湖南省湘潭市2022年高三第一次调研测试生物试卷含解析.docx

2021-2022学年高考生物模拟试卷请考生注意：1 .请用2B铅笔将选择题答案涂填在答题纸相应位置上，请用0. 5毫米及以上黑色字迹的钢笔或签字笔将主观题的答 案写在答题纸相应的答题区内。写在试题卷、草稿纸上均无效。2 .答题前，认真阅读答题纸上的注意事项，按规定答题。一、选择题（本大题共7小题,每小题6分，共42分。）1.下列有关特异性免疫的叙述，错误的是（）A.受到新型抗原刺激后，淋巴细胞的种类和数量均会增多B.活化的细胞毒性T细胞能识别嵌有抗原-MHC复合体的细胞C.同一个体内不同的细胞毒性T淋巴细胞表面的MHC分子相同D.成熟的B细胞、细胞毒性T细胞、辅助性T细胞和记忆细胞均有分裂能力2.肾上腺髓质分泌肾上腺素受内脏神经的直接支配，人在受到恐惧惊吓时，肾上腺素分泌增多，使人表现为警觉性提 高、反应灵敏、呼吸频率加快、心率加速等特征。下列相关叙述错误的是（）A.肾上腺素的靶细胞有神经细胞、心脏细胞、呼吸肌细胞等B.紧急情况下产生恐惧感是反射活动，引起的反应对机体是有利的C.在恐惧惊吓等紧急情况下，机体的调节方式属于神经一体液调节D.当恐惧因素消除后，心率不会马上恢复的原因是体液调节的作用时间较长3 .同一生物体内，不同组织中的细胞在形态上存在一定的差异，下列关于这些细胞的叙述错误的是A.通常情况下，这些不同形态的细胞中的核遗传物质是相同的B.遗传信息的执行情况不同导致了细胞形态的不同C.每种细胞具有的特定形态与其执行特定功能相适应D.不同细胞间形态的差异是在细胞分裂完成时产生的4 .某家族有两种遗传病（如图1）：蚕豆病是伴X染色体显性遗传（用E、e表示），但女性携带者表现正常：。地中海 贫血是由于11号染色体上厂基因突变导致血红蛋白结构异常，基因型与表现型的关系如下表所示；口基因片段进行 PCR扩增后的产物电泳结果如图2所示。下列叙述正确的是（）1窜？里攫上异常男女声ndw 6 6r<5应阳患蚕乂病男11567 8 | 91（） 患重型地贫和蚕显病男m m111图基因型表现型L h L11 11 11 1P一点样孔 -匚二条带11图2旷旷或p+/或p°p-无异常p+p°中间型地贫p°p° 或 p+p+重型地贫A. 丁基因突变可产生W基因和伊基因，体现了基因突变的可逆性8 .图1中/ 基因型有P+P-XeY或p°p-XeY或p p-XcYC.若图1中H9已怀孕，则M个体出现蚕豆病的概率是1/4D.适龄生育可预防M出现p地中海贫血和蚕豆病9 .某昆虫（XY型）的红眼与白眼、裂翅与正常翅分别由基因A（a）、B（b）控制，其中有一对基因位于X染色体上，且存在某种配子致死现象。一对红眼裂翅雌雄个体交配，得到的用表现型及数目见下表，下列分析正确的是（）红眼裂翅红眼正常翅白眼裂翅白眼正常翅雌性个体（只）1790600雄性个体（只）31293231A.控制眼色遗传的基因位于X染色体上B. Fi红眼裂翅雌性个体有2种基因型C.亲代产生的AY型配子致死D. Fi中红眼裂翅雌雄个体随机交配，子代中纯合红眼裂翅雌性占1/86 .某二倍体哺乳动物的睾丸中，有些细胞进行有丝分裂，也有些细胞进行减数分裂。下列关于有丝分裂和减数分裂的 叙述，不正确的是A.在细胞的有丝分裂与减数分裂过程中染色体都只复制一次B.有丝分裂前期与减数第一次分裂前期细胞中都有同源染色体C.有丝分裂中期与减数第二次分裂中期染色体都排列在细胞中央D.有丝分裂后期与减数第一次分裂后期细胞中染色体数目相同7 .下列有关动植物激素的判断，一定正确的是（）A. CO2通过体液运输调节人体呼吸，判断CO2是一种动物激素B.人尿中含有生长素，判断人体细胞代谢过程能合成生长素C.植物顶芽合成的生长素能在侧芽积累，判断生长素的运输消耗能量D.赤霉菌分泌的赤毒素能导致水帮幼苗疯长，判断此赤霉素是植物激素8. （10分）叶绿体是植物进行光合作用的场所。下列关于叶绿体结构与功能的叙述，正确的是A.叶绿体中的色素主要分布在类囊体腔内B. H2O在光下分解为H和O2的过程发生在基质中C. C(h的固定过程发生在类囊体薄膜上D.光合作用的产物一淀粉是在基质中合成的二、非选择题9. (10分)请回答下列与生物工程有关的问题：(1)基因工程中常利用PCR技术扩增目的基因，此过程需要在酶的作用下进行，主要利用了 原理。此过程的前提是要有序列，以便根据这一序列合成。(2)在基因表达载体中，是RNA聚合酶识别和结合的部位，有了它才能驱动基因转录出.(3)哺乳动物核移植可以分为体细胞核移植和胚胎细胞核移植。但实际操作中，利用体细胞核移植技术的难度很大， 其原因是»10. (14分)科技人员发现了某种兔的两个野生种群，一个种群不论雌、雄后肢都较长，另一种群不论雌、雄后肢都 较短，为确定控制后肢长、短这一相对性状的基因显隐性关系及基因是位于常染色体还是位于性染色体的I、IIk n2 区段(如图)，兴趣小组同学进行了分析和实验(I区段为x染色体与丫染色体的同源区段，在此区段中有等位基因； 山区段为丫染色体上特有区段，n2区段为x染色体上特有区段)。请回答下列问题：X Y(1)在兔的种群中口2区段是否有等位基因： (填“是''或"否”)，兔在繁殖过程中性染色体上能发生基因重 组的区段是。(2)首先同学们认为可以确定控制后肢长、短的基因不位于Hl区段，理由是.(3)同学们分别从两种群中选多对亲本进行了以下两组实验：甲组：d后肢长X?后肢短-Fl后肢短；乙组：步后肢长*6后肢短一E后肢短。从两组实验中可得到以下结论：后肢长度的显隐性关系为,在此基础上可以确定基因不位于,理由=(4)为进一步确定基因的位置，同学们准备分别用乙组的已与亲代个体进行两组回交实验：丙组：&雌x亲代雄；丁 组：Fi雄x亲代雌，以确定基因位于I区段还是位于.11. （14分）小麦是我国北方的主要农作物，研究环境条件变化对其产量的影响对农业生产有重要意义。（1）科研人员测定小麦一昼夜净光合速率（Pn）的变化，发现小麦与其他植物一样出现了“午睡”现象。一般认为， 午后温度较高，植物通过蒸腾作用使叶片降温，同时，植物体也会 （填“降低”或“升高”）叶片气孔开度 来避免过度失水对细胞造成的损伤。这一变化会引起叶肉细胞间的 不足，使午后小麦光合速率降低。（2）科研人员推测，午间强光照可能会导致由色素和蛋白质组成的光系统II发生损伤，导致 速率下降,进而抑制叶片的光合作用.di是对光系统n活性起调节作用的关键蛋白，科研人员使用蛋白质凝胶电泳技术检测 不同光照条件下的D1蛋白含量，结果如图1所示，分析可知午间较强光照使细胞中,导致 活性降低，从而在一定程度上导致“午睡”现象。D1蛋白（微管蛋白CK W2CK：适宜光照强度照射2小时W2：较强光照强度照射2小时图1140, 120 100806()4020实验一fI. 口实验二I前SA图2（3）水杨酸（SA）是一种与植物抗热性有关的植物激素，科研人员用适宜浓度的SA喷洒小麦叶片后，测定两种光 照条件下的D1蛋白含量，结果如图2所示，可推测，SA能 （填“减弱”或“增强”）较强光照造成的D1 蛋白含量及光系统II活性降低程度， （填“缓解”或“加剧”）小麦的"午睡”现象。12. 癌细胞表面蛋白“PDL-1”与T细胞表面蛋白“PD-1”特异性结合后，可抑制T细胞活性并启动其凋亡，导致肿瘤细 胞发生免疫“逃逸”。研究者对“PD-1”基因进行克隆、表达及生物学活性鉴定，为制备抗体打基础。研究中所用引物a 和。碱基序列见图1、几种常用限制酶名称及识别序列与酶切位点见图2：a 链：5'-T CACTCGAGACCATGCAGATCCCACAGGCGCC C-3'链：5 -CTCGAATTCTCAGAGGGGCCAAGAGCAGTG-3'图1限制的名称Xhol识别序列及豳切位点:5-CTCGAG-3,3-GAGCTC-55'(1)首先提取细胞中的mRNA反转录生成作为模板：设计含有不同的限制酶切点的a和p序列为引物，通过 技术扩增目的基因o(2)选用图1中的两种名称分别为 的限制酶将“PIRES2-EGFP质粒”载体进行双切，再用DNA连接酶将其与目的基因拼接，构建表达载体。该表达载体的组成，除了目的基因、标记基因抗卡那霉素基因外，还必 须具有 等o(3)而后一定温度下，与经过Ca?+处理的感受态大肠杆菌混合培养在含有 培养基中，可筛选出已经完成转化的大肠杆菌，继续培养该种大肠杆菌以扩增重组DNA。(4)将扩增后的“pIRES2-EGFP载体/PD-1重组DNA”转入可高度表达外源基因的原代293T细胞。一段时间后，为 确定PD-1基因是否表达，检测细胞膜表面是否具有.为判断其是否具有生物学活性和功能， 则可裂解293T细胞，提取该物质看能否与 发生结合，从而阻断“PD-1与PDL-1信号通路”。研究中还会有一步骤，只将“pIRES2-EGFP载体”转入293T细胞，其目的是。参考答案一、选择题(本大题共7小题,每小题6分，共42分。)1、D【解析】免疫是指身体对抗病原体引起的疾病的能力，特异性免疫包含细胞免疫和体液免疫。细胞免疫对抗被病原体感染的细 胞和癌细胞，此外也对抗移植器官的异体细胞。活化的细胞毒性T淋巴细胞识别嵌有抗原一MHC复合体的细胞，并 消灭之。体液免疫为效应B细胞产生和分泌大量的抗体分子分布到血液和体液中，体液免疫的主要目标是细胞外的病 原体和毒素。这些病原体和毒素在组织和体液中自由的循环流动时，抗体与这类细胞外的病原体和毒素结合，致使病 毒一类的抗原失去进入寄主细胞的能力，使一些细菌产生的毒素被中和而失效，还可使一些抗原(如可溶的蛋白质) 凝聚而被巨噬细胞吞噬。【详解】A、受到新型抗原刺激后，会产生新的T淋巴细胞和B淋巴细胞，淋巴细胞的种类和数量均会增多，A正确； B、活化的细胞毒性T细胞上有抗原-MHC复合体对应的受体，能识别嵌有抗原-MHC复合体的细胞，B正确： C、同一个体内所有细胞表面的MHC分子相同，C正确；D、辅助性T细胞没有分裂能力，D错误。故选Do2、B【解析】神经调节和体液调节的比较:比较项目神经调节体液调节作用途径反射弧体液运输反应速度迅速较缓慢作用范围准确、比较局限较广泛作用时间短暂比较长【详解】A、肾上腺素可以使人表现为警觉性提高、呼吸频率加快、心率加速等特征，故其靶细胞有神经细胞、心脏细胞、呼 吸肌细胞等，A正确；B、产生恐惧感没有经过完整的反射弧，不属于反射活动，B错误；C、在恐惧惊吓等紧急情况下，涉及肾上腺素分泌，故其调节方式属于神经一体液调节，C正确；D、当恐惧因素消除后，心率不会马上恢复的原因是体液调节的作用时间较长，D正确。故选B。3、D【解析】细胞分化指在个体发育中，由一个或一种细胞增殖产生的后代，在形态、结构和功能上发生稳定性差异的过程。细胞 分化是一种持久性的变化，一般来说，分化了的细胞会一直保持分化了的状态，直到死亡。【详解】除了哺乳动物成熟的红细胞等一些特殊细胞外，同一生物体内不同形态的细胞中，核遗传物质是相同的，A项正确； 遗传信息的执行情况不同即基因的选择性表达，基因的选择性表达导致细胞分化，细胞分化使得一个或一种细胞增殖 产生的后代在形态、结构和生理功能上发生稳定性差异，B项正确；生物的形态结构是与其功能相适应的，C项正确; 细胞分裂只是使细胞数目增加，不同细胞间形态的差异是在细胞分裂后经细胞分化形成，D项错误。故选D。【点睛】易错点：细胞分化的实质是基因的选择性表达，同一个体不同体细胞中遗传物质相同，但RNA和蛋白质有所不同。4、B【解析】伴X显性遗传的特点是男性的致病基因来自母亲，由于女性携带蚕豆病致病基因的个体表现正常，所以1-4和H-7的 基因型为XEX%俨俨或p+父为重型地贫，m-11为重型地贫，根据电泳条带可知最下面的条带为/或旷。I -2, 1-3, I -4均不患地中海贫血，|$邛-或b+|T或俨旷均为无异常的个体，I -3、I -4只有一条电泳条带，可知I -3、I -4基因 型为P-P.【详解】A、丁基因突变可产生-基因和伊基因，体现了基因突变的不定向性，A错误；B、II-8为表现型正常的男性，故不携带蚕豆病致病基因，即为X，Y,且不患地中海贫血，即B基因型为厂|广或 一或伊丁，即图1中11-8基因型有口+93。丫或仍!$飞。丫或邛飞。丫，B正确；C、仅考虑基因E和e, II-9表现正常且II-10患蚕豆病，故亲本的基因型为X©Y和XEX。，因此U-9为携带者的概率 为1/2, II-8表现正常，因此II-8的基因型为X©Y,因此子代患蚕豆病(XEY)的概率为l/2xl/4=l/8, C错误；D、P地中海贫血和蚕豆病由基因控制，来源于亲本遗传，个体含有的遗传信息和年龄无关，因此适龄生育不会改变两 种病的发病率，D错误。故选Bo【点睛】本题考查人类遗传病的遗传规律及伴性遗传等相关知识，意在考察同学们运用所学知识与观点，通过比较、分析与综 合等方法对某些生物学问题进行解释、推理，做出合理的判断或得出正确的结论的能力。5、C【解析】分析表格：雌性中红眼：白眼=179： 60=3： 1,裂翅：正常翅=1： 0；雄性中红眼：白眼=(31+29)： (32+31) =1： 1,裂翅：正常翅=(31+32)： (29+31) =1： 1；由题意知：两对等位基因 只有一对基因位于X染色体上，对于眼色来说，亲本都为红眼，子代雌雄个体都出现白眼，说明红眼为显性性状，子 代雌雄个体表现型比例不同，可能是因为某种配子致死，导致雄性红眼个体减少导致；对于翅形来说：亲本都为裂翅, 而正常翅只在雄性中出现，说明控制翅形的基因位于X染色体上，裂翅为显性性状，由此推知，亲本的基因型为AaXBx AaXBY»【详解】A、由分析可知：由于裂翅雌雄个体交配，Fi雌性个体中只有裂翅，雄性个体中既有裂翅又有正常翅，故控制翅形(B、 b)的基因位于X染色体上，A错误；B、亲本的基因型为AaXBX% AaXBY,将两对性状分开来看，则对于眼色来说Fi红眼有AA和Aa两种基因型，对于 翅型来说，尺裂翅雌性个体的基因型有共有XBX11、XBX11两种基因型，因此艮红眼裂翅雌性个体有2x2=4种基因型, B错误；C、亲本的基因型为AaXBx% AaXBY,假设不存在配子致死，则有雌性中：红眼裂翅：白眼裂翅=3： 1,雄性中：红 眼裂翅：红眼正常翅：白眼裂翅：白眼正常翅=3： 1： 3： 1,即（3： 1） （1： 1）,而表格数据可知，雌性中：红眼裂翅： 白眼裂翅=3： 1,雄性中：红眼裂翅：红眼正常翅：白眼裂翅：白眼正常翅=1： 1： 1； 1,即（1： 1） （1； 1）,说明雄 果蝇产生的含Y的配子致死，同时由于红眼：白眼由3： 1变成1： 1,说明含A的配子致死，故推测AY的配子致死, C正确；D、Fi中所有红眼裂翅雌个体的基因型及比例为1/6AAXBX' l/6AAXBXb > 2/6AaXBXB、2/6AaXBXb , F1中所有红 眼裂翅雄个体的基因型为AaXBY,让Fi随机交配,采用配子法，雌配子的基因型及比例为6/12AXB.2/12AX3/12aX l/12aXb ,雄配子的基因型及比例为1/3AXB、l/3aXB、l/3aY,雌雄配子随机结合，子代中纯合红眼裂翅雌性（AAXBXB） 个体的比例为6/12x1/3=1/6, D错误。故选C.6、D【解析】依题文可知，有丝分裂是遗传物质在间期复制，分裂期平均分配到子细胞中；减数分裂是遗传物质在减数第一次分裂 间期复制，细胞连续分裂两次，从而使子细胞中遗传物质减半，以此相关知识做出判断。【详解】A、在细胞的有丝分裂与减数分裂过程中染色体都是在间期只复制一次，A正确；B、有丝分裂前期与减数第一次分裂前期细胞中都有同源染色体，B正确；C、有丝分裂中期与减数第二次分裂中期染色体都排列在细胞中央的赤道板平面，C正确；D、二倍体哺乳动物的睾丸中，有丝分裂后期染色体数目是减数第一次分裂后期细胞中染色体数的两倍，D错误。 故选D。【点睛】本题文重点考查学生识记有丝分裂及减数分裂过程的能力。7、C【解析】五类植物激素的比较：名称合成部位存在较多的部位功能生长素幼嫩的芽、叶、发育中的种子集中在生长旺盛的部位既能促进生长，也能抑制生长；既 能促进发芽，也能抑制发芽；既能 防止落花落果，也能疏花蔬果赤霉素未成熟的种子、幼根和幼芽普遍存在于植物体内促进细胞伸长，从而引起植株增 高促进种子萌发和果实发育细胞分裂素主要是根尖细胞分裂的部位促进细胞分裂脱落酸根冠、萎德的叶片将要脱落的器官和组织中抑制细胞分裂促进叶和果实的衰老和脱落乙烯植物的各个部位成熟的果实中较多促进果实成熟【详解】A、CO2不是动物激素，A错误；B、人尿中含有的生长素，可能是从食物中摄取、未经消化分解而随尿排出的，B错误；C、顶芽合成的生长素能在侧芽积累，说明生长素能逆浓度转运，因此是主动运输过程，主动运输消耗能量，C正确；D、要判断赤霉素是植物激素，还需要有植物能合成赤霉素的证据，D错误。故选C。【点睛】本题主要考查动植物激素的含义，植物生长素的发现、生长素的极性运输等，考查学生的理解能力。8【解析】叶绿体中的色素主要分布在类囊体膜上，在光下分解的过程也是在类囊体膜上进行的，CO2的固定和淀 粉的合成发生在暗反应中，在叶绿体的基质中进行。所以D正确。二、非选择题9、热稳定DNA聚合(Taq)DNA双链复制一段已知目的基因的核昔酸 引物 启动子 mRNA 动物体细胞分化程度高，恢复其全能性十分困难【解析】PCR技术：(1)概念：PCR全称为聚合酶链式反应，是一项在生物体外复制特定DNA的核酸合成技术。(2)原理：DNA复制。(3)前提条件：要有一段已知目的基因的核昔酸序以便合成一对引物。(4)条件：模板DNA、四种脱氧核甘酸、一对引物、热稳定DNA聚合酶(Taq酶).(5)过程：高温变性：DNA解旋过程(PCR扩增中双链DNA解开不需要解旋酶，高温条件下氢键可自动解开)； 低温复性：引物结合到互补链DNA上；中温延伸：合成子链。【详解】(1)基因工程中常利用PCR技术扩增目的基因，此过程需要在热稳定DNA聚合(Taq)酶的作用下进行，主要利用 了 DNA双链复制原理。此过程的前提是要有一段已知目的基因的核甘酸序列，以便根据这一序列合成引物。（2）在基因表达载体中，启动子的作用是RNA聚合酶识别和结合的部位，并驱动基因转录出mRNA。（3）由于体细胞分化程度高，不容易恢复全能性，因此体细胞核移植技术的难度大于胚胎细胞核移植。【点睛】本题考查基因工程的相关知识，要求考生识记基因工程的原理及操作步骤，掌握各操作步骤中需要注意的细节；能结 合所学的知识准确答题，属于考纲识记和理解层次考查。10、是I区段和II 2区段不论雌、雄后肢长度表现都一致，与性别无关后肢短对后肢长为显性 112区段乙组实验Fl没有出现交叉遗传现象常染色体【解析】基因位置的判断方法。在常染色体上还是X染色体上的判断方法：1 .已知性状的显隐关系，通常采用隐性的雌性和显性的雄性的个体进行杂交，若后代中雌雄个体表现型一致，则位于 常染色体上；若后代中雌性表现为显性，雄性表现为隐性，则相关基因位于X染色体上。2 .未知性状的显隐关系，通常采用正反交实验，若正反交结果相同，则位于常染色上；若正反交结果不同，则位于X 染色体上。【详解】（1）在XY型性别决定的生物中，雌性体内有2条同型的性染色体，用XX表示，雄性体内有2条异型的性染色体， 用XY表示。Ih为X染色体上特有区段，因此在兔的种群中H2片段有等位基因；兔在繁殖过程中，X染色体与丫染 色体的同源区段即I区段上，以及X染色体特有区段即H2区段上都能发生基因重组。（2） Ih区段为丫染色体上特有区段，该区段上的基因控制的性状表现为限雄遗传，而题意显示，某种兔的两个野生 种群，不论雌、雄后肢长度表现都一致，不表现限雄遗传，因此可以确定控制后肢长、短的基因不位于n1区段。（3）分析两组实验结果可知：无论用后肢长的个体作父本，还是作母本，即无论正交还是反交F】都表现为后肢短， 由此说明，后肢短对后肢长为显性，且控制该性状的基因不位于n2片段上（或乙组实验用没有出现交叉遗传现象， 可以确定基因不位于U2片段上）。（4）结合对（2）和（3）的分析，已经排除了基因位于Hl片段与H2片段上的可能性，因此分别用乙组的Fl与亲 代个体进行两组回交实验的目的是：为进一步确定基因是位于I区段上还是位于常染色体上.【点睛】本题考查伴性遗传、基因的自由组合定律的相关知识。熟知所学知识的要点，把握知识间的内在联系是解答本题的关 键！能从题图中提取有效信息并运用所学知识与观点，通过比较、分析与综合等方法对某些生物学问题进行解释、推 理，做出合理的判断是解答本题的另一关键!11、降低 CO2 光反应 D1蛋白的含量降低 光系统II 减弱 缓解【解析】植物蒸腾作用旺盛会导致叶片气孔开度下降,气孔开度下降又引起细胞吸收的CO2减少，导致叶肉细胞间的CCh不足, 使午后小麦光合速率降低。图1显示，较强光照会导致D1蛋白含量下降，图2说明喷洒适宜浓度的SA会减弱较强光 照造成的D1蛋白含量降低，对小麦的“午睡”现象起到缓解作用，据此，若要减少“午睡”现象提高小麦产量，从外源 因素考虑，可喷洒适宜浓度的水杨酸，从分子水平考虑，可通过提高D1蛋白的含量来实现，据此作答。【详解】(1)午后温度较高，植物蒸腾作用旺盛，植物会降低叶片气孔开度来避免过度失水，这会导致叶肉细胞间的CCh不 足，使午后小麦光合速率降低。(2)强光照引起光系统II发生损伤，会导致光反应的速率下降；图1中数据显示，强光照会导致D1含量下降，因此 “午睡”原因可能是午间较强光照使细胞中D1蛋白的含量降低，从而导致光系统II活性降低。(3)根据图2中D1蛋白含量所示，可推测经SA处理后，能减弱较强光照造成的D1蛋白含量及光系统H活性降低 程度，缓解小麦的“午睡”现象。【点睛】本题以“环境条件变化对小麦产量的影响”为背景，结合反映实验处理和结果信息，考查学生对光合作用及其影响因素 的知识的理解和掌握，对实验现象和结果进行分析和处理的能力，解答本题，需要学生认真阅读题干，提取有效信息， 结合所学的相关知识分析和判断，进行知识的整合和迁移。12, cDNA PCR Xhol EoR I启动子、终止子、复制原点卡那霉素 PD-1蛋白 PDL-1或答PD-1抗体 作为对照【解析】基因工程技术的基本步骤：(1)目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成。(2)基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等。(3)将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样。将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌 转化法、基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细 胞的方法是感受态细胞法。(4)目的基因的检测与鉴定：分子水平上的检测：检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因采用DNA分 子杂交技术；检测目的基因是否转录出了 mRNA采用分子杂交技术；检测目的基因是否翻译成蛋白质采用抗原一 抗体杂交技术。个体水平上的鉴定：抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等。【详解】(1)基因文库包括基因组文库和部分基因文库(cDNA)o其中基因组文库包含某种生物所有的基因，而部分基因文库 只包含某种生物的部分基因，可以mRNA为模板反转录形成cDNA；由于PCR技术利用的是DNA分子复制的原理， 所以用该cDNA进行PCR技术扩增短时间内可以获得大量的目的基因。(2)分析图1中碱基序列，a链上有“一CTCGAC”识别序列，0链上有“一GAATTC"碱基识别序列，与图2中Xhol限制酶和EoRl限制酶的识别序列相同。故选用Xhol限制酶和EoRl限制酶将“pIRES2-EGFP质粒”载体进行双 切，再用DNA连接酶将其与目的基因拼接，构建基因表达载体。基因表达载体的组成包括目的基因、标记基因、启 动子、终止子、复制原点等。(3)根据第(2)题可知，基因表达载体上的标记基因是卡那霉素抗性基因，因此一定温度下，与经过Ca2+处理的感 受态大肠杆菌混合培养在含有卡那霉素的培养基，可筛选出已经完成转化的大肠杆菌。(4)基因表达的产物是蛋白质，一段时间后，为确定PD-1基因是否表达，可以检测细胞膜表面是否具有PD-1基因 表达的PDJ蛋白。为判断其是否具有生物学活性和功能，可采用抗原一抗体杂交技术，即从裂解293T细胞中，提取 PD-1蛋白看能否与PDL-1发生结合，从而阻断“PD-1与PDL-1信号通路”。为了增加实验的可信度，还需要设置对照 实验，只将“pIRES2-EGFP载体”转入293T细胞，因为不含PD-1基因，所以“PD-1与PDL-1信号通路”不会阻断。【点睛】题考查基因工程的相关知识，要求考生识记基因工程的概念、原理及操作步骤，掌握各操作步骤中需要注意的细节， 能结合所学的知识在新的情景材料下分析运用O