急冠脉综合征微观辨证治法及其机制的新探讨.ppt

急冠脉综合征微观辨证治法及其机制的新探讨 Still waters run deep.流静水深流静水深,人静心深人静心深 Where there is life,there is hope。有生命必有希望。有生命必有希望完成本文介绍的研究的博士、硕士有：n王显刚（人民军医出版社）n刘美霞（中国中医科学院西苑医院）n王怡斐（山东中医药大学附属医院）n张京春（中国中医科学院西苑医院）n吴敏（中国中医科学院广安门医院）n刘龙涛（中国中医科学院西苑医院）n等 基金项目资助n国家自然科学基金国家自然科学基金（3047227530472275）n高等学校博士学科点专项科研基金高等学校博士学科点专项科研基金（No.20060441002No.20060441002）n中国博士后科学基金中国博士后科学基金（2007041062220070410622）n国家中医药管理局科技计划项目国家中医药管理局科技计划项目 （04-05LP3004-05LP30）n山东省中医管理局科技计划项目山东省中医管理局科技计划项目前前 言言n急性冠脉综合征（急性冠脉综合征（ACSACS），包括不稳定），包括不稳定性心绞痛、急性心肌梗死，是造成心性心绞痛、急性心肌梗死，是造成心血管不良事件的主要因素，严重危害血管不良事件的主要因素，严重危害着人类的健康。着人类的健康。前前 言言ACSACS的中医辨证、治法的中医辨证、治法n如何在继承的基础上创新发展？如何在继承的基础上创新发展？n如何阐明其现代机理？如何阐明其现代机理？前前 言言继承继承n既往研究认为，既往研究认为，ACS当属当属“胸痹心痛胸痹心痛”、“真心痛真心痛”范畴，为本虚标实证。范畴，为本虚标实证。n其病情急、危、重的临证特点，有别其病情急、危、重的临证特点，有别于一般冠心病的辨证特点主要表现在于一般冠心病的辨证特点主要表现在标实证方面，主要标实证为标实证方面，主要标实证为血瘀血瘀，已，已得到众多专家的共识。得到众多专家的共识。前前 言言创新发展创新发展nACS的的热毒热毒病机及辨证病机及辨证nACS标实证的标实证的微观辨证微观辨证n阐明阐明解毒活血解毒活血稳定斑块、治疗稳定斑块、治疗ACS机机制制 提提 纲纲n一、急性冠脉综合征瘀毒证宏观辨证n二、急性冠脉综合征瘀毒证微观辨证 n三、解毒活血稳定斑块、治疗急性冠脉综合征瘀毒证及其机制探讨 一、急性冠脉综合征一、急性冠脉综合征 瘀毒证宏观辨证瘀毒证宏观辨证研究假说研究假说10多年前，从多年前，从中医毒邪致病理论中医毒邪致病理论的整理的整理继承出发，对继承出发，对UA中医病机新探索中医病机新探索n提出提出UA除具有冠心病气虚血瘀的病机共性之除具有冠心病气虚血瘀的病机共性之外，还具有外，还具有毒邪致病毒邪致病的特点，的特点，n毒损心络毒损心络为其重要病机，为其重要病机，n解毒解毒为其重要治法，为其重要治法，n提出提出解毒与益气活血法伍用解毒与益气活血法伍用应该优于单纯益气应该优于单纯益气活血法的假说。活血法的假说。王显刚硕士论文（王显刚硕士论文（2002年）年）UAUA毒损心络证自拟标准毒损心络证自拟标准（20022002年）年）n学术界早就有了包括血瘀证在内的冠心病学术界早就有了包括血瘀证在内的冠心病辨证标准。辨证标准。（中国中西医结合学会心血管学会中国中西医结合学会心血管学会19901990年年修订的冠心病中医辨证标准）修订的冠心病中医辨证标准）n2002年我们提出年我们提出UA毒损心络证毒损心络证自拟标准：自拟标准：n起病急骤，疼痛剧烈，进展迅速；起病急骤，疼痛剧烈，进展迅速；n可伴有心烦、大便干燥、苔黄、脉促或可伴有心烦、大便干燥、苔黄、脉促或不齐；不齐；n客观指标的变化，如炎症因子肿瘤坏死客观指标的变化，如炎症因子肿瘤坏死因子（因子（TNF）、）、C反应蛋白（反应蛋白（CRP），等可），等可升高。升高。王显刚硕士论文（王显刚硕士论文（20022002年）年）ACSACS热毒证的自拟标准热毒证的自拟标准（20092009年）年）n2009年研究年研究ACS热毒证热毒证的自拟标准：的自拟标准：n起病急剧，进展迅速，面红，目赤，起病急剧，进展迅速，面红，目赤，身热，口干，烦躁，口舌生疮，便秘，身热，口干，烦躁，口舌生疮，便秘，溲赤，舌红苔黄，脉数或促。溲赤，舌红苔黄，脉数或促。王怡斐硕士论文（王怡斐硕士论文（2009年）年）ACSACS热毒证的自拟标准热毒证的自拟标准（20102010年）年）n2010年年ACS热毒证热毒证自拟标准：自拟标准：n起起病病急急骤骤，疼疼痛痛剧剧烈烈，进进展展迅迅速速，可可伴伴有有心心烦烦、大大便便干干燥燥、苔苔黄黄、脉脉促促或或不齐。不齐。刘美霞博士论文（刘美霞博士论文（2010年）年）50例急性冠脉综合征标实辨证（例数）血瘀证与热毒证是血瘀证与热毒证是ACS的主要标实证的主要标实证 急性冠脉综合征标实辨证与冠脉病变积分的关系与血瘀证相比，与血瘀证相比，*P P0.050.05与热毒证相比，与热毒证相比，#P P0.05,#0.05,#P P0.010.01*#ACS血瘀证与热毒证的冠脉病变程度较重，病变范围较大。血瘀证与热毒证的冠脉病变程度较重，病变范围较大。ACSACS标实证辨证及与冠脉病变关系标实证辨证及与冠脉病变关系n50例例ACS患者标实证辨证，血瘀证患者标实证辨证，血瘀证45例，热例，热毒证毒证38例，分别占所有病例的例，分别占所有病例的90%和和76%，明，明显高于痰浊证、气滞证及寒凝证，可见显高于痰浊证、气滞证及寒凝证，可见血瘀证血瘀证与与热毒证热毒证是是ACS的的主要标实证主要标实证；n血瘀证及热毒证的血瘀证及热毒证的冠脉病变积分冠脉病变积分明显高于痰浊明显高于痰浊证、气滞证及寒凝证，有显著的统计学差异，证、气滞证及寒凝证，有显著的统计学差异，说明说明ACS血瘀证与热毒证的血瘀证与热毒证的冠脉病变程度较重，冠脉病变程度较重，病变范围较大。病变范围较大。7676例例ACSACS行冠脉内支架术行冠脉内支架术（ICSICS）前后）前后标实证辨证分布情况标实证辨证分布情况ICSICS前后前后ACSACS标实证单证变化规律标实证单证变化规律与术前比较有显著差异；与术前比较有显著差异；与术前比较有非常显著差异与术前比较有非常显著差异ACSACS标实证辨证及与病变血管关系标实证辨证及与病变血管关系n76例行冠脉内支架术（例行冠脉内支架术（ICS）的）的ACS患者，患者，ICS前标实证中以前标实证中以热毒血瘀热毒血瘀最为常见最为常见，由多到，由多到少排列为：热毒血瘀证、痰浊血瘀证、热毒痰少排列为：热毒血瘀证、痰浊血瘀证、热毒痰瘀证、气滞血瘀证、其他证型；瘀证、气滞血瘀证、其他证型；n热毒证与非热毒证在病变血管支数分布方面存热毒证与非热毒证在病变血管支数分布方面存在显著差异（在显著差异（P0.05），），热毒证热毒证多支病变显多支病变显著多于单支病变著多于单支病变。提 示nACS常以标实证为著，常以标实证为著，n血瘀证血瘀证及及热毒证热毒证均为均为ACS的主要标实证且的主要标实证且常并存，常并存，n瘀毒证瘀毒证与冠脉病变程度、范围呈一致性。与冠脉病变程度、范围呈一致性。n瘀毒互结瘀毒互结可能是可能是ACS病机的关键（或主要病机的关键（或主要病机）。病机）。n急则治其标，急则治其标，“解毒活血解毒活血”可望成为中医可望成为中医药治疗药治疗ACS的重要治法。的重要治法。二、急性冠脉综合征二、急性冠脉综合征 瘀毒证微观辨证瘀毒证微观辨证 ACS的的微微观观辨辨证证研研究究 传统辨证基础上引入现代医学先进技术传统辨证基础上引入现代医学先进技术传统辨证基础上引入现代医学先进技术传统辨证基础上引入现代医学先进技术 微观指标认识、辨别证微观指标认识、辨别证微观指标认识、辨别证微观指标认识、辨别证 更完整、更准确、更本质的阐明证的更完整、更准确、更本质的阐明证的更完整、更准确、更本质的阐明证的更完整、更准确、更本质的阐明证的实质与物质基础实质与物质基础实质与物质基础实质与物质基础 ACSACS的血瘀证、痰浊证的微观辨证研究较多，的血瘀证、痰浊证的微观辨证研究较多，的血瘀证、痰浊证的微观辨证研究较多，的血瘀证、痰浊证的微观辨证研究较多，热毒证研究较少热毒证研究较少热毒证研究较少热毒证研究较少 本研究选取本研究选取本研究选取本研究选取hs-CRPhs-CRP、TNFTNF以及冠脉造影等以及冠脉造影等以及冠脉造影等以及冠脉造影等微观指标来认识微观指标来认识微观指标来认识微观指标来认识ACSACS瘀毒证瘀毒证瘀毒证瘀毒证微观辨证微观辨证微观辨证微观辨证 5050例例ACSACS患者患者标实证微观辨证研究标实证微观辨证研究急性冠脉综合征标实辨证与超敏急性冠脉综合征标实辨证与超敏C C反应蛋白、反应蛋白、肿瘤坏死因子的关系肿瘤坏死因子的关系与血瘀证相比，与血瘀证相比，*P P0.05,*0.05,*P P0.010.01与热毒证相比，与热毒证相比，#P P0.05,#0.05,#P P0.010.01*#血瘀证和热毒证的血瘀证和热毒证的hs-CRP、TNF均明显增高均明显增高 5050例例ACSACS患者标实证微观辨证研究患者标实证微观辨证研究n血瘀证和热毒证的超敏血瘀证和热毒证的超敏C反应蛋白（反应蛋白（hs-CRP）及）及TNF均明显增高，均明显增高，n其中热毒证的其中热毒证的hs-CRP、TNF明显高于痰浊明显高于痰浊证、气滞证及寒凝证；证、气滞证及寒凝证；n血瘀证的血瘀证的hs-CRP明显高于痰浊证、气滞证明显高于痰浊证、气滞证及寒凝证，及寒凝证，TNF明显高于寒凝证；明显高于寒凝证；n可见可见ACS血瘀证及热毒证与炎症密切相关。血瘀证及热毒证与炎症密切相关。7676例行例行ICSICS的的ACSACS患者患者标实证微观辨证研究标实证微观辨证研究标实证辨证与标实证辨证与C C反应蛋白反应蛋白与热毒血瘀有非常显著差异；与热毒血瘀有非常显著差异；与热毒痰瘀有显著差异与热毒痰瘀有显著差异标实证辨证与白细胞计数标实证辨证与白细胞计数 与热毒血瘀有显著差异；与热毒血瘀有显著差异；与热毒痰瘀有显著差异与热毒痰瘀有显著差异标实证辨证与标实证辨证与CRP CRP、WBC WBCnCRPCRP、WBCWBC可以作为热毒证的辨证参考可以作为热毒证的辨证参考指标之一指标之一n亦可以作为亦可以作为ACSACS严重程度的评价指标之严重程度的评价指标之一一标实证与标实证与D D二聚体二聚体n 与气滞血瘀比较有显著差异；与气滞血瘀比较有显著差异；与其他证型比较有与其他证型比较有显著差异显著差异标实证辨证与标实证辨证与D D二聚体二聚体n血瘀证相关的证型中血瘀证相关的证型中DD水平高水平高nDD可作为血瘀证辨证的客观指标之一可作为血瘀证辨证的客观指标之一ACSACS瘀毒证的微观辨证瘀毒证的微观辨证n炎症指标（炎症指标（CRPCRP、hs-CRPhs-CRP、TNFTNF、WBC WBC 等）等）水平与热毒证密切相关，可作为热毒证微水平与热毒证密切相关，可作为热毒证微观辨证的重要指标；观辨证的重要指标；n血管内皮损伤、血小板活化、高凝状态血管内皮损伤、血小板活化、高凝状态 等等相关指标如相关指标如vWF vWF、CD62pCD62p、DD DD等可作为血等可作为血瘀证微观辨证的客观指标；瘀证微观辨证的客观指标；nACSACS瘀毒证的微观辨证，包括（但不局限于）瘀毒证的微观辨证，包括（但不局限于）上述两大类。上述两大类。三、解毒活血稳定斑块、治疗三、解毒活血稳定斑块、治疗急性冠脉综合征急性冠脉综合征瘀毒证瘀毒证及其及其机制探讨机制探讨nACS的病理生理机制是由于动脉粥样硬化的病理生理机制是由于动脉粥样硬化（As）斑块不稳定（易损斑块），发生溃）斑块不稳定（易损斑块），发生溃破、出血及血栓形成，引起不同程度的冠破、出血及血栓形成，引起不同程度的冠状动脉管腔堵塞，心肌血和氧供应急剧减状动脉管腔堵塞，心肌血和氧供应急剧减少所致。少所致。前两部分工作基础上前两部分工作基础上n血瘀证血瘀证及及热毒证热毒证均为主要标实证且常并存均为主要标实证且常并存n瘀毒互结瘀毒互结可能是病机的关键（主要病机）可能是病机的关键（主要病机）n“解毒活血解毒活血”可望成为重要治法可望成为重要治法n瘀毒证微观辨证研究结果瘀毒证微观辨证研究结果结合进行下面两部分工作结合进行下面两部分工作n观察观察“解毒活血解毒活血”的疗效的疗效n探讨探讨“解毒活血解毒活血”的机理的机理解毒活血稳定斑块、治疗急性冠脉综合征解毒活血稳定斑块、治疗急性冠脉综合征瘀毒证及其机制探讨瘀毒证及其机制探讨临床研究临床研究n（一）益气解毒活血治疗（一）益气解毒活血治疗不稳定性心绞痛不稳定性心绞痛疗效疗效与清热解毒的作用与清热解毒的作用n（二）解毒活血配伍稳定（二）解毒活血配伍稳定动脉粥样硬化动脉粥样硬化斑块的斑块的机制机制实验研究实验研究n（三）解毒活血配伍干预易损斑块的机制（三）解毒活血配伍干预易损斑块的机制n（四）解毒活血配伍抑制巨噬细胞泡沫化、抗（四）解毒活血配伍抑制巨噬细胞泡沫化、抗动脉粥样硬化的机制动脉粥样硬化的机制（一）益气解毒活血治疗（一）益气解毒活血治疗不稳定性心绞痛疗效不稳定性心绞痛疗效与清热解毒的作用与清热解毒的作用不稳定性心绞痛患者不稳定性心绞痛患者的临床治疗研究的临床治疗研究nUA患者在常规西药治疗的基础上，随机分组患者在常规西药治疗的基础上，随机分组为为3组：组：n益气活血益气活血组，加用组，加用黄芪黄芪注射液、注射液、三七三七总皂苷注总皂苷注射剂治疗；射剂治疗；n益气活血益气活血解毒解毒组，加用组，加用黄芪黄芪注射液、注射液、三七三七总皂总皂苷注射剂及苷注射剂及解毒护心胶囊解毒护心胶囊（黄连黄连微粉与微粉与绿茶绿茶提提取物）治疗；取物）治疗；n西药对照组，不加中药。西药对照组，不加中药。n治疗治疗2周后结果，周后结果，益气活血益气活血配伍与配伍与益气益气活血活血解毒解毒配伍均可改善配伍均可改善UA患者临床症患者临床症状及心电图，并可降低状及心电图，并可降低P选择素（血小选择素（血小板板-颗粒膜蛋白颗粒膜蛋白140，CD62p）、血管）、血管性假血友病因子（性假血友病因子（vWF）、）、TNF、CRP水平，改善左室收缩、舒张功能水平，改善左室收缩、舒张功能指标。指标。益气活血益气活血解毒解毒配伍配伍n在降低在降低TNF、CRP水平和改善水平和改善左室舒左室舒张功能张功能方面优于方面优于益气活血益气活血配伍配伍n并有显著的并有显著的调脂调脂作用作用n在降低在降低CD62p、vWF幅度方面，与益幅度方面，与益气活血组之间未见显著差异气活血组之间未见显著差异提 示n解毒活血治疗解毒活血治疗UA机制与保护血管内皮机制与保护血管内皮功能、抑制血小板活化、抗炎、调脂功能、抑制血小板活化、抗炎、调脂等有关等有关n清热解毒清热解毒在在抗炎抗炎、调脂调脂方面发挥更显方面发挥更显著作用著作用（二）解毒活血配伍稳定动脉（二）解毒活血配伍稳定动脉粥样硬化斑块的机制粥样硬化斑块的机制颈动脉粥样硬化斑块患者颈动脉粥样硬化斑块患者的临床干预研究的临床干预研究解毒与活血配伍的创新药对解毒与活血配伍的创新药对n虎杖虎杖与与山楂山楂配伍配伍n大黄大黄与与红曲红曲配伍配伍用于干预颈动脉粥样硬化斑块的临床研究解毒解毒组（组（虎杖提取物组，虎杖提取物组，A A组）组）活血活血组（组（山楂提取物组山楂提取物组，B B组）组）解毒解毒活血活血配伍组（配伍组（虎杖提取物与山楂提虎杖提取物与山楂提取物配伍组，取物配伍组，C C组）组）洛伐他汀对照组（洛伐他汀对照组（D D组）组）空白对照组（空白对照组（E E组）组）各各3030例，疗程例，疗程6 6个月个月 虎杖山楂虎杖山楂配伍配伍对颈动脉对颈动脉AsAs斑块及其稳定性干预作用斑块及其稳定性干预作用检测指标检测指标颈动脉粥样硬化斑块超声检测颈动脉粥样硬化斑块超声检测n斑块积分等斑块积分等斑块稳定性血清指标检测斑块稳定性血清指标检测n超敏超敏C反应蛋白反应蛋白n血清粘附分子血清粘附分子n血清基质降解相关因子血清基质降解相关因子颈动脉粥样硬化斑块超声检测指标比较*#斑块稳定性血清指标检测 *第二部分第二部分 研究结果研究结果斑块稳定性血清指标检测#*大黄红曲配伍对颈动脉As斑块及其稳定性干预作用血清超敏C反应蛋白大黄组、大黄红曲配伍组、洛伐他汀组均显著降低，大黄红曲大黄组、大黄红曲配伍组、洛伐他汀组均显著降低，大黄红曲配伍组降低配伍组降低hs-CRPhs-CRP水平显著优于大黄组、红曲组及洛伐他汀组水平显著优于大黄组、红曲组及洛伐他汀组临床研究表明临床研究表明虎杖与山楂配伍虎杖与山楂配伍大黄与红曲配伍大黄与红曲配伍n干预颈干预颈As临床疗效突出临床疗效突出n降脂降脂n抗抗Asn抑制及稳定斑块等作用抑制及稳定斑块等作用n显著优于单纯活血或解毒显著优于单纯活血或解毒临床研究初步阐明作用机理临床研究初步阐明作用机理虎杖与山楂配伍虎杖与山楂配伍大黄与红曲配大黄与红曲配n抗炎抗炎n调脂调脂n减少细胞外基质降解减少细胞外基质降解n降压降压n改善血流动力学等改善血流动力学等n显著优于单纯活血或解毒显著优于单纯活血或解毒（三）解毒活血配伍干预易损（三）解毒活血配伍干预易损斑块的机制斑块的机制 载脂蛋白载脂蛋白E E基因敲除小鼠动脉粥样基因敲除小鼠动脉粥样硬化和易损斑块模型实验研究硬化和易损斑块模型实验研究解毒活血配伍解毒活血配伍虎杖提取物与芎芍胶囊配伍虎杖提取物与芎芍胶囊配伍n虎杖提取物虎杖提取物n芎芍胶囊（川芎与赤芍的提取物）芎芍胶囊（川芎与赤芍的提取物）n两者配伍低剂量两者配伍低剂量n两者配伍中剂量两者配伍中剂量n两者配伍高剂量两者配伍高剂量n血脂康血脂康n洛伐他汀洛伐他汀技术路线图技术路线图1313周龄周龄ApoE(-/-)ApoE(-/-)小鼠小鼠110110只只 1313周龄周龄C57C57小鼠小鼠1212只只 9898只给予高脂饲料只给予高脂饲料 1212只给予普通饲料只给予普通饲料 模型组、洛伐他汀组、血脂康组、模型组、洛伐他汀组、血脂康组、解毒、活血组及配伍高、中、低剂量组解毒、活血组及配伍高、中、低剂量组普通饲料组普通饲料组 19周后19周后正常对照组正常对照组 连续灌胃17周病理形态学病理形态学 透射电镜透射电镜 血脂血脂主动脉主动脉NF-BNF-B、MMP-9MMP-9表达表达 炎症因子炎症因子NF-B免疫组化表达结果免疫组化表达结果 各给药组与高脂模型组比，各给药组与高脂模型组比，NF-B NF-B表达明显降低，且以解毒活血配伍表达明显降低，且以解毒活血配伍高剂量组降低最明显高剂量组降低最明显MMP-9MMP-9阳性表达结果阳性表达结果 各给药组与高脂模型组比，各给药组与高脂模型组比，MMP-9表达明显降低，且以解毒活血配伍表达明显降低，且以解毒活血配伍高剂量组降低最明显高剂量组降低最明显 虎杖提取物与活血化瘀制剂芎芍胶囊配虎杖提取物与活血化瘀制剂芎芍胶囊配伍作为解毒活血配伍伍作为解毒活血配伍n显著抑制显著抑制As、稳定斑块，、稳定斑块，n并降脂、降低血清并降脂、降低血清hs-CRP、MCP-1、CD40L水平，水平，n抑制粥样斑块核因子抑制粥样斑块核因子-B（NF-B）表）表达，达，n抑制基质金属蛋白酶抑制基质金属蛋白酶-9（MMP-9）表）表达从而稳定基质。达从而稳定基质。（四）解毒活血配伍抑制巨噬（四）解毒活血配伍抑制巨噬细胞泡沫化、抗动脉粥样硬化细胞泡沫化、抗动脉粥样硬化的机制的机制载脂蛋白载脂蛋白E E基因敲除小鼠腹腔巨基因敲除小鼠腹腔巨噬细胞泡沫化模型实验研究噬细胞泡沫化模型实验研究ApoEApoEApoEApoE（-/-/-/-/-）小鼠）小鼠）小鼠）小鼠腹腔巨噬细胞培养腹腔巨噬细胞培养腹腔巨噬细胞培养腹腔巨噬细胞培养分分 为为分分 为为 B B-G GB B-G G 组组 与与组组 与与 o ox x-L LD D L L+L LP PS So ox x-L LD D L L+L LP PS S共共孵孵育育，并并分分别别加加药药干干预预共共孵孵育育，并并分分别别加加药药干干预预B B B B虎虎虎虎杖杖杖杖苷苷苷苷C C C C山山山山楂楂楂楂提提提提取取取取物物物物D D D D虎杖虎杖虎杖虎杖苷山苷山苷山苷山楂提楂提楂提楂提取物取物取物取物组组组组E E E E洛洛洛洛伐伐伐伐他他他他汀汀汀汀组组组组F F F F罗罗罗罗格格格格列列列列酮酮酮酮组组组组G G G G模模模模型型型型组组组组A A A A空空空空白白白白对对对对照照照照分别观察分别观察分别观察分别观察0 0 0 0、24242424、48h48h48h48h三个不同时相的三个不同时相的三个不同时相的三个不同时相的以下指标变化以下指标变化以下指标变化以下指标变化WesternWesternWesternWesternblotblotblotblotELISAELISAELISAELISATLR4TLR4TLR4TLR4NF-NF-NF-NF-B B B BTNF-TNF-TNF-TNF-IL-1IL-1IL-1IL-1数据整理、统计分析数据整理、统计分析数据整理、统计分析数据整理、统计分析技术路线技术路线检测指标检测指标n透射电镜观察细胞超微结构透射电镜观察细胞超微结构n激光共聚焦显微镜观察各组细胞游离钙离子浓激光共聚焦显微镜观察各组细胞游离钙离子浓度度n酶法检测各组细胞内胆固醇及胆固醇酯的变化酶法检测各组细胞内胆固醇及胆固醇酯的变化nRT-PCR法检测各组细胞法检测各组细胞PPAR、ABCA1、CD36的的mRNA表达表达nWestern blot法检测各组细胞法检测各组细胞 TLR4、NF-B表达表达nELISA法检测各组细胞法检测各组细胞TNF-、IL-1含量含量4848小时空白组、模型组、解小时空白组、模型组、解毒活血配伍组细胞电镜图片毒活血配伍组细胞电镜图片（6000)6000)空白组空白组空白组空白组模型组模型组模型组模型组解毒活血配伍组解毒活血配伍组解毒活血配伍组解毒活血配伍组研究结果研究结果不同时相各组巨噬细胞内胆固醇酯含量*#*研究结果研究结果不同时相各组巨噬细胞内CD36mRNA相对表达量*#研究结果研究结果不同时相各组巨噬细胞内TLR4蛋白相对表达量*#研究结果研究结果不同时相各组巨噬细胞内NF-B蛋白相对表达量*#研究结果研究结果不同时相各组巨噬细胞内TNF-含量*#研究结果研究结果不同时相各组巨噬细胞内IL-1含量*#研究结果解毒活血配伍（虎杖与山楂配伍）抑解毒活血配伍（虎杖与山楂配伍）抑制巨噬细胞泡沫化、抗制巨噬细胞泡沫化、抗AsAs作用的机制作用的机制 n1.通过抑制泡沫细胞内通过抑制泡沫细胞内Toll样受体样受体4（TLR4）的表达，抑制）的表达，抑制NF-B的激的激活，进而减弱活，进而减弱TLR4/NF-B信号途径及信号途径及白介素白介素-1（IL-1）、）、TNF的合成的合成与释放，从而抑制炎症反应；与释放，从而抑制炎症反应；解毒活血配伍（虎杖与山楂配伍）抑解毒活血配伍（虎杖与山楂配伍）抑制巨噬细胞泡沫化、抗制巨噬细胞泡沫化、抗AsAs作用的机制作用的机制n2.通过激活核受体过氧化物酶体增殖因子激通过激活核受体过氧化物酶体增殖因子激活受体活受体（PPAR），从转录水平调节下游），从转录水平调节下游靶基因靶基因B类清道夫受体类清道夫受体CD36、腺苷三磷酸、腺苷三磷酸结合盒转运体结合盒转运体A1(ABCA1)及炎症因子的表及炎症因子的表达，干预氧化修饰的低密度脂蛋白达，干预氧化修饰的低密度脂蛋白(ox-LDL)-PPAR-CD36与与ox-LDL-PPAR-ABCA1两条信号通路，使两条信号通路，使ABCA1mRNA表表达上调、达上调、CD36mRNA表达下调；表达下调；解毒活血配伍（虎杖与山楂配伍）抑解毒活血配伍（虎杖与山楂配伍）抑制巨噬细胞泡沫化、抗制巨噬细胞泡沫化、抗AsAs作用的机制作用的机制n3.拮抗巨噬细胞内钙离子水平的增高；拮抗巨噬细胞内钙离子水平的增高；n4.能降低巨噬细胞内总胆固醇的浓度，能降低巨噬细胞内总胆固醇的浓度，延缓游离胆固醇和胆固醇酯上升速度。延缓游离胆固醇和胆固醇酯上升速度。解毒活血配伍（虎杖与山楂配伍）抑解毒活血配伍（虎杖与山楂配伍）抑制巨噬细胞泡沫化、抗制巨噬细胞泡沫化、抗AsAs作用的机制作用的机制n解毒活血配伍对这解毒活血配伍对这4个方面机制的作用个方面机制的作用均显著优于单纯解毒或活血均显著优于单纯解毒或活血n解毒能够更好地作用于抗炎环节及其解毒能够更好地作用于抗炎环节及其相关的调控机制相关的调控机制结结 语语ACSACS的瘀毒证辨证与解毒活血治法的瘀毒证辨证与解毒活血治法n根据瘀毒病机、瘀毒辨证提出根据瘀毒病机、瘀毒辨证提出解毒活解毒活血血治疗治疗ACS的中医药治疗新思路，的中医药治疗新思路，n初步临床研究表明，初步临床研究表明，解毒与活血配伍解毒与活血配伍治疗治疗UA、抗、抗AS、稳定斑块，较之单用、稳定斑块，较之单用活血或益气活血有明显的优越性。活血或益气活血有明显的优越性。ACSACS瘀毒证的微观辨证瘀毒证的微观辨证nACS瘀毒证微观辨证指标的检测有助瘀毒证微观辨证指标的检测有助于辨证的客观化与量化，也可成为临于辨证的客观化与量化，也可成为临床证候评估、疗效评价、机理探讨和床证候评估、疗效评价、机理探讨和预后判断的重要参考指标。预后判断的重要参考指标。解毒活血稳定斑块、治疗急性冠脉解毒活血稳定斑块、治疗急性冠脉综合征的机制，可能包括：综合征的机制，可能包括：n抗炎，抗炎，n稳定基质，稳定基质，n抑制血小板活化，抑制血小板活化，n保护血管内皮功能，保护血管内皮功能，n拮抗细胞内钙超载，拮抗细胞内钙超载，n降低细胞内胆固醇、胆固醇酯浓度，等作用降低细胞内胆固醇、胆固醇酯浓度，等作用从而稳定斑块、抑制斑块破裂及诱发的血栓形成。从而稳定斑块、抑制斑块破裂及诱发的血栓形成。抗炎等作用的调控途径可能包括抗炎等作用的调控途径可能包括nTLR4/NF-B信号途径信号途径nox-LDL-PPAR-CD36信号途径信号途径nox-LDL-PPAR-ABCA1信号途径信号途径上述临床及实验研究结果表明上述临床及实验研究结果表明n解毒与活血配伍优于单独的活血化瘀或解毒与活血配伍优于单独的活血化瘀或单独的清热解毒单独的清热解毒n解毒活血有望更好地发挥多途径、多部解毒活血有望更好地发挥多途径、多部位、多靶点的综合调治效应位、多靶点的综合调治效应n值得进一步应用与深入研究值得进一步应用与深入研究祝第十一次全国中西医结合心血管病学术会议圆满成功！