抗菌肽对肉鸡生产性能的影响.doc

在饲料中添加天蚕素抗菌肽对AA肉鸡生产性能的影响摘要：本实验旨在研究在饲料中添加天蚕素抗菌肽对AA肉鸡生产性能的影响，实验采用单因素随机分组的实验设计，选择360 只1日龄 大庆本地AA肉鸡，随机分为4个处理，即抗生素组S、试验 T1 组、试验 T2 组、试验T3组，每个处理个6重复，每个重复15只鸡，在饲粮中分别添加不同质量浓度的天蚕素抗菌肽，试验T1组添加量为 100mg/kg ，试验T2组为 200 mg/kg，试验T3组为300mg/kg，抗生素组日粮中添加土霉素200mg/kg。结果表明饲粮中添加抗菌肽能显著提高肉鸡日增重，降低料重比。关键词：天蚕素抗菌肽，肉鸡，生产性能Cecropin antimicrobial peptides AA broiler performance in feedAbstract：The purpose of this experiment is to add of cecropin antibacterial peptide AA broiler performance research in the feed, experiments using single factor randomized feeding design, select 360 1-day-old Daqing the local AA broiler were randomly divided into four treatments, antibiotics, S, test group T1, the test T2 group, test group T3, each treatment 6 Repeat, 15 chi- ckens each repetition, cecropin antimicrobial peptides in the diet were added in different concen- trations, the test T1 Addis 100mg/kg, 200 mg / kg group T2, T3 group test for the 300 mg oxytetracycline 200mg/kg added to the antibiotic group diet. The results showed that dietary supplementation of antimicrobial peptides can significantly improve broiler daily gain, lower feed conversion ratio。Keywords: Cecropin antimicrobial peptides, broiler，production performance目 录前言：41 材料与方法41.1 试验动物及分组41.2 实验日粮41.3 试验方法与饲养管理51.4测定指标51.5 统计分析52 结果与分析63 讨论64 结论75 应用前景及其展望7致 谢10前言： 近些年， 肉鸡的饲养已经进入规模化的养殖体系，在饲养过程中，由于抗生素的广泛使用，致使许多病原菌对其产生了耐药性。另外，抗生素添加剂的使用也严重破坏了动物肠道中的微生物平衡，并且极易造成药物残留，严重危害肉鸡产品的质量，危害人类健康。这些问题已经引起了人们的高度关注，2006 年1 月起欧盟已全面禁止在饲料中添加饲用抗生素， 其他国家也限制了对饲用抗生素的使用。在抗生素逐步被禁用的大背景下，使用安全、高效、无残留的新型饲料添加剂取代抗生素的使用具有极大的经济效益和社会效益 1 。抗菌肽（Antibacterial Peptides）是生物体产生的一种具有强抗菌活性的阳离子多肽，分子质量在2 0007 000 kb 之间，由2060 个氨基酸残基组成， 是生物先天性免疫的重要组成成分。抗菌肽不仅可以直接杀灭微生物，而且通过趋化树突状细胞、单核细胞和记忆T 细胞， 在先天性免疫和获得性免疫反应之间起到桥梁作用， 并启动获得性免疫系统提高机体抵抗微生物感染的能力 2-4 。抗菌肽的抗菌谱比传统抗生素更宽，既有抗革兰阳性菌和革兰阴性菌的作用，又有抗真菌和病毒的作用。前人对抗菌肽的研究主要集中在分离纯化、鉴定及抗微生物活性等方面，关于抗菌肽对动物生长性能的影响研究较少。已有的研究表明：抗菌肽能促进仔猪、肉鸡、雏鸭和鱼的生长速度。天蚕素抗菌肽是目前研究比较清楚的抗菌肽，天蚕素抗菌肽是根据Cecropin A 和D 设计合成的含37 个氨基酸残基的杂合肽。并在枯草芽孢杆菌中成功表达的基因工程产物。体外抑菌试验已经证明它能有效的抑制大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、沙门菌等有害菌，天蚕素抗菌肽独特的抗菌性能及促生长作用，使它成为养鸡业最具潜力的抗生素替代品之一。本研究以天蚕素抗菌肽为试验材料，通过在日粮中添加抗生素与添加不同剂量的抗菌肽对肉鸡的生产性能进行比较，了解抗菌肽的应用效果。1 材料与方法1.1 试验动物及分组选择360 只1日龄 大庆本地AA肉鸡，随机分为4个处理，即抗生素组S、试验 T1 组、试验 T2 组、试验T3组，每个处理个6重复，每个重复15只鸡。1.2 实验日粮在饲粮中分别添加不同质量浓度的天蚕素抗菌肽，试验T1组添加量为 100 mg/kg ，试验T2组为 200 mg/kg，试验T3组为300 mg/kg，抗生素组日粮中添加土霉素200 mg/kg, ，实验采用玉米-豆粕型基础日粮，基础饲粮及营养水平见表 1 。 表 1 基础饲粮及营养水平原料含量 1-21d含量 22d42d玉米/%59.1860.92豆粕/%32.5031.40鱼粉(64%粗蛋白) /%2.000.00 豆油/%2.504.00磷酸氢钙/%1.521.60石粉/%1.271.15食盐/%0.300.30维生素和矿物质添加剂/%0.500.50DL-蛋氨酸(98%)/% 0.230.13合计 /%100.00100.00营养成分代谢能（MJ/kg）12.1413.20粗蛋白/%19.9017.59钙/%0.950.78总磷/%0.690.59赖氨酸1.190.99蛋氨酸/%0.450.491.3 试验方法与饲养管理各组均按相同的饲养管理和免疫程序进行，肉鸡采用全封闭式饲养，每组由专人负责。肉鸡采用网上笼养，自由采食和饮水，每天进行消毒，消毒方式采用喷雾式；免疫措施按照鸡场的常规免疫。鸡舍内的温度由温度调控器控制，光照采用白炽灯。每日观察鸡群的健康状况，每天记录饲料饲喂量，剩余量，料重比。1.4测定指标每天定时记录试验组和对照组的存活率、采食量、肉料比等。并在试验开始时对每组肉鸡随机称重，作为始重，试验到42天对每组肉鸡空腹称重，作为末重。个体质量：试验结束时每组随机抽测12只肉鸡活质量。 日增质量：试验结束体质量和试验天数的比值即日增质量。 料重比：耗料总量与体质量总量的比值。1.5 统计分析 试验数据采用SPSS统计软件ANOVA过程中的单因素方差分析法分析，采用Duncans检验法进行各组间的多重比较，显著水平设为005。所有数据均以平均值±标准差表示。2 结果与分析本试验选用健康的肉雏，整个试验过程由专人看管、记录。试验期间肉鸡的生产性能指标的统计结果见下表。 表2: 抗生素组和试验组指标结果指标抗生素S组试验T1组试验T2组试验T3组始重/g49.68 49.14 49.25 49.91末重/g1896±0.31a1976±0.36ab2179±0.45c2035±0.62b日增重/g46.24±3.86a48.19±3.24ab53.15±4.52c49.63±3.88b日采食量/g 92.66 93.12 93.07 93.01料肉比 2.00 1.93 1.75 1.87注：肩标字母表明均值差异比较结果，同行字母不同表示差异显著(P<005)，同行字母相同表示差异不显著（P0.05）。 在整个试验过程中，肉鸡在使用天蚕素抗菌肽以后，试验组和抗生素组的鸡群发病情况均无明显差异。有表可知，肉鸡初始体重无明显差异；T1组的末重与抗生素组相比差异不显著（P0.05），T2组、T3组的末重显著性高于抗生素组(P<005)，并且T1组与T3组之间差异不显著，T2组显著性高于T3组的末重；T1组的日增重与抗生素组相比差异不显著（P0.05），T2组、T3组的的日增重显著性高于抗生素组(P<005)，其中T1组与T3组之间差异不显著，T2组显著性高于T3组的日增重；各组之间的日采食量无显著差异（P0.05）；试验组的料肉比均低于抗生素组，且T2组的料肉比最低。3 讨论 抗菌肽具有杀菌作用，改善胃肠道功能，增强机体免疫力。综合本实验各项指标，在肉鸡饲粮中添加天蚕素抗菌肽可提高肉鸡的生产性能。试验组T1、 T2 、T3的末重较抗生素组分别提高了4.22%、14.93%、7.33%，由此可知抗生素的添加量为200 mg/kg时对末重的提升最大。试验组T1、 T2 、T3的日增重较抗生素组分别提高了4.21%、14.94%、0.84%，可见抗生素的添加量不是越多越好，对日增重提高最多的是T2组。各组的料肉比依次为2.00、1.93、1.75、1.87，其中料重比最低的添加量为200 mg/kg。 解决抗生素类药物残留的有效途径是研发替代物，抗菌肽作为饲料添加剂有着较好的前景。有研究结果证实，猪小肠抗菌肽有增加肉鸡增重和降低料重比的效果，可提高雏鸡生长速度和饲料转化率；陈晓生(2005) 5 研究报道显示，用抗菌肽制剂作为肉鸭饲料添加剂，可有效提高肉鸭生产性能；同时，抗菌肽饲喂肉仔鸡可以促进生长，与中草药对比，在平均体重、饲料效率方而效果相当(黄永彤等，2004) 6 。 抗菌肽在体内除了能以直接杀死病原菌的方式起作用外，更多的时候是作为免疫效应分子来启动、调节宿主免疫防御体系，从而促进免疫功能来消除感染，保护宿主免受病原生物侵害。抗菌肽对细菌、真菌和原虫都具有杀灭作用，甚至多癌细胞也有杀伤作用，胃肠是身体的重要器官，经常与微生物接触，由于胃内的胃酸酸度极高而保持胃腔内大部分无菌，近端小肠介导主要的消化和吸收营养功能，也相对无菌，而在远端回肠则存在大量的细菌，总计有400-500种不同的厌氧和需氧菌。天然免疫通过保护宿主肠腔防御微生物入侵来提高动物的生产性能。4 结论本研究结果表明，添加天蚕素抗菌肽的试验组上述指标明显优于抗生素作为添加剂的对照组，为天蚕素抗菌肽取代饲用抗生素提供了依据。当天蚕素抗菌肽的添加量为200 mg/kg时，对AA肉鸡的生产性能提升最大。5 应用前景及其展望 抗菌肽以其广谱抗微生物、作用快、安全、无残留、能够刺激免疫反应和对环境有较强的抗性等特点将被广泛的应用在多个领域，如畜牧业、果树育种、食品加工业、医疗和制药等。例如马卫明 7 等研究表明抗菌肽添加于断奶猪仔饲料中，可减轻猪仔的腹泻。作为小分子的抗菌肽基因转入植物将大大提高农作物的抗病性 8-10。传统的抗生素的抗菌谱一般较窄，但大多数的抗菌肽具有广谱的抗病原体活性，可抗革兰氏阳性、阴性细菌、病毒、真菌、肿瘤和多种原虫， 这就预示着抗菌肽在治疗和预防癌症、病毒感染等方面具有良好的应用前景。通过微生物介导，利用基因工程技术将抗菌肽基因转入植物和动物，可以产生抗菌肽转基因植物和动物。可以提高作物的抗感染率和动物的成活率。鸡新城疫、猪瘟、乳牛乳房炎和仔猪腹泻等一直是畜牧业和养殖业中棘手的疾病，严重影响其行业的发展， 借鉴已成功的昆虫抗菌肽转基因工程，如转基因马铃薯、转基因蚊子和转基因水稻等，把特异的抗菌肽基因转入畜禽特定细胞让其表达，从而产生抗病新品种，不失为一条发展畜牧业和养殖业的新思路，前景广阔。但是目前抗菌肽的研究开发中还是有一些亟需解决的问题，如来源问题（天然提取资源有限，成本昂贵）活性问题和应用问题。作为药物应用或食品防腐剂等，还必须加强药理、药代动力学、药效、毒理性等的研究，以及解决毒性、稳定性、用量等问题。虽然小分子的抗菌肽依然有着来源有限，成本高，提取工艺复杂，容易被酶降解等问题，但是相信随着人们对抗菌肽的结构和作用机制了解的深入，在此基础上对其进行人工设计和改造，抗菌肽最终会给人类生活带来深远影响，在畜牧业、养殖业和食品加工业等行业发挥重要作用。参考文献1 林道密. 抗菌肽及其在鸡生产上的应用J. 中国家禽, 2009, 31（11）: 49-50.2 邱晓燕. 抗菌肽的免疫功能和应用前景J. 生物学通报, 2002, 37: 24-25.3 杨静静. 富含酪氨酸新型抗菌肽（Trpi）免疫机理的研究D. 天津: 天津商业学，2007.4 Yang D, Chen Q，Chertov O, et al. Human neutrophil defensins selectively chemoattract naive T and immature dendriticcellsJ. Leukou Biol, 2000, 68: 9-14.5 陈晓生温刘发，张辉华等饲料中添加抗茵肽对内鸭生产性能及免疫器官、内脏器官的影响【J】. 畜禽业。20052：12一13.6 黄永彤, 黄自然, 黄建清, 等. 抗茵肽与抗生素饲喂肉鸡的效果比较lJl广东饲料, 2004(02).7 马卫明, 余锐萍, 彭芳珍, 等.中国兽医杂志, 2005, （1）: 37.8 Pierce JC, Maloy WL, Salvador L, et a1.Mol Mar Biol Techical，1997,( 6): 248259.9 Cavallarin L, Andreu D，San Segundo B.Mol Plant Microb Interact, 1998, 11（3）:218227.10 Moffat AS.Science，1992, 257: 482483.