微生物临床送检标本的接种.ppt

微生物临床送检标本的接种微生物临床送检标本的接种张张 瑞瑞 君君 内内 蒙蒙 古古 一一 机机 医医 院院 检验科检验科 .微生物室微生物室 内蒙古医学院第四附属医院内蒙古医学院第四附属医院一机医院一机医院 .检验科检验科科内学习讲座科内学习讲座微生物检验的质量保证微生物检验的质量保证 临床标本的微生物学检验，与临床标本的其它实验室检验是临床标本的微生物学检验，与临床标本的其它实验室检验是一样的，质量保证工作必须贯穿于实验室工作的整个过程一样的，质量保证工作必须贯穿于实验室工作的整个过程,包括包括分析前（标本的正确采集、运送）、分析中（培养、分离、鉴分析前（标本的正确采集、运送）、分析中（培养、分离、鉴定和药敏试验等）和分析后（结果报告、解释、临床反馈）的定和药敏试验等）和分析后（结果报告、解释、临床反馈）的质量管理。质量管理。在这三个阶段对我们实验起到至关重要作用的分析前质量，在这三个阶段对我们实验起到至关重要作用的分析前质量，它是由临床医护人员来进行控制的，标本留取的正确与否、时它是由临床医护人员来进行控制的，标本留取的正确与否、时机是否恰当都是由他们来监控的。但是，我们完全可以在我们机是否恰当都是由他们来监控的。但是，我们完全可以在我们实验之前，标本接收的时候对所接收的标本进行初步的质量控实验之前，标本接收的时候对所接收的标本进行初步的质量控制，如从留取标本的容器、所留标本的外观质量、等项目进行制，如从留取标本的容器、所留标本的外观质量、等项目进行检查。再一个非常重要的环节就是我们工作人员对标本的接种，检查。再一个非常重要的环节就是我们工作人员对标本的接种，这将影响到检验结果的准确性、及时性、合理性，今天我将主这将影响到检验结果的准确性、及时性、合理性，今天我将主要介绍一下我们微生物实验室对临床不同标本的初次接种。要介绍一下我们微生物实验室对临床不同标本的初次接种。一机医院一机医院 .检验科检验科科内学习讲座科内学习讲座分析后分析后一、微生物检验的质量控制一、微生物检验的质量控制分析中分析中分析前分析前分析前阶段按时间顺序，该阶段始于来自临床医师的申请，分析前阶段按时间顺序，该阶段始于来自临床医师的申请，包括检验要求、患者准备、原始样本采集、运送到实验室并包括检验要求、患者准备、原始样本采集、运送到实验室并在实验室内部的传递，至检验分析过程开始时结束。在实验室内部的传递，至检验分析过程开始时结束。保证检验项目申请的科学、合理性；根据临床医师的检验要求，保证检验项目申请的科学、合理性；根据临床医师的检验要求，患者的病情正确准备；原始样本的正确采集及运送。患者的病情正确准备；原始样本的正确采集及运送。1.1.检验结果的正确发布；检验结果的正确发布；2.2.咨询服务；咨询服务；3.3.检验样品的保存及检验样品的保存及处理。处理。包括授权者应系统性的评审检验结果，评价其与可利用的患包括授权者应系统性的评审检验结果，评价其与可利用的患者有关临床信息的符合程度，并授权发布；结果、原始样品者有关临床信息的符合程度，并授权发布；结果、原始样品与其它实验室样品的保存应符合经批准的政策；不再用于检与其它实验室样品的保存应符合经批准的政策；不再用于检验样品的安全处置应符合当地关于医疗废物处置法规和有关验样品的安全处置应符合当地关于医疗废物处置法规和有关废物管理的建议。废物管理的建议。主要是指实验室接到标本后检验分析开始到出具结果前的整个实验过程。主要是指实验室接到标本后检验分析开始到出具结果前的整个实验过程。定定 义：义：主要内容：主要内容：所有过程：所有过程：主要工作：主要工作：一机医院一机医院 .检验科检验科科内学习讲座科内学习讲座无菌痰杯无菌痰杯留取标本：留取标本：尿液、尿液、痰等。痰等。血培养瓶血培养瓶留取标本：留取标本：血液、血液、胸水、胸水、腹水、腹水、穿刺液等穿刺液等无菌拭子无菌拭子留取标本：留取标本：脓汁、脓汁、分泌物、分泌物、咽拭子等咽拭子等真菌培养管真菌培养管留取标本：留取标本：皮屑、皮屑、甲屑等。甲屑等。1.1.取取样样容容器器二、微生物检验的相关用品二、微生物检验的相关用品一机医院一机医院 .检验科检验科科内学习讲座科内学习讲座2.2.接接种种工工具具接种环接种环接种针接种针无菌拭子无菌拭子酒精灯酒精灯二、微生物检验的相关用品二、微生物检验的相关用品一机医院一机医院 .检验科检验科科内学习讲座科内学习讲座3.3.培培养养基基血培养瓶血培养瓶真菌培养管真菌培养管巧克力琼脂平板巧克力琼脂平板SSSS琼脂平板琼脂平板麦康凯琼脂平板麦康凯琼脂平板血琼脂平板血琼脂平板二、微生物检验的相关用品二、微生物检验的相关用品一机医院一机医院 .检验科检验科科内学习讲座科内学习讲座标标 本本 的的 接接 种种（1 1）（2 2）分析中的质量控制分析中的质量控制标本的初步判断标本的初步判断A A、外、外 观观 C C、容器的选择、容器的选择B B、标、标 示示 D D、留取的标本量、留取的标本量 A A、正确的接种时间、正确的接种时间 B B、选择正确的培养基、选择正确的培养基C C、选择正确的接种方法、选择正确的接种方法D D、选择正确的培养环境、选择正确的培养环境 E E、正确的放置培养基、正确的放置培养基三、微生物检验的接种要求三、微生物检验的接种要求一机医院一机医院 .检验科检验科科内学习讲座科内学习讲座科别科别姓名姓名床号床号采样时间采样时间8/4 16:208/4 16:208/4 16:208/4 16:20N 5-18 N 5-18 王王xxxx8/4 16:208/4 16:20N 5-18 N 5-18 王王xxxx标标 示示一机医院一机医院 .检验科检验科科内学习讲座科内学习讲座标标 示示标本的标示标本的标示培养皿：培养皿：急诊不急诊不需编号，但一定需编号，但一定要在培养皿上做要在培养皿上做标示，包括：标示，包括：科科科科别别别别、患者姓名患者姓名患者姓名患者姓名、接种时间（接种时间（日日日日、时时时时、分分分分）；）；化验单：化验单：完整填完整填写样本接收时间写样本接收时间（日日日日、时时时时、分分分分）一机医院一机医院 .检验科检验科科内学习讲座科内学习讲座接接 种种 时时 间间标标 本本说说 明明 血、骨髓血、骨髓收到标本后立即放入培养箱，不可放冰箱内暂存收到标本后立即放入培养箱，不可放冰箱内暂存 脑脊液脑脊液抽取标本后抽取标本后15分钟内送检，接收标本后立即接种，绝不可冷藏分钟内送检，接收标本后立即接种，绝不可冷藏 痰痰患者留取标本后到接种时，间隔不得超过患者留取标本后到接种时，间隔不得超过2h 尿液尿液尿标本采集后尿标本采集后2h内送检，实验室收取标本后立即处理内送检，实验室收取标本后立即处理 粪便粪便粪便标本留取后粪便标本留取后2h内送检，实验室收取标本后立即处理内送检，实验室收取标本后立即处理 脓汁脓汁立即立即 穿刺液穿刺液立即立即 一些对环境敏感的细菌如脑膜炎奈瑟菌、淋病奈瑟菌和流感嗜血杆菌一些对环境敏感的细菌如脑膜炎奈瑟菌、淋病奈瑟菌和流感嗜血杆菌等应保温并立即送检；等应保温并立即送检；而其他所有的标本采集后最好在而其他所有的标本采集后最好在2h2h之内送到实验室，实验室收到标本之内送到实验室，实验室收到标本后应立即处理。后应立即处理。一机医院一机医院 .检验科检验科科内学习讲座科内学习讲座分离培养基分离培养基血琼脂平板：血琼脂平板：巧克力平板：巧克力平板：麦康凯平板：麦康凯平板：SSSS琼脂平板：琼脂平板：血液培养瓶：血液培养瓶：适于给类细菌生长，一般细菌检验标本的分离，都应适于给类细菌生长，一般细菌检验标本的分离，都应接种此平板。接种此平板。其中含有其中含有和和因子，适于接种疑有嗜血杆菌、奈瑟因子，适于接种疑有嗜血杆菌、奈瑟菌的标本。菌的标本。有较强的抑菌力，用于志贺菌和沙门菌的分离。因选有较强的抑菌力，用于志贺菌和沙门菌的分离。因选 择性过强，可影响检出率，所以，使用时最好加一种择性过强，可影响检出率，所以，使用时最好加一种弱选择平板以配对互补。弱选择平板以配对互补。用于血液、骨髓中分离常见病原菌。用于血液、骨髓中分离常见病原菌。具中等强度选择性，抑菌力略强，有少数革兰阴性菌具中等强度选择性，抑菌力略强，有少数革兰阴性菌不生长。在麦康凯平板上能否生长，是非发酵菌鉴定不生长。在麦康凯平板上能否生长，是非发酵菌鉴定的一个依据。的一个依据。一机医院一机医院 .检验科检验科科内学习讲座科内学习讲座接种方法接种方法本法主要用于杂菌量较多的标本。本法主要用于杂菌量较多的标本。先将标本均匀涂布于平板表面边缘一小区（第一区）内，约占平先将标本均匀涂布于平板表面边缘一小区（第一区）内，约占平板板1/51/5面积，再在二、三、面积，再在二、三、.区依次连续划线。每划完一个区，区依次连续划线。每划完一个区，均将接种环灭菌一次。每一小区的划线均接触上一区的接种线均将接种环灭菌一次。每一小区的划线均接触上一区的接种线1 12 2次，使菌量逐渐减少，以获得单个菌落。次，使菌量逐渐减少，以获得单个菌落。平板划线分离法平板划线分离法斜面接种法斜面接种法液体接种法液体接种法穿刺接种法穿刺接种法倾注平板法倾注平板法涂布接种法涂布接种法连续划线分离法连续划线分离法分区划线分离法分区划线分离法本法主要用于杂菌不多多的标本。本法主要用于杂菌不多多的标本。用接种环取标本少许，于平板平板用接种环取标本少许，于平板平板1/51/5处密集涂布，然后来回做曲处密集涂布，然后来回做曲线连续划线接种，线与线间有一定距离，划满平板为止。线连续划线接种，线与线间有一定距离，划满平板为止。常用于纸片法药物敏感性测定常用于纸片法药物敏感性测定用于单个菌落的纯培养、保存菌种或观察细菌的某些特性用于单个菌落的纯培养、保存菌种或观察细菌的某些特性多用于一些液体生化试验管的接种多用于一些液体生化试验管的接种测定牛乳、饮水和尿液等标本细菌数测定牛乳、饮水和尿液等标本细菌数主要用于半固体培养基、明胶及双糖管的接种主要用于半固体培养基、明胶及双糖管的接种一机医院一机医院 .检验科检验科科内学习讲座科内学习讲座图图示示一机医院一机医院 .检验科检验科科内学习讲座科内学习讲座正确的涂布结果正确的涂布结果第一区：第一区：各种细菌密集涂布，各种细菌密集涂布，形成菌苔；形成菌苔；在后几区在后几区可见有所分离所有可见有所分离所有细菌的单个菌落。细菌的单个菌落。一机医院一机医院 .检验科检验科科内学习讲座科内学习讲座一机医院一机医院 .检验科检验科科内学习讲座科内学习讲座正确的放置培养基正确的放置培养基1 1、加盖、倒置（底朝上）、加盖、倒置（底朝上）3 3、放置于合适的培养环境、放置于合适的培养环境2 2、不可叠加太高（不超过、不可叠加太高（不超过4 4个）个）一机医院一机医院 .检验科检验科科内学习讲座科内学习讲座四、各种标本的接种四、各种标本的接种 1 1、痰、咽拭子、痰、咽拭子接种培养基接种培养基接种方法接种方法注意事项注意事项血琼脂平板、血琼脂平板、巧克力琼脂平板巧克力琼脂平板、麦康凯琼脂平板、麦康凯琼脂平板培养环境培养环境3535，5%5%10%CO10%CO2 2，181824h24h分区划线接种法分区划线接种法不可用棉拭子直接分区划线；不可用棉拭子直接分区划线；不可不分区而连续划线；不可不分区而连续划线；初始划线一定要密涂；初始划线一定要密涂；尽快送检尽快送检尽快送检尽快送检立即接种立即接种立即接种立即接种一机医院一机医院 .检验科检验科科内学习讲座科内学习讲座四、各种标本的接种四、各种标本的接种 2 2、尿液、尿液接种培养基接种培养基接种方法接种方法注意事项注意事项血琼脂平板、麦康凯琼脂平板血琼脂平板、麦康凯琼脂平板培养环境培养环境3535，181824h24h连续划线一次完成连续划线一次完成定量接种法。标准接种环法。定量接种法。标准接种环法。10ul10ul，结果乘以，结果乘以100100不可用棉拭子直接划线；不可用棉拭子直接划线；可不分区而连续划线；可不分区而连续划线；初始划线一定要密涂；初始划线一定要密涂；尽快送检尽快送检尽快送检尽快送检立即接种立即接种立即接种立即接种一机医院一机医院 .检验科检验科科内学习讲座科内学习讲座四、各种标本的接种四、各种标本的接种 3 3、分泌物、分泌物接种培养基接种培养基接种方法接种方法注意事项注意事项血琼脂平板、麦康凯琼脂平板血琼脂平板、麦康凯琼脂平板培养环境培养环境3535，181824h24h分区划线接种法分区划线接种法不可用棉拭子直接分区划线；不可用棉拭子直接分区划线；不可不分区而连续划线；不可不分区而连续划线；初始划线一定要密涂；初始划线一定要密涂；尽快送检尽快送检尽快送检尽快送检立即接种立即接种立即接种立即接种一机医院一机医院 .检验科检验科科内学习讲座科内学习讲座四、各种标本的接种四、各种标本的接种 4 4、粪便、粪便接种培养基接种培养基接种方法接种方法注意事项注意事项血琼脂平板、麦康凯琼脂平板、血琼脂平板、麦康凯琼脂平板、ssss琼脂平板琼脂平板不同的检查目的，可选用不同的培养基不同的检查目的，可选用不同的培养基培养环境培养环境3535，181824h24h分区划线接种法分区划线接种法一般不作涂片检查。杂菌多一般不作涂片检查。杂菌多不可用棉拭子直接分区划线；不可用棉拭子直接分区划线；不可不分区而连续划线；不可不分区而连续划线；初始划线一定要密涂；初始划线一定要密涂；尽快送检尽快送检尽快送检尽快送检立即接种立即接种立即接种立即接种一机医院一机医院 .检验科检验科科内学习讲座科内学习讲座四、各种标本的接种四、各种标本的接种 5 5、血液、骨髓、血液、骨髓接种培养基接种培养基接种方法接种方法注意事项注意事项双相血培养瓶双相血培养瓶培养环境培养环境3535，5%5%10%CO10%CO2 2，7 7天后方可报告阴性天后方可报告阴性液体接种法液体接种法每日观察血培养瓶的变化；每日观察血培养瓶的变化；每日对血培养瓶进行颠倒混匀。每日对血培养瓶进行颠倒混匀。尽快送检尽快送检尽快送检尽快送检立即接种立即接种立即接种立即接种一机医院一机医院 .检验科检验科科内学习讲座科内学习讲座四、各种标本的接种四、各种标本的接种 6 6、脑脊液、脑脊液接种培养基接种培养基接种方法接种方法注意事项注意事项血琼脂平板、血琼脂平板、巧克力琼脂平板巧克力琼脂平板、麦康凯琼脂平板、麦康凯琼脂平板培养环境培养环境3535，5%5%10%CO10%CO2 2，181824h24h分区划线接种法分区划线接种法不可冷藏不可冷藏不可用棉拭子直接分区划线；不可用棉拭子直接分区划线；不可不分区而连续划线；不可不分区而连续划线；初始划线一定要密涂；初始划线一定要密涂；尽快送检尽快送检尽快送检尽快送检立即接种立即接种立即接种立即接种一机医院一机医院 .检验科检验科科内学习讲座科内学习讲座四、各种标本的接种四、各种标本的接种 7 7、胸水、腹水、心包液、关节腔积液等、胸水、腹水、心包液、关节腔积液等接种培养基接种培养基接种方法接种方法注意事项注意事项 血琼脂平板、麦康凯琼脂平板、血琼脂平板、麦康凯琼脂平板、可选择血培养瓶可选择血培养瓶培养环境培养环境3535，5%5%10%CO10%CO2 2，181824h24h分区划线接种法分区划线接种法不可冷藏不可冷藏不可用棉拭子直接分区划线；不可用棉拭子直接分区划线；不可不分区而连续划线；不可不分区而连续划线；初始划线一定要密涂；初始划线一定要密涂；尽快送检尽快送检尽快送检尽快送检立即接种立即接种立即接种立即接种一机医院一机医院 .检验科检验科科内学习讲座科内学习讲座四、各种标本的接种四、各种标本的接种 8 8、皮屑、甲屑等、皮屑、甲屑等接种培养基接种培养基接种方法接种方法注意事项注意事项 真菌培养管真菌培养管培养环境培养环境22-2522-25，7 7天后方可报告阴性天后方可报告阴性每日观察真菌培养管的变化；每日观察真菌培养管的变化；尽快送检尽快送检尽快送检尽快送检立即接种立即接种立即接种立即接种一机医院一机医院 .检验科检验科科内学习讲座科内学习讲座 谢谢 谢！谢！