细胞生物学:第4章-1细胞膜与表面.ppt
第四章第四章 细胞胞质膜与膜与细胞表面胞表面Plasma Membrane and Cell Surface 1 OUTLINEOUTLINE细胞胞质膜膜细胞表面特化胞表面特化结构构2第一第一节 细胞胞质膜膜 细胞质膜细胞质膜(plasma membrane)(plasma membrane)或细胞膜或细胞膜(cell membrane)(cell membrane):生物膜生物膜(biomembrane)(biomembrane):围绕在细胞最外层的由脂质和蛋白质组成的生物膜围绕在细胞最外层的由脂质和蛋白质组成的生物膜细胞的所有膜结构的统称,包括细胞膜和细胞内膜。细胞的所有膜结构的统称,包括细胞膜和细胞内膜。3细胞胞的的生生物物膜膜体体系系4一、生物膜的一、生物膜的结构模型构模型“三明治式三明治式”结构模型:构模型:“蛋白蛋白质-脂脂质-蛋白蛋白质”。Davision&Danielli Davision&Danielli(1935),(1935),Gorter&Grendel(1925)Gorter&Grendel(1925)单位膜模型位膜模型(unit membrane model(unit membrane model):):所有的生物膜所有的生物膜都是由都是由“蛋白蛋白质-脂脂质-蛋白蛋白质”的的单位膜构成。位膜构成。(19591959)流流动镶嵌模型嵌模型(fluid mosaic model)(fluid mosaic model):生物膜是由磷生物膜是由磷脂双分子脂双分子层和蛋白和蛋白质构成构成,膜蛋白和膜脂均可膜蛋白和膜脂均可侧向运向运动,膜蛋白是膜蛋白是镶嵌于脂双分子嵌于脂双分子层中,是不中,是不对称分布的。称分布的。和和G.NicolsonG.Nicolson(19721972)脂筏模型(脂筏模型(lipid rafts modellipid rafts model):):5Typical plasma Membrane 胆固醇胆固醇磷脂磷脂膜蛋白的非极性区膜蛋白的非极性区糖基链糖基链蛋白链蛋白链6二、生物膜的化学组成二、生物膜的化学组成(一)、膜脂(一)、膜脂(Membrane Lipids)膜脂、膜蛋白膜脂、膜蛋白磷脂磷脂(phospholipids)(phospholipids)动、植物、植物细胞膜上都有磷脂胞膜上都有磷脂,约占膜脂的占膜脂的50%50%以上以上;磷脂分子的磷脂分子的亲水端是磷酸基水端是磷酸基团,称,称为头部;部;磷磷脂脂分分子子的的疏疏水水端端是是两两条条长短短不不一一的的烃链,称称为尾尾部部,一一般般含有含有 14 142424个偶数碳原子;个偶数碳原子;其其中中一一烃链常常含含有有一一个个或或数数个个双双键,双双键的的存存在在造造成成这条条不不饱和和链有一定角度的扭有一定角度的扭转。7Phospholipids8糖脂糖脂(Glycolipid)(Glycolipid)糖脂普遍存在于原核和真核糖脂普遍存在于原核和真核细胞膜上胞膜上,含量含量约占膜脂的占膜脂的5%5%以下以下;最最简单的的糖糖脂脂是是半半乳乳糖糖脑苷苷脂脂,它它仅有有一一个个半半乳糖作乳糖作为极性极性头部部;变化化最最多多、最最复复杂的的是是神神经节苷苷脂脂,它它是是神神经原原质膜具特征性的成分。膜具特征性的成分。91、半乳糖 脑苷脂 2、神经节苷脂 3、唾液酸.10胆固醇胆固醇(Cholesterol)(Cholesterol)胆固醇存在于真核胆固醇存在于真核细胞膜中:胞膜中:动物物细胞膜胆固醇的含量胞膜胆固醇的含量较高高 大多数高等植物细胞膜中没有大多数高等植物细胞膜中没有胆固醇胆固醇 胆固醇分子包括三部分胆固醇分子包括三部分:极性的极性的头部:部:羟基基 非极性的非极性的类固醇固醇环结构构 一个非极性的碳一个非极性的碳氢尾部尾部 作用作用:调节膜的流膜的流动性,增加膜的性,增加膜的稳定性、降低水溶性定性、降低水溶性物物质的通透性等的通透性等11膜脂的运膜脂的运动 沿膜平面的侧向运动沿膜平面的侧向运动(基本运动方式)基本运动方式),其扩散其扩散系数为系数为1010-8-8cm/scm/s;脂分子围绕轴心的自旋运动;脂分子围绕轴心的自旋运动;脂分子尾部的摆动;脂分子尾部的摆动;双层脂分子之间的翻转运动,发生频率还不到脂分子侧向双层脂分子之间的翻转运动,发生频率还不到脂分子侧向交换频率的交换频率的10101010。但在内质网膜上但在内质网膜上,新合成的磷脂分子翻转新合成的磷脂分子翻转运动发生频率很高。运动发生频率很高。12脂脂质体体(Liposome)(Liposome)是是人人工工膜膜,是是根根据据磷磷脂脂分分子子可可在在水水相相中中形形成成稳定定的的脂脂双双层膜膜的的趋势而而制制备的的。脂脂质体的形成体的形成过程程13脂质体脂质体14 脂脂质体的体的应用用 研究膜脂与膜蛋白及其生物学性质;研究膜脂与膜蛋白及其生物学性质;脂质体中裹入脂质体中裹入DNADNA可用于基因转移;可用于基因转移;在临床治疗中在临床治疗中,脂质体作为药物或酶等载体脂质体作为药物或酶等载体15(二)、膜蛋白(二)、膜蛋白(Membrane ProteinsMembrane Proteins)生物膜的特定功能主要是由蛋白生物膜的特定功能主要是由蛋白质完成的完成的;膜蛋白膜蛋白约占膜的占膜的40%40%50%,50%,有有5050余种膜蛋白余种膜蛋白;在在不不同同细胞胞中中膜膜蛋蛋白白的的种种类及及含含量量有有很很大大差差异异。有的含量不到有的含量不到25%,25%,有的达到有的达到75%;75%;一一般般来来说,功功能能越越复复杂的的膜膜,其其上上的的蛋蛋白白质含含量量越多。越多。16整合蛋白整合蛋白(Integral Proteins)膜蛋白的种膜蛋白的种类整合蛋白、膜周整合蛋白、膜周边蛋白蛋白 部分或全部部分或全部镶嵌嵌在在细胞膜中或内外两胞膜中或内外两侧的蛋白的蛋白质;整合蛋白整合蛋白约占膜蛋白的占膜蛋白的70-80%。17Integral Proteins-+18内在膜蛋白与膜脂内在膜蛋白与膜脂结合的方式合的方式 跨膜结构域与脂双分子层的疏水核心相互作用跨膜结构域与脂双分子层的疏水核心相互作用 跨膜结构域两端携跨膜结构域两端携带带正正电荷电荷的氨基酸残基与磷脂分子带的氨基酸残基与磷脂分子带 负电的极性头形成离子键,或带负电的极性头形成离子键,或带负负电的氨基酸残基通过电的氨基酸残基通过 Ca2+Ca2+、Mg2+Mg2+等阳离子与带负电的磷脂极性头相互作用。等阳离子与带负电的磷脂极性头相互作用。某些膜蛋白在细胞质基质一侧的某些膜蛋白在细胞质基质一侧的半胱氨酸残基半胱氨酸残基上共价结上共价结 合脂肪酸分子合脂肪酸分子,插入脂双层之间插入脂双层之间,进一步加强膜蛋白与脂进一步加强膜蛋白与脂 双层的结合力双层的结合力,还有少数蛋白与糖脂共价结合。还有少数蛋白与糖脂共价结合。19膜周膜周边蛋白蛋白Peripheral ProteinsPeripheral Proteins20 靠靠离离子子键或或其其它它较弱弱的的键与与膜膜表表面面的的蛋蛋白白质分子或脂分子分子或脂分子结合合;外周蛋白外周蛋白为水溶性水溶性;占占膜膜蛋蛋白白总量量的的20%20%30%,30%,在在红细胞胞中中占占50%,50%,如如红细胞胞的的血血影影蛋蛋白白和和锚定定蛋蛋白白都都是外周蛋白是外周蛋白。膜周膜周边蛋白蛋白(peripheral proteins)(peripheral proteins)21膜蛋白的提取方法膜蛋白的提取方法根根据据膜膜的的组组成成特特性性,可可用用去去污污剂剂分分离离小小的的跨跨膜膜蛋蛋白白,这是膜蛋白研究的重要手段:这是膜蛋白研究的重要手段:去去污污剂剂(detergent)(detergent)是是一一种种一一端端亲亲水水一一端端疏疏水水的的两性小分子,可以使膜崩解两性小分子,可以使膜崩解 当当它它们们与与膜膜蛋蛋白白作作用用时时,其其疏疏水水端端与与膜膜蛋蛋白白的的疏疏水水区区域域相相结结合合,极极性性端端指指向向水水中中,形形成成溶溶于于水水的的去去垢垢剂剂-膜膜蛋蛋白白复复合合物物,从从而而使使膜膜蛋蛋白白在在水水中中溶溶解解而而达达到到分分离离的目的的目的 常用的有常用的有SDS,Triton X-100 当当去去除除去去垢垢剂剂并并加加入入磷磷脂脂后后,可可使使膜膜蛋蛋白白复复性性并并恢复功能恢复功能22三三.膜的基本特征与功能膜的基本特征与功能 膜的流动性膜的流动性 膜脂流动的影响因素膜脂流动的影响因素 内因:脂肪酸链、胆固醇内因:脂肪酸链、胆固醇 外因:温度外因:温度 膜蛋白流动的影响因素膜蛋白流动的影响因素 内因:内因:膜下细胞骨架膜下细胞骨架 外因:温度外因:温度 荧光漂白恢复技术荧光漂白恢复技术 膜的不对称性膜的不对称性细胞胞质膜的功能膜的功能23膜蛋白的运动膜蛋白的运动24 FUNCTIONS OF MEMBRANE PROTEINS25第二第二节 膜膜 骨骨 架架特殊结构:膜下的膜骨架系统,膜表面的其它特化结构:特殊结构:膜下的膜骨架系统,膜表面的其它特化结构:鞭毛、纤毛、微绒毛、细胞变形足等。鞭毛、纤毛、微绒毛、细胞变形足等。膜骨架的概念膜骨架的概念 指细胞质膜下与膜蛋白相连的由纤维蛋白组成的网指细胞质膜下与膜蛋白相连的由纤维蛋白组成的网架结构架结构,它参与维持细胞质膜的形状并协助质膜完成多它参与维持细胞质膜的形状并协助质膜完成多种生理功能。种生理功能。人们对膜骨架的认识,大多来自于对红细胞人们对膜骨架的认识,大多来自于对红细胞的研究。的研究。26电镜下的下的红细胞胞27红细胞胞 Red Blood Cells Red Blood Cells是是结构最构最简单的的细胞胞:成熟的成熟的红细胞没有胞没有细胞器;胞器;质膜是膜是红细胞惟一的膜胞惟一的膜结构;构;红细胞胞质膜易于提膜易于提纯和分离;和分离;红细胞的基本性胞的基本性质 成成熟熟的的红细胞胞呈呈双双面面凹凹或或单面面凹凹陷陷的的盘状状,直径直径约为7m,7m,厚度厚度1.7m,1.7m,表面表面积为145m2145m2;红细胞胞的的主主要要功功能能是是携携带O O2 2和和运运输COCO2 2,红细胞的寿命胞的寿命约为120120天,一生中要行走天,一生中要行走500,000500,000米。米。28红细胞胞质膜蛋白及膜骨架膜蛋白及膜骨架问题提出的依据提出的依据 行程行程500,000500,000米米 要多次穿要多次穿过小于自身直径一半的微小通道小于自身直径一半的微小通道;要在脾要在脾脏内内经受少氧、低受少氧、低pHpH值的不利条件的不利条件;又要又要经过心心脏内瓣膜内瓣膜涡流冲流冲击,但始,但始终保保持持结构的完整。构的完整。29红细胞血影(胞血影(Erythrocyte GhostErythrocyte Ghost)30红细胞膜蛋胞膜蛋白成分:白成分:大大约有有1515种主要的蛋白种主要的蛋白带,主要蛋白主要蛋白:血影蛋白血影蛋白(Spectrin)(Spectrin)、锚蛋白(蛋白(ankyrinankyrin)、)、肌肌动蛋白(蛋白(actinactin)、)、带带4.1蛋白蛋白(Band4.1protein)、带3 3蛋白蛋白(Band 3 protein)(Band 3 protein)、血型糖蛋白血型糖蛋白(Glycophorin)(Glycophorin)31Erythrocyte Membrane Skeleton主要膜骨架主要膜骨架蛋白蛋白:血影蛋白血影蛋白锚蛋白蛋白肌肌动蛋白蛋白带4.14.1蛋白蛋白(都是外周蛋都是外周蛋白白)32总结:膜的特征:膜的特征:细胞膜的功能:胞膜的功能:脂质双分子层,蛋白质镶嵌其中;不对称性、脂质双分子层,蛋白质镶嵌其中;不对称性、流动性流动性 为细胞的生命活动提供相对稳定的内环境为细胞的生命活动提供相对稳定的内环境;选择性的物质运输选择性的物质运输,包括代谢底物的输入与代谢包括代谢底物的输入与代谢 产物的排除产物的排除,其中伴随着能量的传递其中伴随着能量的传递;提供细胞识别位点提供细胞识别位点,并完成细胞内外信息跨膜传递并完成细胞内外信息跨膜传递;为多种酶提供结合位点为多种酶提供结合位点,使酶促反应高效而有序地使酶促反应高效而有序地进行进行;介导细胞与细胞、细胞与基质之间的连接介导细胞与细胞、细胞与基质之间的连接;质膜参与形成具有不同功能的细胞表面特化结构。质膜参与形成具有不同功能的细胞表面特化结构。膜的成分:膜的成分:33