乙肝五项修改版.pptx
第一页,共二十三页。目录目录u 1.1.乙肝的定义及传播途径乙肝的定义及传播途径u 2.2.乙肝五项的具体内容乙肝五项的具体内容u 3.3.乙肝五项的检测方法及原理乙肝五项的检测方法及原理u 4.4.乙肝五项各项指标详解乙肝五项各项指标详解u 5.5.乙肝五项不同结果的意义乙肝五项不同结果的意义第二页,共二十三页。一、乙肝的定义:一、乙肝的定义:慢性乙型肝炎简称乙肝是指乙肝病毒检测为阳性,病程超过半年或发病日期不慢性乙型肝炎简称乙肝是指乙肝病毒检测为阳性,病程超过半年或发病日期不明确而临床有慢性肝炎表现者。明确而临床有慢性肝炎表现者。临床表现为乏力、畏食、恶心、腹胀、肝区疼痛等病症。临床表现为乏力、畏食、恶心、腹胀、肝区疼痛等病症。肝大,质地为中等硬度,有轻压痛。肝大,质地为中等硬度,有轻压痛。病情重者可伴有慢性肝病面容、蜘蛛痣、肝掌、脾大,肝功能可异常或持续异病情重者可伴有慢性肝病面容、蜘蛛痣、肝掌、脾大,肝功能可异常或持续异常。常。根据临床表现分为轻度、中度和重度。根据临床表现分为轻度、中度和重度。第三页,共二十三页。乙肝的传播途径乙肝的传播途径 血液传播:主要包括输血及血制品、注射器针头及针炙、牙科及手术器械等医疗行为,血液传播:主要包括输血及血制品、注射器针头及针炙、牙科及手术器械等医疗行为,纹身、纹眉、穿耳眼、做双眼皮、刮面等具有损伤性的美容行为。纹身、纹眉、穿耳眼、做双眼皮、刮面等具有损伤性的美容行为。母婴传播:指携带乙肝病毒的母亲在怀孕期、分娩期、哺乳期将乙肝病毒传播给婴儿母婴传播:指携带乙肝病毒的母亲在怀孕期、分娩期、哺乳期将乙肝病毒传播给婴儿的一种方式。的一种方式。密切接触传播:家庭日常生活可造成传播的情况主要有:密切接触传播:家庭日常生活可造成传播的情况主要有:HBsAgHBsAg阳性人的创伤出血、阳性人的创伤出血、月经血、痔疮血污染家庭环境;与月经血、痔疮血污染家庭环境;与HBsAgHBsAg阳性人共用牙刷、口杯、毛巾和剃刀;阳性人共用牙刷、口杯、毛巾和剃刀;HBsAgHBsAg阳性人同乳幼儿密切接触,尤其是口喂小儿。阳性人同乳幼儿密切接触,尤其是口喂小儿。性接触传播:男女性生活可通过精液、阴道分泌液传播乙肝病毒。性接触传播:男女性生活可通过精液、阴道分泌液传播乙肝病毒。第四页,共二十三页。乙肝五项的概念乙肝五项的概念 乙肝五项也称为乙肝两对半,包括乙肝外表抗原用HBSAg表示、乙肝外表抗体用抗-HBS表示、e抗原用HBeAg表示、e抗体用抗-HBe表示、核心抗体用抗-HBc表示。乙肝五项检查,便是抽出患者静脉血,检测血液中乙肝病毒的血清学标志。第五页,共二十三页。金标法 金标法乙肝两对半快速检测板是采用层析法检测乙肝病毒五项血清学标志HBsAg、HBsAb、HBeAg、HBeAb、HBcAb。酶免法ELISA法 ELISA可用于测定抗原,也可用于测定抗体。在这种测定方法中有3种必要的试剂:固相的抗原或抗体,酶标记的抗原或抗体,酶作用的底物。HBsAg、HBeAg检测试纸条采用双抗体夹心法测抗原;HBsAb检测试纸条采用双抗原夹心法;HBeAb、HBcAb此两项在检测试纸条上采用了竞争抑制法。由于e抗原较核心抗原仅多29个氨基酸,e抗原很容易转变成核心抗原,因此HBcAb和HBeAb的测定均采用竞争法乙肝五项的检测方法及原理乙肝五项的检测方法及原理第六页,共二十三页。ELISA ELISA法在临床实验室已得到普遍应用,特别是用于各种肝炎法在临床实验室已得到普遍应用,特别是用于各种肝炎标志物的检测,但标志物的检测,但ELISAELISA法需时较长法需时较长,其主要原因是由于液相中的抗原抗其主要原因是由于液相中的抗原抗体需经扩散才能与固相上的抗原或抗体反响。但作为基层医疗单位、急体需经扩散才能与固相上的抗原或抗体反响。但作为基层医疗单位、急诊病人和手术前的应急的单个标本检测,包括现在的血站的流动采血点献诊病人和手术前的应急的单个标本检测,包括现在的血站的流动采血点献血员的快速筛检是根本无法用血员的快速筛检是根本无法用ELISAELISA法来实现的。法来实现的。2020世纪世纪7070年代初,年代初,FANKLFANKL等建立了免疫胶体金技术,开始作为一种免疫标记技术而被使用,随后逐等建立了免疫胶体金技术,开始作为一种免疫标记技术而被使用,随后逐渐广泛应用于免疫检测技术。各种金标检测条,检测卡已被广泛使用。相渐广泛应用于免疫检测技术。各种金标检测条,检测卡已被广泛使用。相对而言,对而言,ELISAELISA法检测准确性要高于金标法,法检测准确性要高于金标法,金标法检测限为金标法检测限为1ng/ml,ELISA1ng/ml,ELISA法灵敏度为法灵敏度为0.5ng/ml0.5ng/ml,国产,国产ELISAELISA法试剂最高灵敏度可达法试剂最高灵敏度可达 0.1ng/ml 0.1ng/ml。故在。故在实际应用中,根据实际情况两种方法联合起来,特别是实际应用中,根据实际情况两种方法联合起来,特别是 在大批量检测时可在大批量检测时可用金标法作为初筛,这样可大量节约时间,更快速、准确为病人效劳。用金标法作为初筛,这样可大量节约时间,更快速、准确为病人效劳。第七页,共二十三页。1 1将特异性抗体与固相载体连接,形成固相抗体:洗涤除去未结合的抗体及杂将特异性抗体与固相载体连接,形成固相抗体:洗涤除去未结合的抗体及杂质。质。2 2加受检标本:使之与固相抗体接触反响一段时间,让标本中的抗原与固加受检标本:使之与固相抗体接触反响一段时间,让标本中的抗原与固相载体上的抗体结合,形成固相抗原复合物。洗涤除去其他未结合的物质。相载体上的抗体结合,形成固相抗原复合物。洗涤除去其他未结合的物质。3 3加酶标抗体:使固相免疫复合物上的抗原与酶标抗体结合。彻底洗涤未结合加酶标抗体:使固相免疫复合物上的抗原与酶标抗体结合。彻底洗涤未结合的酶标抗体。此时固相载体上带有的酶量与标本中受检物质的量正相关。的酶标抗体。此时固相载体上带有的酶量与标本中受检物质的量正相关。4 4加底物:夹心式复合物中的酶催化底物成为有色产物。根据颜色反响的程度进行加底物:夹心式复合物中的酶催化底物成为有色产物。根据颜色反响的程度进行该抗原的定性或定量。该抗原的定性或定量。根据同样原理,将大分子抗原分别制备固相抗原和酶标抗原结合物,即可用双抗根据同样原理,将大分子抗原分别制备固相抗原和酶标抗原结合物,即可用双抗原夹心法测定标本中的抗体。原夹心法测定标本中的抗体。第八页,共二十三页。双位点一步法即在双抗体夹心法根底上使用针对抗原分子上两个不同表双位点一步法即在双抗体夹心法根底上使用针对抗原分子上两个不同表位的单克隆抗体,分别作为固相抗体和酶标抗体。测定时将待检标本和酶标抗位的单克隆抗体,分别作为固相抗体和酶标抗体。测定时将待检标本和酶标抗体同时参加进行反响,两种抗体互不干扰,经一次温育和洗涤后,即可参加底体同时参加进行反响,两种抗体互不干扰,经一次温育和洗涤后,即可参加底物进行显色测定。物进行显色测定。钩状效应:双位点一步法中,如果待检测标本中抗原浓度过高,过量抗原那么会分别与钩状效应:双位点一步法中,如果待检测标本中抗原浓度过高,过量抗原那么会分别与固相抗体和酶标抗体结合,而不再形成夹心复合物,类似于沉淀反响中抗原过剩的后带现象,固相抗体和酶标抗体结合,而不再形成夹心复合物,类似于沉淀反响中抗原过剩的后带现象,所得结果将低于实际的含量,这种现象称之为钩状效应。所得结果将低于实际的含量,这种现象称之为钩状效应。第九页,共二十三页。固相抗体底物竞争法可用于测定抗原,也可用于测定抗体。以测定抗原为例,竞争法可用于测定抗原,也可用于测定抗体。以测定抗原为例,酶标抗原和待测抗原对固相特异性抗体具有相同的结合力,因此两酶标抗原和待测抗原对固相特异性抗体具有相同的结合力,因此两者竞争结合固相特异性抗体。反响体系中,固相抗体和酶标抗原是者竞争结合固相特异性抗体。反响体系中,固相抗体和酶标抗原是固定限量,且前者的结合位点少于酶标和非酶标抗原的分子数量和。固定限量,且前者的结合位点少于酶标和非酶标抗原的分子数量和。免疫反响后,结合于固相的酶标抗原量与标本中待检抗原含量成反免疫反响后,结合于固相的酶标抗原量与标本中待检抗原含量成反比。待检抗原量越多,相应的结合特异性抗体越多,而酶标抗原和比。待检抗原量越多,相应的结合特异性抗体越多,而酶标抗原和固相抗体结合越少,底物显色反响浅;反之那么显色越深,即底物固相抗体结合越少,底物显色反响浅;反之那么显色越深,即底物显色与待检标本中抗原含量成反比。显色与待检标本中抗原含量成反比。第十页,共二十三页。间接法检测抗体最常用的方法,其原理为利用酶标记的间接法检测抗体最常用的方法,其原理为利用酶标记的抗抗体以检测已与固相结合的受检抗体,故称为间接法。即将抗抗体以检测已与固相结合的受检抗体,故称为间接法。即将能看出抗原吸附于固相载体上。待检标本中相应抗体与之结合,能看出抗原吸附于固相载体上。待检标本中相应抗体与之结合,形成固相抗原形成固相抗原-抗体复合物,再用酶标二抗与固相免疫复合物抗体复合物,再用酶标二抗与固相免疫复合物中的抗体结合,形成固相抗原中的抗体结合,形成固相抗原-抗体抗体-酶标二抗复合物,根据加酶标二抗复合物,根据加底物后的显色程度确定待检抗体含量。底物后的显色程度确定待检抗体含量。第十一页,共二十三页。捕获法的原理是将抗人捕获法的原理是将抗人IgMIgM抗体抗人抗体抗人IgMIgM链抗体吸链抗体吸附于固相载体上,待检标本中的附于固相载体上,待检标本中的IgMIgM类抗体多被固相抗体捕获。类抗体多被固相抗体捕获。参加特异抗原与固相抗体捕获的参加特异抗原与固相抗体捕获的IgMIgM抗体结合,再参加抗原特抗体结合,再参加抗原特异的酶标抗体,形成固相抗人异的酶标抗体,形成固相抗人IgM-IgM-IgM-IgM-抗原抗原-酶标抗体复合物。酶标抗体复合物。最后根据加底物后的显色程度确定待检最后根据加底物后的显色程度确定待检IgMIgM抗体的含量。固相抗体的含量。固相捕获法主要用于血清中捕获法主要用于血清中IgMIgM类抗体的测定。类抗体的测定。第十二页,共二十三页。1 1、HBsAg(HBsAg(乙肝外表抗原乙肝外表抗原)它是乙肝病毒的外壳物质,本身没有传染性。它的它是乙肝病毒的外壳物质,本身没有传染性。它的阳性往往提示有完整的病毒颗粒存在。阳性往往提示有完整的病毒颗粒存在。2 2、抗一、抗一HBs(HBs(乙肝外表抗体,乙肝外表抗体,HbsAb)HbsAb)它是它是HBVHBV自然感染人恢复期出现的抗体,此时自然感染人恢复期出现的抗体,此时HBsAgHBsAg自自然消失了。它的存在提示人对乙肝有了抵抗力,不会再得乙型肝炎了。我国有然消失了。它的存在提示人对乙肝有了抵抗力,不会再得乙型肝炎了。我国有27.42%27.42%的人口有的人口有此抗体。此抗体。3 3、HBeAg(HBeAg(乙型肝炎乙型肝炎e e抗原抗原)它产生于病毒内部,可分泌血液中,它产生于病毒内部,可分泌血液中,e e抗原阳性提示病毒有活抗原阳性提示病毒有活动,乙肝病毒复制速度很快,而且是具有传染性的指标。动,乙肝病毒复制速度很快,而且是具有传染性的指标。4 4、抗、抗HBe(HBe(乙肝乙肝e e抗体,抗体,HBeAb)HBeAb)是人体针对是人体针对e e抗原产生的一种蛋白物质,阳性结果抗原产生的一种蛋白物质,阳性结果提示病毒的传染性变弱,病情已处于恢复阶段。但另一种情况可能是乙肝病毒发生了变提示病毒的传染性变弱,病情已处于恢复阶段。但另一种情况可能是乙肝病毒发生了变异,此时血清中无异,此时血清中无HBeAgHBeAg,但可产生抗一,但可产生抗一HBeHBe,出现这种情况就需要查,出现这种情况就需要查HBVDNAHBVDNA来判定是来判定是否还有病毒存在。否还有病毒存在。5 5、抗一、抗一HBc(HBc(乙肝核心抗体,乙肝核心抗体,HbcAb)HbcAb)这种抗体分这种抗体分IgMIgM和和lgGlgG两种:抗两种:抗HBcIgMHBcIgM阳性提示病阳性提示病毒活动,有传染性毒活动,有传染性;抗抗HBcIgGHBcIgG阳性提示为以往感染,无传染性,不需抗病毒治疗。阳性提示为以往感染,无传染性,不需抗病毒治疗。6.6.乙肝前乙肝前S1S1抗原是病毒复制的另一个指标,人体感染乙型肝炎病毒后,最抗原是病毒复制的另一个指标,人体感染乙型肝炎病毒后,最早的免疫应答就是针对前早的免疫应答就是针对前S1S1抗原的。由于前抗原的。由于前S1S1抗原的出现在抗原的出现在HBVHBV感染的最早期,感染的最早期,因而可以起到早期诊断的作用因而可以起到早期诊断的作用 其他,其他,HBVDNAHBVDNA是病毒的遗传基因,存在于病毒的核心部位,它的阳性和是病毒的遗传基因,存在于病毒的核心部位,它的阳性和HBeAgHBeAg阳性意义根本是一致的。因此,公认的抗病毒治疗是否有效,主要是以阳性意义根本是一致的。因此,公认的抗病毒治疗是否有效,主要是以HBeAgHBeAg和和HBVDNAHBVDNA的阴转或定量的明显减少为指标。的阴转或定量的明显减少为指标。第十三页,共二十三页。乙肝五项单项指标阳性意义第十四页,共二十三页。乙肝五项结果32种模式分析表 9 种常见模式出现率 1%40%)第十五页,共二十三页。1 1、“大三阳见于以下几种可能:大三阳见于以下几种可能:慢性乙型肝炎,常见乏力、食欲差等病症;慢性乙型肝炎,常见乏力、食欲差等病症;乙肝病毒耐受期携带者,无明显病症,肝功和乙肝病毒耐受期携带者,无明显病症,肝功和B B超检查均正常;超检查均正常;急性乙型肝炎早期;急性乙型肝炎早期;乙肝肝硬化,见于少数病毒仍活泼复制的肝硬化患者。乙肝肝硬化,见于少数病毒仍活泼复制的肝硬化患者。2 2、“小三阳见于以下几种情况:小三阳见于以下几种情况:乙肝病毒感染者经历无病症免疫去除后,进入了病毒残留期,形成乙肝病毒乙肝病毒感染者经历无病症免疫去除后,进入了病毒残留期,形成乙肝病毒“小三阳携带者;小三阳携带者;乙肝患者经过一次或屡次发作后,由乙肝患者经过一次或屡次发作后,由“大三阳转化为大三阳转化为“小三阳,肝功恢复小三阳,肝功恢复正常,病毒复制也渐趋停止,血液中查不到病毒正常,病毒复制也渐趋停止,血液中查不到病毒HBVDNAHBVDNA,属于慢肝恢复或稳定,属于慢肝恢复或稳定阶段;阶段;乙肝病毒在人体免疫作用的压力下发生变异,变异后的病毒乙肝病毒在人体免疫作用的压力下发生变异,变异后的病毒e e抗原不能被检出,抗原不能被检出,而血清中抗而血清中抗HBeHBe阳性,这种患者虽然表现为阳性,这种患者虽然表现为“小三阳,肝功能仍然不正常,小三阳,肝功能仍然不正常,HBVDNA(+)HBVDNA(+),病情大多继续进展。可能是,病情大多继续进展。可能是CHBCHB,也可能有少数患者已成为肝纤维,也可能有少数患者已成为肝纤维化或早期肝硬化。化或早期肝硬化。绝大多数乙肝患者及相当一局部医务工作者以乙肝两对半检查结果绝大多数乙肝患者及相当一局部医务工作者以乙肝两对半检查结果“大三阳、大三阳、“小三阳等来判断乙肝病情的轻重,并且视小三阳等来判断乙肝病情的轻重,并且视“三阳是否转阴为疗效好坏的惟三阳是否转阴为疗效好坏的惟一指标,这是极其错误的。一指标,这是极其错误的。无论是无论是“大三阳还是大三阳还是“小三阳,都不能说明或判断乙肝病情的轻重,只能说小三阳,都不能说明或判断乙肝病情的轻重,只能说明体内携带乙肝病毒,还有病毒的复制情况,不能说明病毒的严重性,也不能代表肝明体内携带乙肝病毒,还有病毒的复制情况,不能说明病毒的严重性,也不能代表肝病到了什么程度或表达疗效的好坏。判断和划分乙肝病情轻重的条件和依据是系统的病到了什么程度或表达疗效的好坏。判断和划分乙肝病情轻重的条件和依据是系统的肝功能检测结果。肝功能检测结果。第十六页,共二十三页。3 3、HBVDNAHBVDNA在乙肝病程中的意义;临床检查在乙肝病程中的意义;临床检查HBvDNAHBvDNA定量,如检验结果小于定量,如检验结果小于3.0103.010的三次方即为阴性,或用的三次方即为阴性,或用(-)(-)来表示,有的检验报告用来表示,有的检验报告用“0“0来表示;来表示;如大于如大于3.0103.010的三次方即为阳性,或用的三次方即为阳性,或用(+)(+)来表示。来表示。HBVDNAHBVDNA是乙肝病毒核心中的基因片段,血液检查中如是乙肝病毒核心中的基因片段,血液检查中如HBVDNA(+)HBVDNA(+),说明,说明病毒在大量复制,传染性强。病毒在大量复制,传染性强。在慢性无病症在慢性无病症HBvHBv携带者患者中虽然携带者患者中虽然HBVDNA(+)HBVDNA(+),同时又是,同时又是“大三阳,但大三阳,但并不能说明病情重,因为在病毒耐受阶段,机体没有免疫应答,肝细胞无坏死并不能说明病情重,因为在病毒耐受阶段,机体没有免疫应答,肝细胞无坏死现象。现象。在在CHBCHB患者中,如患者中,如HBV-DNA(+)HBV-DNA(+)就说明病情仍有继续开展的可能,或存在肝细就说明病情仍有继续开展的可能,或存在肝细胞坏死,检查肝功能异常;如经治疗,胞坏死,检查肝功能异常;如经治疗,HBVDNAHBVDNA转为转为(-)(-),那么是病情好转的,那么是病情好转的标志,可能病情长期稳定,不开展。但是也有少局部患者可由标志,可能病情长期稳定,不开展。但是也有少局部患者可由(-)(-)再转为再转为(+)(+),出现病情反复。出现病情反复。治疗治疗CHBCHB用抗病毒药可以使患者的用抗病毒药可以使患者的HBvDNAHBvDNA指数下降,它是临床治疗有效的指数下降,它是临床治疗有效的标志。总之,标志。总之,HBvDNAHBvDNA持续保持持续保持(-)(-)是理想的疗效。肝硬化的患者如是理想的疗效。肝硬化的患者如HBvDNAHBvDNA长期保持长期保持(-)(-),病情可能不会再开展。,病情可能不会再开展。第十七页,共二十三页。第十八页,共二十三页。第十九页,共二十三页。乙肝五项检查有很多结果,正常的结果有以下三种:一、乙肝五项全部阴性说明没有感染乙肝病毒,所以这种检查结果是正常的。但是需要注意的是,此种人,体内没有保护性抗体的存在,需要及时注射乙肝疫苗的,要按照0.1.6的原那么进行注射。二、乙肝外表抗体阳性,其余为阴性出现这种情况代表检查是正常的。乙肝外表抗体阳性表示以往有过乙肝病毒感染的历史,机体产生了一定的免疫力;或者接种乙肝疫苗或打过外表抗体免疫球蛋白;或者对HBV感染产生特异性免疫。三、乙肝外表抗体阳性、乙肝核心抗体阳性,其余为阴性这说明是接种了乙肝疫苗后,或是乙肝病毒感染后已康复的结果,已有免疫能力。这种检查结果也是正常的。第二十页,共二十三页。定量检测乙肝五项临床意义定量检测乙肝五项临床意义(1)可以提高检出灵敏度,可以缩短检出窗口期,防止漏检;(2)动态观察疗效和监测乙肝病情进展;(3)动态监测分析HBSAg和HBsAb浓度的变化,可以预见急性乙肝是不是处在恢复期;(4)提高乙肝核心抗体HBcAb的检出率,HBcAb浓度的上下能够反映病毒感染的状况,同时单纯HBcAb阳性不能排除乙肝感染;(5)对健康检查而言,定量检查乙肝外表抗体可以判断是否免疫成功或正具有中和HBV的免疫力,对乙肝的预防起到监督作用。HBsAb的含量在10 mIU/ml以上的患者在用酶法检测查就可呈HBsAb阳性结果,但并不提示机体都一定具有免疫力,而HBsAb的含量在10 mIU/ml-100 mIU/ml之间的样本,定性虽为阳性,但此时机体对乙肝病毒的免疫能力较弱,甚至不能预防HBV感染,仍然有感染HBV的危险。作为定量检查,依据HBsAb的含量能够判断机体对HBV的免疫状态及乙肝疫苗的免疫效果;(6)在慢性肝炎的治疗期间患者对了解自身病情的变化最为关切,乙肝五项定量测定乙肝标志物的浓度使患者能够对自身的病状有更明确的了解,提高治疗信心,并且也加强了医生的信任度,可帮助改善医患关系,有益于病患的治疗。第二十一页,共二十三页。第二十二页,共二十三页。内容总结乙肝五项。但另一种情况可能是乙肝病毒发生了变异,此时血清中无HBeAg,但可产生抗一HBe,出现这种情况就需要查HBVDNA来判定是否还有病毒存在。其他,HBVDNA是病毒的遗传基因,存在于病毒的核心部位,它的阳性和HBeAg阳性意义根本是一致的。因此,公认的抗病毒治疗是否有效,主要是以HBeAg和HBVDNA的阴转或定量的明显减少为指标第二十三页,共二十三页。