QB∕T 5714-2022 发酵液中L-赖氨酸的测定 酶电极法.pdf

ICS 67.180.20CCS X69QB中华人民共和国轻工行业标准QB/T 5714-2022发酵液中L-赖氨酸的测定 酶电极法Determination of L-lysine in fermentation enzyme-Electrode method2022-04-08 发布 2022-10-01 实施中华人民共和国工业和信息化部发布QB/T 5714-2022-XX.1刖 三本文件按照GB/T 1.1-2020标准化工作导则 第1部分：标准化文件的结构和起草规则的规定 起草。本文件由中国轻工业联合会提出。本文件由全国食品工业标准化技术委员会（SAC/TC64）归口。本文件起草单位：山东省科学院生物研究所、山东寿光巨能金玉米开发有限公司、梁山菱花生物科 技有限公司、武汉远大弘元股份有限公司、中国生物发酵产业协会、天津科技大学。本文件主要起草人：高世军、毕春元、王晋、满德恩、张文文、张成林、张金玲、李建军、吴泽华、关丹。本文件为首次发布。IQB/T 5714-2022发酵液中L-赖氨酸的测定酶电极法1范围本文件描述了酶电极法测定发酵液中L-赖氨酸的原理、试剂和溶液、仪器和设备、试样制备和分 析步骤。本文件适用于L-赖氨酸发酵生产过程中L-赖氨酸的快速测定。本文件的定量限为0.01 g/L。2规范性引用文件下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件,仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本 文件。GB/T 6682分析实验室用水规格和试验方法3术语和定义本文件没有需要界定的术语和定义。4原理赖氨酸氧化酶可特异性催化L-赖氨酸，生成相应的氧化产物和过氧化氢（H2O2）。测定时，样品 中L-赖氨酸向L-赖氨酸氧化酶酶膜扩散，并与赖氨酸氧化酶层接触发生酶催化反应，催化产物H2O2 在电极表面产生电流信号的变化，电流信号变化量与样品中L-赖氨酸的浓度在一定范围内成线性相关 性。将赖氨酸酶电极与相应的液体试剂、电路、控制软件等组成仪器，从而实现L-赖氨酸的快速、准 确测定。L-C6H14N2O2+H2O+02 赖氨酸氧化睥 C6HnNO3+NH3+H2O2H2O2H+HO2-5试剂和溶液本试验方法中，所用试剂除特殊注明外均为分析纯；水应符合GB/T6682中三级（含三级）以上的 规格。1QB/T 5714-20225.1试剂5.2试剂配制筛的磷酸备用5.1.1 磷酸二氢钠：相对分 量119.98。5.1.2 磷酸氢二钠：相纳子质量141.96。缓冲溶液：用分析天平 0.19 g,溶于 lOOnjL 水中，85 g,瞬峭血析筛的磷酸二氢钠5.3标准品L-赖氨酸盐酸盐：C6H15C1N2O2，相对分子质量182.645.4标准溶液配制L-赖氨酸标准溶液：米L-赖氨酸盐酸盐放入烘干箱，104 七烘二二 4 h,出放燥器冷却至室温,用电子天平准确称双0.1249 g烘干后的LT负氨酸成酸盐，次入100 mL烧桶向加入少量蒸储水使之溶解，转移至100 mL容量瓶中，用蒸情水5.5 L-赖氨酸氧化酶酶度，摇匀。密封保勾.赖氨酸氧化酶0.1。（活力单位）；0。（24。（3保存。8.1.2当酶电极响应信号小于200时，应更换新的L-赖氨酸氧化酶酶膜。2QB/T 5714-20228.2测定样品用试液（7）冲洗彳进样口。仪器显示测定结束后1按仪器本身操作程序进n-R8.2.2全自动仪器8.3 分析结果的装述样品中L-赖氨式中：X-样品中8.2.1半自动仪器擦干针尖外部后注入行测定。酸的含量以X霸示，按公式（1）L-赖氨酸的含量,单位为克每升（g/L）显示值。次。准确吸取试液)计算：X=nR(1)试液的稀释倍数 仪器测定值，8.4精密度位为克东升（g/L）使用该方法检恻匕赖氨酸，同一样品的两次测定值之差，不应超过两次测定算术平均值的2%。3