荧光PCR检测原理精选课件.ppt

关于荧光PCR检测原理第一页，本课件共有17页一、荧光信号的检测一、荧光信号的检测一、荧光信号的检测一、荧光信号的检测第二页，本课件共有17页 荧光标记信号的产生荧光标记信号的产生荧光标记信号的产生荧光标记信号的产生 荧光标记基团在某波长的激发光刺激下，荧光标记基团在某波长的激发光刺激下，荧光标记基团在某波长的激发光刺激下，荧光标记基团在某波长的激发光刺激下，产生一个更长波长的发射光产生一个更长波长的发射光产生一个更长波长的发射光产生一个更长波长的发射光第三页，本课件共有17页 FRET FRET？某荧光标记基团在激发光刺激下生成某波长的发射光，某荧光标记基团在激发光刺激下生成某波长的发射光，某荧光标记基团在激发光刺激下生成某波长的发射光，某荧光标记基团在激发光刺激下生成某波长的发射光，某荧光标记基团在激发光刺激下生成某波长的发射光，某荧光标记基团在激发光刺激下生成某波长的发射光，当另一屏蔽基团与其距离合适时，原发射光将会被屏蔽基当另一屏蔽基团与其距离合适时，原发射光将会被屏蔽基当另一屏蔽基团与其距离合适时，原发射光将会被屏蔽基当另一屏蔽基团与其距离合适时，原发射光将会被屏蔽基当另一屏蔽基团与其距离合适时，原发射光将会被屏蔽基当另一屏蔽基团与其距离合适时，原发射光将会被屏蔽基团所吸收，并转化为其他波长的发射光或热能，称之为团所吸收，并转化为其他波长的发射光或热能，称之为团所吸收，并转化为其他波长的发射光或热能，称之为团所吸收，并转化为其他波长的发射光或热能，称之为团所吸收，并转化为其他波长的发射光或热能，称之为团所吸收，并转化为其他波长的发射光或热能，称之为FRETFRETFRET。第四页，本课件共有17页荧光荧光荧光荧光信号信号信号信号 荧光染料荧光染料荧光染料荧光染料SYBR greenSYBR greenSYBR greenSYBR green特异性结合双链，释放荧光信号特异性结合双链，释放荧光信号特异性结合双链，释放荧光信号特异性结合双链，释放荧光信号 特异性荧光探针特异性荧光探针特异性荧光探针特异性荧光探针TaqmanTaqmanTaqmanTaqman双荧光标记探针双荧光标记探针双荧光标记探针双荧光标记探针molecular Beaconmolecular Beaconmolecular Beaconmolecular Beacon荧光标记探针荧光标记探针荧光标记探针荧光标记探针荧光标记杂交双探针荧光标记杂交双探针荧光标记杂交双探针荧光标记杂交双探针第五页，本课件共有17页TaqmanTaqman特异性荧光特异性荧光双标记探针双标记探针Taqman 5353外外切酶活性切酶活性第六页，本课件共有17页MolecularMolecular beaconbeacon第七页，本课件共有17页荧光标记杂交双探针荧光标记杂交双探针荧光标记杂交双探针荧光标记杂交双探针第八页，本课件共有17页二、典型的荧光二、典型的荧光二、典型的荧光二、典型的荧光PCRPCRPCRPCR扩增曲线扩增曲线扩增曲线扩增曲线阳性标本扩增曲线阳性标本扩增曲线阳性标本扩增曲线阳性标本扩增曲线 阴性标本扩增曲线阴性标本扩增曲线阴性标本扩增曲线阴性标本扩增曲线第九页，本课件共有17页Bio-rad iCyclerBio-rad iCyclerBio-rad iCyclerBio-rad iCycler扩增曲线扩增曲线扩增曲线扩增曲线第十页，本课件共有17页PE-5700PE-5700PE-5700PE-5700扩增曲线扩增曲线扩增曲线扩增曲线第十一页，本课件共有17页PE-7700PE-7700PE-7700PE-7700扩增曲线扩增曲线扩增曲线扩增曲线第十二页，本课件共有17页Roche LightCyclerRoche LightCyclerRoche LightCyclerRoche LightCycler扩增曲线扩增曲线扩增曲线扩增曲线第十三页，本课件共有17页三、三、三、三、CtCtCtCt值值值值样本扩增曲线与阈值线交叉点的循环数样本扩增曲线与阈值线交叉点的循环数样本扩增曲线与阈值线交叉点的循环数样本扩增曲线与阈值线交叉点的循环数Ct值值第十四页，本课件共有17页四、荧光四、荧光四、荧光四、荧光PCRPCR定量的原理定量的原理定量的原理定量的原理 第十五页，本课件共有17页Unknown未知样本拷贝数的确定未知样本拷贝数的确定未知样本拷贝数的确定未知样本拷贝数的确定 第十六页，本课件共有17页感谢大家观看第十七页，本课件共有17页