脂质体与泡囊制备技术.ppt
第六节第六节 脂质体与泡囊制备技术脂质体与泡囊制备技术 p420昆明医学院药学院陈彤副教授一、脂质体一、脂质体概述概述制备方法制备方法质量评价分类质量评价分类脂质体的概述脂质体的概述脂质体的组成和结构脂质体的组成和结构脂质体的性质脂质体的性质脂质体的作用特点脂质体的作用特点脂质体作为药物载体的应用脂质体作为药物载体的应用脂质体的组成与结构脂质体的组成与结构脂质体脂质体(liposomes):将磷脂分散在水中，自主装形成的具将磷脂分散在水中，自主装形成的具有具有双分子层膜结构的囊泡。有具有双分子层膜结构的囊泡。脂质体脂质体 磷脂磷脂 附加剂附加剂卵磷脂卵磷脂磷脂酰乙醇胺（磷脂酰乙醇胺（PE）二硬脂酰磷脂酰胆碱二硬脂酰磷脂酰胆碱（DSPC）二棕榈酰磷脂酰胆碱二棕榈酰磷脂酰胆碱（DPPC）等等胆固醇胆固醇脂质体的简介脂质体的简介-脂质体的分类脂质体的分类小单室脂质体小单室脂质体大单室脂质体大单室脂质体大单室脂质体大单室脂质体多室脂质体多室脂质体15um100nm1000nm2080nmDOXIL阿霉素脂质体阿霉素脂质体脂质体的理化性质脂质体的理化性质（1）相变温度：）相变温度：当温度升高时，当温度升高时，脂质体双分子层中酰基侧脂质体双分子层中酰基侧链可从有序排列变为无序排列，脂膜由链可从有序排列变为无序排列，脂膜由胶晶态变为液晶态，胶晶态变为液晶态，膜流动性增加，这膜流动性增加，这种转变时的温度称为种转变时的温度称为相变温度相变温度(phase transition temperature)（2）电性）电性 （-）磷脂酸、磷脂酰丝氨酸磷脂酸、磷脂酰丝氨酸 （+）磷脂酰十八胺）磷脂酰十八胺 （0）磷脂酰胆碱）磷脂酰胆碱 对包封率、稳定性、靶器官分布及对靶细对包封率、稳定性、靶器官分布及对靶细胞的作用均有影响胞的作用均有影响脂质体的作用特点脂质体的作用特点提高药物稳定性提高药物稳定性降低药物毒性降低药物毒性（教师科研）（教师科研）长效作用（缓释性）长效作用（缓释性）靶向性靶向性细胞亲和性，组织相容性细胞亲和性，组织相容性脂质体靶向原理脂质体靶向原理EPR效应效应：增强透过和滞留效应（增强透过和滞留效应（the enhanced permeability and retention effect，EPR）脂质体作为药物载体的应用脂质体作为药物载体的应用抗肿瘤药物抗寄生虫药物抗菌药物各种酶解毒剂免疫激活剂抗结核药物生物工程技术药物二、脂质体的制备方法二、脂质体的制备方法薄膜分散法（薄膜分散法（film dispersion method）逆相蒸发法（逆相蒸发法（reverse evaporation）冷冻干燥法（冷冻干燥法（freeze-drying）注入法（注入法（injection）超声波分散法（超声波分散法（ultrasonic dispersion）pH梯度法（梯度法（pH-gradient）前提脂质体法（前提脂质体法（preliposomes）薄膜蒸发法薄膜蒸发法 与有机溶剂共溶与有机溶剂共溶减压蒸发形成薄膜减压蒸发形成薄膜 水合水合粗混悬液粗混悬液高压匀化或挤出过滤高压匀化或挤出过滤冷冻干燥冷冻干燥 逆相蒸发法逆相蒸发法 油水两相形成油水两相形成W/O乳状液乳状液减压蒸发减压蒸发 形成胶态形成胶态水合水合高压匀化或挤出过滤高压匀化或挤出过滤 离心滤过离心滤过冷冻干燥冷冻干燥 冷冻干燥法冷冻干燥法 分散于缓冲盐溶液中分散于缓冲盐溶液中超声波处理超声波处理冷冻干燥冷冻干燥分散分散到含药的水性介质到含药的水性介质注入法注入法 与有机溶剂共溶与有机溶剂共溶注入磷注入磷酸盐缓冲液酸盐缓冲液除尽乙醚除尽乙醚超声波分散法超声波分散法 药物溶于磷酸盐缓冲药物溶于磷酸盐缓冲液液加至有机溶液中加至有机溶液中除去有机除去有机溶剂溶剂超声波处理超声波处理分离脂质体分离脂质体混悬于磷酸盐缓冲液混悬于磷酸盐缓冲液pH梯度法（主动载药梯度法（主动载药）（教师科研）（教师科研）前提脂质体法前提脂质体法 颗粒状物或粉状颗粒状物或粉状物物加水即可加水即可两性霉素两性霉素B脂质体处方脂质体处方每1000支量两性霉素两性霉素B 50gHSPC 213g胆固醇胆固醇 52gDSPG 34g生育酚生育酚 0.64g蔗糖蔗糖 900gC4H4NaO4.6H2O 27g两性霉素两性霉素B脂质体的制备脂质体的制备制法制法 将两性霉素将两性霉素B、HSPC、胆固醇、胆固醇、DSPG和生育酚用适当溶剂溶解，减压除和生育酚用适当溶剂溶解，减压除去有机溶剂，备用：去有机溶剂，备用：蔗糖、蔗糖、C4H4NaO4.6H2O用注射用水溶用注射用水溶解解,得溶液得溶液,调调pH至至5,备用备用:将将“”加入加入“”中，水化，分散，中，水化，分散，所得液体过均质机或采用所得液体过均质机或采用“挤压器挤压器”制制备脂质体，控制粒度小于备脂质体，控制粒度小于100nm：无菌过滤，分装，冷冻干燥即得。无菌过滤，分装，冷冻干燥即得。阿霉素脂质体处方（DOXIL，楷来注射液）阿霉素 2.0mg/mLMPEG-DSPE 3.19mg/mLHSPC 9.58mg/mL胆固醇 3.19mg/mL硫酸铵 2mg/mL其它：盐酸、氢氧化钠、蔗糖pH约6.5三、脂质体的质量评价脂质体的质量评价形态与粒径及其分布形态与粒径及其分布包封率包封率渗漏率渗漏率磷脂的氧化程度磷脂的氧化程度(氧化指数的测定氧化指数的测定)有机溶剂残留量有机溶剂残留量脂质体制剂脂质体制剂体外释放度测定体外释放度测定体内分布实验体内分布实验形态与粒径及其分布形态与粒径及其分布光学显微镜光学显微镜(教师科研图片）教师科研图片）扫描电镜或透射电镜扫描电镜或透射电镜(小于小于2m)激光粒度仪激光粒度仪(Mastersizer 2000马尔马尔文激光粒度仪文激光粒度仪)(教师科研图片）教师科研图片）包封率包封率包封率包封率=(脂质体中包封的药量脂质体中包封的药量/脂质脂质体中包封的与未包封的总药量体中包封的与未包封的总药量)100%包封率常用的分离方法有包封率常用的分离方法有葡聚糖凝胶过滤法葡聚糖凝胶过滤法(分子筛法分子筛法)超滤膜过滤法超滤膜过滤法超速离心法超速离心法微型柱离心法微型柱离心法透析法透析法渗漏率渗漏率渗漏率渗漏率=(产品贮藏后渗漏到介质中产品贮藏后渗漏到介质中的药量的药量/产品贮藏前包封的药量产品贮藏前包封的药量)100%磷脂的氧化程度磷脂的氧化程度(氧化指数的氧化指数的测定测定)氧化指数氧化指数=A233nm/A215nm小于小于0.2有机溶剂残留量有机溶剂残留量脂质体制剂脂质体制剂 应符合中国药典有关制剂应符合中国药典有关制剂通则的规定通则的规定四、泡囊（类脂质体）四、泡囊（类脂质体）泡囊泡囊(niosomes)：又称类脂质体，也有：又称类脂质体，也有人称囊泡。泡囊由非离子型表面活性剂人称囊泡。泡囊由非离子型表面活性剂组成，也有类似脂质体封闭的双层结构，组成，也有类似脂质体封闭的双层结构，但比较不易泄漏，也比脂质体稳定。但比较不易泄漏，也比脂质体稳定。泡囊也可由两亲性嵌段共聚物在溶液中泡囊也可由两亲性嵌段共聚物在溶液中自主装形成，称为聚合物泡囊自主装形成，称为聚合物泡囊（polymericniosomes）。聚合物泡囊）。聚合物泡囊较一般泡囊更为稳定。膜是单分子层。较一般泡囊更为稳定。膜是单分子层。特点特点靶向性靶向性缓释性缓释性降低药物毒性降低药物毒性提高药物稳定性提高药物稳定性比脂质体稳定，不易泄露比脂质体稳定，不易泄露粒径较小的泡囊（粒径较小的泡囊（50m），可延长在体内），可延长在体内的时间，并具有增强透过和滞留效应（的时间，并具有增强透过和滞留效应（the enhanced permeability and retention effect，EPR）不易被肾排泄不易被肾排泄材料与制备方法材料与制备方法材料材料膜材料膜材料非离子型表面活性剂非离子型表面活性剂单（双）烷基聚丙三醇醚类单（双）烷基聚丙三醇醚类Span类类Tween类类Brij类类合成的双亲性嵌段不共聚物合成的双亲性嵌段不共聚物其它材料其它材料胆固醇胆固醇提高膜稳定性、降低药物的通透性、提提高膜稳定性、降低药物的通透性、提高包封率与载药量高包封率与载药量磷酸二鲸蜡酯磷酸二鲸蜡酯提高泡囊荷电性、提高膜稳定性、增大提高泡囊荷电性、提高膜稳定性、增大泡囊双分子层的间距、增大泡囊的容积、泡囊双分子层的间距、增大泡囊的容积、增大粒径与包封率增大粒径与包封率制备方法制备方法薄膜分散法（薄膜分散法（film dispersion method）逆相蒸发法（逆相蒸发法（reverse evaporation）前体泡囊法前体泡囊法思考题简述脂质体的概念、特点与用途。简述制备脂质体的常用的材料。简述热敏性脂质体含义与用途。
