高二生物选修三《单克隆抗体的制备》课件.ppt

植物体细胞杂交和动物细胞融合的比较植物体细胞杂交和动物细胞融合的比较比较项目比较项目植物体细胞杂交植物体细胞杂交动物细胞融合动物细胞融合原原理理细胞融合细胞融合的步骤的步骤诱导方法诱导方法用途用途获得获得杂种植株杂种植株细胞膜的流动性细胞膜的流动性细胞膜的流动性细胞膜的流动性细胞的全能性细胞的全能性去除细胞壁去除细胞壁后诱导后诱导原生质体融合原生质体融合使细胞分散后诱导使细胞分散后诱导细胞融合细胞融合物理（离心、振荡、物理（离心、振荡、电刺激）电刺激）化学（聚乙二醇）化学（聚乙二醇）物理、化学方法物理、化学方法（同左）（同左）灭活的病毒灭活的病毒主要用于制备主要用于制备单克隆抗体单克隆抗体1 1、抗体抗体1.1 1.1 概念：概念：抗体是机体受抗原刺激抗体是机体受抗原刺激后产生的、并能与该抗原发后产生的、并能与该抗原发生特异性结合的具有免疫功生特异性结合的具有免疫功能的球蛋白能的球蛋白 。1.2 1.2 来源：来源：浆细胞（浆细胞（B B淋巴细胞淋巴细胞）抗原抗原 动物体动物体刺激刺激浆细胞浆细胞 抗体抗体抗体不纯抗体不纯特异性差、纯度低；特异性差、纯度低；产量低、反应不够灵敏产量低、反应不够灵敏传统血清抗体的制备传统血清抗体的制备抗原不纯抗原不纯 每个浆细胞（淋巴细胞）只能分泌一种抗体，由一个每个浆细胞（淋巴细胞）只能分泌一种抗体，由一个淋巴细胞增殖产生的细胞群分泌的抗体化学成份是单一淋巴细胞增殖产生的细胞群分泌的抗体化学成份是单一的。的。如何获得化学性质单一、特异性强的抗体？如何获得化学性质单一、特异性强的抗体？体外培养淋巴细胞能无限增殖吗体外培养淋巴细胞能无限增殖吗?体外培养单个淋巴细胞，提取分泌的抗体体外培养单个淋巴细胞，提取分泌的抗体怎样解决这个问题？怎样解决这个问题？设计方案：设计方案：一个一个B B淋巴细胞只分泌一种特异性抗体淋巴细胞只分泌一种特异性抗体小鼠骨髓瘤细胞能无限增殖小鼠骨髓瘤细胞能无限增殖杂种细胞杂种细胞二、单克隆抗体二、单克隆抗体注射抗原的目的是什么注射抗原的目的是什么诱导其融合的方法有哪些？诱导其融合的方法有哪些？融合后培养液中有几种细胞融合后培养液中有几种细胞为何要进行克隆化培养和专为何要进行克隆化培养和专一抗体检测，多次筛选一抗体检测，多次筛选大量增殖杂交瘤细胞获得单大量增殖杂交瘤细胞获得单抗的方法抗的方法比较项目第一次筛选克隆化培养和多次筛选原理在选择性培养基中添在选择性培养基中添加某种药物，特异性加某种药物，特异性杀死未融合细胞和融杀死未融合细胞和融合的同种核细胞合的同种核细胞抗原抗原抗体的特抗体的特异性结合，进行异性结合，进行抗体检测抗体检测目标选出杂交瘤细胞选出杂交瘤细胞选出既能无限增选出既能无限增殖，又能产生特殖，又能产生特异性抗体的杂交异性抗体的杂交瘤细胞瘤细胞【堂堂清堂堂清】1.单克隆抗体的优点是单克隆抗体的优点是_杂交瘤细胞的优点是杂交瘤细胞的优点是_特异性强、灵敏度高、可大量制备特异性强、灵敏度高、可大量制备2.单克隆抗体具有特异性强、灵敏度高的单克隆抗体具有特异性强、灵敏度高的原因是原因是_每一种每一种B B淋巴细胞只能分泌一种特异性抗体淋巴细胞只能分泌一种特异性抗体3.产生抗体的细胞是产生抗体的细胞是_ 产生单克隆抗体的细胞是产生单克隆抗体的细胞是_效应效应B B细胞（浆细胞）细胞（浆细胞）杂交瘤细胞杂交瘤细胞既能无限增殖（迅速大量繁殖）又能产生专一的抗体既能无限增殖（迅速大量繁殖）又能产生专一的抗体