实验六、细胞膜的渗透性.ppt

南京晓庄学院南京晓庄学院生命科学系实验教学中心生命科学系实验教学中心实验四实验四 细胞膜的渗透性细胞膜的渗透性指导教师：吴雨龙指导教师：吴雨龙上课班级：上课班级：1.1.了解溶血现象及其发生机制。了解溶血现象及其发生机制。2.2.了解细胞膜的渗透性及各类物质进入细胞了解细胞膜的渗透性及各类物质进入细胞的速度。的速度。一、实验目的：一、实验目的：细胞膜是细胞与环境进行物质交换的选择细胞膜是细胞与环境进行物质交换的选择通透性屏障，是一种半透膜，可选择性控制物通透性屏障，是一种半透膜，可选择性控制物质进出细胞。质进出细胞。将红细胞放在低渗盐溶液中，水分子大量将红细胞放在低渗盐溶液中，水分子大量渗到细胞内，可使细胞胀破，血红蛋白释放到渗到细胞内，可使细胞胀破，血红蛋白释放到介质中，由不透明的红细胞悬液变为红色透明介质中，由不透明的红细胞悬液变为红色透明的血红蛋白溶液，这种现象称为溶血。的血红蛋白溶液，这种现象称为溶血。二、实验原理：二、实验原理：将红细胞放在某些等渗盐溶液中，由于红细将红细胞放在某些等渗盐溶液中，由于红细胞膜对各种溶质的通透性不同，有的溶质可进入，胞膜对各种溶质的通透性不同，有的溶质可进入，有的溶质不能进入，进入红细胞的溶质能提高红有的溶质不能进入，进入红细胞的溶质能提高红细胞的渗透压，使水进入红细胞，引起溶血。由细胞的渗透压，使水进入红细胞，引起溶血。由于溶质透入速度不同，溶血时间也不同，因此，于溶质透入速度不同，溶血时间也不同，因此，发生溶血现象所需时间长短可作为测量物质进入发生溶血现象所需时间长短可作为测量物质进入红细胞速度的一种指标。本实验选用红细胞作为红细胞速度的一种指标。本实验选用红细胞作为细胞膜透性的实验材料，将其放入不同的介质溶细胞膜透性的实验材料，将其放入不同的介质溶液中，观察红细胞的变化。液中，观察红细胞的变化。二、实验原理：二、实验原理：1.1.器材：器材：50ml 50ml烧杯、烧杯、10ml10ml移液管、滴管、试管移液管、滴管、试管1212支、试管架支、试管架 2.2.试剂：试剂：0.9%0.9%生理盐水；生理盐水；2 2种低渗溶液：种低渗溶液：0.017mol/L0.017mol/L氯化钠和氯化钠和0.032mol/L0.032mol/L葡萄葡萄糖；糖；1010种等渗溶液：种等渗溶液：0.17mol/L0.17mol/L氯化钠、氯化钠、0.32mol/L0.32mol/L葡葡萄糖、萄糖、0.17mol/L0.17mol/L氯化铵、氯化铵、0.17mol/L0.17mol/L醋酸铵、醋酸铵、0.17mol/L0.17mol/L硝酸钠、硝酸钠、0.12mol/L0.12mol/L草酸铵、草酸铵、0.12mol/L0.12mol/L硫酸硫酸钠、钠、0.32mol/L0.32mol/L甘油、甘油、0.32mol/L0.32mol/L乙醇、乙醇、0.32mol/L0.32mol/L丙丙酮。酮。3.3.兔血兔血三、实验材料：三、实验材料：1.1.兔红细胞悬液的制备：兔红细胞悬液的制备：取取50ml50ml小烧杯一只，加小烧杯一只，加1 1份兔血和份兔血和1010份份0.17mol/L0.17mol/L氯化钠溶液，形成一种不透明氯化钠溶液，形成一种不透明的红色液体，此即稀释兔血。的红色液体，此即稀释兔血。四、实验步骤：四、实验步骤：2.2.溶血现象的观察：溶血现象的观察：取试管取试管2 2支，分别加入支，分别加入0.017mol/L0.017mol/L氯化钠氯化钠和和0.032mol/L0.032mol/L葡萄糖低渗溶液葡萄糖低渗溶液5ml 5ml，再加，再加入入0.5ml0.5ml制备好的兔红细胞悬液，注意观察制备好的兔红细胞悬液，注意观察溶液颜色的变化，由不透明的红色悬液变溶液颜色的变化，由不透明的红色悬液变成透明的血红蛋白溶液（红细胞发生破裂，成透明的血红蛋白溶液（红细胞发生破裂，造成造成100%100%红细胞溶血，使光线比较容易透红细胞溶血，使光线比较容易透过溶液）。过溶液）。四、实验步骤：四、实验步骤：3.3.红细胞的渗透性红细胞的渗透性（1 1）取试管一支，加入）取试管一支，加入0.17mol/L0.17mol/L氯化钠溶液氯化钠溶液5ml5ml，再加入，再加入0.5ml0.5ml制备好的兔红细胞悬液，制备好的兔红细胞悬液，轻轻摇动，混匀后静置于温室中，观察试轻轻摇动，混匀后静置于温室中，观察试管中发生溶血的时间及其变化。管中发生溶血的时间及其变化。注意是否有颜色变化？是否有溶血现象？为注意是否有颜色变化？是否有溶血现象？为什么？什么？四、实验步骤：四、实验步骤：（2 2）分别在下列几种等渗溶液中进行实验，）分别在下列几种等渗溶液中进行实验，步骤同（步骤同（1 1）。）。0.32mol/L 0.32mol/L葡萄糖葡萄糖 0.17mol/L 0.17mol/L氯化铵氯化铵 0.17mol/L0.17mol/L醋酸铵醋酸铵 0.17mol/L 0.17mol/L硝酸钠硝酸钠 0.12mol/L0.12mol/L草酸铵草酸铵 0.12mol/L 0.12mol/L硫酸钠硫酸钠 0.32mol/L0.32mol/L甘油甘油 0.32mol/L 0.32mol/L乙醇乙醇 0.32mol/L 0.32mol/L丙酮丙酮四、实验步骤：四、实验步骤：1 1、离心机使用时，要将配平后的离心管对称、离心机使用时，要将配平后的离心管对称放置在离心机内，禁止未配平就放入离心放置在离心机内，禁止未配平就放入离心机和非对称放置离心管。机和非对称放置离心管。2 2、试管中有红细胞和测试溶液时，不应强力、试管中有红细胞和测试溶液时，不应强力摇晃，以免造成人为的红细胞破裂。摇晃，以免造成人为的红细胞破裂。3 3、目测法判断标准：快速溶血：；慢、目测法判断标准：快速溶血：；慢速溶血：或；不溶血：。速溶血：或；不溶血：。五、注意事项：五、注意事项：记录观察到的现象，并对实验结果进行分析和比较。记录观察到的现象，并对实验结果进行分析和比较。六、实验结果：六、实验结果：试试管管编编号号是否溶血是否溶血时间时间结结果分析果分析1.5ml氯化钠+0.5ml稀释兔血2.5ml氯化铵+0.5ml稀释兔血3.5ml醋酸铵+0.5ml稀释兔血4.5ml硝酸钠+0.5ml稀释兔血5.5ml草酸铵+0.5ml稀释兔血6.5ml硫酸钠+0.5ml稀释兔血7.5ml葡萄糖+0.5ml稀释兔血 8.5ml甘 油+0.5ml稀释兔血 9.5ml乙 醇+0.5ml稀释兔血 10.5ml丙 酮+0.5ml稀释兔血