药物分析湖南大学第08章杂环类药物的分析.ppt

第八章第八章 杂环类药物的分析杂环类药物的分析 杂杂环环化化合合物物：环环状状有有机机化化合合物物的的碳碳环环中中 夹夹杂杂有有非非碳碳元元素素原原子子(氮、氮、氧氧、硫硫）的的化化合合物。物。主主要要讲讲述述：吡吡啶啶类类、喹喹啉啉类类、托托烷烷类类、吩吩噻噻嗪嗪类类、苯苯并并二二氮氮杂杂卓类卓类第一节第一节 吡啶类药物的分析吡啶类药物的分析1吡啶类吡啶类药物的基本结构与主要性质药物的基本结构与主要性质含有氮杂原子不饱和六元单环含有氮杂原子不饱和六元单环吡啶（吡啶（pyridinepyridine）(异烟肼异烟肼)1.典型药物典型药物：(尼可刹米尼可刹米)(硝苯地平硝苯地平)(尼群地平尼群地平)(尼莫地平尼莫地平)2.主要化学性质主要化学性质：吡啶环的特性：吡啶环的特性：吡啶环可发生开环反应，可用于吡啶类药吡啶环可发生开环反应，可用于吡啶类药物的鉴别。物的鉴别。弱弱碱碱性性：吡吡啶啶环环的的pKb8.8，非非水水碱碱量量法法含量测定或沉淀反应鉴别。含量测定或沉淀反应鉴别。取代基取代基的特性的特性异异烟烟肼肼：位位上上酰酰肼肼基基具具有有较较强强的的还还原原性性，可可被被不不同同的的氧氧化化剂剂氧氧化化，也也可可与与某某些些含含羰羰基的化合物发生缩合反应。基的化合物发生缩合反应。取代基取代基的特性（续）的特性（续）尼尼可可刹刹米米：位位上上酰酰胺胺基基易易水水解解，遇遇碱碱水水解解后后，释释放放出出具具有有碱碱性性的的二二乙乙胺胺，能能使使湿湿润润的的红红色色石石蕊蕊试试纸纸变变蓝蓝色色，故故可可以以此此进进行行鉴鉴别。别。2鉴别试验鉴别试验 1.1.吡啶的开环反应吡啶的开环反应 适适用用于于吡吡啶啶环环 位位未未取取代代，以以及及 或或 位位为为烷烷基基或或羧羧基基的的衍衍生生物物所所取取代代的的尼尼可可刹刹米米和和异异烟肼烟肼。戊烯二醛反应（戊烯二醛反应（KningKning反应）反应）戊烯二醛戊烯二醛+溴化氰溴化氰尼可刹米尼可刹米 戊烯二醛衍生物（戊烯二醛衍生物（黄色）黄色）H2O苯胺苯胺反应机理：反应机理：a.a.溴溴化化氰氰作作用用于于吡吡啶啶环环，使使吡吡啶啶环环水水解解成成戊戊烯烯二二醛。醛。反应机理（续）：反应机理（续）：b.b.戊戊烯烯二二醛醛与与芳芳伯伯胺胺缩缩合合成成有有色色的的戊戊烯烯二二醛醛衍衍生生物物，颜色随，颜色随芳伯胺不同有所差异。芳伯胺不同有所差异。异烟肼：异烟肼：先先用用高高锰锰酸酸钾钾或或溴溴水水将将其其氧氧化化为为异异烟烟酸酸后后，再再进进行行戊烯二醛反应。戊烯二醛反应。尼可刹米尼可刹米 Ch.P Ch.P（20052005）【鉴鉴别别】取取本本品品1 1滴滴，加加水水50ml50ml，摇摇匀匀，分分取取2ml2ml，加加溴溴化化氰氰试试液液2ml2ml与与2.5%2.5%苯苯胺胺溶溶液液3ml3ml，摇摇匀匀，溶溶液液渐渐显显黄色。黄色。例例二硝基氯苯反应二硝基氯苯反应（VongerichtenVongerichten反应）反应）原理原理:无无水水条条件件下下，吡吡啶啶及及其其某某些些衍衍生生物物与与2 2，4-4-二二硝硝基基氯氯苯苯混混合合共共热热，冷冷却却后后，加加醇醇制制NaOHNaOH试试液液，溶液呈紫红色。溶液呈紫红色。用用于于鉴鉴别别异异烟烟肼肼和和尼尼可可刹刹米米时时，须须将将酰酰肼肼氧氧化化成羧基或酰胺水解为羧基后进行本反应。成羧基或酰胺水解为羧基后进行本反应。注：异烟肼不经处理的反应注：异烟肼不经处理的反应属酰肼基的反应属酰肼基的反应非吡啶环开环反应非吡啶环开环反应2.酰肼基团的反应酰肼基团的反应 还原反应还原反应异烟肼异烟肼+4AgNO3+5 NH3H2O异烟酸铵异烟酸铵+4Ag()+N2()+4NH4NO3+4H2O(银镜银镜)异烟肼异烟肼+SeO2异烟酸异烟酸+N2()+Se()+H2O(红色红色)(亚硒酸亚硒酸)缩合反应缩合反应（228228231231）二氢吡啶的解离反应二氢吡啶的解离反应二二氢氢吡吡啶啶类类药药物物（硝硝苯苯地地平平、尼尼群群地地平平）的的丙丙酮酮或或甲甲醇醇溶溶液液与与碱碱作作用用，二二氢氢吡吡啶啶环环上上1 1、4 4位位氢可发生解离，形成氢可发生解离，形成p-p-共轭而发生颜色变化。共轭而发生颜色变化。黄色黄色橙红色橙红色沉淀反应沉淀反应本本类类药药物物具具有有吡吡啶啶环环结结构构，可可与与重重金金属属盐盐类类及及苦味酸等试剂形成沉淀。苦味酸等试剂形成沉淀。异烟肼异烟肼+HgCl2白色沉淀白色沉淀分解产物的反应分解产物的反应尼尼可可刹刹米米与与氢氢氧氧化化钠钠试试液液共共热热，即即发发生生二二乙乙胺胺的臭气，能使湿润的红色石蕊试变蓝色。的臭气，能使湿润的红色石蕊试变蓝色。异异烟烟肼肼、尼尼可可刹刹米米等等与与无无水水碳碳酸酸钠钠或或氢氢氧氧化化钙钙共热，发生脱羧降解，有吡啶臭气逸出共热，发生脱羧降解，有吡啶臭气逸出紫外分光光度法与红外分光光度法紫外分光光度法与红外分光光度法本本类类药药物物含含芳芳杂杂环环，在在紫紫外外光光区区有有特特征征吸收。吸收。3有关物质检查有关物质检查 1.1.异烟肼中游离异烟肼中游离肼的检查肼的检查游离肼游离肼来源来源：合成原料引入合成原料引入异烟肼在贮藏过程中降解产生异烟肼在贮藏过程中降解产生肼的副作用：肼的副作用：诱变剂和致癌物质诱变剂和致癌物质限量检查方法：限量检查方法：薄层色谱法和比浊法薄层色谱法和比浊法薄层色谱法薄层色谱法：供试品溶液：供试品溶液：取本品，加水制成每取本品，加水制成每1ml1ml中含中含50mg50mg的溶液的溶液对照溶液：对照溶液：取取硫硫酸酸肼肼加加水水制制成成每每1ml1ml中中含含0.20mg0.20mg的的溶溶液（相当于游离肼液（相当于游离肼50g50g）薄层板：薄层板：硅硅胶胶薄薄层层板板（用用羧羧甲甲基基纤纤维维素素钠钠溶溶液液制制备）备）点样量：点样量：供试品溶液供试品溶液10l10l；对照溶液；对照溶液2l 2l 展开剂：展开剂：异丙醇异丙醇-丙酮（丙酮（3232）显色剂：显色剂：乙醇制对二甲氨基苯甲醛试液乙醇制对二甲氨基苯甲醛试液判断：判断：在在供供试试品品主主斑斑点点前前方方与与硫硫酸酸肼肼斑斑点点相相应应的位置上，不得显黄色斑点。的位置上，不得显黄色斑点。限量计算：限量计算：比浊法比浊法：检查方法：检查方法：取取异异烟烟肼肼0.1g0.1g，加加水水5ml5ml使使溶溶解解，加加水水杨杨醛醛乙乙醇醇溶溶液液（120120）0.1ml0.1ml，振振摇摇混混合，放置合，放置5min5min内不得出现浑浊。内不得出现浑浊。反应原理：反应原理：游离肼游离肼+水杨醛水杨醛水杨醛腙水杨醛腙 优点：优点：不用对照品，价廉、简单易行不用对照品，价廉、简单易行 缺点：缺点：准确度差准确度差2.2.尼可刹米中有关物质的检查尼可刹米中有关物质的检查 杂质杂质来源来源：生生产产和和贮贮藏藏过过程程中中引引入入的的N-N-乙乙基基烟烟酰酰胺胺及及结结构不明的有关物质。构不明的有关物质。限量检查方法：限量检查方法：薄层色谱法中的高低浓度对比法薄层色谱法中的高低浓度对比法供试品溶液：供试品溶液：取本品，加甲醇制成每取本品，加甲醇制成每1ml1ml中中 含含40mg40mg的溶液。的溶液。对照溶液：对照溶液：精密量取供试品溶液适量，加甲精密量取供试品溶液适量，加甲 醇醇稀稀释释成成每每1ml1ml中中含含0.4mg(0.4mg(对对照照1)1)和和0.04mg(0.04mg(对照对照2)2)的溶液。的溶液。薄层板：薄层板：硅胶硅胶GFGF254254点样量：点样量：三种溶液各三种溶液各10l10l展开剂：展开剂：三氯甲烷三氯甲烷-丙酮（丙酮（75:2575:25）检测：检测：置紫外光灯（置紫外光灯（254nm254nm）下检视）下检视判断：判断：供试品溶液的杂质斑点，与对照液供试品溶液的杂质斑点，与对照液2 2 的的主主斑斑点点比比较较，不不得得更更深深，如如有有1 1个个超超 过时，应不深于对照液过时，应不深于对照液1 1的主斑点的主斑点第二节第二节 喹啉类药物的分析喹啉类药物的分析1喹啉类药物喹啉类药物的基本结构与性质的基本结构与性质喹啉类药物分子结构中含有吡啶与苯稠喹啉类药物分子结构中含有吡啶与苯稠合而成的合而成的喹啉杂环喹啉杂环。（喹啉杂环）（喹啉杂环）1.典型药物典型药物：（硫酸奎尼丁）（硫酸奎尼丁）（硫酸奎宁）（硫酸奎宁）分子式完全相同，部分立体结构不同分子式完全相同，部分立体结构不同（磷酸氯喹）（磷酸氯喹）（盐酸环丙沙星）（盐酸环丙沙星）（氧氟沙星）（氧氟沙星）2.主要化学性质主要化学性质：碱碱性性：喹喹核核碱碱上上脂脂环环氮氮碱碱性性强强，与与强强酸酸形形成成稳稳定定的的盐盐。喹喹啉啉环环芳芳环环氮氮碱碱性性较较弱弱，不不能能与与酸成盐。酸成盐。旋旋光光性性：硫硫酸酸奎奎宁宁为为左左旋旋体体；硫硫酸酸奎奎尼尼丁丁为为右右旋旋体体；盐盐酸酸环环丙丙沙沙星星无无旋旋光光性性；氧氧氟氟沙沙星星为消旋体为消旋体荧荧光光特特性性：硫硫酸酸奎奎宁宁、硫硫酸酸奎奎尼尼丁丁在在稀稀盐盐酸酸中显蓝色荧光。中显蓝色荧光。2鉴别试验鉴别试验 1.绿喹宁反应绿喹宁反应奎奎宁宁、奎奎尼尼丁丁为为6-6-位位含含氧氧喹喹啉啉衍衍生生物物，可可发发生生绿喹宁反应。绿喹宁反应。6-位含氧喹啉位含氧喹啉氯水（或溴水）氯水（或溴水）氧化氯化氧化氯化二醌基亚胺的铵盐（绿色）二醌基亚胺的铵盐（绿色）氨水处理缩合氨水处理缩合绿喹宁反应：绿喹宁反应：硫酸奎宁硫酸奎宁硫酸奎尼丁硫酸奎尼丁溴试液溴试液溶液显溶液显翠绿色翠绿色加酸成加酸成中性中性溶液变溶液变成蓝色成蓝色加加酸酸成成酸酸性性溶液变溶液变成紫色成紫色可转溶于醇可转溶于醇和三氯甲烷和三氯甲烷但不溶于醚但不溶于醚2.光谱特征光谱特征硫硫酸酸奎奎宁宁、硫硫酸酸奎奎尼尼丁丁在在稀稀盐盐酸酸中中显显蓝蓝色色荧荧光光，盐盐酸酸环环丙丙沙沙星星无无荧荧光光的的特特征征，可可鉴鉴别别或或区区别别本本类药物。类药物。3.无机酸盐无机酸盐硫酸奎宁、硫酸奎尼丁中的硫酸根，在酸性条硫酸奎宁、硫酸奎尼丁中的硫酸根，在酸性条件下与氯化钡反应生成白色沉淀。件下与氯化钡反应生成白色沉淀。盐酸环丙沙星中具有盐酸根，在酸性条件下与盐酸环丙沙星中具有盐酸根，在酸性条件下与硝酸银反应生成白色沉淀。硝酸银反应生成白色沉淀。3有关物质检查有关物质检查 1.1.硫酸奎宁中有关物质检查硫酸奎宁中有关物质检查酸度检查酸度检查取取 本本 品品 0.20g，加加 水水 20ml溶溶 解解 后后，pH应应 为为5.76.6，主要控制药物中的酸性杂质。，主要控制药物中的酸性杂质。三氯甲烷三氯甲烷-乙醇中不溶物质乙醇中不溶物质取取本本品品2.0g2.0g，加加三三氯氯甲甲烷烷-无无水水乙乙醇醇（2:12:1）混混合合液液15ml15ml，在在5050加加热热10min10min，用用称称定定重重量量的的垂垂熔熔坩坩埚埚滤滤过过，滤滤渣渣用用上上述述混混合合液液分分5 5次次洗洗涤涤，每每次次10ml10ml，在在105105干干燥燥至至恒恒重重，遗遗留留残残渣渣不不得得超超过过2mg2mg。主主要要控控制制药药物物中中的的不不溶溶性性杂杂质质和和无机盐类等。无机盐类等。其他金鸡纳碱其他金鸡纳碱采采用用TLCTLC或或HPLCHPLC中中的的主主成成分分自自身身对对照照法法或或杂杂质质对对照照品品对对照照法法进进行行检检查查，主主要要控控制制硫硫酸酸奎奎宁宁中中的其他生物碱。的其他生物碱。主成分自身对照法主成分自身对照法 杂质峰面积与主成分峰面积相差悬殊时应用。杂质峰面积与主成分峰面积相差悬殊时应用。方法：方法：主成分自身对照法（续）主成分自身对照法（续）分分别别进进样样，测测定定供供试试品品溶溶液液中中各各杂杂质质峰峰面面积积及及其其总总和和，与与对对照照溶溶液液主主成成分分峰峰面面积积比比较较，控制供试品中杂质的量。控制供试品中杂质的量。优优点点：不不需需杂杂质质对对照照品品，可可同同时时控控制制各各个个杂杂 质及其总量限度质及其总量限度缺缺点点：检检测测波波长长处处，各各杂杂质质和和药药物物的的吸吸收收强强 度可能有差异，准确度差度可能有差异，准确度差 TLCTLC法法供供试试品品溶溶液液：取取本本品品，加加稀稀乙乙醇醇制制成成每每 1 1m m l l 中中 含含 有有 10mg 10mg的溶液。的溶液。对对照照品品溶溶液液：精精密密量量取取适适量量，加加 稀稀乙乙醇醇制制成成每每 1ml中中 含有约含有约5050gg的溶液。的溶液。点样量：点样量：各各5 5ll，点于同一硅胶，点于同一硅胶G G薄层板上薄层板上 。展开剂：展开剂：三氯甲烷三氯甲烷-丙酮丙酮-二乙胺（二乙胺（5:4:1.25）显色剂：显色剂：碘铂酸钾试液碘铂酸钾试液判断：判断：供试品溶液如显杂质斑点，与对照也的主斑点供试品溶液如显杂质斑点，与对照也的主斑点 比较，不得更深。比较，不得更深。例例2.2.氧氟沙星中有关物质检查氧氟沙星中有关物质检查溶液的澄清度与颜色溶液的澄清度与颜色主主要要控控制制生生产产和和贮贮藏藏过过程程中中引引入入的的水水中中不不溶溶性性物质和有色杂质。物质和有色杂质。a.澄清度检查法澄清度检查法b.取取本本品品0.5g0.5g，加加NaOHNaOH试试液液10ml10ml溶溶解解后后，溶溶液液应应澄澄清清。如如显显混混浊浊，与与2 2号号浊浊度度标标准准液液比较，不得更浓。比较，不得更浓。b.颜色检查法颜色检查法c.取取本本品品0.1g0.1g，加加NaOHNaOH试试液液10ml10ml溶溶解解后后，在在450nm450nm处测定吸光度，不得超过处测定吸光度，不得超过0.250.25。有关物质有关物质对对生生产产和和贮贮藏藏过过程程中中引引入入的的副副产产物物及及结结构构不不清清的有关物质，可采用的有关物质，可采用HPLCHPLC法进行检查。法进行检查。HPLCHPLC法法供试品溶液：供试品溶液：精密称定本品适量，加精密称定本品适量，加0.1mol/L0.1mol/L盐酸溶盐酸溶 液溶解并稀释制成每液溶解并稀释制成每1ml1ml中含有中含有1.2mg1.2mg的的 溶液。溶液。对照品溶液：对照品溶液：精密量取适量，加精密量取适量，加0.1mol/L盐酸溶液稀盐酸溶液稀 释制成每释制成每1ml中含有约中含有约2.4g的溶液。的溶液。填充剂：填充剂：十八烷基硅烷键和硅胶十八烷基硅烷键和硅胶流动相：流动相：醋酸铵高氯酸纳溶液醋酸铵高氯酸纳溶液-乙腈（乙腈（85:1585:15）例例HPLCHPLC法（续）法（续）进样量：进样量：1010ll判断：判断：供试品溶液中如有杂质峰，单个杂质峰面积不供试品溶液中如有杂质峰，单个杂质峰面积不 得大于对照溶液主峰面积（得大于对照溶液主峰面积（0.2%0.2%）个杂质峰面积的和不得大于对照溶液主峰面积个杂质峰面积的和不得大于对照溶液主峰面积 的的2.52.5倍（倍（0.5%0.5%）例例第四节第四节 托烷类药物的分析托烷类药物的分析1托烷类药物托烷类药物的基本结构与性质的基本结构与性质托烷类药物大多数是由托烷类药物大多数是由莨菪烷莨菪烷衍生的氨基醇衍生的氨基醇与不同的有机酸缩合成酯的生物碱。与不同的有机酸缩合成酯的生物碱。（莨菪烷）（莨菪烷）（莨菪醇）（莨菪醇）（莨菪碱）（莨菪碱）1.典型药物典型药物：（硫酸阿托品）（硫酸阿托品）（氢溴酸后马托品）（氢溴酸后马托品）（氢溴酸东莨菪碱）（氢溴酸东莨菪碱）2.主要化学性质主要化学性质：水水解解性性：阿阿托托品品和和东东莨莨菪菪碱碱分分子子结结构构中中，具具有酯的结构，易水解有酯的结构，易水解。碱碱性性：阿阿托托品品和和东东莨莨菪菪碱碱分分子子结结构构中中，五五元元酯酯环环上上含含有有叔叔胺胺氮氮原原子子，具具有有较较强强的的碱碱性性，易与酸成盐。易与酸成盐。旋旋光光性性：氢氢溴溴酸酸东东莨莨菪菪碱碱分分子子结结构构中中含含有有不不对对称称碳碳原原子子，呈呈左左旋旋体体；阿阿托托品品结结构构中中虽虽然然也也有有不不对对称称碳碳原原子子，但但为为外外消消旋旋体体，无无旋旋光光性。性。2鉴别试验鉴别试验 1.托烷生物碱类的鉴别实验托烷生物碱类的鉴别实验2.托托烷烷生生物物碱碱类类结结构构中中的的酯酯键键水水解解后后生生成成的的莨莨菪菪酸酸，经经发发烟烟硝硝酸酸处处理理，转转变变为为三三硝硝基基衍衍生生物物，再再与与KOHKOH醇醇溶溶液液和和固固体体KOHKOH作作用用，转转成成有有色色的的醌醌型型产产物，呈深紫色。物，呈深紫色。2.氧化反应氧化反应本本类类药药物物水水解解后后，生生成成莨莨菪菪酸酸，可可与与硫硫酸酸和和重重铬铬酸酸钾钾在在加加热热条条件件下下，发发生生氧氧化化反反应应，生生成成苯苯甲甲醛醛，逸出苦杏仁的臭味。逸出苦杏仁的臭味。2.沉淀反应沉淀反应本类药物为生物碱，可与生物碱沉淀剂生成沉淀。本类药物为生物碱，可与生物碱沉淀剂生成沉淀。阿托品阿托品 +氯化汞醇试液氯化汞醇试液黄色沉淀黄色沉淀东莨菪碱东莨菪碱 +氯化汞醇试液氯化汞醇试液白色沉淀白色沉淀2.硫酸盐和溴化物的反应硫酸盐和溴化物的反应硫酸阿托品硫酸阿托品 +BaCl+BaCl2 2试液试液白色沉淀白色沉淀（不溶于盐酸或硝酸）（不溶于盐酸或硝酸）硫酸阿托品硫酸阿托品 +醋酸铅试液醋酸铅试液白色沉淀白色沉淀（溶于醋酸铵或（溶于醋酸铵或NaOH试液）试液）氢溴酸东莨菪碱氢溴酸东莨菪碱+AgNO+AgNO3 3试液试液淡黄色凝乳沉淀淡黄色凝乳沉淀沉淀微溶于氨试液，几乎不溶于硝酸；沉淀微溶于氨试液，几乎不溶于硝酸；滴加氯试液，溴即游离；滴加氯试液，溴即游离；加三氯甲烷振摇，三氯甲烷层显黄色或红棕色加三氯甲烷振摇，三氯甲烷层显黄色或红棕色3有关物质检查有关物质检查 1.1.氢溴酸东莨菪碱中有关物质的检查氢溴酸东莨菪碱中有关物质的检查酸度检查酸度检查东东莨莨菪菪碱碱的的碱碱性性很很弱弱，对对石石蕊蕊试试纸纸不不显显碱碱性性反应。反应。氢氢溴溴酸酸东东莨莨菪菪碱碱为为强强酸酸弱弱碱碱盐盐，其其5%5%水水溶溶液液pH4.0pH4.05.55.5，以此来控制酸性杂质的量。，以此来控制酸性杂质的量。易氧化物易氧化物主主要要检检查查生生产产过过程程中中引引入入的的杂杂质质阿阿扑扑东东莨莨菪菪碱碱及及其其他他不不饱饱和和双双键键的的有有机机物物质质，他他们们可可使使高锰酸钾溶液褪色。高锰酸钾溶液褪色。其他生物碱其他生物碱本本品品的的水水溶溶液液加加入入氨氨试试液液不不得得发发生生混混浊浊。但但有有其其他他生生物物碱碱（阿阿扑扑阿阿托托品品、颠颠茄茄碱碱等等）存存在时，则产生混浊。在时，则产生混浊。本本品品水水溶溶液液加加入入KOHKOH试试液液，则则有有东东莨莨菪菪碱碱析析出，溶液显混浊，瞬间消失。出，溶液显混浊，瞬间消失。2.硫酸阿托品中有关物质的检查硫酸阿托品中有关物质的检查3.硫硫酸酸阿阿托托品品为为消消旋旋体体，无无旋旋光光性性；莨莨菪菪碱碱为为左左旋旋体体，可可利利用用旋旋光光度度测测定定法法对对莨莨菪菪碱碱杂杂质质进进行行检检查查东莨菪碱东莨菪碱碱性条件碱性条件异东莨菪醇异东莨菪醇+莨菪酸莨菪酸(溶于水溶于水)(其钾盐溶于水其钾盐溶于水)第四节第四节 吩噻嗪类药物的分析吩噻嗪类药物的分析1吩噻嗪类药物吩噻嗪类药物的基本结构与性质的基本结构与性质苯并噻嗪的衍生物，含有硫氮杂蒽母核苯并噻嗪的衍生物，含有硫氮杂蒽母核1.典型药物典型药物：CH2CH2CH2N(CH3)2NSHCl(盐酸丙嗪盐酸丙嗪)CH2CH2CH2N(CH3)2ClNSHCl(盐酸氯丙嗪盐酸氯丙嗪)CH2CHN(CH3)2NSHCl(盐酸异丙嗪盐酸异丙嗪)CH3ClCH2CH2CH2CH2CH2OHNNNS（奋乃静）（奋乃静）CF3CH2CH2CH2(CH2)2OCO(CH2)8CH3NNNS（癸氟奋乃静）（癸氟奋乃静）（盐酸氟奋乃静）（盐酸氟奋乃静）CF3CH2CH2CH2CH2CH2OHNNNS2HClCF3CH2CH2CH2CH3NNNS2HCl(盐酸三氟拉嗪盐酸三氟拉嗪)(盐酸二氧丙嗪盐酸二氧丙嗪)2.主要化学性质主要化学性质：含含S S、N N的的三三环环共共轭轭的的大大 体体系系，S S、N N与与苯苯环环形形成成p-p-共共轭轭,在在紫紫外外区区有有三三个个吸吸收收峰峰（205205、254254、300nm300nm），最最强强峰峰多多在在254nm254nm。2 2位位上上的的取代基的不同，会引起吸收峰发生位移。取代基的不同，会引起吸收峰发生位移。硫硫氮氮杂杂蒽蒽环环上上硫硫原原子子为为-2-2价价，易易被被氧氧化化呈呈色色。氧化产物砜及亚砜有四个吸收峰。氧化产物砜及亚砜有四个吸收峰。硫硫氮氮杂杂蒽蒽环环上上硫硫原原子子有有两两对对孤孤对对电电子子，易易与与金属离子络合呈色。金属离子络合呈色。吩吩噻噻嗪嗪类类药药物物随随取取代代基基R R和和RR的的不不同同，产产生生不同的红外吸收光谱。不同的红外吸收光谱。2鉴别试验鉴别试验 1.紫外分光光度法与红外分光光度法紫外分光光度法与红外分光光度法2.显色反应显色反应氧化剂显色反应氧化剂显色反应吩噻嗪类药物可被不同氧化剂氧化呈色吩噻嗪类药物可被不同氧化剂氧化呈色常用氧化剂：硫酸、硝酸、常用氧化剂：硫酸、硝酸、H H2 2O O2 2各药物由于取代基不同，所显颜色有差异各药物由于取代基不同，所显颜色有差异反应产物极其复杂，难以用化学反应式表达反应产物极其复杂，难以用化学反应式表达与钯离子配合显色反应与钯离子配合显色反应吩吩噻噻嗪嗪类类药药物物分分子子结结构构中中的的二二价价硫硫可可与与金金属属钯离子形成红色配合物钯离子形成红色配合物吩吩噻噻嗪嗪类类药药物物的的氧氧化化产产物物砜砜和和亚亚砜砜无无此此反反应应，专属性强。专属性强。分解产物的反应分解产物的反应癸癸氟氟奋奋乃乃静静含含有有氟氟，经经与与NaNa2 2COCO3 3或或K K2 2COCO3 3在在600600炽炽灼灼，分分解解成成氟氟化化物物，加加酸酸性性茜茜素素锆锆试试液液，生生成成ZrFZrF6 6 2-2-配配位位离离子子，茜茜素素游游离离使使溶液有红色变为黄色。溶液有红色变为黄色。3有关物质检查有关物质检查 1.1.杂质来源杂质来源吩吩噻噻嗪嗪类类药药物物结结构构中中的的二二价价硫硫易易被被氧氧化化生生成成砜砜类化合物。类化合物。母母体体吩吩噻噻嗪嗪的的残残留留及及副副反反应应产产物物，如如：异异丙丙嗪嗪合成过程中产生的异丙美沙嗪。合成过程中产生的异丙美沙嗪。吩噻嗪类药物在贮藏过程中产生的分解产物。吩噻嗪类药物在贮藏过程中产生的分解产物。2.检查方法检查方法薄薄层层色色谱谱法法：杂杂质质对对照照品品不不易易获获得得，以以高高低低浓浓度对比法控制杂质限量。度对比法控制杂质限量。第五节第五节 苯并二氮杂卓类药物的分析苯并二氮杂卓类药物的分析 1 1基本结构与性质基本结构与性质苯苯并并二二氮氮杂杂卓卓类类药药物物为为苯苯环环与与七七元元含含氮氮杂环稠和而成。杂环稠和而成。环庚三烯环庚三烯草草卓卓1.典型药物典型药物：硝西泮硝西泮氯硝西泮氯硝西泮奥沙西泮奥沙西泮三唑仑三唑仑ClClH H3 3C C2.主要化学性质主要化学性质：本本类类药药物物结结构构中中的的二二氮氮杂杂卓卓七七元元环环上上的的氮氮原子具有弱碱性。原子具有弱碱性。二二氮氮杂杂卓卓七七元元环环上上的的二二氮氮原原子子的的性性质质不不同同，在在不不同同pHpH介介质质中中，可可形形成成不不同同的的离离子子化化状状态态：质质子子化化分分子子（H H2 2A A+)，中中性性分分子子（HAHA），或或去去质质子子化化分分子子（A A-)，从从而而影影响响其其紫紫外外光光谱性质。谱性质。在在强强酸酸性性溶溶液液中中，本本类类药药物物可可水水解解，形形成成相应的二苯甲酮衍生物。相应的二苯甲酮衍生物。例例2鉴别试验鉴别试验 1.化学鉴别化学鉴别沉淀反应沉淀反应一些苯并二氮卓药物具有生物碱性质，可与生一些苯并二氮卓药物具有生物碱性质，可与生物碱沉淀剂作用。物碱沉淀剂作用。氯氮卓的盐酸溶液氯氮卓的盐酸溶液+碘化铋碘化铋钾钾 橙红色沉淀橙红色沉淀盐酸氟西泮水溶液盐酸氟西泮水溶液+碘化铋钾碘化铋钾 橙红色沉淀橙红色沉淀氯硝西泮盐酸溶液氯硝西泮盐酸溶液 +碘化铋钾碘化铋钾 橙红色沉淀橙红色沉淀放置后，沉淀颜色变深放置后，沉淀颜色变深水解后芳香伯胺反应（重氮化水解后芳香伯胺反应（重氮化-偶合反应）偶合反应）氯氯氮氮卓卓、奥奥沙沙西西泮泮的的盐盐酸酸溶溶液液，缓缓慢慢加加热热煮煮沸沸，放放冷冷，加加NaNONaNO2 2和和碱碱性性-萘萘酚酚试试液液，生生成成橙橙红红色沉淀，后者放置颜色变暗。色沉淀，后者放置颜色变暗。硫酸硫酸-荧光反应荧光反应苯苯并并二二氮氮卓卓类类药药物物溶溶于于硫硫酸酸后后，在在紫紫外外光光（365nm365nm）下下，显显不不同同颜颜色色的的荧荧光光。地地西西泮泮：黄黄绿色；氯氮卓：黄色。绿色；氯氮卓：黄色。分解产物的反应分解产物的反应本本类类药药物物多多为为有有机机氯氯化化合合物物，用用氧氧瓶瓶燃燃烧烧法法破破坏坏，生生成成氯氯化化氢氢，以以5%NaOH5%NaOH吸吸收收，加加硝硝酸酸酸酸化化，显氯化物反应。显氯化物反应。2.紫外分光光度法与红外分光光度法紫外分光光度法与红外分光光度法本本类类药药物物均均含含有有较较大大共共轭轭体体系系，在在紫紫外外区区有有特特征吸收，可用于鉴别。征吸收，可用于鉴别。红红外外吸吸收收可可用用于于1 1，4-4-苯苯并并二二氮氮卓卓类类药药物物的的指指纹鉴别。纹鉴别。3.色谱法色谱法苯苯并并二二氮氮卓卓类类药药物物发发展展很很快快，临临床床应应用用的的品品种种较多。较多。结构与性质相似，不易区分鉴别。结构与性质相似，不易区分鉴别。常用色谱法进行专属鉴别常用色谱法进行专属鉴别3有关物质检查有关物质检查 1.1.氯氮卓中有关物质的检查氯氮卓中有关物质的检查杂质来源：杂质来源：在在生生产产和和贮贮藏藏过过程程中中引引入入的的中中间间体体、副副产产物物和和分解产物。分解产物。检查方法检查方法薄层色谱法薄层色谱法供试品溶液：供试品溶液：取取本本品品0.10g0.10g，加加甲甲苯苯-甲甲醇醇（8:128:12）溶溶解解并并稀释至稀释至5ml5ml。对照溶液对照溶液1 1：精精密密量量取取供供试试品品溶溶液液0.5ml0.5ml，加加甲甲苯苯-甲甲醇醇（8:128:12）稀释至）稀释至100ml100ml。对照溶液对照溶液2 2：取取（2-2-氨氨基基-5-5-氯氯苯苯基基）苯苯甲甲酮酮对对照照品品5mg5mg，加甲苯加甲苯-甲醇（甲醇（8:128:12）稀释至）稀释至100ml100ml。薄层板：薄层板：硅胶硅胶GF254GF254薄层板薄层板点样量：点样量：对照品溶液各对照品溶液各5 5ll，供试品溶液各，供试品溶液各2525ll展开剂：展开剂：甲苯甲苯-乙酸乙酯乙酸乙酯-乙醇乙醇-乙二胺乙二胺-水水 （70:15:10:4:1)70:15:10:4:1)判断：判断：置置紫紫外外灯灯(254nm)(254nm)下下检检视视，供供试试品品溶溶液液的的杂杂质斑点不得比对照品溶液质斑点不得比对照品溶液1 1的主斑点更深。的主斑点更深。喷喷 以以 1mol/L1mol/L盐盐 酸酸 溶溶 液液 现现 制制 的的 NaNO2NaNO2溶溶 液液(1100)(1100)，冷冷风风吹吹干干，再再喷喷以以盐盐酸酸N-(1-N-(1-萘萘基基)-)-乙乙二二胺胺的的乙乙醇醇溶溶液液(41000)(41000)，供供试试品品如如显显紫紫色色斑斑点点，不不得得比比对对照照品品溶溶液液2 2的的主主斑斑点更深。点更深。2.2.三唑仑中有关物质的气相色谱法检查三唑仑中有关物质的气相色谱法检查由由于于不不易易获获得得有有关关物物质质的的对对照照品品，对对三三唑唑仑仑中中有有关关物物质质的的检检查查采采用用GCGC峰峰面面积积归归一一化化法法计计算算有有关关物物质的含量。质的含量。GCGC法法供试品溶液：供试品溶液：精密称定本品适量，加三氯甲烷制成每精密称定本品适量，加三氯甲烷制成每 1ml 1ml中含有中含有2mg2mg的溶液。的溶液。色谱柱：色谱柱：玻璃柱（玻璃柱（3mm120cm3mm120cm）载体：载体：酸洗并经硅烷化处理的硅藻土（酸洗并经硅烷化处理的硅藻土（60608080目）目）固定液：固定液：三氟丙基甲基聚硅氧烷三氟丙基甲基聚硅氧烷例例GCGC法（续）法（续）涂布度：涂布度：3%3%检测器温度：检测器温度：275275柱温和进样器温度：柱温和进样器温度：240240进样量：进样量：4 4ll判断：判断：按峰面积计算，除溶剂峰外，所有杂质峰面积按峰面积计算，除溶剂峰外，所有杂质峰面积 的总和不得超过总峰面积的的总和不得超过总峰面积的1.5%1.5%例例优点：优点：不需杂质对照品，简便易行。不需杂质对照品，简便易行。缺点：缺点：检测波长处，各杂质和药物的吸收强度可能检测波长处，各杂质和药物的吸收强度可能 有差异，控制杂质峰面积百分率不一定就是有差异，控制杂质峰面积百分率不一定就是 杂质限量，准确度差。杂质限量，准确度差。第六节第六节 含量测定含量测定 1 1非水溶液滴定法非水溶液滴定法在在非非水水溶溶剂剂中中进进行行的的酸酸碱碱滴滴定定测测定定法法。主主要要用用来来测测定定有有机机碱碱及及氢氢卤卤酸酸盐盐、磷磷酸酸盐盐、硫硫酸酸盐、有机弱酸以及有机酸碱金属盐类含量。盐、有机弱酸以及有机酸碱金属盐类含量。非水溶剂的种类：非水溶剂的种类：1.酸酸性性溶溶剂剂：有有机机弱弱碱碱在在酸酸性性溶溶剂剂中中可可显显著著 的的增增强强其其相相对对碱碱度度，最最常常用用的的 酸性溶剂为冰醋酸。酸性溶剂为冰醋酸。2.碱碱性性溶溶剂剂：有有机机弱弱酸酸在在碱碱性性溶溶剂剂中中可可显显著著 的的增增强强其其相相对对酸酸度度，最最常常用用的的 酸性溶剂为二甲基甲酰胺。酸性溶剂为二甲基甲酰胺。3.3.两两性性溶溶剂剂：兼兼有有酸酸、碱碱两两种种性性能能、最最常常用用 的为甲醇。的为甲醇。4.4.惰惰性性溶溶剂剂：没没有有酸酸碱碱性性，如如甲甲苯苯、三三氯氯甲甲 烷、丙酮烷、丙酮本本类类药药物物多多为为弱弱碱碱性性，在在水水溶溶液液中中用用标标准准酸酸碱碱直直接接滴滴定定没没有有明明显显的的突突跃跃。在在非非水水酸酸性性溶溶剂剂中中。只只要要在在水水溶溶液液中中的的p pK Kb b值值小小于于1010，都都能能被被冰冰醋醋酸酸均均化化到到醋醋酸酸根根的的水水平，相对碱性显著增强。可用高氯酸非水溶液滴定。平，相对碱性显著增强。可用高氯酸非水溶液滴定。基本原理：基本原理：尼尼可可刹刹米米、地地西西泮泮和和氯氯氮氮卓卓等等游游离离碱碱直直接与高氯酸反应。接与高氯酸反应。盐盐酸酸环环丙丙沙沙星星、氢氢溴溴酸酸东东莨莨菪菪碱碱和和硫硫酸酸奎奎宁宁等等盐盐类类药药物物的的高高氯氯酸酸滴滴定定过过程程是是一一个个强强酸置换有机弱酸的过程。酸置换有机弱酸的过程。BH+A-+HClO4BH+ClO4-+HA一般方法：一般方法：精精密密称称取取供供试试品品，加加冰冰醋醋酸酸101030ml30ml溶溶解解，用用高高氯氯酸酸滴滴定定液液（0.1mol/L0.1mol/L）滴滴定定，电电位法指示终点。位法指示终点。问题讨论：问题讨论：a.a.适用范围：适用范围：主主要要用用于于p pK Kb b88的的有有机机弱弱碱碱性性药药物物及及其其盐盐类类的含量测定。的含量测定。l当当杂杂环环类类药药物物的的p pK Kb b为为8 81010时时，宜宜选选用用冰醋酸作为溶剂。冰醋酸作为溶剂。lp pK Kb b为为10101212时时，宜宜选选用用冰冰醋醋酸酸与与醋醋酐酐的的混合液作为溶剂。混合液作为溶剂。lp pK Kb b1212时，应用醋酐作为溶剂。时，应用醋酐作为溶剂。b.b.酸根的影响：酸根的影响：l有有机机弱弱碱碱盐盐类类药药物物非非水水溶溶液液滴滴定定时时被被置置换出的酸类，在醋酸介质中酸性如下：换出的酸类，在醋酸介质中酸性如下：高氯酸高氯酸 氢溴酸氢溴酸 硫酸硫酸 盐酸盐酸 硝酸硝酸 磷酸磷酸 有机酸有机酸l非非水水介介质质中中，高高氯氯酸酸的的酸酸性性最最强强，有有机机碱的盐均用其滴定。碱的盐均用其滴定。l若若在在滴滴定定过过程程中中被被置置换换出出来来的的HAHA，酸酸性性较较强强时时（如如氢氢卤卤酸酸），反反应应不不能能进进行行到到底底。可可加加醋醋酸酸汞汞冰冰醋醋酸酸溶溶液液，使使其其生生成成难离解的卤化汞，以消除干扰。难离解的卤化汞，以消除干扰。HX+Hg(AC)22HAC+HgX2l供供试试品品为为磷磷酸酸盐盐，可可以以直直接接滴滴定定；硫硫酸酸盐盐也也可可直直接接滴滴定定，但但滴滴定定至至硫硫酸酸氢氢盐盐为为止。止。l供供试试品品为为硝硝酸酸盐盐，应应以以电电位位法法指指示示终终点点（硝酸可使指示剂褪色）（硝酸可使指示剂褪色）。c.c.滴定剂的稳定性：滴定剂的稳定性：l溶溶剂剂醋醋酸酸具具有有挥挥发发性性，温温度度和和贮贮存存条条件件影响滴定剂的浓度。影响滴定剂的浓度。lT T供供试试品品-T-T标标定定高高氯氯酸酸 1010，高高氯氯酸酸滴滴定液应重新标定。定液应重新标定。lT供供试试品品-T标标定定高高氯氯酸酸 10，高高氯氯酸酸滴滴定定液的浓度应加以校正。液的浓度应加以校正。N1=N0/1+0.0011(t1-t0)t t0 0：标定时高氯酸的温度；：标定时高氯酸的温度；t t1 1：滴定供试品时的温度：滴定供试品时的温度 N N0 0：t t0 0时高氯酸的浓度；时高氯酸的浓度；N N1 1：t t1 1时高氯酸的浓度时高氯酸的浓度0.00110.0011：冰醋酸的体积膨胀系数：冰醋酸的体积膨胀系数d.d.终点指示方法：终点指示方法：l常用电位滴定法和指示剂法。常用电位滴定法和指示剂法。l电电位位滴滴定定时时，玻玻璃璃电电极极为为指指示示电电极极，饱饱和甘汞电极为参比电极。和甘汞电极为参比电极。l常用指示剂：结晶紫、萘酚苯甲醇等。常用指示剂：结晶紫、萘酚苯甲醇等。e.其他干扰：其他干扰：l制制剂剂中中的的其其他他成成分分对对非非水水溶溶液液滴滴定定法法均均有干扰。有干扰。l对对于于杂杂环环碱碱性性药药物物，可可经经碱碱化化处处理理，有有机溶剂提取分离出游离碱后，再滴定。机溶剂提取分离出游离碱后，再滴定。2 2氧化还原滴定法氧化还原滴定法1.铈量法铈量法二二氢氢吡吡啶啶、吩吩噻噻嗪嗪类类药药物物在在酸酸性性介介质质中中对对硫硫酸铈具有还原性，可用铈量法测定含量。酸铈具有还原性，可用铈量法测定含量。二氢吡啶类药物二氢吡啶类药物原理：原理：硝苯地平硝苯地平+2Ce(SO4)2+6HClO4（或尼群地平）（或尼群地平）硝苯地平的氧化态硝苯地平的氧化态+2Ce(ClO4)3+4H2SO4（或尼群地平的氧化态）（或尼群地平的氧化态）指示剂：邻二氮菲指示剂：邻二氮菲微微过过量量的的CeCe4+4+将将指指示示液液中中的的FeFe2+2+氧氧化化成成FeFe3+3+，使使橙橙红红色色配配合合物物离离子子转转变变为为淡淡蓝蓝色色或或无无色的配合物离子，指示终点。色的配合物离子，指示终点。吩噻嗪类药物吩噻嗪类药物原理：原理：吩噻嗪类药物吩噻嗪类药物+Ce(SO4)2-e红色自由基红色自由基-e红色消退红色消退 指示剂：指示剂：自身颜色变化指示终点自身颜色变化指示终点铈量法优点铈量法优点l硫硫酸酸铈铈作作滴滴定定剂剂具具有有高高的的氧氧化化电电位位，且且为为一一价价还还原原；不不存存在在对对吩吩噻噻嗪嗪环环上上取取代代基基的的副反应，专属性高。副反应，专属性高。l在在适适宜宜的的酸酸度度条条件件下下，咖咖啡啡因因、苯苯丙丙胺胺、可待因、巴比妥酸衍生物等均不干扰。可待因、巴比妥酸衍生物等均不干扰。l本法既可用于原料，亦可用于片剂的测定本法既可用于原料，亦可用于片剂的测定 2.溴酸钾法溴酸钾法异异烟烟肼肼具具有有较较强强的的还还原原性性，在在酸酸性性溶溶液液中中可可以用溴酸