中国药典三部标准(2005年版)正文.doc

中国药典三部标准(2005年版)正文101种 A群脑膜炎球菌多糖疫苗拼音名： A Qun Naomoyanqiujun Duotang Yimiao英文名：Group A MeningococcaI Polysaccharide Vaccine书页号：2005年版三部-34 本品系用A群脑膜炎奈瑟菌培养液，经提取获得的荚膜多糖抗原，纯化后加入适宜稳定剂后冻干制成。用于预防A群脑膜炎球菌引起的流行性脑脊髓膜炎。 1 基本要求 生产和检定用设施、原料及辅料、水、器具、动物等应符合“凡例”的有关要求。 2 制造 2.1 菌种 生产用菌种应符合“生物制品生产检定用菌毒种管理规程”的有关规定。 2.1.1 菌种名称及来源 生产用菌种为A群脑膜炎奈瑟菌CMCC 29201(A4)菌株。 2.1.2 种子批的建立 应符合“生物制品生产检定用菌毒种管理规程”的规定。 2.1.3 种子批的传代 主种子批启开后传代次数不得超过5代，工作种子批启开后至接种发酵罐培养传代次数不得超过5代。 2.1.4 种子批菌种的检定 2.1.4.1 培养特性及染色镜检 菌种接种于含10%羊血普通琼脂培养基，脑膜炎球菌在25%不生长。于3537%二氧化碳的环境中培养1620小时，长出光滑、湿润、灰白色的菌落，菌苔易取下，在生理氯化钠溶液中呈现均匀混悬液。染色镜检应为革兰阴性双球菌、单球菌。 2.1.4.2 生化反应 发酵葡萄糖、麦芽糖，产酸不产气；不发酵乳糖、甘露醇、果糖及蔗糖(附录V)。 2.1.4.3 血清凝集试验 取经3537培养1 620小时的菌苔，混悬于含0.5%甲醛的生理氯化钠溶液中，或56加热30分钟杀菌以后，使每1ml含菌1.o×1092.o×109，与同群参考血清做定量凝集反应，置353过夜，次日再置室温2小时观察结果，以肉眼可见清晰凝集现象(+)之血清最高稀释度为凝集反应效价，必须达到血清原效价之半。 2.1.5 种子批的保存 原始种子批和主种子批应冻干保存于28。 2.2原液 2.2.1 生产用种子 启开工作种子批菌种，经适当传代，经检定合格后， 接种于改良半综合培养基或其他适宜培养基，制备数量适宜的生产用种子。 2.2.2 生产用培养基 采用改良半综合培养基或经批准的其他适宜培养基。培养基不应含有与十六烷基三甲基溴化铵能形成沉淀的成分。 2.2.3 培养 采用培养罐液体培养。在培养过程中取样进行纯菌检查，涂片做革兰染色镜检，如发现污染杂菌，应废弃。 2.2.4 收获及杀菌 于对数生长期的后期或静止期的前期中止培养，取样进行菌液浓度测定及纯菌检查，合格后在收获的培养液中加入甲醛溶液杀菌，或采用加热方法杀菌。以确保杀菌完全又不损伤其多糖抗原为宜。 2.2.5 纯化 2.2.5.1 去核酸 将已杀菌的培养液(单批或多批混合)离心后收集上清液，加入十六烷基三甲基溴化铵，充分混匀，形成沉淀；离心后的沉淀物加入适量氯化钙溶液，其最终浓度为1mol/L，使多糖与十六烷基三甲基溴化铵解离；加入乙醇至最终浓度为25%，28静置13小时或过夜，离心收集澄清的上清液。 2.2.5.2 沉淀多糖 于上述上清液中加入冷乙醇至最终浓度为80%，充分振摇。离心收集沉淀，用无水乙醇及丙酮各洗2次以上，沉淀物即为多糖粗制品。应保存在20以下，待纯化。 2.2.5.3 多糖纯化 将多糖粗制品溶解于1/10饱和中性醋酸钠溶液中，使其浓度达1020mg/ml；按1：2容量用冷酚(100g结晶酚溶于40ml的1/10饱和醋酸钠溶液)提取数次，离心收集上清液，并用0.1mol/L氯化钙溶液或其他适宜溶液透析，加入乙醇至终浓度为75%80%；离心收集的沉淀物用无水乙醇及丙酮各洗2次以上，干燥后用灭菌注射用水溶解沉淀物，即为纯化多糖原液。提取过程应尽量在15以下进行。 2.2.6 原液检定 纯化多糖原液除菌过滤后，取样按3.1项进行。 2.2.7 保存及有效期 于-20以下保存，自多糖粗制品制造之日起有效期为5年。 2.3 半成品 2.3.1 配制 半成品可由单批或多批多糖原液合并后，用无菌无热原乳糖和灭菌注射用水稀释制成。每1次人用剂量含多糖应不低于30g，乳糖2.53.0mg。 2.3.2 半成品检定 按3.2项进行。 2.4 成品 2.4.1 分批 应符合“生物制品分批规程”规定。 2.4.2 分装及冻干 应符合“生物制品分装和冻干规程”规定。冻干过程中制品温度应不高于30，真空或充氮封口。 2.4.3 规格 每瓶含多糖150g、300g。每1次人用剂量含多糖应不低于30g。 2.4.4 包装 应符合“生物制品包装规程”规定。 3 检定 3.1 原液检定 3.1.1 鉴别试验 采用免疫双扩散法(附录C)，本品与A群脑膜炎球菌抗体应形成明显沉淀线。 3.1.2 化学检定 3.1.2.1 固体总量 依法测定(附录M)。 3.1.2.2 蛋白质含量 应小于10mg/g(附录B第二法)。 3.1.2.3 核酸含量 应小于10mg/g，核酸在波长260nm处的吸收系数(E1% 1cm)为200(附录A)。 3.1.2.4 O-乙酰基含量 应不低于2mmol/g(附录F)。 3.1.2.5 磷含量 应不低于80mg/g(附录A)。 3.1.2.6 多糖分子大小测定 多糖分子的KD值应不高于O.40，KD值小于O.5的洗脱液多糖回收率应大于65%(附录G)。 3.1.3 无菌检查 依法检查(附录A)，应符合规定。 3.1.4 细菌内毒素检查 应不高于100EU/g(附录E凝胶限量试验)；也可采用热原检查法(附录D)检查，应符合规定，注射剂量按家兔体重每lkg注射O.025g多糖。 3.2 半成品检定 无菌检查 依法检查(附录A)，应符合规定。 3.3 成品检定 除水分测定外，按制品标示量加入灭菌PBS复溶后进行其余各项检定。 3.3.1 鉴别试验 采用免疫双扩散法(附录C)，本品应与A群脑膜炎球菌抗体形成明显沉淀线。 3.3.2 外观 应为白色疏松体，按标示量加入PBS应迅速复溶为澄明液体，无异物。 3.3.3 化学检定 3.3.3.1 水分 应不高于3.O%(附录D)。 3.3.3.2 多糖含量 每1次人用剂量多糖含量应不低于 30g。根据WHO规程规定的计算公式(多糖含量：磷含量为1000：75)，先测定磷含量应不低于2.25g(附录A)，再计算出多糖含量。 3.3.3.3 多糖分子大小测定 每5批疫苗至少抽1批检查多糖分子大小。KD值应不高于0.40，KD值小于0.5的洗脱液多糖回收率应大于65%(附录G)。 3.3.4 无菌检查 依法检查(附录A)，应符合规定。 3.3.5 异常毒性检查 依法检查(附录F)，应符合规定。每只豚鼠注射剂量为500g/m1，每只小鼠注射剂量为100g/0.5ml。 3.3.6 热原检查 依法检查(附录D)，应符合规定。注射剂量按家兔体重每lkg注射O.025g多糖。 3.4 稀释剂检定 稀释剂为无菌无热原PBS。 3.4.1 pH值 应为6.87.2(附录V A)。 3.4.2 无菌检查 依法检查(附录A)，应符合规定。 3.4.3 异常毒性检查 依法检查(附录F)，应符合规定。 3.4.4 热原检查 依法检查(附录D)，应符合规定。注射剂量按家兔体重每lkg注射lml。 4 保存、运输及有效期 于28避光保存和运输，自分装之日起有效期为2年。 5使用说明 A群脑膜炎球菌多糖疫苗使用说明 【药品名称】 通用名称：A群脑膜炎球菌多糖疫苗 英文名称：Group A Meningococcal Polysaccharide Vaccine 汉语拼音：A Qun Naomoyanqiujun Duotong Yimiao 【成分和性状】本品系用A群脑膜炎奈瑟菌培养液，经提取获得的荚膜多糖抗原纯化后加入适宜稳定剂冻干制成。为白色疏松体，复溶后为澄明液体。 【接种对象】6个月1 5周岁少年儿童。 【作用与用途】接种本疫苗后，可使机体产生体液免疫应答。用于预防A群脑膜炎球菌引起的流行性脑脊髓膜炎。 【规格】每瓶为150g、300g多糖。每1次人用剂量含多糖应不低于30g。 【用法用量】(1)按标示量加入所附稀释剂复溶，摇匀立即使用。 (2)于上臂外侧三角肌附着处皮下注射0.2ml或0.5ml(含多糖不低于30g)。 (3)基础免疫注射2针，从6月龄开始，每针间隔3个月；3岁以上儿童只需注射1次。接种应于流行性脑脊髓膜炎流行季节前完成。 根据需要每3年复种1次。在遇有流行情况下，可扩大年龄组做应急接种。 【不良反应】本疫苗反应轻微，偶有短暂低热，局部稍有压痛感，可自行缓解。 【禁忌】(1)有癫痢、惊厥及过敏史者。 (2)患脑部疾患、肾脏病、心脏病及活动性结核者。 (3)患急性传染病及发热者。 【注意事项】 (1)疫苗瓶塞松动者复溶后有异物或疫苗瓶有裂纹，均不得使用。 (2)疫苗复溶后，应按规定人份(剂量)一次用完，不得分多次使用，剩余的疫苗应废弃。 【 贮藏】于28避光保存和运输。 【包装】 【有效期】2年。 【执行标准】 【批准文号】 【生产企业】 企业名称： 生产地址： 邮政编码： 电话号码： 传真号码： 网址： I型肾综合征出血热灭活疫苗拼音名： Xing Shenzonghezheng Chuxuere Miehuoyimiao英文名：Haemorrhagic Fever With Renal Syndrome (Type I)Vaccine，Inactivated书页号：2005年版三部- 80 本品系用I型肾综合征出血热(简称I型出血热)病毒接种原代沙鼠肾细胞，经培养、收获病毒液、灭活病毒，加入氢氧化铝佐剂后制成。用于预防I型肾综合征出血热。 l 基本要求 生产和检定用设施、原料及辅料、水、器具、动物等应符合“凡例”的有关要求。 2 制造 21 生产用细胞 生产用细胞为原代沙鼠肾细胞。 211 细胞管理及检定 应符合“生物制品生产用动物细胞基质制备及检定规程”规定。 212 细胞制备 选用2周龄左右沙鼠，无菌取肾，剪碎，经胰蛋白酶消化，分散细胞，接种培养瓶，用MEM等适宜的培养液培养。 22 毒种 221 名称及来源 生产用毒株为I型出血热病毒Z10株。 222 种子批的建立 应符合“生物制品生产检定用菌毒种管理规程”规定。 病毒接种鼠脑制备原始及主种子批。原始种子批传代应不超过第12代，主种子批应不超过第13代，主种子批毒种接种原代沙鼠肾细胞制备工作种子批，工作种子批应不超过第18代。 223 种子批毒种的检定 主种子批应进行以下全面检定，工作种子批应至少进行22312234项检定。 2231 鉴别试验 毒种与已知I型出血热病毒免疫血清等量混合，置37水浴90分钟，接种Vero-E6单层细胞，观察1014天，以免疫荧光法测定，中和指数应大于1000。 2232 病毒滴定 取毒种做10倍系列稀释，接种Vero-E6细胞进行病毒滴定，滴度应不低于60 lg CCID50/ml(荧光法)，或接种23 日龄乳鼠或2535日龄的沙鼠，进行脑内毒力滴定，滴度应不低于70lg LD50/ml。 2233 无菌检查 依法检查(附录A)，应符合规定。 2234 支原体检查 依法检查(附录B)，应符合规定。 2235 病毒外源因子检查 依法检查(附录C)，应符合规定。 2236 免疫原性检查 取主种子批毒种制备原疫苗，接种2kg左右的白色家兔4只，每只后腿肌内注射10ml，注射后第7天以同法-再注射1次。第一次免疫后第4周采血分离血清，用蚀斑减少中和试验测中和抗体，试验用病毒为76118株；同时用参考血清作对照，每只家兔的中和抗体滴度应不低于1：10。 224 毒种保存 毒种应于-60以下保存。 23 原液 231 细胞制备 同212项。 232 培养液 培养液为含适量的灭能小牛血清的MEM或其他适宜培养液。小牛血清的质量应符合要求(附录D) 233 对照细胞病毒外源因子检查 依法检查(附录C)，应符合规定。 234 病毒接种和培养 当细胞培养成致密单层后，按终浓度为4050 1gCCID50/ml接种病毒，在适宜温度培养一定时间后，弃去培养液，用PBS冲洗去除小牛血清，加入适量新鲜维持液继续培养35天。 235 病毒收获 当收获液的血凝滴度不低于1：64时，收获培养液及细胞，合并、过滤和离心即为病毒收获液。 236 病毒收获液检定 按31项进行。 237 病毒灭活 病毒收获液中按1：4000的比例加入-丙内酯和终浓度不高于010mg/ml的硫柳汞，于28放置7天灭活病毒和水解-丙内酯。 238 合并 合并检定合格的灭活后的病毒收获液，经离心、过滤并加入适量的人血白蛋白作为稳定剂，即为原液。 239 原液检定 按32项进行。 24 半成品 241 配制 检定合格的原液加入终浓度不高于070mg/ml的氢氧化铝佐剂吸附，即为半成品。 242 半成品检定 按33项进行。 25 成品 251 分批 应符合“生物制品分批规程”规定。 252 分装 应符合“生物制品分装和冻干规程”规定。 253 规格 每瓶10ml。每1次人用剂量为10ml。 254 包装 应符合“生物制品包装规程”规定。 3 检定 31 病毒收获液检定 311 病毒滴定 将本品10倍系列稀释，取至少3个稀释度，分别接种Vero-E6细胞或沙鼠肾单层细胞，在适宜温度下培养7天左右，以免疫荧光法测定病毒滴度，应不低于60 1g CCID50/ml。 312 无菌检查 依法检查(附录A)， 313 支原体检查 依法检查(附录B)， 32 原液检定 应符合规定。 321 病毒灭活验证试验 按灭活后病毒收获液总量的01取样，透析后接种Verc-E6细胞，连续传3代，每1014天传l代，每代以免疫荧光法检查病毒，结果均应为阴性。 322 抗原量测定 采用反向间接血凝法进行抗原量测定，应不低于1：64。 323 牛血清白蛋白残留量采用酶联免疫法，牛血清白蛋白残留量应不高于50ng剂。 324 无菌检查 依法检查(附录A)，应符合规定。 33 半成品检定 无菌检查 依法检查(附录A)，应符合规定。 34 成品检定 341 鉴别试验 按2236项进行，应符合规定。当效价测定不合格时，鉴别试验不成立。 342 外观 应为橘红色微浑浊液体，久置形成可摇散的沉淀，无异物。 343 化学检定 3431 pH值 应为7280(附录V A)。 3432 硫柳汞含量 应不高于010mg/ml(附录B)。 3433 氢氧化铝含量 应不高于070mg/ml(附录F)。 344 效价测定 按2236项进行。免疫4 只家兔，每只家兔的中和抗体滴度应不低于1：10。 345 热稳定性试验 疫苗出厂前应进行热稳定试验。于37放置7天，按2236项进行效价测定。如合格，视为效价测定合格。 346 无菌检查 依法检查(附录A)，应符合规定。 347 细菌内毒素检查 应不高于100EU剂(附录E凝胶限量试验)。 348 异常毒性检查 依法检查(附录F)，应符合规定。 4 保存、运输及有效期 于28避光保存和运输。自效价测定合格之日起有效期为1年6个月。 5 使用说明 I型肾综合征出血热灭活疫苗使用说明 【药品名称】 通用名称：I型肾综合征出血热灭活疫苗 英文名称：Haemorrhagic Fever With Renal Syndrome(Type I)Vaccine，Inactivated 汉语拼音： I Xing Shenzonghezheng ChuxuereMiehuoyimiao 【成分和性状】本品系用I型肾综合征出血热病毒接种原代沙鼠肾细胞，经培养、收获病毒液、灭活病毒，加入氢氧化铝佐剂制成。为橘红色微浑浊液体，含硫柳汞防腐剂。 【接种对象】肾综合征出血热疫区的居民及进入该地区的人员，主要对象为1060岁的高危人群。 【作用与用途】接种本疫苗后，可刺激机体产生抗I型肾综合征出血热病毒的免疫力。用于预防I型肾综合征出血热。 【规格】每瓶10ml。每1次人用剂量为10ml。 【用法用量】(1)于上臂外侧三角肌肌内注射。 (2)基础免疫为3针，于第0天、第7天、第28天各注射1次，基础免疫后1年应加强免疫1次，每1次10ml。 【不良反应】一般无不良反应，个别有发热、头晕、皮疹者应注意观察，必要时给予适当治疗。因疫苗含有氢氧化铝佐剂，少数人在注射后局部可出现硬结、轻度肿胀和疼痛，一般在13天内自行消退。 【禁忌】(1)发热，患急性疾病、严重慢性病、神经系统疾病者。 (2)患过敏性疾病、既往对抗生素或生物制品有过敏史者。 (3)哺乳期、妊娠期妇女。 【注意事项】(1)注射前应充分摇匀。 (2)疫苗异常浑浊、变色、有异物及摇不散的块状物者，疫苗瓶有裂纹者，均不得使用。 (3)应备有肾上腺素等药物，以备偶有发生严重过敏反应时急救用，接受注射者在注射后应在现场休息片刻。 (4)严禁冻结。 【贮藏】于28避光保存和运输。 【包装】 【有效期】 【执行标准】 【批准文号】 【生产企业】 企 业名称： 生产地址： 邮政编码： 电话号码： 传真号码： 网 址： 型肾综合征出血热灭活疫苗 拼音名：Xing Shenzonghezheng Chuxuere Miehuoyimiao英文名：Haemorrhagic Fever With RenaI Syndrome (Type)Vaccine，InactiVated书页号：2005年版三部- 83 本品系用型肾综合征出血热(简称型出血热)病毒接种原代地鼠肾细胞，经培养、收获病毒液、灭活病毒，加入氢氧化铝佐剂制成。用于预防型肾综合征出血热。 1 基本要求 生产和检定用设施、原料及辅料、水、器具、动物等应符合“凡例”的有关要求。 2 制造 21 生产用细胞 生产用细胞为原代地鼠肾细胞。 211 细胞管理及检定 应符合“生物制品生产用动物细胞基质制备及检定规程”规定。 212 细胞制备 选用2周龄左右地鼠，无菌取肾，剪碎，经胰蛋白酶消化，分散细胞，接种培养瓶，加入适宜的培养液，置37培养。 22 毒种 221 名称及来源 生产用毒种为型出血热病毒L99株。 222 种子批的建立 应符合“生物制品生产检定用菌毒种管理规程”规定。 在原代地鼠肾细胞上传代制备主种子批。原始种子批应不超过第13代，主种子批应不超过第16代，工作种子批应不超过第20代。 223 种子批毒种的检定 主种子批应进行以下全面检定，工作种子批应至少进行22312234项检定。 2231 鉴别试验 毒种与已知同型出血热病毒免疫血清等量混合，置37水浴90分钟，接种Vero-E6细胞，观察1014天，以免疫荧光法测定，中和指数应大于1000。 2232 病毒滴定 毒种用原代地鼠肾细胞进行免疫荧光法测定，病毒滴度应不低于70lg CCID50/ml。 2233 无菌检查 依法检查(附录A)，应符合规定。 2234 支原体检查 依法检杏(附录B)，应符合规定。 2235 病毒外源因子检查 依法检查(附录c)，应符合规定。 2236 免疫原性检查 取主种子批毒种制备原疫苗，接种2kg左右的白色家兔4只，每只后腿肌内注射10ml，注射后第1 4天以同法再注射1次。第1次免疫后4周采血分离血清，用蚀斑减少中和试验测中和抗体，试验用病毒为UR株；同时用参考血清作对照，每只家兔的中和抗体滴度应不低于1：10。 224 毒种保存 毒种应于-60以下保存，液体工作种了批毒种保存时间不得超过1年。 23 原液 231 细胞制备 同212项。 232 培养液 培养液为含适量灭能小牛血清和乳蛋白水解物的Earles液或其他适宜培养液。小牛血清的质量应符合要求(附录D)。 233 对照细胞病毒外源因子检查 依法检查(附录c)，应符合规定。 234 病毒接种和培养 选择生长良好的单层细胞，接种适量病毒，在适宜温度培养适当时间后，弃去培养液，换以维持液继续培养一定时间。 235 病毒收获 培养适宜天数，收获培养液，即为病毒收获液。 236 病毒收获液检定 按31项进行。 237 病毒灭活 病毒收获液中按1：4000的比例加入甲醛溶液，置适宜温度一定时间内灭活病毒。 238 合并 合并检定合格的灭活病毒收获液，经离心处理后，加入终浓度不高于010mg/ml的硫柳汞作为防腐剂，即为原液。 239 原液检定 按32项进行。 24 半成品 241 配制 检定合格的原液加入终浓度不高于070mg/ml的氧氧化铝佐剂，即为半成品。 242 半成品检定 按33项进行。 25 成品 251 分批 应符合“生物制品分批规程”规定。 252 分装 应符合“生物制品分装和冻干规程”规定。 253 规格 每瓶10ml。每1次人用剂量为10ml。 254 包装 应符合“生物制品包装规程”规定。 3 检定 31 病毒收获液检定 311 病毒滴定 将本品10倍系列稀释，取至少3个稀释度，分别接种原代地鼠肾细胞或其他适宜细胞，在适宜温度下培养1012天，以免疫荧光法测定病毒滴度，应不低于65 lg CCID50m1。 312无菌检查 依法检查(附录A)，应符合规定。