实验四 放线菌和真菌形态的观察.ppt

实实 验验 四四放线菌和真菌形态的放线菌和真菌形态的观察观察放线菌和真菌形态的观察放线菌和真菌形态的观察目的要求目的要求实验材料实验材料实验程序实验程序思考题思考题目的要求目的要求学习观察放线菌和真菌形态的基本方法学习观察放线菌和真菌形态的基本方法加深理解放线菌和真菌的形态特征加深理解放线菌和真菌的形态特征实验材料实验材料放线菌和真菌培养物放线菌和真菌培养物 1.放线菌培养物：青色链霉菌（放线菌培养物：青色链霉菌（Streptomyces glaucus）或或“5406”产生菌（产生菌（St.microflacus）四天培养物。四天培养物。2.啤酒酵母啤酒酵母（Saccharomyces cervisiae）24至至28h液体培养液体培养物或斜面培养物。物或斜面培养物。3.黄曲霉（黄曲霉（Aspergillus flavus）4d平面培养物。平面培养物。4.各种真菌示范片。各种真菌示范片。显微镜、载玻片、接种环、解剖针、解剖刀、酒显微镜、载玻片、接种环、解剖针、解剖刀、酒精灯、镊子等。精灯、镊子等。乳酚油、碘液、酒精、蒸馏水等。乳酚油、碘液、酒精、蒸馏水等。实验程序实验程序观察放线菌链霉菌的形态观察放线菌链霉菌的形态观察酵母菌的形态观察酵母菌的形态观察霉菌的形态观察霉菌的形态看录象看录象实验程序实验程序（观察放线菌链霉菌的形态）（观察放线菌链霉菌的形态）个体形态直接观察法：个体形态直接观察法：观察菌丝和孢子丝自然生长的性状，其中包括气生观察菌丝和孢子丝自然生长的性状，其中包括气生菌丝（较粗），基内菌丝（较细）和孢子丝的形状，菌丝（较粗），基内菌丝（较细）和孢子丝的形状，如分枝状况及孢子丝的卷曲等，并绘图说明。如分枝状况及孢子丝的卷曲等，并绘图说明。印片染色法：印片染色法：印片印片 微热固定微热固定 石炭酸复红染色石炭酸复红染色1min 水洗水洗 晾干晾干 镜检。（示范片）镜检。（示范片）实验程序实验程序（观察放线菌链霉菌的形态）（观察放线菌链霉菌的形态）插片染色法：插片染色法：280C插片培养插片培养46d，轻轻，轻轻取出盖玻片，进行固定、染取出盖玻片，进行固定、染色、水洗、晾干、镜检。观色、水洗、晾干、镜检。观察方法同察方法同“直接观察法直接观察法”，观察基内菌丝、气生菌丝及观察基内菌丝、气生菌丝及孢子丝的卷曲状况，及分生孢子丝的卷曲状况，及分生孢子的形状，绘图加以说明孢子的形状，绘图加以说明（本实验采用青色链霉菌接（本实验采用青色链霉菌接种后观察）。种后观察）。实验程序实验程序（观察酵母菌的形态）（观察酵母菌的形态）观察酵母菌形态和无性繁殖：观察酵母菌形态和无性繁殖：用高倍镜观察啤酒酵母的形态和出芽繁殖。用高倍镜观察啤酒酵母的形态和出芽繁殖。酵母肝糖染色法：酵母肝糖染色法：在洁净的载玻片上滴一小滴路哥氏碘液（在洁净的载玻片上滴一小滴路哥氏碘液（Lugol），），取一环酵取一环酵母菌液与碘液混匀，盖上盖玻片，镜检，菌体呈淡黄色，肝母菌液与碘液混匀，盖上盖玻片，镜检，菌体呈淡黄色，肝糖粒呈红褐色。在高倍镜下观察菌体形态、出芽、芽簇、肝糖粒呈红褐色。在高倍镜下观察菌体形态、出芽、芽簇、肝糖粒，并绘图。糖粒，并绘图。酵母脂肪粒染色法：酵母脂肪粒染色法：在洁净的载玻片上加一滴，取一环啤酒酵母与福尔马林混匀，在洁净的载玻片上加一滴，取一环啤酒酵母与福尔马林混匀，静止静止5min，加加1滴美兰染色液，滴美兰染色液，10min后再加一滴苏丹后再加一滴苏丹染色染色液，盖上盖玻片，镜检。原生质呈兰色，脂肪粒呈粉红色，液，盖上盖玻片，镜检。原生质呈兰色，脂肪粒呈粉红色，而液泡无色。（示范片）而液泡无色。（示范片）实验程序实验程序（观察霉菌的形态）（观察霉菌的形态）观察黄曲霉菌丝分隔情况和分生孢子着生情况（着重辨认分观察黄曲霉菌丝分隔情况和分生孢子着生情况（着重辨认分生孢子梗、顶囊、小梗和分生孢子）：在洁净载玻片中央加生孢子梗、顶囊、小梗和分生孢子）：在洁净载玻片中央加一滴酒精，用接剖针挑取黄曲霉培养物少许放入其中，再加一滴酒精，用接剖针挑取黄曲霉培养物少许放入其中，再加入酒精和蒸馏水各一滴（重复一次），使分生孢子分散，便入酒精和蒸馏水各一滴（重复一次），使分生孢子分散，便于观察。倾去酒精和蒸馏水，加一滴乳酚油（防止细胞变形于观察。倾去酒精和蒸馏水，加一滴乳酚油（防止细胞变形和气泡产生，又可防止干燥以保持较长时间），盖上盖玻片，和气泡产生，又可防止干燥以保持较长时间），盖上盖玻片，镜检、观察、绘图。镜检、观察、绘图。用同样方法制取青霉（用同样方法制取青霉（Penicillium sp.）封片，示范片，观察封片，示范片，观察菌丝有无分隔和分生孢子梗、小梗、及分生孢子排列方式，菌丝有无分隔和分生孢子梗、小梗、及分生孢子排列方式，并绘图。并绘图。用同样方法制取镰刀霉（用同样方法制取镰刀霉（Fusarium sp.）封片，示范片，观封片，示范片，观察孢子丝和着生部位的构造，并绘图。察孢子丝和着生部位的构造，并绘图。实验程序实验程序（观察霉菌的形态）（观察霉菌的形态）取黑曲霉（取黑曲霉（Rhizopus niger）5d平板培养物，用其皿盖，平板培养物，用其皿盖，在低倍镜下观察菌丝体形态（假根、匍匐菌丝、孢囊在低倍镜下观察菌丝体形态（假根、匍匐菌丝、孢囊梗及孢囊等）并绘图。梗及孢囊等）并绘图。更好的是采用载片培养法，可制成永久的封片，更便更好的是采用载片培养法，可制成永久的封片，更便于保存。于保存。做蘑菇切片。观察担子菌担子着生情况及其孢子的形做蘑菇切片。观察担子菌担子着生情况及其孢子的形态等，示范片，并绘图。态等，示范片，并绘图。观察梨头霉（观察梨头霉（Absidia sp.）或根霉的接合孢子，示范或根霉的接合孢子，示范片，并绘图。片，并绘图。看录象看录象真菌的有性孢子和无性孢子及其结构真菌的有性孢子和无性孢子及其结构实验室平菇的栽培实验室平菇的栽培思考题思考题在用放线菌菌苔直接观察气生菌丝和孢子丝的在用放线菌菌苔直接观察气生菌丝和孢子丝的形态时，要注意些什么？形态时，要注意些什么？在制取酵母菌的水浸片时，要注意哪些要点？在制取酵母菌的水浸片时，要注意哪些要点？制取酵母水浸片时为什么不用水，而用乳酚油制取酵母水浸片时为什么不用水，而用乳酚油？实验四实验四结结 束束