B细菌和噬菌体的遗传和重组.ppt
六、六、E.coli 环状染色体环状染色体Hfr H thr pro lac pur gal his gly thiHfr1 thr thi gly his gal pur lac proHfr2 thr pro thi gly his gal pur lacHfr3 pur lac pro thr thi gly his gal E.coli的染色体。上图表示因子处于染色体上的不同位点；下图表示高频重组时基因转移的先后顺序不同Hfr品系最早的最晚的转移顺序Hfr品系H Hfr品系1 Hfr品系2 Hfr品系7转化的机制七七.重组频率的计算重组频率的计算 (一一)等级传递绘图等级传递绘图1956年年Wollman,Jacob和和 Hayes HfrH thr+leu+azis lac+gal+()+str+mal+mtl+F thr-leu-azir lac-gal-()-str mal mtl-mal:maltose麦芽糖mtl:mannitol 甘露醇(二)中断杂交作图(interrupted matingexperiment)1961年 Jacob 和 Wollman供体：Hfr H strs thrleuazir tonr lac gal受体：F strr thr leu azis tons lacgal（1）不同的非选择标记进入受体且重组）不同的非选择标记进入受体且重组 的时间不同，但都是稳定的；的时间不同，但都是稳定的；（2）各基因的重组频率随着时间的增加）各基因的重组频率随着时间的增加 而增加，直至极值；而增加，直至极值；（3）按时间顺序，先重组和后重组的基）按时间顺序，先重组和后重组的基 因，重组率的极值在逐步减少；因，重组率的极值在逐步减少；(三)重组作图E.coli染色体连锁图部分二倍体部分二倍体（partial diploid）部分合子部分合子（merozygote）也称半合子半合子，内基因子内基因子 (endogenote)外基因子外基因子（exogenote）八八.性导性导(Sexduction)1959年年 Adelberg&Burns重复高频重组实验发现一重复高频重组实验发现一个新的品系，既可以高频，又可高频致育。个新的品系，既可以高频，又可高频致育。特点：特点：(1)F因子能高频传递；因子能高频传递；(2)供体能力的传递与染色体无关；供体能力的传递与染色体无关；(3)F变为变为Hfr时，整合到相同位点，时，整合到相同位点，F+变为变为Hfr时时整合到不同位点，整合到不同位点，(4)高频传递特定的基因；高频传递特定的基因；(5)形成的部分二倍体不稳定，约形成的部分二倍体不稳定，约10-3会失去会失去F 因子。因子。第五节第五节噬菌体染色体的连锁和交换噬菌体染色体的连锁和交换一、噬菌体的结构和形态一、噬菌体的结构和形态二二噬菌体噬菌体1951年 Esther Lederberg 发现K12中有原噬菌体，并命名为。附加体附加体 (episome)合子诱导合子诱导（zygotic induction）Hfr（）F 无重组子无重组子 Hfr F（）有有重组子重组子三、噬菌体的基因重组三、噬菌体的基因重组菌苔菌苔（lawn）噬菌斑噬菌斑（plaque）图6-23hr+,h+r双重感染E.coli进行的 杂交(引自Griffiths et al.,1999)图6-24 hr+h+r在大肠杆菌菌苔上出现的4种不同的噬菌斑hr+,h+r,h+r+,hr 四、四、T2的环形遗传图的环形遗传图 第六节 转导转导（transduction）一、转导的发现一、转导的发现1952年年J.Lederberg，N.Zinder发现发现（1）P22的的侵侵染染性性和和FA的的能能力力都都可可被被一一些些水水解酶，如解酶，如DNase和胰蛋白酶所抑制；和胰蛋白酶所抑制；（2）FA的大小和质量与的大小和质量与P22相同。相同。（3）用）用P22抗血清或加热处理都可以使抗血清或加热处理都可以使P22 和和FA失活，且失活速率相同；失活，且失活速率相同；（4）FA和和P22的宿主范围相同。的宿主范围相同。三三.共转导共转导（contransduc）三、特异性转导三、特异性转导又称局限性转导（restricted transduction）J.Lederberg&N.Zinder发现发现 野生型E.coli UV 细胞裂解 K12()gal 诱导 感染非溶原的品系 基本 106 gal 培养基 选择 转导体进一步发现:（1）这些转导子是溶原的，具有这些转导子是溶原的，具有“免疫免疫 力力”。说明什麽？说明什麽？（2）gal 转导子遗传特点不稳定，转导子遗传特点不稳定，有有1-10又变成又变成gal。表明什麽？表明什麽？（3）gal转导子在细菌裂解时不能产生转导子在细菌裂解时不能产生 成熟的噬菌体。成熟的噬菌体。作何推论？作何推论？附着位点附着位点（attachment site,att）att B（又叫att），att P正常的切离正常的切离非正常切离非正常切离dg(d gal)pgaldbio低频转导低频转导(low-frequency transduction,LFT）高频转导高频转导(High-feequency transduction,HFT)双重溶原双重溶原（double lysoge）细菌接合接合转化转化转导转导
