微生物实验六糖发酵实验.ppt

实验六实验六 糖发酵实验糖发酵实验林标声实验六实验六 糖发酵实验糖发酵实验n n一、实验目的一、实验目的n n1 1、了解糖发酵的原理和在肠道细菌鉴定中 的重要作用。二、实验原理二、实验原理n n糖发酵试验是最常用的糖发酵试验是最常用的生化反应【糖发酵实验，生化反应【糖发酵实验，生化反应【糖发酵实验，生化反应【糖发酵实验，IMVICIMVICIMVICIMVIC实验（吲哚、甲基红、伏普、柠檬酸盐实验）实验（吲哚、甲基红、伏普、柠檬酸盐实验）实验（吲哚、甲基红、伏普、柠檬酸盐实验）实验（吲哚、甲基红、伏普、柠檬酸盐实验）】，在肠道细菌的鉴定上尤为重要。绝大多数细，在肠道细菌的鉴定上尤为重要。绝大多数细菌都能利用糖类作为碳源和能源，但是它们在分菌都能利用糖类作为碳源和能源，但是它们在分解糖的能力上有很大的差异，有些细菌能分解某解糖的能力上有很大的差异，有些细菌能分解某种糖并产酸（如乳酸、醋酸、丙酸等）和气体种糖并产酸（如乳酸、醋酸、丙酸等）和气体（如氢、甲烷、二氧化碳等）；有些细菌只产酸（如氢、甲烷、二氧化碳等）；有些细菌只产酸不产气。例如不产气。例如大肠杆菌能分解乳糖和葡萄糖产酸大肠杆菌能分解乳糖和葡萄糖产酸大肠杆菌能分解乳糖和葡萄糖产酸大肠杆菌能分解乳糖和葡萄糖产酸并产气；并产气；并产气；并产气；伤寒杆菌能分解葡萄糖产酸不产气，不伤寒杆菌能分解葡萄糖产酸不产气，不能分解乳糖；枯草芽孢杆菌分解葡萄糖产酸产气，能分解乳糖；枯草芽孢杆菌分解葡萄糖产酸产气，不能分解乳糖，不能分解乳糖，普通变形杆菌能分解葡萄糖产酸、普通变形杆菌能分解葡萄糖产酸、普通变形杆菌能分解葡萄糖产酸、普通变形杆菌能分解葡萄糖产酸、产气，但不能分解乳糖产气，但不能分解乳糖产气，但不能分解乳糖产气，但不能分解乳糖。产酸产气的鉴定产酸产气的鉴定 产酸的判断产酸的判断：指示剂：指示剂溴甲酚紫溴甲酚紫(pH52为黄为黄色，色，pH68为紫色为紫色)，当发酵产酸时，使培，当发酵产酸时，使培养基养基由紫色变为黄色由紫色变为黄色。产气的判断产气的判断：倒置的德汉氏小管（倒置的德汉氏小管（有无气泡）有无气泡）糖发酵试验结果：糖发酵试验结果：右侧为空白对照，右侧为空白对照，左侧为发酵产酸阳左侧为发酵产酸阳性，但不产气，中性，但不产气，中间为产酸、产气间为产酸、产气三、实验器材三、实验器材 n n大肠杆菌，普通变形杆菌斜面各1支；盛有葡萄糖发酵培养基的试管和乳糖发酵培养基的试管各3支（内装有倒置的德汉氏小管），试管架，接种环等。四、实验方法和步骤四、实验方法和步骤n n1 1、编号、编号、编号、编号n n用记号笔在各试管上分别标明发酵培养基名称和所接种的菌用记号笔在各试管上分别标明发酵培养基名称和所接种的菌名。名。n n2 2、接种、接种、接种、接种n n取盛有葡萄糖发酵培养基的试管取盛有葡萄糖发酵培养基的试管3 3支，按编号支，按编号1 1支接种大肠杆支接种大肠杆菌，另菌，另1 1支接种枯草芽孢杆菌，第支接种枯草芽孢杆菌，第3 3支不接种，作为对照。另支不接种，作为对照。另取乳糖发酵培养基试管取乳糖发酵培养基试管3 3支，同样支，同样1 1支接种大肠杆菌，支接种大肠杆菌，1 1支接种支接种枯草芽孢杆菌，第枯草芽孢杆菌，第3 3支不接种，作为对照。支不接种，作为对照。n n3 3将上述已接种的葡萄糖和乳糖发酵试管和对照管置将上述已接种的葡萄糖和乳糖发酵试管和对照管置3737温温室中培养室中培养2424小时。小时。n n4 4观察结果，观察结果，并填表记录并填表记录并填表记录并填表记录。五、实验结果五、实验结果糖糖糖糖类发类发类发类发酵酵酵酵大大大大肠肠肠肠杆菌杆菌杆菌杆菌普通普通普通普通变变变变形杆菌形杆菌形杆菌形杆菌对对对对照照照照葡萄糖葡萄糖葡萄糖葡萄糖发发发发酵酵酵酵乳糖乳糖乳糖乳糖发发发发酵酵酵酵 将实验结果填入下表。分别用产酸产气、产酸不产气、不产酸不产气将实验结果填入下表。分别用产酸产气、产酸不产气、不产酸不产气表示表示六、思考题六、思考题n n假如某种微生物可以有氧代谢葡萄糖，发假如某种微生物可以有氧代谢葡萄糖，发酵试验应该出现什么结果？酵试验应该出现什么结果？