真核细胞周期调控的分子机制.ppt

第十九章第十九章 真核细胞周期调控的分子机制真核细胞周期调控的分子机制唐旭东唐旭东2001年年10月月8日美国人日美国人LelandHartwell、英国、英国人人PaulNurse、TimothyHunt因对细胞周期调因对细胞周期调控机理的研究而荣获控机理的研究而荣获诺贝尔生理医学奖诺贝尔生理医学奖第一节第一节 细胞周期及调控的概述细胞周期及调控的概述细细胞胞周周期期间期间期(interphase)分裂期分裂期(M)G1期期(合成前期合成前期)S期期(DNA合成期合成期)G2期期(合成后期合成后期)前期前期(prophase)中期中期(metaphase)后期后期(anaphase)末期末期(telophase)一、细胞周期一、细胞周期(cellcycle)有丝有丝分裂分裂(mitosis)胞质分裂胞质分裂(cytokinesis)细胞周期的不同时相细胞周期的不同时相(phase)G0裂殖酵母裂殖酵母二、细胞周期调控的主要分子机制二、细胞周期调控的主要分子机制细胞周期引擎细胞周期引擎异二聚体蛋白激酶复合体异二聚体蛋白激酶复合体包括二个亚单位：包括二个亚单位：调节亚单位：调节亚单位：细胞周期蛋白细胞周期蛋白（cyclin）cyclin浓度随细胞周期不断变化浓度随细胞周期不断变化催化亚单位：催化亚单位：细胞周期蛋白依赖性激酶细胞周期蛋白依赖性激酶(cyclin-dependentkinase，CDK)-CDK单独存在时无活性，与单独存在时无活性，与cyclin结合才结合才具有激酶的活性具有激酶的活性;-cyclin不仅起激活不仅起激活CDK的作用，还决定了的作用，还决定了CDK何时、何处、将何种底物磷酸化。何时、何处、将何种底物磷酸化。三种控制细胞周期进程的细胞周期蛋三种控制细胞周期进程的细胞周期蛋白白-CDK复合体：复合体：G1、S期和有丝分裂期和有丝分裂-CDK复合体复合体（G1-CDK复合体的合成和活性的调节复合体的合成和活性的调节是细胞周期的主要调控机制）是细胞周期的主要调控机制）前复制复合体（前复制复合体（pre-replicationcomplex，pre-RC）：其磷酸化既可启动其磷酸化既可启动DNA的复制，的复制，又可防止新的前复制复合体组装又可防止新的前复制复合体组装翻译后调节机制：翻译后调节机制：蛋白磷酸化、泛素依赖的蛋白降解蛋白磷酸化、泛素依赖的蛋白降解三、研究细胞周期调控的实验体系三、研究细胞周期调控的实验体系（一）细胞的（一）细胞的DNA含量提示其所处的细胞周含量提示其所处的细胞周期时相期时相用与用与DNA结合的荧光染料处理细胞，结合的荧光染料处理细胞，再用流式细胞术再用流式细胞术(FCM)测定每一细胞的测定每一细胞的DNA含量。含量。荧光激活的细胞分选仪（荧光激活的细胞分选仪（FACS)（二）细胞融合实验（二）细胞融合实验（三）互补实验（三）互补实验G0+G1SG2+MG0+G1SG2+MControlDrug-treated细胞周期阻滞于细胞周期阻滞于S期期ControlG0+G1G0+G1G0+G1G0+G1G2+MG2+MG2+MG2+MSSSS细胞周期阻滞于细胞周期阻滞于G2期期参与细胞周期调控的分子参与细胞周期调控的分子第二节第二节一、细胞周期蛋白（一、细胞周期蛋白（cyclin）种类：种类：目前分离出目前分离出30余种余种脊椎动物：脊椎动物：A1-2、B1-3、CD1-3、E1-2、F、G、H等等人类：人类：A、B、C、D、E。分类：分类：不同时相发挥作用不同时相发挥作用G1周期蛋白周期蛋白：在：在G1期发挥作用（期发挥作用（CDE）（S和）和）M期周期蛋白期周期蛋白：AB在在G2/M调控点发挥作用调控点发挥作用一、细胞周期蛋白（一、细胞周期蛋白（cyclin）共同结构：共同结构：均含有一段约均含有一段约100150个氨基酸的保个氨基酸的保守序列，称为守序列，称为周期蛋白盒（周期蛋白盒（cyclinbox)，是与是与CDK结合的关键区。结合的关键区。功能：功能：不同的不同的cyclin识别不同的识别不同的CDK，组成，组成不同的不同的cyclin-CDK复合物，表现出不同的复合物，表现出不同的CDK激酶的活性。激酶的活性。G1周期蛋白周期蛋白表达顺序：先表达顺序：先cyclinCD，再，再cyclinEcyclinD和和E，为细胞通过限制点所，为细胞通过限制点所必需必需cyclinD亚类：亚类：D1D2D3cyclinDCDK：4、6cyclinD功能：功能：使下游蛋白磷酸化使下游蛋白磷酸化如：如：CDK4/6-cyclinD使视网膜母细胞瘤使视网膜母细胞瘤（retinoblastoma，Rb）蛋白磷酸化）蛋白磷酸化释放转录因子释放转录因子E2F促进促进CDK2、cyclinE表达表达进一步磷酸化进一步磷酸化Rb阳性反馈回路阳性反馈回路*此时细胞周期不依赖此时细胞周期不依赖CDK4/6-cyclinD复合体的活性复合体的活性细胞周期的调控细胞周期的调控CDK1/Cyc B*CyclinD和和E在在G1期表达，为细胞期表达，为细胞通过限制点所通过限制点所必需必需S和和M期周期蛋白期周期蛋白合成顺序：合成顺序：A早于早于B（1）cyclinA：与与CDK1和和CDK2形成复合物形成复合物（2）cyclinB亚类：亚类：B1B2B3合成：合成：在胚胎细胞周期中连续合成，但在有丝在胚胎细胞周期中连续合成，但在有丝分裂分裂后期（晚期）后期（晚期）迅速降解。迅速降解。？CDK：1二、细胞周期蛋白依赖性激酶二、细胞周期蛋白依赖性激酶（CDK）种类：种类：目前动物中发现目前动物中发现9种种，人类，人类7种种（17)共同结构：共同结构：相似的相似的激酶结构域激酶结构域，是一段，是一段保守序列保守序列，与，与周周期蛋白期蛋白的结合有关。的结合有关。至少有两个结构域：至少有两个结构域：T-loop、ATP结合位点结合位点激活：激活：Cyclin与与CDK结合为结合为CDK发挥酶活性所发挥酶活性所必需必需但但CDK仅与仅与Cyclin结合结合并不能并不能使使CDK激活激活只有只有T-loop中的中的Thr161残基磷酸化残基磷酸化才能使才能使CDK激活。激活。二、细胞周期蛋白依赖性激酶（二、细胞周期蛋白依赖性激酶（CDK）功能：功能：在不同细胞时相，在不同细胞时相，特定的特定的CDK与与特定特定的的cyclin形成细胞周期特异的蛋白激酶形成细胞周期特异的蛋白激酶复合体，调节细胞周期进程。复合体，调节细胞周期进程。激活的激活的CDK1可将靶蛋白磷酸化而产生可将靶蛋白磷酸化而产生相应的生理效应。相应的生理效应。脊椎动物细胞脊椎动物细胞CDK-细胞周期蛋白复合体细胞周期蛋白复合体CDK细胞周期蛋白细胞周期蛋白功能功能CDK1cyclinB1,B2,B3有丝分裂有丝分裂cyclinAG2/MCDK2cyclinAS期期cyclinEG1/SCDK3？G1/S?CDK4/6cyclinD1,D2,D3G1期期三、泛素与三、泛素与APC泛素泛素（ubiquitin)组成和分布：组成和分布：由由76个氨基酸组成，高度保守，普遍个氨基酸组成，高度保守，普遍存在于真核细胞，故名泛素；存在于真核细胞，故名泛素；作用：作用：共价结合泛素的蛋白质能被共价结合泛素的蛋白质能被蛋白酶体蛋白酶体识别和降解，识别和降解，这是细胞内短寿命蛋白和一这是细胞内短寿命蛋白和一些异常蛋白降解的普遍途径。些异常蛋白降解的普遍途径。把泛素加到周期蛋白或其他蛋白需要把泛素加到周期蛋白或其他蛋白需要3个酶个酶:泛素激活酶泛素激活酶(E1):泛素泛素-COS-Cys-E1(活化活化)泛素结合酶泛素结合酶(E2):泛素泛素-COS-Cys-E2(转硫酯）转硫酯）泛素连接酶泛素连接酶(E3):泛素泛素-CONH-Lys-底物蛋白底物蛋白(标记标记)泛素与被选择降解的蛋白质形成共价连接，使后者标泛素与被选择降解的蛋白质形成共价连接，使后者标记并被激活，称为记并被激活，称为泛素化。泛素化。蛋白酶体蛋白酶体可迅速将可迅速将泛素化泛素化的底物蛋白降解的底物蛋白降解后期促进复合体（后期促进复合体（anaphasepromotingcomplex，APC）就是一种）就是一种E3,可将泛素连到可将泛素连到M期周期蛋白上期周期蛋白上作用机制：作用机制：分裂期周期蛋白分裂期周期蛋白B的的N端有一段序列与其降端有一段序列与其降解有关，称解有关，称破坏作用盒破坏作用盒(destructionbox)；APC使使E2-泛素复合体找到泛素复合体找到破坏作用盒破坏作用盒，并，并将泛素转移到位于将泛素转移到位于盒盒C端的端的Lys残基残基；泛素化泛素化-多泛素化多泛素化共价结合一串泛素的过程，称为共价结合一串泛素的过程，称为多泛素化多泛素化(polyubiquitination)。周期蛋白周期蛋白B被蛋白酶体识别而降解被蛋白酶体识别而降解周期蛋白周期蛋白B(cyclinB)如何降解？如何降解？细胞周期蛋白的破坏作用盒与降解途径细胞周期蛋白的破坏作用盒与降解途径其他蛋白的降解其他蛋白的降解G1期周期蛋白期周期蛋白也通过类似的途径降解，但也通过类似的途径降解，但其其N端没有破环作用盒，端没有破环作用盒，C端有一段端有一段PEST序列与其降解有关。序列与其降解有关。PEST序列：指富含脯氨酸（序列：指富含脯氨酸（P)、谷氨酸、谷氨酸（E)、天冬氨酸、丝氨酸（、天冬氨酸、丝氨酸（S)和苏氨酸（和苏氨酸（T)的残基序列的残基序列缺氧诱导因子缺氧诱导因子-1(Hypoxiainduciblefactor1，HIF-1)ExpressionandactivationofHIF-1areregulatedbytheoxygenconcentration*Undernormoxicconditions:hydroxylationinteractionwithvonHippel-Lindau(pVHL)pVHLisanimportantcomponentoftheE3ubiquitinligasecomplex.ubiquitinizationanddegradation*Underhypoxicconditions:InhibitionofhydroxylationSuppressionofdegradationaccumulationHypoxiainduciblefactor1(HIF-1)四、生长因子四、生长因子(growthfactor)生长因子生长因子是一大类与细胞增殖有关的信号物质，是一大类与细胞增殖有关的信号物质，目前发现的生长因子多达几十种；目前发现的生长因子多达几十种；多数有促进细胞增殖的功能，故又称多数有促进细胞增殖的功能，故又称有丝分有丝分裂原（裂原（mitogen），），如表皮生长因子如表皮生长因子（EGF）、神经生长因子（）、神经生长因子（NGF）等；）等；少数具有抑制作用（或称生长抑制因子）少数具有抑制作用（或称生长抑制因子）如抑素如抑素(chalone)、肿瘤坏死因子（、肿瘤坏死因子（TNF）、）、c-mos原癌基因产物、原癌基因产物、p39mos(Mos)。生长因子的作用机理生长因子的作用机理五、周期蛋白五、周期蛋白-激酶抑制因子激酶抑制因子（CDK-kinaseinhibitor，CKI）CKI对细胞周期起负调控作用对细胞周期起负调控作用CKI分为两大家族：分为两大家族：INK4(Inhibitorofkinase4)家族家族CIP/KIP家族家族CIP:CDKinhibitoryproteinKIP:Kinaseinhibitoryprotein一、一、INK4家族的家族的CKI包括：包括：P16(INK4a)、P15(INK4b)、P18(INK4c)、P19(INK4d)共同结构：共同结构：4个锚（个锚（ankyrin）重复序列）重复序列CDK：识别识别CDK4、6，不识别，不识别CDK2功能：功能：通过与通过与cyclinD竞争结合竞争结合CDK4而而引起细胞周期在引起细胞周期在G1期停滞期停滞一、一、INK4家族的家族的CKI（一）（一）P16功能：功能：结合结合CDK4和和CDK6，抑制，抑制CDK-cyclinD复复合体的催化活性合体的催化活性使细胞周期在使细胞周期在G1期停滞期停滞意义：意义：P16的严格调节对维持细胞的正常生长是必的严格调节对维持细胞的正常生长是必需的需的常在肿瘤和癌细胞中缺失或灭活常在肿瘤和癌细胞中缺失或灭活（甲基化）（甲基化）一、一、INK4家族的家族的CKI（二）（二）P15诱导剂：诱导剂：转化生长因子（转化生长因子（TGF-）意意义：甲基化使甲基化使P15启启动子沉默在血液子沉默在血液恶性病性病变中起重要作用中起重要作用P15的异常甲基化的异常甲基化对估估计预后具有意后具有意义P15和和P16都具有抑制端粒酶活性和抑都具有抑制端粒酶活性和抑制细胞生长的作用（具有肿瘤抑制作用）制细胞生长的作用（具有肿瘤抑制作用）二、CIP/KIP家族的家族的CKI包括包括:：P21(CIP1/WAF1/SDI)、P27(KIP1)、P57(kip2）等）等共同结构：共同结构：N端端CDK抑制性功能域抑制性功能域功能：功能：抑制抑制CDK2-细胞周期蛋白细胞周期蛋白A和和CDK2-细胞周细胞周期蛋白期蛋白E的激酶活性。的激酶活性。过多表达引起过多表达引起G1期细胞周期蛋白停滞。期细胞周期蛋白停滞。P21和和P27是是CDK4的激活因子。的激活因子。（一）（一）P21结构特点：结构特点：启动子上有启动子上有P53结合位点结合位点功能：功能：DNA损伤时损伤时G1期停滞的关键性决定因素期停滞的关键性决定因素在在G2/M转折中起作用转折中起作用参与细胞的终末分化和衰老参与细胞的终末分化和衰老与与DNA聚合酶聚合酶的辅助因子的辅助因子PCNA结合，直接抑结合，直接抑制制DNA的合成。的合成。表达调节：表达调节：P53的转录激活调节的转录激活调节P53-非依赖的调节：非依赖的调节：P202、STAT信号通路、癌信号通路、癌基因产物的负性调节（基因产物的负性调节（c-Myc、Set、Her2）（二）（二）P27表达调节：表达调节：上调信号：上调信号：phosphataseandtensionhomolog(PTEN)Forkhead转录因子转录因子(Afx、Fkhr、Fkhr-L1）下调信号：下调信号：CpG岛过度甲基化岛过度甲基化癌蛋白（癌蛋白（c-Myc、Her2)（三）（三）P57在在Beckwith-Wiedeman综合征（综合征（BWS)中丢失中丢失受受IGF-II的负调节的负调节三、新的三、新的CKI-14-3-314-3-3家族的成员之一家族的成员之一与细胞分裂周期与细胞分裂周期(celldivisioncycle，CDC)有关的基因有关的基因CDC2、CDK2和和CDK4相互作用相互作用抑制抑制CDK活性活性阻断细胞周期进展阻断细胞周期进展Cellcycle主要直接依赖于一系列主要直接依赖于一系列异二聚体异二聚体蛋白激酶复合体蛋白激酶复合体的调节；的调节；蛋白激酶复合体的活性依赖于各种蛋白激酶复合体的活性依赖于各种cyclins的合成与降解；的合成与降解；Cyclins的合成受各种的合成受各种生长因子生长因子影响；影响；Cyclins的降解与的降解与泛素泛素降解途径有关；降解途径有关；蛋白激酶复合体的活性还受蛋白激酶复合体的活性还受CKI抑制抑制。小结小结第三节第三节细胞周期的运行细胞周期的运行细胞周期和其他的一些细胞生理过程就像细胞周期和其他的一些细胞生理过程就像多米诺骨牌多米诺骨牌细胞在生长因子的刺激下，细胞在生长因子的刺激下，G1期期cyclinD表达；表达；并与并与CDK4、CDK6结合而活化激酶；结合而活化激酶；G1-CDK使下游的蛋白质如使下游的蛋白质如Rb磷酸化，磷磷酸化，磷酸化的酸化的Rb释放出转录因子释放出转录因子E2F；促进许多基因的转录，如编码促进许多基因的转录，如编码cyclinE、A和和CDK12的基因。的基因。在在G1-S期，期，cyclinE与与CDK2结合，促进细结合，促进细胞通过胞通过G1/S限制点而进入限制点而进入S期。期。一、细胞周期的启动（一、细胞周期的启动（G0G1）生长因子促进细胞进入细胞周期生长因子促进细胞进入细胞周期CyclinD与与CDK结合结合使使Rb释放结合的转录因子释放结合的转录因子E2F二、二、DNA复制（复制（G1S）在在G1-S期，期，cyclinE与与CDK2结合，促进细结合，促进细胞通过胞通过G1/S限制点而进入限制点而进入S期。期。DNA的复制是由复制起始点（的复制是由复制起始点（originsofreplication）开始的）开始的;复制起始点也就是自主复制序列，散布在复制起始点也就是自主复制序列，散布在染色体上染色体上;在整个细胞周期中，复制起始点上结合有在整个细胞周期中，复制起始点上结合有起始识别复合体（起始识别复合体（Originrecognitioncomplex,ORC）;CDC6是一个调节因子，在是一个调节因子，在G1期期CDC6含量瞬含量瞬间提高间提高;细胞分裂周期细胞分裂周期(celldivisioncycle，CDC)基因基因CDC6结合在结合在ORC上，在上，在ATP供能下，供能下，促进促进6个亚单位构成的个亚单位构成的小染色体维持蛋白小染色体维持蛋白（mini-chromatinmaintenanceprotein,MCM）复合体和其他一些蛋白结合到复合体和其他一些蛋白结合到ORC上，形成前复制复合体（上，形成前复制复合体（pre-RC）;-MCM实际上就是实际上就是DNA解螺旋酶（解螺旋酶（helicase）起始识别复合体起始识别复合体起始复制点起始复制点S-CDK触发触发pre-RC的启动，同时阻止了的启动，同时阻止了DNA再次进行复制再次进行复制;因为因为S-CDK将将CDC6磷酸化，使其脱离磷酸化，使其脱离ORC;磷酸化的磷酸化的CDC6随后被随后被SCF(skpi-cullin-F-boxprotein)参与的泛素化途径降解；参与的泛素化途径降解；(SCF复合体将泛素连接到复合体将泛素连接到G1/S期期cyclin)S-CDK还可以将某些还可以将某些MCM磷酸化，使其被磷酸化，使其被输出细胞核输出细胞核;其它一些其它一些CDK也参与阻止也参与阻止pre-RC的再次形的再次形成，从而保证了成，从而保证了DNA仅复制一次仅复制一次。每每条条染染色色体体在在一一个个细细胞胞周周期期仅仅复复制制一一次次三、进入三、进入M期期(G2-M)在在G2-M期，期，cyclinA、cyclinB与与CDK1结结合，形成合，形成M-CDK；M期期CDK的激活起始于分裂期的激活起始于分裂期cyclin的积累，的积累，在在胚胎细胞周期胚胎细胞周期中中cyclin一直在合成，其浓一直在合成，其浓度决定于降解的速度；度决定于降解的速度；但在但在大多数细胞的有丝分裂周期大多数细胞的有丝分裂周期中，中，cyclin的积累是因为在的积累是因为在G2-M期期M-cyclin基因转录基因转录的增强的增强;随着随着M-cyclin的积累，结合周期蛋白的积累，结合周期蛋白的的M-CDK（CDK1）增加，但是没有）增加，但是没有活性活性;-因为抑制因子因为抑制因子Wee1激酶将激酶将CDK1的的Thr14和和Tyr15磷酸化磷酸化#52-这种机制保证了这种机制保证了CDK-cyclin能够不能够不断积累，然后在需要的时候突然释放。断积累，然后在需要的时候突然释放。#53.CDK1的激活的激活需要需要Thr14和和Tyr15去磷酸化去磷酸化和和Thr161的磷酸化，它是在的磷酸化，它是在CDK激酶激酶(CDKactivatingkinase,CAK)的作用下完成的的作用下完成的在在M期，一方面期，一方面Wee1的活性下降的活性下降;另一方面另一方面CDC25使使CDK去磷酸化，去除了去磷酸化，去除了CDK活化的障碍活化的障碍;CDC25可被两种激酶激活，一是可被两种激酶激活，一是polo激酶激酶，另一个是另一个是M-CDK本身本身;激活的激活的M-CDK还可以抑制它的抑制因子还可以抑制它的抑制因子Wee1的活性，形成一个的活性，形成一个正反馈循环正反馈循环;只要有少量的只要有少量的CDK1被被CDC25或或polo激酶激酶激活，立即就会有大量的激活，立即就会有大量的CDK被活化。被活化。在中期当在中期当成熟促进因子成熟促进因子(maturationpromotingfactor,MPF)或称为或称为有丝分有丝分裂和减数分裂促进因子裂和减数分裂促进因子（mitosisandmeiosispromotingfactor,MPF)活性活性达到最高时，激活达到最高时，激活APC;APC将泛素连接在将泛素连接在cyclinB上，导致上，导致cyclinB被蛋白酶体（被蛋白酶体（proteasome）降）降解解;完成一个细胞周期。完成一个细胞周期。CyclinB的降解途径的降解途径 第四节第四节细胞周期检验点与周期阻滞细胞周期检验点与周期阻滞细胞要分裂，必须正确复制细胞要分裂，必须正确复制DNA和达到一和达到一定的体积，在获得足够物质支持分裂以前，定的体积，在获得足够物质支持分裂以前，细胞不可能进行分裂细胞不可能进行分裂;细胞周期的运行，是在一系列称为细胞周细胞周期的运行，是在一系列称为细胞周期期检验点（检验点（checkpoint）的严格监控下的严格监控下进行的进行的;检验点的作用：检验点的作用：当当DNA受到损伤时受到损伤时,复制复制不完全或纺锤体形成不正常，周期将被阻不完全或纺锤体形成不正常，周期将被阻断。断。检验点的组成：检验点的组成：由感受异常事件的由感受异常事件的感受器感受器、信号传导通路信号传导通路和和效应器效应器构成。构成。主要检验点有：主要检验点有：G0/G1检验点检验点:控制从静止状态的控制从静止状态的G0期进入期进入G1期期G1/S检验点检验点:在哺乳动物中称限制点在哺乳动物中称限制点(restrictionpoint)或简称或简称R点，控制细胞由点，控制细胞由G1进入进入DNA合成期。合成期。#17细胞可能的细胞可能的3种命运：种命运：继续增殖、暂不增殖、不增殖而分化继续增殖、暂不增殖、不增殖而分化S期检验点：期检验点：DNA复制是否完成？复制是否完成？G2/M检验点：检验点：是决定细胞一分为二的控制点。相关是决定细胞一分为二的控制点。相关的事件包括：的事件包括：DNA损伤？细胞体积足够大？损伤？细胞体积足够大？中中-后期检验点后期检验点（纺锤体组装检验点）：任何一个着（纺锤体组装检验点）：任何一个着丝点没有正确连接到纺锤体上，都会引起细胞周期丝点没有正确连接到纺锤体上，都会引起细胞周期中断。中断。主要的检验点主要的检验点第五节第五节细胞周期与癌症细胞周期与癌症促细胞周期进展促细胞周期进展细胞增殖、分裂细胞增殖、分裂CDK-Cyclin有激酶活性有激酶活性+CyclinCDK无激酶无激酶活性活性CKICDK-CKICyclin无激酶活性无激酶活性Rb、E2F与肿瘤与肿瘤在哺乳动物细胞中，在哺乳动物细胞中，G1期受期受正性正性和和负性负性调调节信号的严格控制；节信号的严格控制；Rb通过细胞周期依赖性的通过细胞周期依赖性的磷酸化磷酸化/去磷酸化去磷酸化监控这些信号，决定细胞是否通过监控这些信号，决定细胞是否通过G1期检期检验点、验点、是否进行分裂是否进行分裂；Rb对细胞周期的调控是通过转录因子对细胞周期的调控是通过转录因子E2F来实现的；来实现的；至少有至少有1/3的人类肿瘤存在的人类肿瘤存在Rb基因缺失或突基因缺失或突变。变。CDK4-CyclinD2(有有Kinase活性活性)Rb-E2FATPADP促转录促转录(如如myc,DNA聚合酶聚合酶)Rb Rb-P P+E2FRb调节细胞周期调节细胞周期细胞增殖细胞增殖DNADamageP21?GADD45BAXKinases(DNA-PK)DNARepairp53p53PP53与肿瘤与肿瘤CyclinD/CDK4Bcl-2ApoptosisG1/SblockG2/MblockCellCycleArrest14-3-3与与肿瘤瘤14-3-3受受P53诱导，参与，参与DNA损伤的的调节，在在P53非依非依赖的的调节机制中可能起作用机制中可能起作用功能功能丧失促失促进恶性性转化化P27与与肿瘤瘤表达下降与癌症的表达下降与癌症的发生和低存活有关，是癌生和低存活有关，是癌症症进展的展的标志志表达下降可能与泛素介表达下降可能与泛素介导的降解增加有关的降解增加有关受受c-Myc的的调节