厌氧菌，在好氧条件下生长最好；兼性厌氧菌，在好氧条件下生长最好；n可在可在15%氯化钠氯化钠和和40%胆汁中生长胆汁中生长生物学特性-菌体形态及培养特征n大多数菌株能生长在6.5-46之间（最适温度30-37）能在pH4.2-9.3之间生长（最适pH为7.0-7.5）；n大多数菌株产生类胡罗卜素，使细胞团呈现出深橙色到浅黄色，色素的产生取决于生长的条件，而且在单个菌株中可能也有变化生物学特性生物学特性-菌体形态及培养特征菌体形态及培养特征n好氧生长的细胞产生接触酶；好氧生长的细胞产生接触酶；n产生蛋白酶、脂肪酶、磷脂酶、脂酶和溶菌酶，产生蛋白酶、脂肪酶、磷脂酶、脂酶和溶菌酶，大多数菌株可水解天然的动物蛋白，例如血红大多数菌株可水解天然的动物蛋白，例如血红蛋白、纤维蛋白、卵白、酪朊和多肽类如明胶，蛋白、纤维蛋白、卵白、酪朊和多肽类如明胶，水解脂类、吐温类和磷脂蛋白质，并释放脂肪水解脂类、吐温类和磷脂蛋白质，并释放脂肪酸；酸；n所有的毒株产生所有的毒株产生凝固酶凝固酶，人和动物来源的菌株，人和动物来源的菌株通常可凝固兔、人、马和猪的血浆。通常可凝固兔、人、马和猪的血浆。致病性致病性n金黄色葡萄球菌为条件致病菌，菌株致病力的强弱金黄色葡萄球菌为条件致病菌，菌株致病力的强弱主要取决于其产生的毒素和侵袭性酶毒素和侵袭性酶：a.溶血素溶血素：外毒素，分外毒素，分、四种，能损伤血小板，破坏四种，能损伤血小板，破坏溶酶体，引起肌体局部缺血和坏死；溶酶体，引起肌体局部缺血和坏死；b.杀白细胞素杀白细胞素：可破坏人的白细胞和巨噬细胞；可破坏人的白细胞和巨噬细胞；c.血浆凝固酶血浆凝固酶：当金黄色葡萄球菌侵入人体时，该酶使血液或血当金黄色葡萄球菌侵入人体时，该酶使血液或血浆中的纤维蛋白沉积于菌体表面或凝固，阻碍吞噬细胞的吞噬作浆中的纤维蛋白沉积于菌体表面或凝固，阻碍吞噬细胞的吞噬作用。葡萄球菌形成的感染易局部化与此酶有关用。葡萄球菌形成的感染易局部化与此酶有关；d.脱氧核糖核酸酶脱氧核糖核酸酶：金黄色葡萄球菌产生的脱氧核糖核酸酶能耐金黄色葡萄球菌产生的脱氧核糖核酸酶能耐受高温，可用来作为依据鉴定金黄色葡萄球菌；受高温，可用来作为依据鉴定金黄色葡萄球菌；e.肠毒素肠毒素：金黄色葡萄球菌能产生数种引起急性胃肠炎的蛋白质金黄色葡萄球菌能产生数种引起急性胃肠炎的蛋白质性肠毒素，分为性肠毒素，分为A、B、C、D、E五种五种。致病性致病性 金黄色葡萄球菌金黄色葡萄球菌是人类是人类化脓感染化脓感染中最常中最常见的病原菌，临床表现见的病原菌，临床表现多种多样，可引起局部多种多样，可引起局部化脓感染，也可引起肺化脓感染，也可引起肺炎、伪膜性肠炎、心包炎、伪膜性肠炎、心包炎等，甚至败血症、脓炎等，甚至败血症、脓毒症等全身感染毒症等全身感染。致病性致病性n葡萄球菌性葡萄球菌性食物中毒食物中毒是葡萄球菌肠毒素所引起是葡萄球菌肠毒素所引起的疾病，可引发不同程度的急性胃肠炎症状，的疾病，可引发不同程度的急性胃肠炎症状，恶心、呕吐最为突出而且普遍，腹痛、腹泻次恶心、呕吐最为突出而且普遍，腹痛、腹泻次之。之。n当金黄色葡萄球菌污染了含淀粉及水分较多的当金黄色葡萄球菌污染了含淀粉及水分较多的食品，如牛奶和奶制品、肉、蛋等，在温度条食品，如牛奶和奶制品、肉、蛋等，在温度条件适宜时，经件适宜时，经8-10小时即可相当数量的肠毒素。小时即可相当数量的肠毒素。分布分布n在自然界中广泛存在，空气、水、灰尘及人和动物的在自然界中广泛存在，空气、水、灰尘及人和动物的排泄物中都可找到。排泄物中都可找到。n作为人和动物的常见病原菌，其主要存在于人和动物作为人和动物的常见病原菌，其主要存在于人和动物的鼻腔、咽喉、头发上，的鼻腔、咽喉、头发上，50%以上健康人的皮肤上都以上健康人的皮肤上都有金黄色葡萄球菌存在。因而，食品受其污染的机会有金黄色葡萄球菌存在。因而，食品受其污染的机会很多。很多。n传播媒介为被该菌污染的食品，主要为淀粉类传播媒介为被该菌污染的食品，主要为淀粉类(如剩如剩饭、米面、粥等饭、米面、粥等)、牛乳及乳制品，以及鱼、肉、蛋、牛乳及乳制品，以及鱼、肉、蛋类等。被污染的食物在室温类等。被污染的食物在室温20-22放置放置5小时以上小时以上时，病菌大量繁殖，并产生肠毒素。时，病菌大量繁殖，并产生肠毒素。葡萄球菌皮肤感染葡萄球菌皮肤感染流行病学流行病学n季节分布，多见于春夏季；季节分布，多见于春夏季；n中毒食品种类多，如奶、肉、蛋、鱼及其制品。中毒食品种类多，如奶、肉、蛋、鱼及其制品。此外，剩饭、油煎蛋、糯米糕及凉粉等引起的此外，剩饭、油煎蛋、糯米糕及凉粉等引起的中毒事件也有报道。上呼吸道感染患者鼻腔带中毒事件也有报道。上呼吸道感染患者鼻腔带菌率菌率83%，所以人畜化脓性感染部位常成为污，所以人畜化脓性感染部位常成为污染源。染源。流行病学流行病学金黄色葡萄球菌肠毒素金黄色葡萄球菌肠毒素是个世界性卫生是个世界性卫生问题，在美国由金黄色葡萄球菌肠毒素引起的问题，在美国由金黄色葡萄球菌肠毒素引起的食物中毒占整个细菌性食物中毒的食物中毒占整个细菌性食物中毒的33%，加拿，加拿大则更多，占大则更多，占45%，我国每年发生的此类中毒，我国每年发生的此类中毒事件也非常多。事件也非常多。流行病学流行病学肠毒素形成条件：肠毒素形成条件：存放温度，在存放温度，在37C内，温度越高，产毒时间内，温度越高，产毒时间越短；越短；存放地点，通风不良氧分压低易形成肠毒素；存放地点，通风不良氧分压低易形成肠毒素；食物种类，含蛋白质丰富，水分多，同时含食物种类，含蛋白质丰富，水分多，同时含一定量淀粉的食物，肠毒素易生成。一定量淀粉的食物，肠毒素易生成。耐受力耐受力n几乎所有的消毒试剂以及热加工过程对金黄色几乎所有的消毒试剂以及热加工过程对金黄色葡萄球菌都有严重的破坏作用葡萄球菌都有严重的破坏作用n肠毒素可耐受肠毒素可耐受10030分钟不被破坏。分钟不被破坏。n对于加工过的食品或食品加工设备而言，此菌对于加工过的食品或食品加工设备而言，此菌或其肠毒素的存在通常作为卫生条件差的一种或其肠毒素的存在通常作为卫生条件差的一种指标。指标。污染的控制污染的控制n防止金黄色葡萄球菌污染防止金黄色葡萄球菌污染食品食品 防止防止带菌人群带菌人群对各种食物的污染：定期对生对各种食物的污染：定期对生产加工人员进行健康检查，患局部化脓性感染产加工人员进行健康检查，患局部化脓性感染（如疥疮、手指化脓等）、上呼吸道感染（如（如疥疮、手指化脓等）、上呼吸道感染（如鼻窦炎、化脓性肺炎、口腔疾病等）的人员要鼻窦炎、化脓性肺炎、口腔疾病等）的人员要暂时停止其工作或调换岗位。暂时停止其工作或调换岗位。污染的控制污染的控制n防止金黄色葡萄球菌污染防止金黄色葡萄球菌污染食品食品 防止金黄色葡萄球菌对防止金黄色葡萄球菌对奶及其制品奶及其制品的污染：的污染：如牛奶厂要定期检查奶牛的乳房，不能挤用患如牛奶厂要定期检查奶牛的乳房，不能挤用患化脓性乳腺炎的牛奶；奶挤出后，要迅速冷至化脓性乳腺炎的牛奶；奶挤出后，要迅速冷至-10以下，以防毒素生成、细菌繁殖。奶制以下，以防毒素生成、细菌繁殖。奶制品要以消毒牛奶为原料，注意低温保存。品要以消毒牛奶为原料，注意低温保存。污染的控制污染的控制n防止金黄色葡萄球菌污染防止金黄色葡萄球菌污染食品食品对对肉制品肉制品加工厂，患局部化脓感染的禽、畜加工厂，患局部化脓感染的禽、畜尸体应除去病变部位，经高温或其他适当方式尸体应除去病变部位，经高温或其他适当方式处理后进行加工生产。处理后进行加工生产。污染的控制污染的控制n防止金黄色葡萄球菌防止金黄色葡萄球菌肠毒素肠毒素的生成的生成应在低温和通风良好的条件下贮藏食物，以防应在低温和通风良好的条件下贮藏食物，以防肠毒素形成；肠毒素形成；在气温高的春夏季，食物置冷藏或通风阴凉地在气温高的春夏季，食物置冷藏或通风阴凉地方也不应超过方也不应超过6小时，并且食用前要彻底加热。小时，并且食用前要彻底加热。检测步骤检测步骤-增菌增菌n利用金黄色葡萄球菌利用金黄色葡萄球菌耐盐耐盐的特性（可耐受的特性（可耐受15%的氯化钠），用含的氯化钠），用含10%氯化钠的胰酪胨大豆肉氯化钠的胰酪胨大豆肉汤增菌。汤增菌。检测步骤-分离n血平板：金黄色葡萄球菌可以产生溶血素，因此在血平板上产生明显的溶血环。n血平板上其典型菌落呈金黄色，有时也为白色，大而突起，圆形，不透明，表面光滑，有溶血圈。检测步骤-分离nBP平板：胰蛋白胨、牛肉膏和酵母膏提供碳源、氮源、硫、维生素和痕量矿物元素丙酮酸钠是一种生长促进剂亚碲酸盐对除金黄色葡萄球外的其他能分解卵黄的菌株有毒性，并使菌落产生黑色卵黄提供营养和有利于观察卵磷脂环甘氨酸和氯化锂对金黄色葡萄球菌以外的其它菌株有抑制作用。检测步骤-分离n在BP平板上其典型菌落为：圆形，光滑突起，湿润，直径2-3mm，颜色呈灰色到黑玉色，边缘常为淡色（米黄色或灰白色略带灰色或黄色的白色），周围为一混浊带，在其外缘常有一透明圈。用接种针接触菌落似有黄油树胶的粘稠感。n偶然会遇到不分解脂肪菌株，除无混浊带及透明圈外，其他外观基本相同。n长期保存的冷冻或干燥食品中所分离的菌落，其黑色常较典型菌落淡些，且外观可能粗燥，质地较干燥。B-P平板检测步骤-鉴定n金黄色葡萄球菌可以产生凝固酶，因此对其鉴别的主要实验是测定其凝固酶。n对于凝固不完全的菌株，可以通过一些其他实验来进一步确认，例如：厌氧葡萄糖发酵、溶葡萄球菌酶敏感性实验、耐热核酸酶实验等。n所有这些实验不能作为鉴别其产毒与否的依据。25g样品样品+225ml 生理盐水生理盐水 5mL样品匀液（样品匀液（1:10）+50mL胰酪胨大豆肉汤胰酪胨大豆肉汤血平板血平板36 1 24hr 镜镜 检检 营养肉汤营养肉汤血浆凝固酶血浆凝固酶实验实验 报告结果报告结果 定性定性检测检测36 1 24hr 36 1 24hr 36 1 6hr BP平板平板25g样品样品+225ml 生理盐水生理盐水 选三个连续梯度，每个梯度各取选三个连续梯度，每个梯度各取3mL加入加入3管胰酪胨大豆肉汤管胰酪胨大豆肉汤将有生长的管划线接种将有生长的管划线接种36 1 48hr 镜镜 检检 营养肉汤营养肉汤血浆凝固酶血浆凝固酶实验实验 报告结果报告结果 MPN/g(mL)定量定量检测检测（MPNMPN法）法）法）法）36 1 48hr 36 1 24hr 36 1 6hr 适用于检测可能含适用于检测可能含适用于检测可能含适用于检测可能含有有有有少量少量少量少量金黄色葡萄金黄色葡萄金黄色葡萄金黄色葡萄球菌，却带有球菌，却带有球菌，却带有球菌，却带有大量大量大量大量竞争菌竞争菌竞争菌竞争菌的样品的样品的样品的样品梯度稀释梯度稀释 25g样品样品+225ml 生理盐水生理盐水 选三个连续梯度，每个梯度分别取选三个连续梯度，每个梯度分别取1mL接种之至表面接种之至表面干燥的干燥的BP平板（如平板（如0.4mL，0.3mL，0.3mL）平板计数（分别记录每种平板计数（分别记录每种类型的菌落数）类型的菌落数）36 1 48hr 镜镜 检检 营养肉汤营养肉汤血浆凝固酶实验血浆凝固酶实验 报告结果报告结果 金葡菌数金葡菌数/g(mL)定量定量检测检测（平板法）（平板法）（平板法）（平板法）每种类型至少选取一个菌落每种类型至少选取一个菌落 36 1 24hr 36 1 6hr 适用于检测金黄色葡萄适用于检测金黄色葡萄适用于检测金黄色葡萄适用于检测金黄色葡萄球菌数球菌数球菌数球菌数不小于不小于不小于不小于10/g10/g（mLmL）的食品的食品的食品的食品梯度稀释梯度稀释 此课件下载可自行编辑修改，仅供参考！此课件下载可自行编辑修改，仅供参考！感谢您的支持，我们努力做得更好！谢谢感谢您的支持，我们努力做得更好！谢谢