专题四菊花的组织培养.ppt
菊菊 花花 的的 组组 织织 培培 养养 大多绿色开花植大多绿色开花植物都是靠物都是靠种子种子繁殖。繁殖。那么,有没有不用那么,有没有不用种子来培育植物的种子来培育植物的方法呢?方法呢?扦插扦插嫁接嫁接压条压条 茎的营养茎的营养繁殖方式繁殖方式 指在人工培养基上,离体培指在人工培养基上,离体培养植物的器官、组织、细胞和原生质体,养植物的器官、组织、细胞和原生质体,并使其生长、增殖、分化以及再生植株并使其生长、增殖、分化以及再生植株的技术。的技术。组织培养组织培养(1 1)基础知识)基础知识细胞离细胞离体体必要条件:必要条件:一定的营养物质、激素和其他外一定的营养物质、激素和其他外一定的营养物质、激素和其他外一定的营养物质、激素和其他外界条件界条件界条件界条件原理原理:细胞的全能性细胞的全能性即已分化的细胞,仍具有发育形成即已分化的细胞,仍具有发育形成完整个体的潜能。完整个体的潜能。原理:原理:定义:定义:生物体的每一个细胞都包含有该物种所生物体的每一个细胞都包含有该物种所特有的全套遗传物质,都有发育成为完特有的全套遗传物质,都有发育成为完整个体所必需的全部基因整个体所必需的全部基因高度特化的动物细胞,从整个细胞来说,全能高度特化的动物细胞,从整个细胞来说,全能性受到限制。但它的性受到限制。但它的细胞核细胞核仍然保持着全能性,仍然保持着全能性,这是因为细胞核内含有这是因为细胞核内含有该物种遗传性所需要的该物种遗传性所需要的遗传物质遗传物质已分化的植物细胞,仍具有已分化的植物细胞,仍具有全能性全能性实例实例受精卵受精卵 生殖细胞生殖细胞 体细胞体细胞全能性的比较全能性的比较:体细胞体细胞 生殖细胞生殖细胞 受精卵受精卵分化程度低的细胞分化程度低的细胞分化程度低的细胞分化程度低的细胞 分化程度高的细胞分化程度高的细胞植物植物植物植物细胞细胞细胞细胞 动物细胞动物细胞动物细胞动物细胞细胞的分化细胞的分化概念:概念:在个体发育中,相同细胞的后代在形在个体发育中,相同细胞的后代在形态、结构、生理功能上发生稳定性差态、结构、生理功能上发生稳定性差异的过程异的过程 结果:结果:形成不同的细胞和组织形成不同的细胞和组织原因:原因:基因在特定的时间和空间条件下的选基因在特定的时间和空间条件下的选择性表达的结果择性表达的结果细胞分化细胞分化是一种持久性的变化,它发生在生物是一种持久性的变化,它发生在生物体的整个生命过程中体的整个生命过程中,在在胚胎期胚胎期达到最大限度。达到最大限度。特点:特点:(2 2)稳定性:稳定性:细胞分化是稳定的,一般是细胞分化是稳定的,一般是不可逆转的不可逆转的(3 3)全能性:全能性:已分化的细胞,仍具有发育已分化的细胞,仍具有发育的的 潜能潜能(1 1)持久性:持久性:是一种持久性的变化,它发是一种持久性的变化,它发生在生物体的整个生命过程中生在生物体的整个生命过程中.离体的离体的植物植物器官、组织、器官、组织、细胞细胞脱分化脱分化愈愈伤伤组组织织再分化再分化 胚状胚状体或体或丛芽丛芽植植物物体体植物组织培养的基本过程植物组织培养的基本过程脱分化脱分化:指已经分化的植物器官、组织或指已经分化的植物器官、组织或细胞细胞,当受到创伤或进行离体当受到创伤或进行离体(也受到创伤也受到创伤)培养时培养时,已停止分裂的细胞已停止分裂的细胞,又重新恢复分又重新恢复分裂裂,细胞改变原有的分化状态细胞改变原有的分化状态,失去原有结失去原有结构和功能构和功能,成为具有未分化特性的细胞。成为具有未分化特性的细胞。在植物中在植物中,去分化细胞成为薄壁细胞去分化细胞成为薄壁细胞,称称为为愈伤组织愈伤组织 外植体:外植体:从活植物体上切下进行培养的从活植物体上切下进行培养的那部分细胞、组织或器官那部分细胞、组织或器官外植体:外植体:脱分化:脱分化:再分化:再分化:已经脱分化的细胞在一定条件下已经脱分化的细胞在一定条件下,又可经过愈伤组织或胚状体又可经过愈伤组织或胚状体,再分化出根和再分化出根和芽芽,形成完整植株形成完整植株,这一过程叫作这一过程叫作再分化。再分化。愈伤组织愈伤组织:细胞排列疏松而无规则细胞排列疏松而无规则,是高度是高度液泡化的、成无定形状态的薄壁细胞液泡化的、成无定形状态的薄壁细胞再分化:再分化:愈伤组织:愈伤组织:菠萝的愈伤组织菠萝的愈伤组织菠萝的愈伤组织菠萝的愈伤组织愈伤组织愈伤组织过程过程:离离离离体体体体组组组组织织织织或或或或细细细细胞胞胞胞植植植植物物物物体体体体脱分化脱分化脱分化脱分化细胞分细胞分细胞分细胞分裂素裂素裂素裂素生长素生长素生长素生长素愈愈愈愈伤伤伤伤组组组组织织织织芽芽芽芽根根根根细胞分裂细胞分裂细胞分裂细胞分裂素素素素 生长素生长素生长素生长素细胞分裂细胞分裂细胞分裂细胞分裂素素素素 有利于根的分化有利于根的分化生长素生长素细胞分裂素:细胞分裂素:有利于芽的分化,抑有利于芽的分化,抑制根的分化制根的分化生长素生长素细胞分裂素:细胞分裂素:促进愈伤组织生长促进愈伤组织生长生长素和细胞分裂素同时使用,用量的比例生长素和细胞分裂素同时使用,用量的比例对植物细胞发育方向的影响对植物细胞发育方向的影响(4 4)除了上述因素外,除了上述因素外,PHPH、温度、光照等条件、温度、光照等条件也很重要。也很重要。不同的植物对各种条件的要求往往不同的植物对各种条件的要求往往不同。进行菊花的组织培养,一般将不同。进行菊花的组织培养,一般将PHPH值控制值控制在在5.85.8左右,温度控制在左右,温度控制在18-2218-22,并且每日用,并且每日用日光灯照射日光灯照射12h12h。讨论:讨论:1 1、你能说出各种营养物质的作用吗?同、你能说出各种营养物质的作用吗?同专题专题2 2中微生物培养基的配方相比,中微生物培养基的配方相比,MSMS培养基的培养基的配方有哪些明显的不同?配方有哪些明显的不同?微量元素和大量元素提供植物细胞生活所必需的微量元素和大量元素提供植物细胞生活所必需的无机盐;蔗糖提供碳源,同时能够维持细胞的渗无机盐;蔗糖提供碳源,同时能够维持细胞的渗透压;甘氨酸、维生素等物质主要是为了满足离透压;甘氨酸、维生素等物质主要是为了满足离体植物细胞在正常代谢途径受到一定影响后所产体植物细胞在正常代谢途径受到一定影响后所产生的特殊营养需求。生的特殊营养需求。微生物培养基以有机营养为主。微生物培养基以有机营养为主。与微生物的与微生物的培养不同,培养不同,MSMS培养基则需提供培养基则需提供大量无机营养,大量无机营养,无无机盐混合物包括植物生长必须的大量元素和微量机盐混合物包括植物生长必须的大量元素和微量元素两大类。元素两大类。阅读课文,思考以下问题阅读课文,思考以下问题2、你认为组织培养过程中,成功的关键、你认为组织培养过程中,成功的关键有哪些?这些步骤的适宜条件是什么?有哪些?这些步骤的适宜条件是什么?组织的脱分化及愈伤组织的再分化。组织的脱分化及愈伤组织的再分化。植物组织培养过程中,影响植物细胞植物组织培养过程中,影响植物细胞脱分化、再分化的最重要因素是植物激素,脱分化、再分化的最重要因素是植物激素,细胞分裂素与生长素之间的浓度比可以调细胞分裂素与生长素之间的浓度比可以调控植株组培过程中芽和根的形成。控植株组培过程中芽和根的形成。生长素生长素/细胞分裂素细胞分裂素高高 有利于根的分化、抑制芽的形成有利于根的分化、抑制芽的形成低低 有利于芽的分化、抑制根的形成有利于芽的分化、抑制根的形成同常规的无性繁殖方法相比,组织培养快速同常规的无性繁殖方法相比,组织培养快速繁殖法主要具有以下优点:繁殖法主要具有以下优点:(1 1)快速。)快速。采用常规的方法如分株法,一棵花采用常规的方法如分株法,一棵花卉一年一般只能生产几株或几十株,但用组织卉一年一般只能生产几株或几十株,但用组织培养的方法则每年可以繁殖出几万甚至数百万培养的方法则每年可以繁殖出几万甚至数百万的小植株。的小植株。(2 2)周年生产。)周年生产。花卉组织培养快速繁殖是在实花卉组织培养快速繁殖是在实验室中进行,因条件可控,所以不受季节限制,验室中进行,因条件可控,所以不受季节限制,可以全年进行连续生产。而常规的无性繁殖则可以全年进行连续生产。而常规的无性繁殖则受季节限制,只能在花卉生长季节进行繁殖。受季节限制,只能在花卉生长季节进行繁殖。组织培养与常规繁殖相比优点众多组织培养与常规繁殖相比优点众多(3 3)经济效益高。)经济效益高。花卉组织培养快速繁殖所花卉组织培养快速繁殖所需要的空间小,在一个需要的空间小,在一个200200平方米的培养室平方米的培养室内一年可生产试管苗上百万株。如按每株内一年可生产试管苗上百万株。如按每株1 1元计算,每年产值上百万元。元计算,每年产值上百万元。(4 4)以组织培养繁殖的种苗与母株有著相同)以组织培养繁殖的种苗与母株有著相同的遗传基因。的遗传基因。所以使用这项技术可让优良所以使用这项技术可让优良的品种不断地延续。的品种不断地延续。组织培养与常规繁殖相比优点众多组织培养与常规繁殖相比优点众多2 2、培育无病毒植株(作物脱毒)、培育无病毒植株(作物脱毒)4 4、转基因植物的培育,转基因植物的培育,基因工程中亦需用到植基因工程中亦需用到植物组织培养的方法。物组织培养的方法。植物组织培养的应用:植物组织培养的应用:3 3、制备人工种子,制备人工种子,可以解决有些作物品种繁殖可以解决有些作物品种繁殖能力差,结子困难或发芽率低等问题能力差,结子困难或发芽率低等问题1 1、植物快速繁殖、植物快速繁殖人人人人工工工工种种种种子子子子二、实验操作二、实验操作制备制备MSMS固体固体培养基培养基外植体消毒外植体消毒接种接种培养培养栽培栽培移栽移栽冲洗冲洗70%酒精酒精无菌水冲洗无菌水冲洗氯化汞氯化汞无菌水冲洗至少三无菌水冲洗至少三次之上次之上二、实验操作二、实验操作(一)制备(一)制备MSMS固体培养基固体培养基MSMSMSMS培养基包括培养基包括培养基包括培养基包括20202020多种营养成分,实验室一般使用多种营养成分,实验室一般使用多种营养成分,实验室一般使用多种营养成分,实验室一般使用4 4 4 4保存配制好的培养基母液来制备。保存配制好的培养基母液来制备。保存配制好的培养基母液来制备。保存配制好的培养基母液来制备。1 1、配制各种母液、配制各种母液为了避免每次配制培养基都要称量几十种成分,为了避免每次配制培养基都要称量几十种成分,减少工作量,可以将各种成分按比例配制成浓减少工作量,可以将各种成分按比例配制成浓缩液,即培养基母液,一般将常用药品配成比缩液,即培养基母液,一般将常用药品配成比所需浓度高所需浓度高1010100100倍的母液。使用时,根据倍的母液。使用时,根据浓缩比例浓缩比例计算用量计算用量,加水稀释。,加水稀释。无机物中大量元素浓缩无机物中大量元素浓缩1010倍,微量元素浓倍,微量元素浓缩缩100100倍,常温保存。倍,常温保存。激素类、维生素类以及用量较小的有机物一激素类、维生素类以及用量较小的有机物一般可按般可按1mg/ml1mg/ml的质量浓度单独配制成母液。的质量浓度单独配制成母液。用母液配制培养基时,需要根据各种母液用母液配制培养基时,需要根据各种母液的的浓缩倍数,计算用量。浓缩倍数,计算用量。2 2、配制培养基、配制培养基分装到锥形瓶中,每瓶分装分装到锥形瓶中,每瓶分装50ml50ml或或100ml100ml。配制培养液配制培养液配制配制1LMS1LMS培养基,先将称好的琼脂加培养基,先将称好的琼脂加800ml800ml蒸馏蒸馏水,加热使琼脂溶化,然后加入蔗糖水,加热使琼脂溶化,然后加入蔗糖30g30g,取配制取配制好的大量元素、微量元素、有机物和植物激素的母好的大量元素、微量元素、有机物和植物激素的母液,依次加入,加蒸馏水定容至液,依次加入,加蒸馏水定容至1000ml1000ml。调调pHpH培养基的分装培养基的分装 由于菊花的茎段的组织培养比较容易,因此由于菊花的茎段的组织培养比较容易,因此不必添加植物激素。不必添加植物激素。3 3、灭菌、灭菌分装好的培养基连同其他器械一起分装好的培养基连同其他器械一起进行进行高压蒸汽灭菌。高压蒸汽灭菌。1 1、选材:菊花茎段,取、选材:菊花茎段,取生长旺盛生长旺盛的的嫩嫩枝。枝。(二)外植体消毒(二)外植体消毒2 2、消毒、消毒流水冲洗流水冲洗菊花茎段用流水冲洗后可少许菊花茎段用流水冲洗后可少许洗衣粉洗衣粉,用软刷,用软刷轻轻刷洗,刷洗后在流水下冲洗轻轻刷洗,刷洗后在流水下冲洗20min20min左右。左右。酒精处理酒精处理用无菌吸水纸吸干外植体表面的水分,放入体用无菌吸水纸吸干外植体表面的水分,放入体积分数为积分数为7070的酒精的酒精中摇动中摇动2 23 3次,持续次,持续6 67s7s,立即将外植体取出,在立即将外植体取出,在无菌水中清洗无菌水中清洗,用,用无菌滤纸吸干表面的水分。无菌滤纸吸干表面的水分。消毒液处理消毒液处理取出后用无菌吸水纸吸干外植体表面的水分,取出后用无菌吸水纸吸干外植体表面的水分,放入质量分数为放入质量分数为0.10.1的氯化汞的氯化汞溶液中溶液中1 12min2min,取出后在取出后在无菌水无菌水中至少清洗中至少清洗3 3次,漂净次,漂净消毒液消毒液,用无菌滤纸吸干表面的水分。用无菌滤纸吸干表面的水分。(三)接种三)接种污染的主要来源是空气中的细菌和孢子,接种污染的主要来源是空气中的细菌和孢子,接种室消毒是至关重要的。用室消毒是至关重要的。用7070的酒精喷雾使空的酒精喷雾使空气消毒,气消毒,酒精或新洁尔灭搽洗工作台并用酒精或新洁尔灭搽洗工作台并用紫外紫外线线照射照射2020分钟。分钟。1 1、接种室消毒、接种室消毒2 2、无、无菌菌操作要求操作要求操作要在酒精灯火焰旁完成,每次使用操作要在酒精灯火焰旁完成,每次使用器械器械后,后,都需要用火焰都需要用火焰灼烧灭菌灼烧灭菌,接种后立即盖好瓶盖。,接种后立即盖好瓶盖。超净工作台的紫外灯照射消毒超净工作台的紫外灯照射消毒3 3、材料的切取和接种、材料的切取和接种将装有培养基的锥形瓶整齐地排列在将装有培养基的锥形瓶整齐地排列在酒精灯酒精灯左侧。左侧。将消过毒的菊花茎段在无菌培养皿中切成将消过毒的菊花茎段在无菌培养皿中切成小段小段(长约(长约0.5-1cm0.5-1cm)。)。左手持锥形瓶。右手拉开捆左手持锥形瓶。右手拉开捆扎锥形瓶的绳子,并将封口膜攥在右手手心,以扎锥形瓶的绳子,并将封口膜攥在右手手心,以避免封口膜接触瓶口的一面被污染。左手持瓶,避免封口膜接触瓶口的一面被污染。左手持瓶,使瓶口旋转通过火焰,右手用镊子夹取菊花茎段,使瓶口旋转通过火焰,右手用镊子夹取菊花茎段,放入培养基中。插入时应放入培养基中。插入时应注意不要倒插注意不要倒插。每瓶接。每瓶接种种6 68 8块外植体。接种后,将封口膜重新扎好。块外植体。接种后,将封口膜重新扎好。(四)培养(四)培养1 1、愈、愈伤伤组织的培养组织的培养首次培养愈伤组织时,在无光条件下愈伤组织首次培养愈伤组织时,在无光条件下愈伤组织长的更快。长的更快。2 2、愈伤组织的继代培养、愈伤组织的继代培养培养基成分接近耗尽,必须更换培养基,进培养基成分接近耗尽,必须更换培养基,进行继代培养。行继代培养。3 3、试管苗的培养、试管苗的培养当愈伤组织长到一定大小后,可以更换培养基,当愈伤组织长到一定大小后,可以更换培养基,进行试管苗的进行试管苗的见光培养。见光培养。思考:思考:你打算做几组重复?你打算做几组重复?你打算设置对照实验吗你打算设置对照实验吗?观察记录观察记录试管苗试管苗(五)移栽五)移栽移栽生根的菊花试管苗之前,应先打开培养移栽生根的菊花试管苗之前,应先打开培养瓶的封口膜,让试管苗在培养间生长几日。瓶的封口膜,让试管苗在培养间生长几日。1 1、打开封口膜(炼苗)、打开封口膜(炼苗)2 2、清洗转移、清洗转移用流水清洗根部的培养基,用流水清洗根部的培养基,将幼苗移植到消过将幼苗移植到消过毒的蛭石或珍珠岩等环境下毒的蛭石或珍珠岩等环境下生活一段时间。生活一段时间。珍珠岩:蓄水性强、透性好,适合栽培珍珠岩:蓄水性强、透性好,适合栽培3 3、移栽、移栽幼苗长壮后,移栽到土壤中幼苗长壮后,移栽到土壤中炼苗炼苗无土栽培基质无土栽培基质(六)栽培(日常管理)六)栽培(日常管理)幼苗移栽后,每天幼苗移栽后,每天观察并记录幼苗的观察并记录幼苗的生长情况,适时浇生长情况,适时浇水、施肥,直至开水、施肥,直至开花,定期观察温湿花,定期观察温湿度。度。日常管理日常管理1 1、培养基的灭菌(高压蒸汽灭菌)、培养基的灭菌(高压蒸汽灭菌)2 2、外植体的消毒(酒精、氯化汞)、外植体的消毒(酒精、氯化汞)3 3、接种的无菌操作(酒精、酒精灯、接种的无菌操作(酒精、酒精灯灼烧)灼烧)4 4、无菌箱中的培养;、无菌箱中的培养;5 5、移栽到消过毒的环境中生存一段、移栽到消过毒的环境中生存一段时间。时间。在整个操作过程中,是如何来实现无菌环境的?在整个操作过程中,是如何来实现无菌环境的?课堂练习课堂练习1 1 、外植体接种前,需要将接种室、接种箱灭菌和对外、外植体接种前,需要将接种室、接种箱灭菌和对外植体消毒,某同学依次进行了如下操作:植体消毒,某同学依次进行了如下操作:接种前一天,将接种室的四个角用甲醛溶液和高锰接种前一天,将接种室的四个角用甲醛溶液和高锰酸钾熏蒸。酸钾熏蒸。将灭菌室和接种箱内用紫外灯灭菌。将灭菌室和接种箱内用紫外灯灭菌。接接种前,操作者用肥皂清洗双手,擦干,再用酒精棉球擦种前,操作者用肥皂清洗双手,擦干,再用酒精棉球擦拭双手。拭双手。接种前接种前1 1小时,在接种室内用喷雾器喷洒小时,在接种室内用喷雾器喷洒70%70%酒精;桌椅也用来酒精擦拭;接种箱内用甲醛溶液和高酒精;桌椅也用来酒精擦拭;接种箱内用甲醛溶液和高锰酸钾熏蒸。锰酸钾熏蒸。用次氯酸钠溶液将外植体消毒。用次氯酸钠溶液将外植体消毒。你认为合理的操作步骤依次是你认为合理的操作步骤依次是()A A B B C C D D A A20122012年新课标卷年新课标卷3939题(题(1515分)分)为了探究为了探究6-BA6-BA和和IAAIAA对某菊花品种茎尖外植体对某菊花品种茎尖外植体再生丛芽的影响,某研究小组在培养基再生丛芽的影响,某研究小组在培养基中加入中加入6-BA6-BA和和IAAIAA,配制成四种培养基(见下,配制成四种培养基(见下表),灭菌后分别接种数量相同、生长状态表),灭菌后分别接种数量相同、生长状态一致、消毒后的茎尖外植体,在适宜条件下一致、消毒后的茎尖外植体,在适宜条件下培养一段时间后,统计再生丛芽外植体的比培养一段时间后,统计再生丛芽外植体的比率(率(m m),以及再生丛芽外植体上的丛芽平均),以及再生丛芽外植体上的丛芽平均数(数(n n),结果如下表。回答下列问题:),结果如下表。回答下列问题:(1 1)按照植物的需求量,培养基中无机盐的元素可分)按照植物的需求量,培养基中无机盐的元素可分为为 和和 两类。上述培养基中,两类。上述培养基中,6-6-BABA属于属于 类生长调节剂。类生长调节剂。(2 2)在该实验中,自变量是)在该实验中,自变量是 ,因变量是,因变量是 ,自变量的取值范围是,自变量的取值范围是 。(3 3)从实验结果可知,诱导丛芽总数最少的培养基是)从实验结果可知,诱导丛芽总数最少的培养基是号培号培养基。养基。(4 4)为了诱导该菊花试管苗生根,培养基中一般)为了诱导该菊花试管苗生根,培养基中一般 不加入不加入 (填(填“6-BA”6-BA”或或“IAA”IAA”)大量元素大量元素微量元素微量元素细胞分裂素细胞分裂素IAAIAA的浓度的浓度菊花再生丛芽外植体的比率和外植体上的丛芽平均数菊花再生丛芽外植体的比率和外植体上的丛芽平均数 00.5mg.L00.5mg.L-1-1 1 16-BA 6-BA 20122012年山东卷年山东卷3434题(题(8 8分)辣椒素作为一种生物碱广泛用分)辣椒素作为一种生物碱广泛用于食品保健、医药工业等领域。辣椒素的获得途径如图。于食品保健、医药工业等领域。辣椒素的获得途径如图。(1 1)图中)图中和和分别表示辣椒组织培养中细胞的分别表示辣椒组织培养中细胞的_和和_过程。过程。(2 2)图中培养外植体的培养基中常用的凝固剂是)图中培养外植体的培养基中常用的凝固剂是_。培养基中的生长素和细胞分裂素用量的比值培养基中的生长素和细胞分裂素用量的比值_(填(填“高高”或或“低低”)时,有利于芽的分化。对培养基彻底灭菌时,)时,有利于芽的分化。对培养基彻底灭菌时,应采用的灭菌方法是应采用的灭菌方法是_。(3 3)图中外植体的消毒所需酒精的体积分数是)图中外植体的消毒所需酒精的体积分数是_。用酶解法将愈伤组织分离成单细胞时,常用的酶是用酶解法将愈伤组织分离成单细胞时,常用的酶是_和纤维素酶。和纤维素酶。脱分化脱分化再分化再分化琼脂琼脂低低高压蒸汽灭菌高压蒸汽灭菌70%70%果胶酶果胶酶课外实践(调查)课外实践(调查)1 1、我们万源的富硒茶非常有名,、我们万源的富硒茶非常有名,现在有一个含硒量很高的新品种茶,现在有一个含硒量很高的新品种茶,假如你是一名科研工作人员,请设假如你是一名科研工作人员,请设计怎样快速将该优良品种推广,成计怎样快速将该优良品种推广,成为万源新时代又一主打茶品牌。为万源新时代又一主打茶品牌。2 2、调查你所见所闻的花卉,有哪些是通、调查你所见所闻的花卉,有哪些是通过植物组织培养技术得到的,这些花卉过植物组织培养技术得到的,这些花卉你了解它们的培养过程和生长过程吗?你了解它们的培养过程和生长过程吗?通过你的调查,可以和同学交流,老师通过你的调查,可以和同学交流,老师讨论,或者以撰写科技小论文的形式在讨论,或者以撰写科技小论文的形式在报刊杂志上发表。报刊杂志上发表。植物组织培养过程示意图植物组织培养过程示意图 上面的示意图中还有什么地方不够上面的示意图中还有什么地方不够完善的?完善的?没有进行灭菌处理,试管也没有做没有进行灭菌处理,试管也没有做密封等。密封等。结果分析与评价结果分析与评价正常苗正常苗污染苗污染苗 不是。对外植体进行表面消毒时,既不是。对外植体进行表面消毒时,既要考虑到药剂的消毒效果,又要考要考虑到药剂的消毒效果,又要考虑到植物的耐受力。虑到植物的耐受力。思考在此消毒过程中,是不是思考在此消毒过程中,是不是强度越大越好,为什么?强度越大越好,为什么?五、课题延伸五、课题延伸一般来说,容易进行无性繁殖的植物,也容易一般来说,容易进行无性繁殖的植物,也容易进行组织培养进行组织培养实例:芦荟、豆瓣绿、秋海棠、月季实例:芦荟、豆瓣绿、秋海棠、月季练习练习1 1、植物组织培养所利用的植物材料体积小、植物组织培养所利用的植物材料体积小、抗逆性差,对培养条件的要求高。用于植物抗逆性差,对培养条件的要求高。用于植物组织培养的培养基同样适合于某些微生物的组织培养的培养基同样适合于某些微生物的生长,如一些细菌、真菌等的生长。而培养生长,如一些细菌、真菌等的生长。而培养物一旦受到微生物的污染,就会导致实验前物一旦受到微生物的污染,就会导致实验前功尽弃,因此要进行严格的无菌操作。功尽弃,因此要进行严格的无菌操作。2 2、外植体的生理状态是成功进行组织培养的、外植体的生理状态是成功进行组织培养的重要条件之一。生长旺盛的嫩枝生理状况好,重要条件之一。生长旺盛的嫩枝生理状况好,容易诱导脱分化和再分化容易诱导脱分化和再分化