实验一、ABO血型的鉴定.ppt

实验一实验一A B O血型的鉴定目的要求目的要求加深理解血型分型的依据及其意义；加深理解血型分型的依据及其意义；学会一种鉴定血型的方法。学会一种鉴定血型的方法。n n 原理原理 n n 用已知的凝集素（如抗用已知的凝集素（如抗A A、抗、抗B B）的标准血清，）的标准血清，鉴定被检查者红细胞上未知的凝集原（如鉴定被检查者红细胞上未知的凝集原（如A A凝集凝集原或原或B B凝集原），红细胞上含何种凝集原即为何种凝集原），红细胞上含何种凝集原即为何种血型。血型。n n 实验用品实验用品 n n 含抗含抗A A和抗和抗B B凝集素标准血清，采血用具，双凹凝集素标准血清，采血用具，双凹玻片，牙签，玻片，牙签，75%75%酒精棉球，玻璃蜡笔等。酒精棉球，玻璃蜡笔等。n n 实验对象实验对象 人人方法步骤方法步骤n n1 1、玻片法、玻片法n n（1 1）取双凹玻片一块，用玻璃蜡笔在两端分别标）取双凹玻片一块，用玻璃蜡笔在两端分别标以以A A、B B字样。字样。n n（2 2）在）在A A侧中央滴含抗侧中央滴含抗B B凝集素标准血清一滴，凝集素标准血清一滴，在在B B侧中央滴含抗侧中央滴含抗A A凝集素标准血清一滴。凝集素标准血清一滴。n n（3 3）消毒手指或耳垂后，针刺取血）消毒手指或耳垂后，针刺取血1 12 2滴于盛有滴于盛有1ml1ml生理盐水之试管混匀，制成红细胞混悬液。分生理盐水之试管混匀，制成红细胞混悬液。分别用二根牙签取混悬液加入别用二根牙签取混悬液加入A A型和型和B B型血清中，并型血清中，并将玻片转动数次后，使其充分混匀，放置将玻片转动数次后，使其充分混匀，放置10101515分钟观察结果。分钟观察结果。n nA 抗抗B B凝集素凝集素 B抗抗A A凝集素凝集素4、ABO血型的鉴定血型的鉴定用已知的标准血清（含有凝集素），检测未知的凝集原用已知的标准血清（含有凝集素），检测未知的凝集原 结果分析结果分析n n1 1、甲玻片上红细胞在含抗、甲玻片上红细胞在含抗A A、B B两种凝集素标准两种凝集素标准血清中都不发生凝集，说明红细胞上血清中都不发生凝集，说明红细胞上A A、B B两种凝两种凝集原都没有，则血型为集原都没有，则血型为OO型。型。n n2 2、乙玻片上红细胞在含抗、乙玻片上红细胞在含抗B B标准血清中不凝集，标准血清中不凝集，在含抗在含抗A A凝集素标准血清中发生凝集，说明红细凝集素标准血清中发生凝集，说明红细胞上含胞上含A A凝集原，则血型为凝集原，则血型为A A型。型。n n3 3、丙玻片与乙玻片刚好相反，说明红细胞上含、丙玻片与乙玻片刚好相反，说明红细胞上含B B凝集原，则血型为凝集原，则血型为B B型。型。n n4 4、丁玻片上红细胞在、丁玻片上红细胞在A A、B B两种标准血清中都发两种标准血清中都发生凝集，说明红细胞上含有生凝集，说明红细胞上含有A A、B B两种凝集原，则两种凝集原，则血型为血型为ABAB型。型。结论结论 n n红细胞上的红细胞上的A A、B B凝集原被测知，即可作出凝集原被测知，即可作出ABOABO血型鉴定。血型鉴定。n n n n 注意事项注意事项 n n1 1、实验前对所用、实验前对所用A A、B B两种标准血清要经过校准，合格两种标准血清要经过校准，合格 者才能用。者才能用。n n2 2、加入玻片或试管中的、加入玻片或试管中的A A、B B两种标准血液切不可混淆错两种标准血液切不可混淆错乱。乱。n n3 3、制备红细胞混悬液摇匀时，不可用力摇振，要轻轻将、制备红细胞混悬液摇匀时，不可用力摇振，要轻轻将试管来回倒置，以防红细胞破裂溶血。试管来回倒置，以防红细胞破裂溶血。n n4 4、玻片或试管内加入红细胞混悬液时所用牙签要分别专、玻片或试管内加入红细胞混悬液时所用牙签要分别专用，不能两侧共用。用，不能两侧共用。异常现象讨论异常现象讨论 n n本实验一般不会出现异常情况，但有时所测血型与某人原本实验一般不会出现异常情况，但有时所测血型与某人原来正式鉴定过的血型不相符，其原因一方面可能所采用的来正式鉴定过的血型不相符，其原因一方面可能所采用的标准血清存放时间过长，已失去标准血清的作用，需要用标准血清存放时间过长，已失去标准血清的作用，需要用重新校准的新鲜标准血清；其次可能系实验场所不清洁，重新校准的新鲜标准血清；其次可能系实验场所不清洁，红细胞悬液及血清有严重污染而产假凝集。红细胞悬液及血清有严重污染而产假凝集。n n 思考题思考题 n n n n 若无标准血清，已知某人血型为若无标准血清，已知某人血型为A A型或型或B B型，能否用来鉴型，能否用来鉴定他人血型？如何鉴定？定他人血型？如何鉴定？