镇痛实验课件20080327.ppt

药物的镇痛作用药物的镇痛作用 热板法热板法 化学刺激法化学刺激法右江民族医学院药理教研室右江民族医学院药理教研室一、热板法一、热板法【实验原理与目的实验原理与目的】小鼠的足底无毛，皮肤裸露，在温度小鼠的足底无毛，皮肤裸露，在温度550.5550.5的金的金属板上产生疼痛反应，表现为舔后足，踢后腿等现象。罗通属板上产生疼痛反应，表现为舔后足，踢后腿等现象。罗通定可提高痛阈，推迟小鼠疼痛出现时间。定可提高痛阈，推迟小鼠疼痛出现时间。学习热板镇痛实验方法，观察罗通定的镇痛作用。学习热板镇痛实验方法，观察罗通定的镇痛作用。【实验动物实验动物】雌性小白鼠，体重雌性小白鼠，体重202g202g。【器材药物器材药物】智能热板仪，电子称，鼠罩，智能热板仪，电子称，鼠罩，1ml1ml注射器，注射器，0.2%0.2%罗罗通定溶液、生理盐水、苦味酸溶液。通定溶液、生理盐水、苦味酸溶液。【实验方法实验方法】将热板仪调至将热板仪调至5555。筛选并测定正常痛阈筛选并测定正常痛阈 将小鼠放入热板仪内，密切观察小将小鼠放入热板仪内，密切观察小鼠反应，以舔后足为痛觉指标。记录痛阈时间值（从小鼠放入鼠反应，以舔后足为痛觉指标。记录痛阈时间值（从小鼠放入热板镇痛仪到出现舔后足）。每只小鼠测痛阈热板镇痛仪到出现舔后足）。每只小鼠测痛阈2 2 次（间隔次（间隔5min5min），），取其平均值为正常痛阈值（药前痛阈取其平均值为正常痛阈值（药前痛阈s s）。）。凡在凡在30s30s内内不舔后足或痛阈小于不舔后足或痛阈小于5s5s者弃去，每实验小组筛选合格小鼠者弃去，每实验小组筛选合格小鼠8 8只，只，并用苦味酸标记编号为并用苦味酸标记编号为1-81-8。给药给药 给药组给药组1 1、2 2、3 3、4 4号鼠腹腔注射号鼠腹腔注射0.2%0.2%罗通定溶液罗通定溶液0.1ml/10g0.1ml/10g，对照，对照组组5、6、7 7、8 8号鼠腹腔注射生理盐水号鼠腹腔注射生理盐水0.1ml/10g0.1ml/10g并记录给药时间。并记录给药时间。4.4.测痛阈变化值测痛阈变化值 给药后给药后1515、30min30min各测痛阈各测痛阈1 1 次，对次，对60s60s内不舔足的小鼠应立即取出来，痛阈按内不舔足的小鼠应立即取出来，痛阈按60s60s计算。计算。【实验结果实验结果】综合全部实验室数据，计算出各组痛阈的平均值（综合全部实验室数据，计算出各组痛阈的平均值（X）填入下表填入下表组别组别 给药前平均给药前平均 给药后平均痛阈值给药后平均痛阈值 镇痛百分率（镇痛百分率（）痛阈值痛阈值 15min 30min 15min 30min 对照组对照组 实验组实验组 药后痛阈值均数药后痛阈值均数药前痛阈值均数药前痛阈值均数药物镇痛阈提高百分率（药物镇痛阈提高百分率（P）=100 药前痛阈值均数药前痛阈值均数【注意事项注意事项】本实验应选用雌性小鼠，雄性小鼠遇热时阴囊松弛下垂，与本实验应选用雌性小鼠，雄性小鼠遇热时阴囊松弛下垂，与热板接触影响实验结果。热板接触影响实验结果。室温应控制在室温应控制在13181318，此温度小鼠对痛反应较稳定。，此温度小鼠对痛反应较稳定。正常痛阈正常痛阈30s30s、10s10s以及喜跳跃的小鼠均应弃用。以及喜跳跃的小鼠均应弃用。测痛阈时若测痛阈时若60s60s仍无反应，应立即取出小鼠，以免烫伤足趾，仍无反应，应立即取出小鼠，以免烫伤足趾，且痛阈按且痛阈按60s60s计。计。二、化学刺激法（扭体法）二、化学刺激法（扭体法）【实验原理与目的实验原理与目的】腹膜有广泛的感觉神经分布，把醋酸等化学刺激物注入腹腔，腹膜有广泛的感觉神经分布，把醋酸等化学刺激物注入腹腔，可使小鼠很快产生疼痛反应，表现为腹部两侧内凹、躯体扭曲和后肢伸可使小鼠很快产生疼痛反应，表现为腹部两侧内凹、躯体扭曲和后肢伸展，统称为扭体反应。罗通定可明显抑制扭体反应的发生，从而证明其展，统称为扭体反应。罗通定可明显抑制扭体反应的发生，从而证明其镇痛作用。镇痛作用。学习化学刺激法镇痛实验方法，观察罗通定的镇痛作用。学习化学刺激法镇痛实验方法，观察罗通定的镇痛作用。【实验动物实验动物】小白鼠，雌雄不拘，体重小白鼠，雌雄不拘，体重202g202g。【实验器材与药品实验器材与药品】电子称、鼠罩、电子称、鼠罩、1ml1ml注射器、注射器、0.2%0.2%罗通定溶液、罗通定溶液、0.6%0.6%醋酸溶液、醋酸溶液、生理盐水，苦味酸溶液。生理盐水，苦味酸溶液。【实验方法实验方法】取小白鼠取小白鼠4只，称重。只，称重。观察正常活动。观察正常活动。给药：给药组给药：给药组1、2、3、4号小号小白鼠腹腔注射白鼠腹腔注射0.2%罗通定罗通定0.1ml/10g，对，对照组照组 5、6、7、8号小白鼠腹腔注射号小白鼠腹腔注射生理盐水生理盐水0.1ml/10g，记录给药时间。记录给药时间。药后药后20min，各组小鼠均腹腔注射各组小鼠均腹腔注射0.6%醋酸溶液醋酸溶液0.1ml/10g，观察观察20min内内各组出现扭体鼠数和扭体次数。各组出现扭体鼠数和扭体次数。【结果结果】综合全实验室结果填入下表综合全实验室结果填入下表 组别组别 药物剂量药物剂量 鼠数鼠数 扭体鼠数扭体鼠数 扭体次数扭体次数 镇痛百分率（镇痛百分率（）给药组给药组 20 对照组对照组 20 计算镇痛百分率（计算镇痛百分率（P）生理盐水组扭体次数生理盐水组扭体次数给药组扭体次数给药组扭体次数 P=100 生理盐水组扭体次数生理盐水组扭体次数【注意事项注意事项】醋酸溶液宜新鲜配制，也可用新配制醋酸溶液宜新鲜配制，也可用新配制的的0.05%0.05%酒石酸锑钾溶液。酒石酸锑钾溶液。室温不能低于室温不能低于1010，否则不易发生扭，否则不易发生扭体反应。体反应。给药组比对照组减少扭体发生率给药组比对照组减少扭体发生率50%50%以以上才能认为有镇痛效力。上才能认为有镇痛效力。小鼠体重轻，扭体反应发生率低。小鼠体重轻，扭体反应发生率低。