4-2.2生物选修1课堂教学课件-微生物的分离与计数.ppt

2022/12/12高中生物高中生物选修选修1 专题专题2 微生物培养与应用微生物培养与应用主要主要 内容内容2022/12/12u大肠杆菌的纯化培养大肠杆菌的纯化培养；u分解尿素的细菌的计数分解尿素的细菌的计数;u分解纤维素微生物的分离分解纤维素微生物的分离。1000ml1000ml牛肉膏蛋白胨培养基的配方牛肉膏蛋白胨培养基的配方H2O 定容至定容至1000mlNacl 5g蛋白胨蛋白胨 10g牛肉膏牛肉膏 5g琼脂琼脂20.0g大肠杆菌的纯化培养大肠杆菌的纯化培养：制备牛肉膏蛋白胨固体培养基制备牛肉膏蛋白胨固体培养基1.1.计算：计算：培养基用量培养基用量依配方计算各成分的用量依配方计算各成分的用量2.2.称量：称量：3.3.溶化：溶化：牛肉膏黏稠，用称量纸称取牛肉膏黏稠，用称量纸称取牛肉膏、蛋白胨易吸潮，要快、加盖牛肉膏、蛋白胨易吸潮，要快、加盖牛肉膏、称量纸牛肉膏、称量纸 、少量水加热溶解、少量水加热溶解 取纸取纸蛋白胨、蛋白胨、NaClNaCl琼脂琼脂 补水定容补水定容4.4.调调pHpH、分装、封口：分装、封口：5.5.灭菌：灭菌：6.6.倒平板：倒平板：培养基、培养皿培养基、培养皿分散成单个细胞分散成单个细胞,形成单个菌落形成单个菌落倒平板倒平板约约50防止皿盖上的水珠落入培养基，造成污染防止皿盖上的水珠落入培养基，造成污染灼烧灭菌，灼烧灭菌，防止瓶口的微生物污染培养基防止瓶口的微生物污染培养基大肠杆菌的纯化培养大肠杆菌的纯化培养：制备牛肉膏蛋白胨固体培养基制备牛肉膏蛋白胨固体培养基纯化大肠杆菌：纯化大肠杆菌：平板划线法：平板划线法：菌种菌种划划3 3个个平板平板1 1个个不划线不划线1.1.接种：接种：接种环接种环防止划破培养基防止划破培养基（重复实验）（重复实验）（空白对照）（空白对照）平板划线法平板划线法 为什么在操作的第一步以及每次划线之前都要为什么在操作的第一步以及每次划线之前都要灼烧接种环？在划线操作结束时，仍然需要灼烧灼烧接种环？在划线操作结束时，仍然需要灼烧接种环吗？为什么？接种环吗？为什么？操作的第一步灼烧接种环是为了避免接种环操作的第一步灼烧接种环是为了避免接种环上可能存在的微生物污染培养物上可能存在的微生物污染培养物 杀死上次残留的菌种，保证使下一次划线时，杀死上次残留的菌种，保证使下一次划线时，菌种直接来源于上次划线的末端，从而通过划线次菌种直接来源于上次划线的末端，从而通过划线次数的增加，使每次划线时菌种的数目逐渐减少，以数的增加，使每次划线时菌种的数目逐渐减少，以便得到菌落。便得到菌落。及时杀死接种环上残留的菌种，避免细菌污及时杀死接种环上残留的菌种，避免细菌污染环境和感染操作者。染环境和感染操作者。6 6支支试管，分别加入试管，分别加入9ml9ml无菌水无菌水1ml1011ml1021ml1031ml1041ml1051ml106稀释涂布平板法稀释涂布平板法：a.a.梯度稀释菌液梯度稀释菌液：菌液菌液微量微量 移液器移液器稀释涂布平板法稀释涂布平板法：a.a.梯度稀释菌液梯度稀释菌液：b.b.涂布平板涂布平板：不超过不超过0.1ml0.1ml各各梯度分别涂布梯度分别涂布3个平板个平板1 1个个不涂布作空白对照不涂布作空白对照滴滴灼灼试试涂涂稀稀释释10103 3倍倍稀稀释释10104 4倍倍稀稀释释10105 5倍倍平板划线法：平板划线法：大肠杆菌的纯化培养大肠杆菌的纯化培养：制备牛肉膏蛋白胨固体培养基制备牛肉膏蛋白胨固体培养基纯化大肠杆菌：纯化大肠杆菌：1.1.接种：接种：稀释涂布平板法稀释涂布平板法：2.2.培养：培养：将将接种后接种后的培养基和一个的培养基和一个未接种未接种的培养基的培养基放入放入3737恒温箱中培养恒温箱中培养12h12h24h24h后，后，观察并记录观察并记录菌种的保藏：菌种的保藏：1.1.临时保藏：临时保藏：试管固体斜面培养基上试管固体斜面培养基上442.2.长期保存：长期保存：菌种易被污染、变异菌种易被污染、变异甘油管藏甘油管藏1ml1ml甘油甘油1ml1ml菌液菌液2020复习复习尿素尿素CO(NHCO(NH2 2)2 2重要的农业氮肥。重要的农业氮肥。只能被土壤中细菌分解为只能被土壤中细菌分解为NHNH3 3才能被植物吸才能被植物吸收利用收利用 CO(NH CO(NH2 2)2 2+H+H2 2O COO CO2 2+2NH+2NH3 3细菌脲酶细菌脲酶u筛选菌株筛选菌株 提出的问题提出的问题 如何寻找如何寻找耐高温耐高温的酶？的酶？解决问题的思路解决问题的思路 寻找寻找耐高温耐高温环境；环境；原理原理 高温淘汰其他菌，选出耐高温细菌，高温淘汰其他菌，选出耐高温细菌，耐高温菌种提取耐高温酶。耐高温菌种提取耐高温酶。u筛选菌株筛选菌株选择培养基：选择培养基：允许特定种类允许特定种类的微生物生长，同时抑制或的微生物生长，同时抑制或阻止其他种类微生物生长的阻止其他种类微生物生长的培养基。培养基。u筛选菌株筛选菌株KHKH2 2POPO4 4 1.4g 1.4g NaHPO NaHPO4 4 2.1g 2.1g MgSO MgSO4 4 H H2 2O 0.2gO 0.2g 葡萄糖葡萄糖 10.0g10.0g 尿素尿素 1.0g1.0g 琼脂琼脂 15.0g15.0g 将上述物质溶解后，将上述物质溶解后，用蒸馏水定容到用蒸馏水定容到1000mL1000mL。该培养基的配方中，为该培养基的配方中，为微生物的生长提供碳源和氮微生物的生长提供碳源和氮源的分别是什么物质？源的分别是什么物质？此配方能否筛选出产生此配方能否筛选出产生脲酶的细菌？为什么？脲酶的细菌？为什么？碳源：葡萄糖、尿素碳源：葡萄糖、尿素氮源：尿素氮源：尿素能。只有产生脲酶的能。只有产生脲酶的细菌能利用尿素作为氮细菌能利用尿素作为氮源而生存。源而生存。u统计菌落数目：统计菌落数目：1 1、活体计数法（、活体计数法（稀释涂布平板稀释涂布平板）（1 1）操作方法：）操作方法：稀释涂布平板稀释涂布平板统计菌落数统计菌落数 （2 2）原理：）原理：1 1个菌落个菌落1 1个活菌个活菌 （3 3）统计原则）统计原则 选选 3030 300 300 个菌落的平板个菌落的平板统计统计 每个稀释度取每个稀释度取3 3个平板个平板取取其其平均值平均值为什么？u统计菌落数目统计菌落数目 1 1、活菌计数法、活菌计数法 （4 4）统计结果：统计的菌落数往往比活菌的）统计结果：统计的菌落数往往比活菌的实际数目实际数目低低，因此统计结果一般用菌落数表，因此统计结果一般用菌落数表示。示。每克样品中的菌株数每克样品中的菌株数=（C/V)*MC/V)*M C:C:某一稀释度下平板上生长的平均菌落数；某一稀释度下平板上生长的平均菌落数；V:V:所用稀释液的体积；所用稀释液的体积；M:M:稀释倍数。稀释倍数。为什么？例：两位同学用稀释涂布平板法测定同例：两位同学用稀释涂布平板法测定同 一土壤样品中的细菌数。从对应稀释倍数为一土壤样品中的细菌数。从对应稀释倍数为10106 6的培养基中，得到以下两种统计结果。的培养基中，得到以下两种统计结果。1 1、甲同学在该浓度下涂布了一个平板，统计的、甲同学在该浓度下涂布了一个平板，统计的菌落数为菌落数为230230。2 2、乙同学在该浓度下涂布了、乙同学在该浓度下涂布了A A、B B、C C三个平板，三个平板，统计的菌落数分别为统计的菌落数分别为2121、212212、256256，该同学以这三个，该同学以这三个平板上菌落数的平均值平板上菌落数的平均值163163作为统计结果。作为统计结果。你认为这两位同学的作法正确吗？如果有问题，你认为这两位同学的作法正确吗？如果有问题，错在哪？错在哪？甲：没有甲：没有重复实验重复实验（至少涂布（至少涂布3 3个平板）个平板）乙：乙：A A组结果误差过大，不应用于计算平均值组结果误差过大，不应用于计算平均值2、显微观察法：比例计数或直接计数（血球计数板）、显微观察法：比例计数或直接计数（血球计数板）计数室（中央大方格）的长、宽和高分别为：计数室（中央大方格）的长、宽和高分别为：1 mm、1 mm和和 0.1mm 计数室的容积：计数室的容积：0.1mm3（万分之一毫升）（万分之一毫升）取样：稀释一定倍数的菌液取样：稀释一定倍数的菌液酵母细胞数酵母细胞数/ml80小格内酵母细胞个数小格内酵母细胞个数/80400104稀释倍数稀释倍数 计数顺序：计数顺序：左上左上右上右上右下右下左下左下 压在格线的，只统计左线和上线压在格线的，只统计左线和上线3.称重法：称重法：一个细胞（细菌）一般重约一个细胞（细菌）一般重约10121013g4.4.比浊法记数比浊法记数 当细菌浓度达到当细菌浓度达到107个个/ml时时,培养基会浑浊培养基会浑浊 利用选择培养基进行尿素分解菌的分离利用选择培养基进行尿素分解菌的分离过程中，从对应稀释倍数为过程中，从对应稀释倍数为10106 6的培养基中，的培养基中，A A、B B两同学分别得到以下两种统计结果。两同学分别得到以下两种统计结果。1 1、A A同学筛选出同学筛选出150150个菌落。个菌落。2 2、B B同学筛选出同学筛选出5050个菌落。个菌落。B B认为认为A A的培养基被杂菌污染了，或培养基的培养基被杂菌污染了，或培养基中混入了其他含氮物质，因而导致不能分解尿中混入了其他含氮物质，因而导致不能分解尿素的细菌也能在该培养基中生长。素的细菌也能在该培养基中生长。A A确认自己确认自己的操作无误，但也拿不出能令人信服的证据。的操作无误，但也拿不出能令人信服的证据。请你帮助请你帮助A A同学改进实验，提供具有说明同学改进实验，提供具有说明了的证据。了的证据。设置对照设置对照同等条件下，培养空白培养基同等条件下，培养空白培养基u设置对照设置对照 1 1、设置对照的目的：、设置对照的目的：排除实验组中非测试因素对实验结排除实验组中非测试因素对实验结果的影响，提高实验结果的可信度。果的影响，提高实验结果的可信度。对照实验对照实验是指除了是指除了 被测试被测试 的条件外，的条件外，其他条件都其他条件都 相同相同 的实验。满足该条件的实验。满足该条件的称为的称为 对照对照组，未满足该条件的称为组，未满足该条件的称为 实验实验 组。组。尿素培养基尿素培养基未接种的尿未接种的尿素培养基素培养基10-510-4实验过程实验过程 （一）土壤取样（一）土壤取样 1 1、取样的位置：、取样的位置：土壤，天然培养基，含有大量的微生物，土壤，天然培养基，含有大量的微生物，其中其中7070 9090是细菌。在富含有机质的土壤层是细菌。在富含有机质的土壤层的的3 3 8cm8cm处中分布着绝大多数的细菌。处中分布着绝大多数的细菌。2 2、取样要求：铲去表层土。、取样要求：铲去表层土。菌落计数菌落计数配制土壤溶液配制土壤溶液系列稀释系列稀释涂布平板与培养涂布平板与培养（二）样品稀释（二）样品稀释 （1 1）测细菌数：一般用）测细菌数：一般用10104 4、10105 5、10106 6稀释液稀释液 （2 2）测放线菌：一般用）测放线菌：一般用10103 3、10104 4、10105 5稀释液稀释液 （3 3）测真菌数：一般用）测真菌数：一般用10102 2、10103 3、10104 4稀释液稀释液原则：确保平板上的菌落数在原则：确保平板上的菌落数在3030 300300之间。之间。（三）微生物的培养与观察（三）微生物的培养与观察 1 1、接种：用适当的稀释液作涂布平板、接种：用适当的稀释液作涂布平板 2 2、培养：细菌：、培养：细菌：3030 3737，1 1 2d;2d;放线菌放线菌:25:25 28,528,5 7d;7d;霉菌霉菌:25:25 28,328,3 4d.4d.3 3、观察：、观察：a.a.每每24h24h统计一次菌落数目统计一次菌落数目 b.b.以以“稳定稳定菌落菌落”为观察对象为观察对象 （四）鉴定（四）鉴定鉴别培养基：不影响鉴别培养基：不影响微生物的生存微生物的生存酚红培养基：酚红培养基：鉴定分解尿素的细菌鉴定分解尿素的细菌原理：脲酶催化尿素原理：脲酶催化尿素分解成氨分解成氨培养基碱性培养基碱性增强增强 酚红变红酚红变红脲脲酶阳性酶阳性复习复习 纤维素酶是一种纤维素酶是一种复合酶复合酶，一般，一般认为它至少包括三种组分认为它至少包括三种组分，即，即C1酶、酶、CX酶和葡萄糖苷酶酶和葡萄糖苷酶，前两种酶使纤，前两种酶使纤维素分解成纤维二糖，第三种维素分解成纤维二糖，第三种酶将纤酶将纤维二糖分解成葡萄糖。维二糖分解成葡萄糖。纤维素纤维素纤维二纤维二糖糖葡萄糖葡萄糖C1酶酶Cx酶酶葡萄糖葡萄糖苷酶苷酶背景知识背景知识滤滤纸纸崩崩溃溃法法纤维素酶活性的测定实验：纤维素酶活性的测定实验：背景知识背景知识 刚果红可以与纤维刚果红可以与纤维素形成素形成红色复合物红色复合物，当，当纤维素被纤维素被纤维素酶纤维素酶分解分解后，红色复合物无法形后，红色复合物无法形成，出现以成，出现以纤维素分解纤维素分解菌菌为中心的为中心的透明圈透明圈，我，我们可以通过们可以通过是否产生透是否产生透明圈明圈来筛选纤维素分解来筛选纤维素分解菌。菌。背景知识背景知识实验流程示意图实验流程示意图一、实验目的一、实验目的二、实验原理二、实验原理三、所需仪器、材料、用具和药品三、所需仪器、材料、用具和药品四、实验的方法和步骤四、实验的方法和步骤五、分析结果五、分析结果实验设计实验设计一、实验目的一、实验目的1 1、利用特定的选择培养基和鉴别培养基从、利用特定的选择培养基和鉴别培养基从土壤中分离分解纤维素的微生物。土壤中分离分解纤维素的微生物。2 2、掌握刚果红染色的机理和操作。、掌握刚果红染色的机理和操作。实验设计实验设计1 1、以纤维素为碳源的选择培养基能选择、以纤维素为碳源的选择培养基能选择出分解纤维素的微生物。出分解纤维素的微生物。2 2、刚果红可以与像纤维素这样的多糖物质、刚果红可以与像纤维素这样的多糖物质形成红色复合物，而不与水解后的纤维二糖形成红色复合物，而不与水解后的纤维二糖和葡萄糖发生这种反应。和葡萄糖发生这种反应。二、实验原理二、实验原理实验设计实验设计三、所需仪器、材料、用具和药品三、所需仪器、材料、用具和药品1 1、实验仪器与用具、实验仪器与用具 除了分离分解尿素的细菌中用到的有除了分离分解尿素的细菌中用到的有关仪器用具外，还需要恒温振荡培养箱。关仪器用具外，还需要恒温振荡培养箱。2 2、材料与药品、材料与药品实验设计实验设计四、实验的方法和步骤四、实验的方法和步骤1 1、配制培养基、配制培养基2 2、灭菌、灭菌3 3、土壤取样、土壤取样5 5、样品稀释、样品稀释6 6、涂布接种、涂布接种4 4、选择培养、选择培养7 7、筛选菌落、筛选菌落实验设计实验设计配制培养基配制培养基实验设计实验设计灭菌灭菌酵母膏：实际上是膏状的酵母抽提物，酵母抽提物是国家行业标准的规定名称。酵母抽提物以酵母为原料，采用自溶法或加酶水解法工艺，经分离、脱色而成的，含氨基酸、肽、多肽及酵母细胞水溶性成分的产品。水解酪素：微生物培养基的氨基酸氮源，由酪蛋白水解得到，常见商品名称为水解酪素或酶解酪素。酪蛋白水解后富含21种氨基酸，氨基酸种类齐全。因此常用于制备培养基。CMC-NaCMC-Na：羧甲基纤维素钠，：羧甲基纤维素钠，是天然纤维素经化学改性后得到的纤维素衍生物，是纤维素的羧甲基醚化物。实验设计实验设计思考：思考：1.1.为什么要在富含纤维素的环境中寻找纤维素分为什么要在富含纤维素的环境中寻找纤维素分解菌？解菌？2.2.将滤纸埋在土壤中有什么作用？你认为滤纸应将滤纸埋在土壤中有什么作用？你认为滤纸应该埋进土壤多深？该埋进土壤多深？土壤取样土壤取样 将将滤纸埋在土壤中能使纤维素分解菌相对滤纸埋在土壤中能使纤维素分解菌相对聚集，实际上是人工设置纤维素分解菌生存的聚集，实际上是人工设置纤维素分解菌生存的适宜环境。一适宜环境。一般将纸般将纸埋于深约埋于深约10cm10cm左右腐殖土左右腐殖土壤中。壤中。实验设计实验设计“浓缩浓缩”作用作用u将土样加入装有将土样加入装有30ml30ml选择培养基的锥形瓶选择培养基的锥形瓶中，将锥形瓶固定在摇床上，在一定温度中，将锥形瓶固定在摇床上，在一定温度下振荡培养下振荡培养1-2d1-2d，直至培养液变混浊。，直至培养液变混浊。u吸取一定量的培养液，转移至另一瓶新鲜吸取一定量的培养液，转移至另一瓶新鲜的选择培养基中，以同样的方法培养到培的选择培养基中，以同样的方法培养到培养液变混浊。养液变混浊。（富集培养）（富集培养）选择培养选择培养根据样品中目的菌株数量来确定是否需要根据样品中目的菌株数量来确定是否需要。实验设计实验设计样品稀释样品稀释实验设计实验设计涂布接种涂布接种鉴别纤维素分解菌的培养基鉴别纤维素分解菌的培养基 挑选产生透明圈的菌落。挑选产生透明圈的菌落。挑取产生明显的挑取产生明显的透明圈的菌落，透明圈的菌落，一般即为分解纤维素的菌落。一般即为分解纤维素的菌落。接种到纤维素分解菌的选择培养基上，在接种到纤维素分解菌的选择培养基上，在30300 0C C37370 0C C培养，可获得纯培养。培养，可获得纯培养。筛选菌落筛选菌落实验设计实验设计刚果红染色法刚果红染色法方法一：方法一：先培养微生物，再加入刚果红进行先培养微生物，再加入刚果红进行颜色反应。颜色反应。方法二：方法二：在倒平板时就加入刚果红。在倒平板时就加入刚果红。实验设计实验设计复习复习微生物培养的基本程序微生物培养的基本程序培养基的配制培养基的配制称量称量溶化溶化调调pH分装分装包扎包扎灭菌灭菌（高压蒸汽灭菌）（高压蒸汽灭菌）接种接种固体培养基固体培养基平板划线（接种环）、稀释涂布（玻璃刮刀）平板划线（接种环）、稀释涂布（玻璃刮刀）液体培养基液体培养基用接种环蘸取菌液（扩大培养）用接种环蘸取菌液（扩大培养）培养培养 固体培养基固体培养基倒置，倒置，37恒温培养箱，恒温培养箱，24h左右左右液体培养基液体培养基空气浴或水浴培养箱（摇床），震荡培养空气浴或水浴培养箱（摇床），震荡培养固体培养基固体培养基划线的末端出现单菌落划线的末端出现单菌落液体培养基液体培养基培养液变浑浊培养液变浑浊观察观察 废弃菌种和培养基灭菌后丢弃废弃菌种和培养基灭菌后丢弃 总结总结 （20132013新课标卷新课标卷IIII）临床试用抗生素前，有时需要做细菌耐药）临床试用抗生素前，有时需要做细菌耐药实验。实验时，首先要从病人身上获取少量样本，然后按照一定实验。实验时，首先要从病人身上获取少量样本，然后按照一定的实验步骤操作，以确定某致病菌对不同抗生素的敏感性。回答的实验步骤操作，以确定某致病菌对不同抗生素的敏感性。回答下列问题：下列问题：（1 1）为了从样本中获取致病菌菌落，可用）为了从样本中获取致病菌菌落，可用_法或法或_法将样本接种于固体培养基表面，经过选择培养、鉴法将样本接种于固体培养基表面，经过选择培养、鉴别等步骤获得。别等步骤获得。（2 2）取该单菌落适当稀释，用）取该单菌落适当稀释，用_法接种于固体培养基法接种于固体培养基表面，在表面，在3737培养箱中培养培养箱中培养24h24h，使其均匀生长，布满平板。，使其均匀生长，布满平板。【答案答案】：（：（1 1）划线）划线 稀释涂布（或涂布）（稀释涂布（或涂布）（2 2）涂布）涂布 （3 3）为了检测该致病菌对于抗生素的敏感性，将分别含有）为了检测该致病菌对于抗生素的敏感性，将分别含有A A，B B，C C，D D四种抗生素的滤纸片均匀置于该平板上的不同位置，四种抗生素的滤纸片均匀置于该平板上的不同位置，培养一段时间后，含培养一段时间后，含A A的滤纸片周围出现透明圈，说明该致病菌的滤纸片周围出现透明圈，说明该致病菌对抗生素对抗生素A_A_；含；含B B的滤纸片周围没有出现透明圈，说明该的滤纸片周围没有出现透明圈，说明该致病菌对抗生素致病菌对抗生素B_B_；含；含C C的滤纸片周围的透明圈比含的滤纸片周围的透明圈比含A A的小，的小，说明说明_；含；含D D的滤纸片周围的透明圈也比含的滤纸片周围的透明圈也比含A A的小，且透明的小，且透明圈中出现了一个菌落，在排除杂菌污染的情况下，此菌落很可能圈中出现了一个菌落，在排除杂菌污染的情况下，此菌落很可能是抗生素是抗生素D D的的_。（4 4）根据上述实验结果，为达到抗菌目的，最好应选择抗）根据上述实验结果，为达到抗菌目的，最好应选择抗生素生素_。（3 3）敏感）敏感 不敏感不敏感 该致病菌对该致病菌对C C的敏感性比对的敏感性比对A A弱弱 耐药菌耐药菌 （4 4）A A （20132013上海卷）回答下列关于微生物的问题。阿拉伯胶是一种多上海卷）回答下列关于微生物的问题。阿拉伯胶是一种多糖，研究者从某地合欢树下距离地表深糖，研究者从某地合欢树下距离地表深101015cm15cm处的土样中初筛处的土样中初筛到能合成阿拉伯胶降解酶的菌株到能合成阿拉伯胶降解酶的菌株SM01SM01，以下为该菌株的鉴定过程。，以下为该菌株的鉴定过程。4141为获得单菌落，可采用为获得单菌落，可采用_法将初筛菌液接种在法将初筛菌液接种在_培养培养基上。基上。4242SM01SM01的菌落为粉白色，菌落初期呈突起絮状，在显微镜下观的菌落为粉白色，菌落初期呈突起絮状，在显微镜下观察到，菌丝白色致密，且有分生孢子，细胞核直径约察到，菌丝白色致密，且有分生孢子，细胞核直径约1m1m，初步，初步推测为真菌，则其特征中，最能说明推测为真菌，则其特征中，最能说明SM01SM01是真菌的是是真菌的是_。A A菌落初期呈突起絮状菌落初期呈突起絮状 B B菌落粉白色菌落粉白色C C有菌丝，白色致密有菌丝，白色致密 D D有细胞核，且有分生孢子有细胞核，且有分生孢子4343SM01SM01还一定具有的结构有还一定具有的结构有_（多选）。（多选）。A A细胞膜细胞膜 B B核糖体核糖体 C C拟核拟核 D D荚膜荚膜 E E芽孢芽孢 F F菌盖菌盖41.41.划线法划线法/涂布法涂布法 固体固体 42.D 43.A42.D 43.A、B B 4444表表4 4中培养液中培养液pHpH均为均为6.06.0，若对，若对SM01SM01中阿拉伯胶降解酶的活力中阿拉伯胶降解酶的活力进行测定，则应选用表中的进行测定，则应选用表中的_培养液，针对不选用的其他培培养液，针对不选用的其他培养液，分别说明原因：养液，分别说明原因：（1 1）_；（2 2）_；（3 3）_。44.D 44.D（1 1）A A培养液缺少氮源，培养液缺少氮源，SM01SM01不能很好生长（不能很好生长（2 2）B B培养液缺少氮源，培养液缺少氮源，SM01SM01不能很好生长；且有阿拉伯胶酶，会影响对不能很好生长；且有阿拉伯胶酶，会影响对SM01SM01自身产生的酶活力的测定自身产生的酶活力的测定结果（结果（3 3）C C培养液缺乏阿拉伯胶酶催化底物阿拉伯胶，会影响培养液缺乏阿拉伯胶酶催化底物阿拉伯胶，会影响SM01SM01的生长，也的生长，也无法对阿拉伯胶酶活力进行测定无法对阿拉伯胶酶活力进行测定