NY∕T 911-2020 饲料添加剂β-葡聚糖酶活力的测定 分光光度法(农业).pdf

ICS 65.120 B 46 NY 中华人民共和国农业行业标准NYIT 911一2020代替Nyrl9川2004 饲料添加剂-葡聚糖酶活力的测定分光光度法Determination of-glucanase activity in feed additives一Spectrophotometry 2020-11-12发布2021-04-01实施习中华人民共和国农业农村部发布修改DNS试jIHlitIilJ斤(!)立jllJ.j问(见J.6,2004 I，r版的5.7);增加I-引fH:jjH剂ftLL.修改其附恼的千l放NJ(见5.7.241斗tl(l)之01.5.8);一二增加了样r1tJr-iT(见第7市);NY/T 911-2020 删除了句次;iJi自己tIi)DNS w J11)均tt.:Wi吧，所绘11)标叫11线的安求(2001年版的第7;I);修改以f(:浴池11，1)备步骤。止日.,2004勾)恒的第8市);一一在i州立i二二璇1增加了i式样坐CI治液.f l J!iJ.fi处-)0,:j;):-1，11才以乙同主乙酸俐缓冲肯于if支代科葡萄椅背手If直(1110r-(见8.2.2.:l);修改了计3公式(见第9，江2004句Jt匠的知10-t-fO;修改了ti常!立的表述01.级10j;，2004什版的第11 i，川。ifl注)2本文斗的某些内容rjJj涉及专利。本文件的发.fIj机构不承担识)IJ这专利的击机。本书;11iH-i农业农村;jl市牧:.)J提出。本标IWrl合同饲料二r.ll!.标lfI化技术委员会(S八C/TC76)J 1 1。本标准起li.单位浙江省11纠饲料ili察所。斗、标111主要a革rl，l(人附:沽、44硝、茨沃军、fLI、琴、吴望和、饶风琴、j占l二|扭。本标准所代桥标泊的历次Jt&本发布情况为NY/T 91 1 20040 范围饲料添加剂-葡聚糖酶活力的测定分光光度法牛;标IfU:i二了饲料fJJllifllI俑mjj)f lif;ji;r;力的分光光度测定JiL4标准适用l饲料fJJII州I伯聚jj.lffJ.&Jt经牟血i.!.Ii!.IL借i聚勒H阳H;r;力的i则应。本标111的工结限为30U/目。2 规范性引用文件3 下列文11;(.门本文(;13/1 6682(;1当/丁20195所iJJ去tl:n)(E比，而i王光JU此，可i-11:1:5 试剂或材料除非另有*元，5.1;ICG/T 6682，一级。5.2 乙醉。5.3 乙酸浴汹(0.j lllo1/U，茧i仅NY/1 911-2020 还以Jf5.4 乙酸销浴1位(0.1 mol/U称取=;j(乙酸例1.:l6 g，JlI水浴ifJIUf柿释F.100 mL，摇匀。5.5 乙阪、乙同击倒缓冲j容1&(pH5.5)，j司以=水乙限制23.14g，JlI;j(i1ifi碍，1J11入冰乙酸1.70mL，用水机料至2000mL，JIJ乙阪济液(5.川成乙股市内的液(5.4)训，pH:军5.5.J岳匀。5.6 DNS试开11称取3，5二的基水杨蔽3.15g,JII;j(500 mL搅jl.水浴至45C，缓慢JJII人刽氧化俐济放(200 g/L)lOO 1111川同时不断搅拌.直至元全防御，向淫!l刁11入四;j(Wq石酸告1俐91.0g、*盼2.50 g和SW.1tR主例2.50g，j削i至惰仰，停1I.Jfl1f.，冷却军宣il，UJII;j(k容至1C丁oIllL，J1H匀，过浓，塑料Jfl1:ill1光保存，室nl下iH11d)可业用，有放JUJ为6个J1。NY/T 911-2020 5.7 11J聚精j和!f是(8.0mg/mL)，f;J、取R俑jlf1:fJif(PS1.:1)(含tt95%)0.10日(和价至O.001日),)111乙醉(5.2)5.0ml.，削润庐葡发腑，而加l乙同豆、乙股市内绥I喘液(5.5)10ml.，f，磁力搅拌，同时缓缓)111热，在至H有Hf-辄If5L:i在iJilI.fi 1/-.J 111热，I*纹悦拌至冷却，FFI乙酸乙1W4内缓冲浴被(5.5)定谷至50ml.抵匀oOOC.4 C逃);，i平，lfl!J:fE;(-18C密II似存，有效WJ为2个月。I lir，J+J前37C水泊1-1衡20min 5.8 11N，ll椭拓、11lin备浴液(JO.Omg/rnL)称以无水11ii稍稍叉.J!自11117岁J0.5自(CAS号，50-99-7，含咐注99.5%)(籽iiifo至0.0001 g)，川Il50 mL容tl)fli中，川l乙股乙险、俐级I111浴浪(5.5)-W解刀定谷至生!IJJJ，拓;匀。OC4C，是闭保存.有效期为:l个月。5 9 际HI系列的液，1ft硕!挝i仅适挝标11储备的液(5.8)-f 100 ml.将结瓶I-It，川l乙险、乙险、俐缓冲附?由(5.5)衍料;.i二容阳J戊系夕IJ标叫Ii怜液，浓度分);11为omg/ml.、O.1 mg/ml.、0.2mg/mL,O.:l mg/rnL、O.4 mg/ml.、0.5mg/ml.、0.6rng/mL、0.7mg/mL。6 仪器设备6.1 分光)!:.度计。6 2 天半。感挝0.001g和0.0001 g,6.3 l心机转i虫不低r3 000 r/min,6.4 pl-l i十.有ilifO至0.0。6.5 rl!热恒rhit-=t工业块fi，(103土2)C。6.6 Mt.;JJ搅拌然 附)111热功能。6.7 但iLI水吁吁书可WilifO至士。IC。6.8 汹汹:混合器。6.9 振荡仪。7 样品按照G/T20195 iitJ备样品.粉碎侦Ilfti11涵。.42mrn孔径的分析筛，充分归匀，装入脐U瓶中，将;闭仇:在，有rm.8 试验步骤8.1 试样溶液制备8.1 1 固体样品平1d故2份试验。按照|附录八，Ilf议的lllin茧，称j仅试样适il:(f，i确至0.0001 g),ilcr 150 ml.J!Ji甘UBJfli 11,)JIJ人乙般乙酸俐级叫:浴液(5.5)40ml.MVJ搅拌或振荡:-Omin，转移至100时，容茧瓶1:11，用乙版乙酸例缓冲济放(5.5)定容至主IJJJ,jm匀。在OCIC条件下:ill光放叫不少f1 h.如匀，才二3000 r/min 2.心:3mil、.1以上1M位远挝.)11乙酸-乙阿克例级IrJr扣在(5.5)稀罪辛辛若稀释后f，i液的pH俏商5.5.先川乙酸浴液(5.3)j;(乙R主俐济i夜(5.4)，j节l汁l至5.5，TJll乙酸乙般俐缓冲祥H在(5.5)稀释定谷，使得待曲!IJ附溶液浓度110.0.1 U/rnLO.08 U/ml.8.1.2 液体样品、l行做2份试份。按照附冲击A中建议的11样i吐柏密移取试样边llt，:I:-j 100 mL容MJflil.)Ij乙股乙酸il4级I浴11)(5.5)定容至主IIJ立.衍匀。HJ乙酸-乙同创内缓冲浴被(5.5)稀释.丰;衍释后酶浓的pl-I偏离5.5.先川乙酸济放(5.:l)!lX乙R刽内瑞l且(5.4)训节l汁1至5.5，./可HJ乙IW乙酸如4级111浴液(5.5)有1释定容.业待i川Nfi轩浓浓度11 0.01 U/ml.O.08 U/rnl.。8.2 jj!IJ定步骤Z 1)PSEAJj武汉(j忖纯公J(1(Ji川给出这-(，i.(J、是J，()，1血本标州的他川者。如l贝贝I也TUlil1他们牛11间的放且.)1 1 门业川这些非放的SlloNY/1 911-2020 8.2 1 标准曲线绘制分)11盐J&ti王叫i系列浴液(5.9)各2.00mL何二j二主IJ.ltJ.1:何1.各)JII入3.0ml.乙股乙般俐缓冲浴液(5.5川115.0 n、LDNS试开I1(5.6)，振Hf:l抖。I:-=j二iJ1:水浴中反应51ll 1ll，冷J斗l至2、iI，L)1/水定乎乎至25rnL，隔匀。以试剂空Cl!M由为21IM!ff.在510nm 彼伏处测定I吸光度，以f由你tm浓JJ为帧响标、l吸)t度的为纵坐标.绘制伪、f/1111钱。8.2 2 测定8.2.2.1 试样空白溶液的测定.!rl:J胆试样浓浓2.00mL,J具i;主1皮试位中，:l7.C水浴1主|衡10min.)JII入DNS试剂(5.6)5.0mL.涡ji!J3 s)百川人H古tJ梳恪液(5.7)2.0ml.于:l7.C7Krfi保r.t30 mino川人0.2mg/ml.葡萄糖标泊的液(5.9)LOOml.，温匀，)1:J-1JI水浴巾反应5min。冷却军宣布UJII7)ii:容至25ml.，指:匀。以试开1亿五Ij在液为空白x.!旺，在51011m波长处泪1ii:I吸光Ht值，川l标时11111线囚归方程计n一试样空II反应浴液1:VL浓且l:句。8 2 2.2 试样溶液的测定卅且呈试中非浓浓2.00mL，jFJ二具;J;主I1J(试11.,37C;)m 1平衡10min.)JII人11ti;t租hi-容液(5.7)2.0 ml.，涡jjf3 s后:l7C仇il，A30 min,JJII DNS试剂(5.6)5.0mL，涡旋3s，以终止N/jIfJl!反应。力11人O.2 mg/ml.甜甜非i)f标叫i溶液(5.9)1.00 mL.混匀，12于训1:水浴1反应5mn，冷却l军五ili.，)J11711,fll L 00时，乙般乙股俐缓冲浴液(5.5)代桥L述测定1的0.2mg/mL 111i萄糖标lfi浴iik(5.9)。9 试验数据处理试样中归葡拙tW;)j以X计，敛值以Ijiij j JY位鲜克(U/g)或AI，jii力单位1f丘刑(U/mL)农示。J主式(1)计170(c-c)X IOOX,x=.-.X 1000-(!)川XIXI日 8.2王:1 试析反应的液中似乎梢H的上机浓度，单位为毫克1If刑(mg/mL);C1)试f(空|二l反J.浴液中葡萄糖的|机浓度，JY.j为宅克创业11-111，单位为分钟(mi时，100 试+1花制制只单位为刑(mU;180.2 瑞i刘树lfl早JJ质茧，单位为克剑!节舟、(g/moJ);1 000 转化例子.1mmo!=1 000卢1010王li行i!11应结果川n术平均iIlo&7J亏，保阴3价有效数字。10 精密度在1飞复n条11下.2次独立测定纺织Cj;fl/n术平均I(I(j绝对差且不大hb:1:平均值的8%。3 NY/T 911-2020 建议l仅H咐见-&A.4 附录A(规范性附录)建议取样盎ONON-FOHUFZ 长,q:/J飞，11III J:&抖出版UtJ;Ir相l问IIXJ，lm街18号榄)(们111阳l川旧11政编川1刊00川l2岛5闷j川1什1:WWW.CClp.COIJl.C口花巳tjj后京jl飞印I灿圳H白削IJ-厂E印11川i叫i刷训新华二JIJ，I;jt);tld丁Jfr:&li JI!新华书JrIi绘制.,印怅0.75j-数15干72021 1 3川JtJit第117;印刷l峰20211J.3)1如l版IIJ，去16109，8432 Jt价。24.00元部)1本880mmXIZ:3011ln11/16 版权专有侵权必究举报电话(010)59194261