第六章第一节痰液脱落细胞检查.ppt

第六章第六章 细胞病理学诊断工作相关技术细胞病理学诊断工作相关技术指南指南第一节第一节 痰液脱落细胞病理学检查痰液脱落细胞病理学检查一、目的 是通过检查痰液中脱落的细胞形态学改变来检是通过检查痰液中脱落的细胞形态学改变来检查呼吸道及肺部病变的一种细胞病理学方法。查呼吸道及肺部病变的一种细胞病理学方法。检查具有非损伤性、非介入性且经济、方便、检查具有非损伤性、非介入性且经济、方便、特异性高等优点，与其它部位的细胞病理学检特异性高等优点，与其它部位的细胞病理学检查不同的是痰液细胞病理学检查主要是检出恶查不同的是痰液细胞病理学检查主要是检出恶性肿瘤细胞（癌细胞），而对癌前病变检查无性肿瘤细胞（癌细胞），而对癌前病变检查无意义。意义。采集痰液的方法和质量直接影响痰检查阳性率，采集痰液的方法和质量直接影响痰检查阳性率，采集痰液分析基本要求是：采集痰液分析基本要求是：痰液必须是从肺部咳出；痰液必须是从肺部咳出；痰液必须新鲜；痰液必须新鲜；对首次痰检查患者，应亲自指导和观察患者对首次痰检查患者，应亲自指导和观察患者咳痰。咳痰。痰液检查痰液检查 v来源：来源：肺泡、支气管、气管所产生的分泌物肺泡、支气管、气管所产生的分泌物v目的目的:辅助诊断：支气管哮喘、支气管扩张辅助诊断：支气管哮喘、支气管扩张 确诊：肺结核、肺癌确诊：肺结核、肺癌 观察疗效和预后判断观察疗效和预后判断对原发肺癌的敏感性可达对原发肺癌的敏感性可达60%-80%，特异性，特异性达到达到100%。二、方法学二、方法学（一）标本准备（一）标本准备1、咳痰、咳痰v建议用晨痰，涮牙、嗽口后进行，深咳。建议用晨痰，涮牙、嗽口后进行，深咳。v有条件者可采用雾化吸入后诱咳采痰。有条件者可采用雾化吸入后诱咳采痰。v纤维支气管镜检后咳取痰液能提高阳性率。纤维支气管镜检后咳取痰液能提高阳性率。2、采集、采集v一次咳痰建议留取一次咳痰建议留取3-5口痰液。口痰液。v存放标本的容器必须是无吸水性的干燥塑料或玻存放标本的容器必须是无吸水性的干燥塑料或玻璃器皿璃器皿,须有盖子密封须有盖子密封,标签明确，标签应记录相关标签明确，标签应记录相关内容内容,包括姓名、门诊号（住院号）、送检时间等。包括姓名、门诊号（住院号）、送检时间等。v二种标准的送检方法：二种标准的送检方法：每日一次，连续三天送检，每天制片。每日一次，连续三天送检，每天制片。每日一次，连续三天，每天收集后先预固定，一次每日一次，连续三天，每天收集后先预固定，一次性提取细胞成份后离心沉渣涂片或制成细胞蜡块性提取细胞成份后离心沉渣涂片或制成细胞蜡块（CB）。）。3、送检：、送检：原则上留取后立即送检，保持标本新原则上留取后立即送检，保持标本新鲜；一般夏天存放时间应鲜；一般夏天存放时间应2小时，冬天小时，冬天4小时，如确有困难或须做沉渣切片则可以预小时，如确有困难或须做沉渣切片则可以预固定后放置冰箱内冷藏，但不宜固定后放置冰箱内冷藏，但不宜5天。天。4、接收：、接收：核对送检单与样本盒（瓶）上的相关核对送检单与样本盒（瓶）上的相关信息，一致后签收标本，若信息不一致则需信息，一致后签收标本，若信息不一致则需重新与相关人员、科室核对，标本的签收制重新与相关人员、科室核对，标本的签收制度必须严格按规定执行。度必须严格按规定执行。注意事项：注意事项：l留痰：先漱口，取深部痰液。留痰：先漱口，取深部痰液。l查查24小时痰量和分层检查：无色广口瓶。小时痰量和分层检查：无色广口瓶。细菌学检查：无菌容器，及时送检。细菌学检查：无菌容器，及时送检。细胞学检查：细胞学检查：3-5口（约口（约5ml）,或上午或上午9-10时新鲜痰液。时新鲜痰液。无痰或痰少患者：化痰药无痰或痰少患者：化痰药(雾化吸入法雾化吸入法)。昏迷患者：清理口腔，负压吸引法吸痰。昏迷患者：清理口腔，负压吸引法吸痰。幼儿：棉拭刺激喉部，棉拭刮取。幼儿：棉拭刺激喉部，棉拭刮取。纤维支气管镜检查：直接病灶采集。纤维支气管镜检查：直接病灶采集。l痰标本应尽快涂片，在室温下，可以保存痰标本应尽快涂片，在室温下，可以保存24小时，在冰箱内可保存两天；痰液量一般以小时，在冰箱内可保存两天；痰液量一般以3ml-5ml(3-5口痰口痰)为宜；为宜；l采痰时应采用内面涂蜡的痰盒，可防止痰液采痰时应采用内面涂蜡的痰盒，可防止痰液被吸收而难于挑痰制片；被吸收而难于挑痰制片；l采集痰标本没有禁忌证，但如果病人在行支采集痰标本没有禁忌证，但如果病人在行支气管镜检查之后，立即进行痰细胞学检查，气管镜检查之后，立即进行痰细胞学检查，往往会混有一些嗜酸性的细胞碎片和炎性细往往会混有一些嗜酸性的细胞碎片和炎性细胞，而误认为高分化鳞癌。最好在支气管镜胞，而误认为高分化鳞癌。最好在支气管镜检查检查510天后再行痰细胞学检查。天后再行痰细胞学检查。（二）制片（二）制片1、标本取样、标本取样（1）大体观察：）大体观察：量：量：无或少量，呼吸道粘膜和肺泡受刺激时增多。无或少量，呼吸道粘膜和肺泡受刺激时增多。颜色颜色:正常：无色或灰白色，正常：无色或灰白色，病理情况有以下变化：病理情况有以下变化：水样痰：黏液少，呈水样，常有泡沫。水样痰：黏液少，呈水样，常有泡沫。灰白色黏液痰：黏液丰富，胶样。灰白色黏液痰：黏液丰富，胶样。红色或棕红色：含血液或血红蛋白红色或棕红色：含血液或血红蛋白 血性痰血性痰:血液量多，肺癌、肺结核、支气管扩张血液量多，肺癌、肺结核、支气管扩张 粉红色泡沫样粉红色泡沫样:急性肺水肿急性肺水肿 铁锈色铁锈色:大叶性肺炎大叶性肺炎,肺梗死肺梗死 黄色脓痰黄色脓痰:呼吸道化脓性感染，化脓性支气管炎呼吸道化脓性感染，化脓性支气管炎,肺结核肺结核;黄绿色黄绿色:绿脓杆菌绿脓杆菌,干酪性肺炎干酪性肺炎 烂桃样灰黄色烂桃样灰黄色:肺吸虫病肺吸虫病;棕褐色棕褐色:阿米巴肺脓肿、慢性充血性心衰肺淤血阿米巴肺脓肿、慢性充血性心衰肺淤血 黑色黑色:煤矿煤矿,锅炉工人或大量吸烟者锅炉工人或大量吸烟者 性状性状:粘液痰：粘液痰：多见于慢性支气管炎的缓解期、支气管哮喘或肺癌病例。痰液多见于慢性支气管炎的缓解期、支气管哮喘或肺癌病例。痰液透明、无色、粘稠，用镊子牵拉时，往往可拉成很长的细丝。如果其中透明、无色、粘稠，用镊子牵拉时，往往可拉成很长的细丝。如果其中有乳白色的颗粒状物，往往提示有肺癌的可能，必须取这部分痰液做涂有乳白色的颗粒状物，往往提示有肺癌的可能，必须取这部分痰液做涂片检查。片检查。粘液脓性痰：粘液脓性痰：是在粘液痰的基础上混有一部分脓液。检查时必须仔细挑是在粘液痰的基础上混有一部分脓液。检查时必须仔细挑选粘液丝的部分做细胞学检查，以提高癌细胞检查的阳性率。选粘液丝的部分做细胞学检查，以提高癌细胞检查的阳性率。脓性痰：脓性痰：为黄色或黄绿色的粘痰，因细菌种类的不同，痰的粘稠度和颜为黄色或黄绿色的粘痰，因细菌种类的不同，痰的粘稠度和颜色可有不同。常见于气管、支气管和肺化脓性感染。其中有大量中性粒色可有不同。常见于气管、支气管和肺化脓性感染。其中有大量中性粒细胞和核碎片。对这种痰最好经抗感染治疗后再送检，以取得较好的结细胞和核碎片。对这种痰最好经抗感染治疗后再送检，以取得较好的结果。果。泡沫痰：泡沫痰：即痰呈泡沫状，此种痰应在除去泡沫后，采取其中的粘液丝做即痰呈泡沫状，此种痰应在除去泡沫后，采取其中的粘液丝做涂片检查。涂片检查。血丝痰：血丝痰：即痰内带有少量的血液，这是支气管黏膜某个局部小血管破裂即痰内带有少量的血液，这是支气管黏膜某个局部小血管破裂出血或肺泡内出血所致。常见于肺癌或支气管结核，有时也见于支气管出血或肺泡内出血所致。常见于肺癌或支气管结核，有时也见于支气管炎。为了明确出血的原因，应将带血丝的及其附近部分的痰全部制成涂炎。为了明确出血的原因，应将带血丝的及其附近部分的痰全部制成涂片，进行检查。片，进行检查。气味气味:正常无特殊气味正常无特殊气味,血腥味血腥味(血性痰血性痰),恶臭恶臭(合并厌氧感染合并厌氧感染)，特殊臭味特殊臭味(晚期肺癌晚期肺癌)（2）取样：）取样：选择性取有价值的部分选择性取有价值的部分 用镊子、竹签等无吸水性材料夹取用镊子、竹签等无吸水性材料夹取,不主张不主张用玻璃制品、棉签等取样。用玻璃制品、棉签等取样。原则上优先选取以下部位：原则上优先选取以下部位：含血丝粘液痰。含血丝粘液痰。灰白色豆渣样痰丝（形似白色细线）。灰白色豆渣样痰丝（形似白色细线）。透明粘液丝丰富处。透明粘液丝丰富处。血液与粘液交界处痰液。血液与粘液交界处痰液。黏液丰富的样本与水样样本应注意区别取样黏液丰富的样本与水样样本应注意区别取样的痰液量，一般情况下后者的取样量应多于的痰液量，一般情况下后者的取样量应多于前者。前者。2、制片、制片普通涂片：普通涂片：直接涂片：用镊子或竹签直接涂抹在玻片上，尽直接涂片：用镊子或竹签直接涂抹在玻片上，尽量分开粘液丝及血性部份，做到相对均匀，涂片面量分开粘液丝及血性部份，做到相对均匀，涂片面积应超过玻片空白部位的三分之二，其优点是粘液积应超过玻片空白部位的三分之二，其优点是粘液丝分布明显，病变细胞相对集中，缺点是涂片厚薄丝分布明显，病变细胞相对集中，缺点是涂片厚薄不匀、重叠现象多见而影响观察及封片，一般一次不匀、重叠现象多见而影响观察及封片，一般一次制片二张以上。制片二张以上。压拉涂片：将取样的标本置于一张玻片上后另一压拉涂片：将取样的标本置于一张玻片上后另一张玻片正面朝下压拉下一张玻片，多次推拉、挤压张玻片正面朝下压拉下一张玻片，多次推拉、挤压均匀后二边分开得到二张涂片；优点是相对厚薄均均匀后二边分开得到二张涂片；优点是相对厚薄均匀，但可能细胞挤压分散，镜下沿粘液丝查找的线匀，但可能细胞挤压分散，镜下沿粘液丝查找的线索相对不明显。索相对不明显。液基制片：液基制片：是指通过标本的预处理后先把痰液的是指通过标本的预处理后先把痰液的粘液溶解、液化且细胞固定后再通过一定的技术手粘液溶解、液化且细胞固定后再通过一定的技术手段把细胞成分转移到玻片上的制片方法，制作过程段把细胞成分转移到玻片上的制片方法，制作过程等同一般的液基片，然应注意标本预处理中以下方等同一般的液基片，然应注意标本预处理中以下方面。面。v选取的痰液样本量通常为一张普通制片痰液量的选取的痰液样本量通常为一张普通制片痰液量的3-5倍。倍。v在清洗、固定作用的保存液内存放在清洗、固定作用的保存液内存放15分钟以上，保分钟以上，保存液各厂家不尽相同，但主要的成份类似：酒精、存液各厂家不尽相同，但主要的成份类似：酒精、甲醛、甲醇等。甲醛、甲醇等。v1，4-二硫苏糖醇（二硫苏糖醇（DTT）液消化粘液：用清洗液加）液消化粘液：用清洗液加10%的的DTT粉剂配制成粉剂配制成DTT液加入到保存液中液加入到保存液中1-2ml,震荡震荡10分钟以上，即可完全溶解保存液中的粘分钟以上，即可完全溶解保存液中的粘液，使标本完全液体化。液，使标本完全液体化。沉渣涂片或细胞蜡块制作：沉渣涂片或细胞蜡块制作：v需要较大的样本量，通常是用三天的咳痰量需要较大的样本量，通常是用三天的咳痰量混合在一起制作取样，须注意标本的预固定混合在一起制作取样，须注意标本的预固定及适当的保存。及适当的保存。v标本需作液化、离心沉淀预处理（同前）。标本需作液化、离心沉淀预处理（同前）。v沉淀后细胞量少作涂片用，沉淀后细胞量少作涂片用，3-5张；沉淀后细张；沉淀后细胞丰富者作细胞蜡块。胞丰富者作细胞蜡块。v普查、科研等情况下应用较多，因其样本量普查、科研等情况下应用较多，因其样本量大也可进一步应用分子、免疫等新技术。大也可进一步应用分子、免疫等新技术。3、制片的质量控制、制片的质量控制v 样本的选取：直接关系到检查的阳性率，样本的选取：直接关系到检查的阳性率，多次检查多张涂片结果的前后一致性应大于多次检查多张涂片结果的前后一致性应大于80%以上。以上。v 涂片应相对均匀，重叠部份面积涂片应相对均匀，重叠部份面积20%，涂片部分面积应大于玻片面积三分之二以上，涂片部分面积应大于玻片面积三分之二以上，合格涂片比例应合格涂片比例应80%。（三）固定（三）固定 必须采用必须采用湿固定湿固定，即制片后立即固定，一旦固定不，即制片后立即固定，一旦固定不及时，涂片在空气中干燥后，细胞的形态特征将明及时，涂片在空气中干燥后，细胞的形态特征将明显受损，所以及时的固定非常重要。显受损，所以及时的固定非常重要。一般要求制片后立即固定，通常一般要求制片后立即固定，通常5秒钟。秒钟。固定时间涂片固定时间涂片15分钟，细胞蜡块分钟，细胞蜡块30分钟。分钟。固定液：为常规固定液。固定液：为常规固定液。垂直快速放入或自由落体放入固定液，否则会出现细胞垂直快速放入或自由落体放入固定液，否则会出现细胞堆积而引起皱折现象。堆积而引起皱折现象。必须注意固定液的及时更换。必须注意固定液的及时更换。固定槽内多个样本同时放置要杜绝相互间的交叉污染。固定槽内多个样本同时放置要杜绝相互间的交叉污染。（四）染色（四）染色痰液脱落细胞病理学检查的常规染色方法痰液脱落细胞病理学检查的常规染色方法是是H.E染色和巴氏染色染色和巴氏染色,特殊需要时也可使特殊需要时也可使用抗酸染色，用抗酸染色，（五）透明及封片（五）透明及封片为保存痰液中细胞结构清晰，涂片染色脱为保存痰液中细胞结构清晰，涂片染色脱水后必须经二甲苯透明及中性树胶封固。水后必须经二甲苯透明及中性树胶封固。（六）痰液标本的安全管理与院感控制（六）痰液标本的安全管理与院感控制 痰液样本因常常伴随特异性感染，并且需开放性处痰液样本因常常伴随特异性感染，并且需开放性处理，因此其实验室的安全管理及院感控制必须引起理，因此其实验室的安全管理及院感控制必须引起重视。重视。v必须使用密闭性器皿来存放标本。必须使用密闭性器皿来存放标本。v制片操作人员必须带口罩、帽子等隔离措施。制片操作人员必须带口罩、帽子等隔离措施。v有条件单位对痰液样本在制片前可进行预消毒有条件单位对痰液样本在制片前可进行预消毒固定处理固定处理,常用预固定液为常用预固定液为2%聚乙二醇和聚乙二醇和50%乙醇混合。乙醇混合。v 每日一次空气、环境的紫外线消毒，并记录每日一次空气、环境的紫外线消毒，并记录时间，定期检测紫外灯管的紫外线强度。时间，定期检测紫外灯管的紫外线强度。v残留样本及盛具统一残留样本及盛具统一1%过氧乙酸液消毒处理过氧乙酸液消毒处理,统一存放专用医疗垃圾袋后处理，处理标本过统一存放专用医疗垃圾袋后处理，处理标本过程中产生的相关污染液体经专用医用污水管道程中产生的相关污染液体经专用医用污水管道排放。排放。其配制方法：其配制方法：10g聚乙二醇聚乙二醇(熔点为熔点为43-46)在在50-100的温箱中溶化后倒入的温箱中溶化后倒入500ml 50%乙醇液中混匀乙醇液中混匀成聚乙二醇溶解液备用成聚乙二醇溶解液备用(此液不会凝固此液不会凝固).。1升升2%聚乙二醇和聚乙二醇和50%乙醇溶解混合液组成乙醇溶解混合液组成配方为：配方为：水水 437ml 95%乙醇液乙醇液 526ml 聚乙二醇乙醇液聚乙二醇乙醇液 40ml（七）分子病理学技术在痰液样本中的应用（七）分子病理学技术在痰液样本中的应用 痰液细胞学样本分子病理学检测尽管临床应痰液细胞学样本分子病理学检测尽管临床应用较少，但在科研、专项普查等领域则经常用较少，但在科研、专项普查等领域则经常开展，应用最多的是通过开展，应用最多的是通过PCR或原位杂交技或原位杂交技术检测上皮细胞的以下项目：术检测上皮细胞的以下项目：v端粒及端粒酶检测端粒及端粒酶检测vP16基因甲基化检测基因甲基化检测v异源核糖核蛋白异源核糖核蛋白A2及其异构体及其异构体vP53基因基因vEGFR相关基因等相关基因等痰液检查痰液检查镜检：镜检：观察有形成分的种类、数量、形态变化观察有形成分的种类、数量、形态变化 1、白细胞：正常少量、白细胞：正常少量 2、中性粒细胞、中性粒细胞/脓细胞脓细胞：化脓性炎症或有混合感染：化脓性炎症或有混合感染 3、嗜酸性粒细胞、嗜酸性粒细胞：支气管哮喘、过敏性支气管炎、：支气管哮喘、过敏性支气管炎、肺吸虫病等肺吸虫病等 4、淋巴细胞、淋巴细胞：肺结核病：肺结核病 5、红细胞：正常无、红细胞：正常无 6、呼吸道疾病、出血性疾病（镜检、呼吸道疾病、出血性疾病（镜检/隐血试验）隐血试验）痰液检查痰液检查7、上皮细胞：正常少量、上皮细胞：正常少量 炎症炎症/其它呼吸系统疾病时大量增加其它呼吸系统疾病时大量增加8、肺泡巨噬细胞：、肺泡巨噬细胞：炭末细胞：吞噬炭粒（炭末沉着症及大量烟尘吸入者）炭末细胞：吞噬炭粒（炭末沉着症及大量烟尘吸入者）含铁血黄素细胞含铁血黄素细胞/心力衰竭细胞：吞噬含铁血黄素心力衰竭细胞：吞噬含铁血黄素 心力衰竭引起的肺淤血、肺梗死、肺出血心力衰竭引起的肺淤血、肺梗死、肺出血9、硫磺样颗粒：黄色小颗粒，放线菌病、硫磺样颗粒：黄色小颗粒，放线菌病 压平可见菌丝放射状排列呈菊花形压平可见菌丝放射状排列呈菊花形(放线菌放线菌)10、寄生虫及虫卵、寄生虫及虫卵 肺吸虫卵：肺吸虫病肺吸虫卵：肺吸虫病 溶组织阿米巴滋养体：阿米巴肺脓肿溶组织阿米巴滋养体：阿米巴肺脓肿/阿米巴肝脓肿入肺阿米巴肝脓肿入肺痰液检查痰液检查镜检镜检 染色染色:脱落细胞：肺部咳出，标本新鲜，一小时内固定脱落细胞：肺部咳出，标本新鲜，一小时内固定 巴氏巴氏(papanicolaou)染色、染色、苏木素苏木素-伊红伊红(H-E)染色染色 细菌学涂片检查：细菌学涂片检查：革兰革兰(Gram)染色：检测细菌、真菌染色：检测细菌、真菌 抗酸染色：检测结核杆菌抗酸染色：检测结核杆菌 荧光染色：检测真菌、支原体荧光染色：检测真菌、支原体 镜检前的准备及镜检规范：镜检前的准备及镜检规范：镜检内容镜检内容1、标本满意度评估：、标本满意度评估：在满意标本的前提下检查的样本才具有可信性，才可保证检在满意标本的前提下检查的样本才具有可信性，才可保证检查的敏感性与特异性。查的敏感性与特异性。满意样本的要求：满意样本的要求：合格的申请单，有详细的临床资料和病史提供，咳痰方法已经过指导，合格的申请单，有详细的临床资料和病史提供，咳痰方法已经过指导，方法正确。方法正确。涂片面积大于玻片面积的三分之二以上，分布均匀，厚薄相对一致，涂片面积大于玻片面积的三分之二以上，分布均匀，厚薄相对一致，可见粘液丝（普通涂片）。可见粘液丝（普通涂片）。镜下见到以下成份表明此样本合格：镜下见到以下成份表明此样本合格：v吞噬反应的组织细胞（尘细胞）。吞噬反应的组织细胞（尘细胞）。v柱状上皮细胞（伴或不伴退变）。柱状上皮细胞（伴或不伴退变）。v支气管形成的粘液丝（枯丝曼氏螺旋体）。支气管形成的粘液丝（枯丝曼氏螺旋体）。三、痰液涂片的脱落细胞病理学的诊断三、痰液涂片的脱落细胞病理学的诊断 不满意样本：不满意样本：不能作出诊断意见，建议重新不能作出诊断意见，建议重新取样制片。取样制片。申请单内容不全，咳痰时未经专业指导。申请单内容不全，咳痰时未经专业指导。不能确认标本与申请单的一致性。不能确认标本与申请单的一致性。涂片面积少于二分之一的阴性标本。涂片面积少于二分之一的阴性标本。缺乏满意样本应有的三种成份的阴性标本。缺乏满意样本应有的三种成份的阴性标本。固定、染色效果差，细胞严重变形。固定、染色效果差，细胞严重变形。v以上评估可写入报告单内容中，以将标本满以上评估可写入报告单内容中，以将标本满意度信息反馈给临床医师及患者。意度信息反馈给临床医师及患者。脱落细胞检查的基本知识脱落细胞检查的基本知识 第一节第一节 细胞诊断学的基本概念细胞诊断学的基本概念一、细胞增生活跃一、细胞增生活跃 细胞体积增大，核明显增大，核染色质增多，颗粒细胞体积增大，核明显增大，核染色质增多，颗粒 增粗，核仁增大增多，核浆比例失常，胞浆蓝染（增粗，核仁增大增多，核浆比例失常，胞浆蓝染（巴氏），可伴核分裂像。巴氏），可伴核分裂像。二、组织修复细胞二、组织修复细胞 组织损伤或修复过程中从新生上皮脱落下来的细胞。组织损伤或修复过程中从新生上皮脱落下来的细胞。特特征征：细细胞胞多多成成片片出出现现，似似合合体体细细胞胞，排排列列规规则则；细细胞胞稍稍增增大大，胞胞核核也也增增大大，核核不不深深染染，胞胞浆浆尚尚丰丰富富，深深染染；核核仁仁明明显显增大或增多；可能出现核分裂像增大或增多；可能出现核分裂像。12/12/202227组织修复细胞三、细胞化生三、细胞化生1、未成熟的鳞状上皮化生细胞的特征：、未成熟的鳞状上皮化生细胞的特征：似似正正常常上上皮皮外外底底层层细细胞胞大大小小；多多成成群群出出现现，可可呈呈铺铺砖砖式式排排列列；细细胞胞呈呈圆圆或或卵卵圆圆形形，边边缘缘有有小小突突起起；胞浆常有小空泡使胞浆透亮。胞浆常有小空泡使胞浆透亮。2、成熟的鳞状上皮化生细胞的特征：、成熟的鳞状上皮化生细胞的特征：细细胞胞似似正正常常鳞鳞状状上上皮皮中中层层细细胞胞大大小小；多多成成群群出出现现，细细胞胞呈呈多多边边形形，有有锐锐角角突突起起，形形态态多多样样；胞胞浆浆中中常常见小空泡。胞浆少，排列紧密，无细胞间桥。见小空泡。胞浆少，排列紧密，无细胞间桥。鳞状化生四、储备细胞增生四、储备细胞增生 储备细胞是柱状上皮细胞下的一层具有分化潜能的幼储备细胞是柱状上皮细胞下的一层具有分化潜能的幼稚细胞（或未分化细胞）。稚细胞（或未分化细胞）。形态特征：形态特征：细胞小，似鳞状上皮内底层细胞大小；细胞小，似鳞状上皮内底层细胞大小；圆或卵圆形，胞浆有小突起；圆或卵圆形，胞浆有小突起；胞浆淡染可见小空泡；胞浆淡染可见小空泡；核偏位，可能大小稍不一致；核偏位，可能大小稍不一致；核染色质匀细，可见核仁和几个大小一致的核粒；核染色质匀细，可见核仁和几个大小一致的核粒；细胞常成群，有时彼此相连；其周围常伴化生细胞。细胞常成群，有时彼此相连；其周围常伴化生细胞。成团增生的基底细胞支气管黏膜支气管黏膜五、细胞增生五、细胞增生细胞分裂增强，数目增多，体积可增大，形态可出现异常。细胞分裂增强，数目增多，体积可增大，形态可出现异常。细胞大，核大，核染色质增多、增粗，双核或多核，核仁明细胞大，核大，核染色质增多、增粗，双核或多核，核仁明显，核膜增厚，甚至轻度不规则。可分为轻度和重度增生。显，核膜增厚，甚至轻度不规则。可分为轻度和重度增生。六、细胞分化六、细胞分化从幼稚细胞发育成具有完备结构和功能的成熟细胞的过程。从幼稚细胞发育成具有完备结构和功能的成熟细胞的过程。上皮细胞分化的形态表现：上皮细胞分化的形态表现：1 细胞体积由小到大细胞体积由小到大2 胞浆量由少到多胞浆量由少到多3 核浆比由大到小核浆比由大到小4 饱和由大到小饱和由大到小5 染色质排列由疏松到致密染色质排列由疏松到致密6 核仁由大到小，由多到少核仁由大到小，由多到少 七、细胞核分裂像七、细胞核分裂像 病理性分裂像应与核碎裂鉴别（核染色质呈大小不病理性分裂像应与核碎裂鉴别（核染色质呈大小不 等的块状）等的块状）八、细胞退行性变八、细胞退行性变 细胞退变包括变性和坏死，涂片中二者鉴别较困难，细胞退变包括变性和坏死，涂片中二者鉴别较困难，统称退变。统称退变。1 人工引起的退变人工引起的退变 原因：原因：标本放置过久，细胞自溶；细胞置于高渗或标本放置过久，细胞自溶；细胞置于高渗或低渗溶液中；固定液浓度或时间不适合，过湿或过干低渗溶液中；固定液浓度或时间不适合，过湿或过干 形态特征：形态特征：细胞呈大片结构不清，细胞均增大或均缩细胞呈大片结构不清，细胞均增大或均缩小，胞浆多呈红染，各种类型细胞退变形式一致。小，胞浆多呈红染，各种类型细胞退变形式一致。2 细胞自然退变细胞自然退变 原原因因：细细胞胞脱脱落落过过久久，细细胞胞营营养养不不良良，炎炎症症、放放疗疗、化化疗的影响，肿瘤表面供血不足，细胞生理性衰老疗的影响，肿瘤表面供血不足，细胞生理性衰老 类型类型：（1）肿肿胀胀性性退退变变细细胞胞及及胞胞核核肿肿大大，染染色色质质模模糊糊、断断裂裂并并淡淡染染，核核内内有有空空泡泡。胞胞浆浆空空泡泡状状、蜂蜂窝窝状状或或网网孔孔状状，胞界不清胞膜消失。胞界不清胞膜消失。（2）固固缩缩性性退退变变细细胞胞及及胞胞核核缩缩小小，胞胞浆浆红红染染、橘橘黄黄、淡淡黄黄或或多多彩彩，常常出出现现核核周周晕晕，核核固固缩缩，染染色色质质致致密密，核核碎裂核膜消失。碎裂核膜消失。脱落细胞肿胀性退变过程细胞退行性变细胞退行性变第二节第二节 正常脱落细胞形态正常脱落细胞形态 一、上皮细胞一、上皮细胞（一）复层鳞状上皮（一）复层鳞状上皮 痰液涂片中占痰液涂片中占80%-90%由底层到表层分为：基底层、中层、表层由底层到表层分为：基底层、中层、表层 1.基底层细胞：基底层细胞：（1）内底层细胞：）内底层细胞：单层立方或柱状，很少脱落。核浆比单层立方或柱状，很少脱落。核浆比1：1（2）外底层细胞：）外底层细胞：23层，核浆比层，核浆比1：3-1：212/12/2022412.中层细胞：中层细胞：形态多样，核浆比形态多样，核浆比1：3-1：5 3.表层细胞：表层细胞：多角形，核浆比多角形，核浆比1：5-1：10 （1）角化前细胞角化前细胞 （2）不全角化细胞不全角化细胞 （3）完全角化细胞完全角化细胞12/12/202242（二）柱状细胞（二）柱状细胞 正常痰液涂片中占正常痰液涂片中占10%-20%类型：单层柱状上皮、假复层纤毛柱状上类型：单层柱状上皮、假复层纤毛柱状上 皮、复层柱状上皮皮、复层柱状上皮涂片中常见：涂片中常见：1 纤毛柱状上皮细胞纤毛柱状上皮细胞 2 黏液柱状上皮细胞黏液柱状上皮细胞 3 储备细胞储备细胞12/12/202246气管壁：黏膜、黏膜下层、外膜气管壁：黏膜、黏膜下层、外膜支气管黏膜：黏膜上皮及固有层支气管黏膜：黏膜上皮及固有层支气管黏膜成团、多核纤毛柱状上皮多核纤毛柱状上皮成团增生的基底细胞支气管黏膜支气管黏膜纤毛柱状上皮细胞增生的柱状上皮二、非上皮细胞二、非上皮细胞 1 内皮细胞内皮细胞 2 成纤维细胞成纤维细胞 3 组织细胞组织细胞 4 多核异物巨细胞多核异物巨细胞 5 血细胞血细胞12/12/202254肺泡吞噬细胞 多核三、背景成分三、背景成分 红细胞红细胞 炎细胞炎细胞 多核巨细胞多核巨细胞 坏死物坏死物 黏液等黏液等12/12/202256炎症增生时脱落细胞的形态一、一般形态特征一、一般形态特征（一）上皮细胞（一）上皮细胞 急性炎症：退化、变性、坏死急性炎症：退化、变性、坏死 慢性炎症：增生、再生、化生，退化、变性慢性炎症：增生、再生、化生，退化、变性 1.鳞状上皮细胞：鳞状上皮细胞：退化变性、退化变性、巴氏细胞巴氏细胞（鳞化）（鳞化）（1）细胞核：核肥大、核固缩、核碎裂）细胞核：核肥大、核固缩、核碎裂12/12/202257 （2）细胞形态：变形（梭性、星形、蝌蚪形、不规则形），）细胞形态：变形（梭性、星形、蝌蚪形、不规则形），核改变不明显核改变不明显 柱状上皮的鳞状化生柱状上皮的鳞状化生。常见常见底层和中层细胞团底层和中层细胞团（正常或轻度畸形）（正常或轻度畸形）2 柱状上皮细胞：柱状上皮细胞：纤毛柱状上皮常成片脱落，以纤毛柱状上皮常成片脱落，以固缩退变固缩退变为主。为主。多多核核的的纤纤毛毛柱柱状状细细胞胞；核核增增大大的的柱柱状状细细胞胞；纤纤毛毛柱柱状状上上皮皮增增生生；储储备备细细胞胞增增生生；鳞鳞状状化化生生细细胞胞；纤纤毛毛柱柱状状上上皮皮细细胞胞退退变变；纤纤毛毛柱柱状状上上皮皮细细胞胞核核、浆浆包包涵涵体体；增增生生的的细细支支气气管管和和肺肺泡泡管管上皮。上皮。（1）细胞核：固缩退变）细胞核：固缩退变 （2）细胞形态：缩小）细胞形态：缩小12/12/202258储储备备细细胞胞增增生生 不不成成熟熟鳞鳞化化成成熟熟化化生生细细胞胞变性，无核纤毛丛 3 病毒感染所致的上皮细胞改变病毒感染所致的上皮细胞改变 （1）单纯疱疹病毒：鳞状细胞核肿大，弱嗜）单纯疱疹病毒：鳞状细胞核肿大，弱嗜 碱性不透明，碱性不透明，大的嗜酸性包涵体，多核大的嗜酸性包涵体，多核 巨细胞巨细胞细胞变性。细胞变性。（2）巨细胞病毒：胞体增大，胞核、胞浆见）巨细胞病毒：胞体增大，胞核、胞浆见 嗜酸性包涵体。嗜酸性包涵体。12/12/202262病毒感染的柱状上皮多核纤毛柱状上皮细胞增生的纤毛柱状上皮细胞增生的基底细胞鳞状上皮化生退变的纤毛柱状上皮病毒感染，核内包涵体（二）炎细胞成分（二）炎细胞成分 1 肺泡吞噬细胞肺泡吞噬细胞 2 其他炎细胞其他炎细胞（三）其他成分（三）其他成分黏液管型；植物细胞；钙化凝结物；非致病菌黏液管型；植物细胞；钙化凝结物；非致病菌肺泡吞噬细胞黏液管型 线虫v黏液管型（二）上皮增生、再生、化生时的形态（二）上皮增生、再生、化生时的形态1 增生增生共同特点：胞浆嗜碱性共同特点：胞浆嗜碱性 胞浆相对减少，核浆比略大胞浆相对减少，核浆比略大 核增大可见核仁核增大可见核仁 核分裂活跃核分裂活跃（1）鳞状上皮）鳞状上皮（2）纤毛柱状上皮）纤毛柱状上皮12/12/202274增生基底细胞增生柱状细胞及少量基底细胞2 再生：再生上皮和基底层细胞再生：再生上皮和基底层细胞 再再生生细细胞胞核核大大染染色色深深，染染色色质质结结块块及及有有丝丝分分裂裂，核核仁仁大大、多多，浆浆略略嗜嗜碱碱性性，见见双双核核多多核核，常常见见炎炎细胞。细胞。3 化生：化生：不不成成熟熟的的鳞鳞状状化化生生上上皮皮似似基基底底层层与与棘棘层层细细胞胞之之间间的的过过渡渡细细胞胞，成成熟熟的的鳞鳞状状化化生生上上皮皮与与正正常常鳞鳞状状上上皮很难区分。皮很难区分。如如化化生生的的细细胞胞核核染染色色质质增增粗粗，染染色色深深，核核大大，染染色大小异常称不典型化生或异型化生。色大小异常称不典型化生或异型化生。12/12/202277鳞状化生（三）各种炎症时脱落细胞的特征1急性炎症：急性炎症：上皮细胞常严重退变，有较多上皮细胞常严重退变，有较多 中性粒细胞、吞噬细胞、坏死中性粒细胞、吞噬细胞、坏死 细胞碎屑，纤维素。细胞碎屑，纤维素。2亚急性炎症：亚急性炎症：退变上皮细胞、坏死细胞碎退变上皮细胞、坏死细胞碎 屑和增生上皮细胞，中性粒细屑和增生上皮细胞，中性粒细 胞、嗜酸性粒细胞、单核细胞胞、嗜酸性粒细胞、单核细胞 和淋巴细胞。和淋巴细胞。3慢性炎症：慢性炎症：较多成团的增生上皮细胞，淋较多成团的增生上皮细胞，淋 巴细胞、浆细胞。巴细胞、浆细胞。4 肉芽肿性炎肉芽肿性炎v上皮样细胞：上皮样细胞：v朗格汉斯巨细胞：仅靠此细胞诊断结核不可靠，朗格汉斯巨细胞：仅靠此细胞诊断结核不可靠，需同时见到上皮样细胞和干酪样坏死。需同时见到上皮样细胞和干酪样坏死。v干酪样坏死：若邻近出现上皮样细胞，更支持结干酪样坏死：若邻近出现上皮样细胞，更支持结核的诊断。核的诊断。v其他细胞：大量单核细胞、淋巴细胞其他细胞：大量单核细胞、淋巴细胞类上皮细胞核异质和角化不良的脱落细胞形态核异质和角化不良的脱落细胞形态（一）核异质（一）核异质 1 轻度核异质细胞：轻度核异质细胞：又称炎性核异质又称炎性核异质病病因因：去去除除多多能能恢恢复复。多多见见于于鳞鳞状状上上皮皮的的中中、表层细胞。表层细胞。与炎性增生细胞的鉴别：与炎性增生细胞的鉴别：核虽大，但染色核虽大，但染色 质仍为细颗粒状，分布均匀，无染色加深质仍为细颗粒状，分布均匀，无染色加深 和核畸形。和核畸形。2重度核异质细胞：重度核异质细胞：3 见见于于慢慢性性炎炎症症，可可发发展展为为癌癌细细胞胞，又又称称癌癌前前核核异异质质。核核增增大大12倍倍，染染色色质质粗粗颗颗粒粒状状，分分布布略略不不均均，核核膜膜增增厚厚，核核仁仁大大、多多，胞胞浆浆与与正正常常细细胞胞相相似似，核核浆浆比比轻轻度度增增大。大。见于癌前病变、原位癌、浸润癌的细胞见于癌前病变、原位癌、浸润癌的细胞 与与癌癌细细胞胞的的鉴鉴别别：核核异异型型性性中中等等，核核浆浆比比无无明显改变。明显改变。（二）角化不良（二）角化不良v又称异常角化、不成熟角化、细胞内角化又称异常角化、不成熟角化、细胞内角化v细细胞胞呈呈圆圆形形，核核深深染染，胞胞浆浆呈呈深深红红色色，巴巴氏氏染染色色呈呈桔桔黄黄色色，此此种种细细胞胞出出现现在在底底层层、中中层层时时，可可能能为为癌癌前前病病变变的的表表现现，在在老老年年和和更更年年期妇女应高度重视。期妇女应高度重视。角化不良三、放疗对细胞形态的影响三、放疗对细胞形态的影响 放疗的是治疗癌症的重要方法之一，受照射放疗的是治疗癌症的重要方法之一，受照射部位的癌细胞和其周围正常细胞均会受射线部位的癌细胞和其周围正常细胞均会受射线影响而发生形态改变。影响而发生形态改变。了解这些改变对明确是否复发非常必要。了解这些改变对明确是否复发非常必要。细胞核增大、空泡变性、核碎裂和核溶解；细胞核增大、空泡变性、核碎裂和核溶解；细胞质内细胞器空泡变，溶酶体破坏释放蛋细胞质内细胞器空泡变，溶酶体破坏释放蛋白水解酶，使细胞自溶。白水解酶，使细胞自溶。（一）良型上皮细胞的改变（一）良型上皮细胞的改变1.急性放射反应急性放射反应（1）细胞体积增大，可增大一倍以上，胞质膨）细胞体积增大，可增大一倍以上，胞质膨胀而向薄弱处外突，呈不规则形或蝌蚪形。胀而向薄弱处外突，呈不规则形或蝌蚪形。胞核与胞质比例不大。胞核与胞质比例不大。（2）核边增厚，核空泡变，胞质核染色质同质）核边增厚，核空泡变，胞质核染色质同质化，呈淡蓝云雾状染色，有空泡形成，染色化，呈淡蓝云雾状染色，有空泡形成，染色质被推向核边，使核边增厚，最后核碎裂溶质被推向核边，使核边增厚，最后核碎裂溶解，可见中性粒细胞侵入胞质内。解，可见中性粒细胞侵入胞质内。（3）放射作用影响细胞有丝分裂过程，使之形）放射作用影响细胞有丝分裂过程，使之形成多核或分叶核等畸形核。成多核或分叶核等畸形核。2.上皮细胞持续性放射改变上皮细胞持续性放射改变 由于放疗后上皮细胞的改变持续时间较长，由于放疗后上皮细胞的改变持续时间较长，涂片中可发现核异质细胞，涂片中可发现核异质细胞，胞核增大，染色胞核增大，染色质呈粗颗粒状，核深染，有时可见核内空泡。质呈粗颗粒状，核深染，有时可见核内空泡。胞质呈多色性，有的细胞呈纤维或蝌蚪形。胞质呈多色性，有的细胞呈纤维或蝌蚪形。这类核异质细胞需与高分化鳞癌的纤维形或这类核异质细胞需与高分化鳞癌的纤维形或蝌蚪形癌细胞鉴别，其鉴别点蝌蚪形癌细胞鉴别，其鉴别点为纤维形核异为纤维形核异质细胞核虽深染色，有核形不整，但胞核与质细胞核虽深染色，有核形不整，但胞核与胞质比例仍在正常范围或略大，其纤维形或胞质比例仍在正常范围或略大，其纤维形或蝌蚪形细胞体亦不如癌细胞大蝌蚪形细胞体亦不如癌细胞大。（二）癌细胞的放疗后改变（二）癌细胞的放疗后改变 癌细胞在放疗后主要为持续性改变，癌细胞在放疗后主要为持续性改变，表现为胞质和表现为胞质和胞核内空泡形成胞核内空泡形成，核仁增大，也可呈空泡变性，继，核仁增大，也可呈空泡变性，继之出现胞质同质化，呈淡蓝云雾状，核碎裂和溶解。之出现胞质同质化，呈淡蓝云雾状，核碎裂和溶解。致癌细胞坏死，呈红染色颗粒状。致癌细胞坏死，呈红染色颗粒状。（三）放射敏感性、放疗反应和敏感反应（三）放射敏感性、放疗反应和敏感反应1放射敏感性：不同组织细胞对放射后损伤的程度放射敏感性：不同组织细胞对放射后损伤的程度不同，损伤大者为敏感性高，不同，损伤大者为敏感性高，一般是分化愈差，癌一般是分化愈差，癌细胞的放射敏感性愈高。细胞的放射敏感性愈高。高度敏感的有精原细胞癌、甲状腺癌、恶性淋巴瘤、高度敏感的有精原细胞癌、甲状腺癌、恶性淋巴瘤、基底细胞癌等；中度敏感的有鳞癌；低度敏感的有基底细胞癌等；中度敏感的有鳞癌；低度敏感的有各种上腺癌；敏感性最低的为纤维肉瘤、骨肉瘤、各种上腺癌；敏感性最低的为纤维肉瘤、骨肉瘤、恶性黑色素瘤等。恶性黑色素瘤等。2放疗反应：放疗反应：放疗以后若有放射后改变的细胞达放疗以后若有放射后改变的细胞达75%以上，以上，属放疗反应良好，反应患者对放疗敏感，预属放疗反应良好，反应患者对放