实验四温度、激活剂和抑制剂对酶活力的影响.ppt

实验四实验四 温度、激活剂和抑制剂对酶活温度、激活剂和抑制剂对酶活力的影响力的影响 一、实验目的一、实验目的1、了解温度对酶活性的影响，学会检测酶最适温度的方法。2、了解激活剂和抑制剂对酶活性的影响。3、学习检测激活剂和抑制剂影响酶促反应速度的原理和方法。二、实验原理二、实验原理（一）（一）温度对酶活性的影响温度对酶活性的影响一方面是温度升高一方面是温度升高,酶促反酶促反应速度加快。应速度加快。另一方面另一方面,温度升高温度升高,也将导也将导致酶活性降低甚至丧失。致酶活性降低甚至丧失。因此大多数酶都有一个因此大多数酶都有一个最适最适温度温度(即即 酶促反应速度最快酶促反应速度最快时的环境温度时的环境温度)酶的最适温度不是一个常数，酶的最适温度不是一个常数，它与作用时间长短有关。它与作用时间长短有关。（二）激活剂对酶反应的影响（二）激活剂对酶反应的影响 激活剂大部分是一些无机离子和小分子有机物。这些物质可与酶激活剂大部分是一些无机离子和小分子有机物。这些物质可与酶分子上的氨基酸侧链基团结合，可能是酶活性部位的组成部分，分子上的氨基酸侧链基团结合，可能是酶活性部位的组成部分，也可能作为辅酶或辅基的一个组成部分起作用。也可能作为辅酶或辅基的一个组成部分起作用。一般情况下，一种激活剂对某种酶是激活剂，而对另一种酶则起一般情况下，一种激活剂对某种酶是激活剂，而对另一种酶则起抑制作用；抑制作用；对于同一种酶，不同激活剂浓度会产生不同的作用。对于同一种酶，不同激活剂浓度会产生不同的作用。（三）抑制剂对酶反应的影响（三）抑制剂对酶反应的影响 抑制剂抑制剂能与酶分子上某些必须基团结合能与酶分子上某些必须基团结合,使酶的活性中心的化学使酶的活性中心的化学性质发生改变，导致酶活力下降或丧失。酶的抑制剂一般具备两性质发生改变，导致酶活力下降或丧失。酶的抑制剂一般具备两个特点：个特点：1 1、在化学结构上与被抑制的底物分子的过渡状态相似。、在化学结构上与被抑制的底物分子的过渡状态相似。2 2、能够与酶的活性中心以非共价或共价的方式形成比较稳定的、能够与酶的活性中心以非共价或共价的方式形成比较稳定的 复合体。复合体。剂i三、试剂和器材三、试剂和器材1、实验器材：、实验器材：(1)恒温水浴锅恒温水浴锅 (2)试管试管 (3)烧杯烧杯 (4)量筒量筒 (5)玻璃棒玻璃棒 (6)白磁板白磁板 (7)铁三角架铁三角架 (8)酒精灯酒精灯 (10)试管夹试管夹 (11)试管架试管架 (12)秒表秒表 2、实验试剂、实验试剂(1)0.2%淀粉的淀粉的0.3%氯化钠溶液氯化钠溶液 (2)KI-I2 (4)1%NaCl (5)1%CuSO4 6)1%Na2SO4 (7)0.1%淀粉溶淀粉溶(8)唾液淀粉酶唾液淀粉酶四、操作步骤四、操作步骤（一）温度对酶活性的影响（一）温度对酶活性的影响 取取3支试管，编号，按下加入试剂，摇匀后，将支试管，编号，按下加入试剂，摇匀后，将1号、号、3号试管放入号试管放入37恒温恒温水浴中，水浴中，2号试管放入冰水中。号试管放入冰水中。10 min后取出，将后取出，将2号管内液体分为两半，用号管内液体分为两半，用碘化钾碘化钾-碘溶液来检验碘溶液来检验1、2、3管内淀粉被唾液淀粉酶水解的程度。记录结果，管内淀粉被唾液淀粉酶水解的程度。记录结果，将将2号管剩下的一半溶液故入号管剩下的一半溶液故入37水浴中继续保温水浴中继续保温10 min后，再用碘液实验，后，再用碘液实验，结果如何结果如何?管管 号号123淀粉溶液（淀粉溶液（ml）1.51.51.5稀稀释释唾液（唾液（ml）11煮沸的稀煮沸的稀释释唾（唾（ml）1(二二)激活剂和抑制剂对酶活性的影响激活剂和抑制剂对酶活性的影响试试 剂剂 管管 号号12341%NaCl（ml）1.01%CuSO4（ml）1.0蒸蒸馏馏水（水（ml）1.01%Na2SO4（ml）1.00.1%淀粉淀粉（ml）1.51.51.51.5唾液淀粉唾液淀粉酶酶1.01.01.01.0摇摇匀，置匀，置37水水浴中浴中10分分钟钟，取出冷却。，取出冷却。KI-I2（滴）（滴）1-2滴滴1-2滴滴1-2滴滴1-2滴滴记录结记录结果果五、注意事项五、注意事项 1、本实验中的保温时间分别是、本实验中的保温时间分别是5min或或10min，但不同的唾液淀，但不同的唾液淀粉粉 酶的活性是不同的，酶的活性是不同的，如果没能得到理想的颜色梯度，则需要根如果没能得到理想的颜色梯度，则需要根据先前的现象结果适当调整酶浓度或反应时间。据先前的现象结果适当调整酶浓度或反应时间。2、加入酶液后务必充分摇匀，保证酶与淀粉溶液充分混匀，反加入酶液后务必充分摇匀，保证酶与淀粉溶液充分混匀，反应后才能得到理想的颜色梯度变化结果。应后才能得到理想的颜色梯度变化结果。剂i