微生物试题及答案grdb.docx

1、什么么是微生生物？主主要特点点，举例例说明。   微生物是一切肉眼看不见或看不清的微小生物的总称。   特点：a.体积小，面积大：典型的菌株体积仅1m3左右，比面积却有6104         b.吸收多，转化快：发酵乳糖的细菌1小时可分解其自重1000-10000倍的乳糖           cc.生长长旺，繁繁殖快：大肠杆杆菌每分分裂1次次时间为为12.5-220.00分中，每每昼分裂裂72次次，后代代4722236665000亿万万个。           dd.适应应强，易易变异：某些硫硫细菌可可在2550甚甚至3000高高温下生生存。           ee.分布布广，种种类多：人体肠肠道中聚聚居着1100-4000种不同同微生物物，个数数大于1100万万亿。试述G+菌和GG-菌细细胞壁的的特点，并并说明革革兰氏染染色的机机理及重重要意义义？2、         试述GG+菌和和G-菌菌细胞壁壁的特点点，并说说明革兰兰氏染色色的机理理及重要要意义？     G-菌细胞胞壁的特特点是厚厚度较GG+菌薄薄，层次次较多，肽肽聚糖层层很薄（仅仅2-33nm），故故机械强强度较GG+菌弱弱。    机机理：通通过结晶晶紫液初初染和碘碘液媒染染后，在在细菌的的细胞膜膜内可形形成不溶溶与水的的结晶紫紫与碘的的复合物物。G+菌由于于其细胞胞壁较厚厚，肽聚聚糖网层层次多和和交联致致密，故故遇脱色色剂乙醇醇处理时时，因失失水而使使网孔缩缩小，再再加上它它不含类类脂，故故乙醇的的处理不不会溶出出缝隙，因因此能把把结晶紫紫和碘的的复合物物牢牢留留在壁内内，使其其保持紫紫色。而而G-菌菌因其细细胞壁薄薄，外膜膜层类脂脂含量高高，肽聚聚糖层薄薄和较联联度差，遇遇脱色剂剂乙醇后后，以类类脂为主主的外膜膜迅速溶溶解，这这时薄而而松散的的肽聚糖糖网不能能阻挡结结晶紫与与碘的复复合物的的溶出，因因此细胞胞退成无无色，这这时，再再经沙黄黄等红色色染料复复染，就就使G-菌呈红红色，而而G+菌菌仍为紫紫色。     意义：通过这这一染色色过程，可可把几乎乎所有细细菌分为为G+和和G-两两类，是是分离鉴鉴定菌种种的重要要指标。同同时证明明了G+和G-主要由由于其细细胞壁化化学成分分的差异异而引起起了物理理特性（脱脱色能力力）的不不同，正正由于这这一物理理特性的的不同才才决定了了最终染染色反应应的不同同试比较GG+和GG-在一一系列生生物学特特性上的的差异。3、         试比较较G+和和G-在在一系列列生物学学特性上上的差异异。比较较项目          G+细菌          G-细菌革革兰氏染染色反应应         能能阻留结结晶紫而而染成紫紫色         可经脱脱色而复复染成红红色肽聚聚糖         厚，层层次多          薄，一一般单层层磷壁酸酸         多多数含有有         无无外膜          无          有脂脂多糖（LLPS）          无          有类类脂和脂脂蛋白含含量         低（仅仅抗酸性性细菌含含有类脂脂）         高鞭毛毛结构          基体体上着生生两个环环         基基体上着着生4个个环产毒毒素         以外毒毒素为主主         以以内毒素素为主对对机械力力的抗性性         强强         弱弱细胞壁壁抗溶菌菌酶         弱         强对青青霉素和和磺胺          敏感感         不不敏感对对链霉素素、氯霉霉素、四四环素          不敏敏感         敏感碱碱性染料料的抑菌菌作用          强          弱对对阴离子子去污剂剂         敏敏感         不敏感感对叠氮氮化钠          敏感感         不不敏感对对干燥          抗性性强         抗性弱弱产芽孢孢         有有的产          不产产细胞芽孢孢有何实实践重要要性，产产芽孢的的细菌有有哪几类类？4、         细胞芽芽孢有何何实践重重要性，产产芽孢的的细菌有有哪几类类？芽孢孢是某些些细菌在在其生长长发育后后期，在在细胞内内形成的的一个圆圆形或椭椭圆形、壁壁厚、含含水量低低、抗屈屈性强的的休眠构构造。无无繁殖功功能，芽芽孢有极极强的抗抗热抗辐辐射，抗抗化学药药物和抗抗静水压压等特性性。芽孢孢具有极极强的休休眠能力力，可以以保存几几年至几几十年而而不死亡亡，芽孢孢的有无无、形态态和位置置，在细细菌分类类和鉴定定中是重重要的形形态学指指标，实实践上芽芽孢的存存在亦利利于菌种种的筛选选与保藏藏，有利利于对各各种消毒毒、杀菌菌措施优优劣的判判断等。产芽孢的菌有：革兰氏阳性菌：芽孢杆菌属，梭菌属，芽孢八叠球菌属              革兰氏阴性菌：脱硫肠状菌属7、列表表比较细细菌、放放线菌、霉霉菌、酵酵母菌细细胞结构构、群体体特征及及繁殖方方式的异异同点。           细胞结构        群体特征        繁殖方式细菌        单细胞原核生物，细胞由细胞壁，细胞膜。细胞质和内含物，核区组成，少数含有特殊结构，如鞭毛、荚膜等。革兰氏染色有G+、G-        菌落一般呈现湿润较光滑，较粘稠，易挑起，质地均匀，菌落正反面及边缘中心部位颜色一致        主要为裂殖少数为牙殖放线菌        单细胞多核原核生物，革兰氏染色显阳性，细胞壁的成分主要为肽聚糖，细胞呈丝状分枝，形成基内菌丝，气生菌丝        干燥、不透明、表面呈致密的丝绒状，上有一层彩色“干粉”难挑起，菌落正反面颜色不一致        多数进行孢子繁殖，少数以基内菌丝分裂，形成孢子状细胞进行繁殖霉菌        由菌丝构成，直径3-10m，与酵母菌细胞类似，细胞壁主要有几丁质构成，少数含有维生素        菌落的形态较大，质地疏松，外观干燥，不透明，呈现或松或紧的蛛网状、绒毛状、棉絮状，与培养基结合紧密，不易挑起        气生菌丝转化成各种子实体，子实体上或里面产生无性或有性孢子，进行繁殖。酵母菌        细胞直径为细菌10倍，是典型的真核微生物细胞主要由细胞壁，细胞膜，细胞核构成。细胞壁分为三层，成分为酵母维生素        较湿润，较透明，表面较光滑，容易挑起，菌落知底均匀，正反面以及边缘与中央部位的颜色一致。        无性繁殖：牙殖，裂殖，无性孢子有性繁殖：产生子囊孢子如何获得得细菌（GG+、GG-）、放放线菌、酵酵母菌、霉霉菌的原原生质体体？G+菌原生生质体获获得：青青霉素、溶溶菌酶GG-菌原原生质体体获得：EDTTA鳌合合剂处理理，溶菌菌酶   放线菌菌原生质质体获得得：青霉霉素、溶溶菌酶霉霉菌原生生质体获获得：纤纤维素酶酶酵母菌菌原生质质体获得得：蜗牛牛消化酶酶营养类型型         能能源         氢供体体         基基本碳源源         实实例光能能无机营营养型（光光能自养养型）          光          无机机物         CO22         蓝蓝细菌、紫紫硫细菌菌、绿硫硫细菌、藻藻类光能能有机营营养型（光光能异养养型）          光          有机机物         CO22及简单单有机物物         红红螺菌科科的细菌菌（即紫紫色无硫硫细菌）化能无机营养型（化能自养型）        无机物        无机物        CO2        硝化细菌、硫化细菌、铁细菌、氢细菌、硫磺细菌等化能有机营养型（化能异养型）        有机物        有机物        有机物        绝大多数细菌和全部真核生物试分析麦麦康开培培养基的的各组分分的主要要作用是是什么？该培养养基属于于什么培培养基？  AA                          功功能蛋白白胨         氮源乳乳糖         碳源NNaCll         无无机物牛牛胆酸盐盐         生生长因子子PH77.4          适宜宜菌生长长1%中中性红          指示示剂发酵酵管         判断是是否产气气属于半半组合培培养基是否所有有的微生生物都需需要生长长因子？如何满满足微生生物对生生长因子子的需要要？    生生长因子子是一类类调节微微生物正正常代谢谢所必须须，但不不能用简简单的碳碳源、氮氮源自行行合成的的有机物物。但并并非任何何微生物物都需要要从外界界吸收生生长因子子。如：多数真真菌、放放线菌和和不少细细菌。EE.Cooli等等都是不不需要外外界提供供生长因因子的生生长因子子自养微微生物。生生长因子子异养微微生物，如如乳酸菌菌，各种种动物致致病菌、原原生动物物、支原原体等。    在配置微生物培养基时，如配置天然培养基，可加入富含生长因子的原料酵母膏、玉米浆、肝浸液、麦芽汁等；如配置组合培养基，可加入复合维生素溶液。测定微生生物的繁繁殖数常常用那些些方法？比较它它们的优优缺点？     （一一）、直直接法：在显微微镜下直直接观察察细胞并并进行计计数的方方法，所所的结果果包括死死细胞。           比例计数法：很粗的计算方法           血球计数板法：可以数出死菌和活菌的数目较精确，但亦有一定误差。    （二）、间接计数法：活菌计数法           液体稀释法（MPN）：不准确           平板菌落计数法：不能全面反映样品中的活菌数，技术要求较高。测定微生生物的生生长量有有那些方方法？比比较优缺缺点？     （一）、直直接法：              aa.测体体积：很很粗的方方法，用用于初步步比较用用。            b.称称干重：可用离离心法或或过滤法法测定。    （二）、间接法：           a.比浊法：可用目测观察未知浓度菌的浓度高低，精确度低，方便；精确测定可用分光度计，方法简单，可随时测出菌体生长情况。           b.生理指标法：                     测含氮量，含碳量等，精确度很高，但测定技术要求高。列表比较较有氧呼呼吸、无无氧呼吸吸、发酵酵的异同同点。呼呼吸类型型         氧氧化机制制         最最终电子子受体          产物物         产产能         呼吸链链有氧呼呼吸         有机物物         OO2         CO22、 HH2O          多          完整整无氧呼呼吸         有机物物         无无机氧化化物延胡胡索酸          COO2、 H2OONO、NN2         次之          不完完整发酵酵         有有机物          氧化化型中间间代谢产产物醛酮酮         还还原型中中间代谢谢产物          少          无，底底物水平平磷酸化化诱变育种种的基本本环节有有那些？整个工工作的关关键是什什么？     工作关关键：选择简简便有效效的诱变变剂    挑选优优良的出出发菌株株                  处理单单孢子悬悬液          选用最最适诱变变剂量充分利利用复合合处理的的协同效效应利利用和创创造形态态，生理理和产量量相关指指标设设计和采采用高效效的筛选选方案方方法。创造新新型筛选选方法。试述艾姆姆氏（AAmess）法检检测致癌癌剂的理理论依据据，一般般方法和和优点。    鼠伤寒沙门氏菌的组氨酸营养缺陷型菌株在基本培养基的平板上不能生长，如发生回复突变成原养型后能生长。方法大致是在含待测可疑“三致”物（例如黄曲霉毒素、二甲氨基偶氮苯、“反应停”或二垩英等）的试样中，加入鼠肝匀浆液，经一段时间保温后，吸入滤纸片中，然后将滤纸片放置于平板中央。经过培养后，出现三种情况：在平板上无大量菌落产生，说明试样中不含诱变剂；在纸片周围有一抑制圈，其外周围出现大量菌落，说明试样中有某种高浓度诱变剂存在；在纸片周围长有大量菌落，说明试样中有浓度适当的诱变剂存在。    优点：快速、准确和费用省等。为什么在在进行诱诱变处理理时，要要把成团团的微生生物细胞胞或孢子子制成充充分分散散的单细细胞或孢孢子悬液液？    一一方面分分散状态态的细胞胞，可以以均匀的的接触诱诱变剂，另另一方面面又可避避免长出出不纯菌菌落。在在某些微微生物中中，由于于许多微微生物细细胞内同同时含有有几个核核，即使使用单细细胞悬浮浮液还是是易长出出不纯菌菌；有时时虽处理理了单核核的细胞胞或孢子子，由于于诱变剂剂只作用用DNAA双链中中某的一一条单链链，故某某一突变变还是无无法反映映在当代代的表型型上。只只有经过过DNAA复制、细细胞分裂裂后，这这一变异异才在表表型上表表述，出出现不纯纯菌落。不不纯菌落落的存在在，是诱诱变育种种中初分分离的菌菌株经传传代后很很快出现现生产性性状“衰衰退”的的主要原原因。故故对霉菌菌、放线线菌应处处理分生生孢子，芽芽孢杆菌菌则应处处理芽孢孢。现有微生生物的包包藏方法法可分几几类？试试用表解解之。方方    法         主要措措施         适宜菌菌种         保藏期期         评评价冰箱箱保藏法法（斜面面）         低温          各大大类         约1-6月          简便便冰箱保保藏法（半半固体）          低温温、避氧氧         细细菌、酵酵母菌          约66-122月         简便石石蜡油封封保藏法法         低低温、阻阻氧         各大类类         约约1-22年         简便甘甘油悬浮浮液保藏藏法         低温、保保护剂干干燥、无无营养          细菌菌、酵母母菌         约100年         较简便便砂土保保藏法          干燥燥、无营营养         产孢子子的微生生物         约1-10年年         简简便有效效冷冻干干燥保藏藏法         干燥、低低温、无无氧、有有保护剂剂         各各大类          >55-155年         繁而高高效液氮氮保藏法法         超超低温、有有保护剂剂         各各大类          >115年          繁而而高效什么叫菌菌种退化化？如何何区别衰衰退、饰饰变与杂杂菌污染染？    菌菌种退化化即生产产性能退退化，遗遗传标记记丢失，原原有典型型的性状状变得不不典型。    衰退指由于自发突变的结果而使某物种原有一系列生物学性状发生量或质变的现象。    饰变是指外表的修饰性改变，即一种不涉及及遗传物质结构改变而只发生在转录、转译水平上的表型变化。杂菌污染则是指混入其它菌。何谓菌种种的复壮壮？如何何达到菌菌种复壮壮？    复复壮：狭狭义指在在菌种已已发生衰衰退的情情况下通通过纯种种分离和和测定典典型性状状、生产产性能等等指标，从从衰退的的群体中中找出少少数尚未未退化的的个体，以以达到恢恢复菌株株固有性性状的相相应措施施。而广广义的复复壮则应应是一项项积极的的措施，即即在菌种种的典型型特征或或生产性性状尚未未衰退前前，就经经常有意意识的采采取纯种种分离和和生产性性状的测测定工作作，以期期从中选选择到自自发的正正变个体体。    达达到菌种种复壮的的方法：a.纯纯种分离离  bb.通过过宿主体体内生长长进行复复壮   c.淘淘汰衰退退个体什么是微微生物的的正常菌菌群？试试分析肠肠道正常常菌群和和人体的的关系。    生活在健康动物各部位、数量大、种类较稳定，一般能发挥有益作用的微生物种群。关系：在一般情况下，正常菌群与人体保持着一个十分和谐的平衡关系。      肠道正常菌群对宿主有很多有益作用，包括排阻，抑制外来致病菌，提供维生素等营养，产生淀粉酶、蛋白酶等有助消化的酶类，分解有毒或致癌物质，产生有机酸，降低肠道PH和促进他的蠕动，刺激机体的免疫系统并提高其免疫力，以及存在一定程度的固氮作用等。食品中检测大肠菌群的意义：1、        测定食品中直接或间接手粪便污染程度。2、        测定肠道致病菌污染的可能性。从微生物物学角度度分析低低酸性的的食品和和酸性食食品如要要长期保保存，应应分别采采取什么么温度杀杀菌？为为什么？低酸性性食品：高温高高压1221。因因所有微微生物均均能生长长，芽孢孢的耐热热温度是是1200高酸酸性食品品：沸水水90-1000，酸酸性中酵酵母菌、霉霉菌的孢孢子在995以以上均可可以杀死死。引起以下下食品变变质的微微生物类类群是什什么？为为什么？A：消消毒牛奶奶：细菌菌，因细细菌表面面积大，生生长速度度最快。B：真空包装的蜜饯产品：酵母菌，在高渗情况下，Aw0.85，兼在厌氧的酵母菌可以活。C：面粉，干霉菌，因干性霉菌可以分解淀粉，引起面粉发霉。Aw小。D：充CO 不足的碳酸饮料：酵母菌，PH=4呈酸性，霉菌酵母菌可以生长，但CO 抑制了细菌的生长。E：杀菌不足的肉类罐头：芽孢未杀死。设计筛选选高温淀淀粉酶产产生菌的的方案，指指出关键键步骤。1、        来源：纺织厂腐败的浆料，面粉厂垃圾堆中采集菌样。2、        富集：淀粉作为唯一C源的培养基中高温培养。3、        分离：依据平板菌落周围、淀粉水解全的大小进行分离。4、        诱变：用化学或物理方法。5、        初筛6、        复筛7、下述微生生物的生生态环境境如何？设想如如何分离离。噬盐盐菌：海海滩，高高盐环境境，如食食品淹制制厂，盐盐厂等，在在培养基基中有一一定盐厌厌氧菌：无氧条条件；河河底污泥泥、沼气气池，堆堆肥中心心等。进进行厌氧氧培养，在在通过影影印培养养高渗酵酵母菌：酱油厂厂，糖浆浆等   高浓浓度糖的的高层培培养基中中乳酸菌菌：乳制制品厂周周围，蔬蔬菜腌制制中    酸酸的环境境 phh4.5纤维维素分解解菌：森森林、木木厂、牧牧场、草草厂等     以纤维维素为CC源的培培养基中中金黄色色葡萄球球菌：化化脓的伤伤口菌种保藏藏原理：根据微微生物生生理、生生化特点点，选用用优良的的菌株，最最好是他他们的休休眠体，人人工的创创造适合合休眠的的环境条条件，即即干燥、低低温、缺缺乏氧气气和养料料等使其其代谢活活动处于于最低状状态，但但又不至至于死亡亡，从而而达到保保藏的目目的。冷冻干燥燥保藏法法的过程程、原理理冷冻干燥燥保藏法法： 11、准备备安 管管    2、准准备菌种种    3、制制各菌悬悬液及分分离   4、冷冷冻：迅迅速降温温至-440-70摄摄氏度    55、抽真真空：完完成时有有干燥块块    6、抽抽真空，封封口   7、冰冰箱保藏藏冷冻干干燥保藏藏法原理理：通过过洗涤液液体的所所有对细细胞生长长有害的的物质，脱脱脂牛奶奶或糖、甘甘油等可可以与大大分子形形成氢键键的物质质做保护护剂，防防止细胞胞损伤；在-220摄氏氏度以下下快速冻冻结，形形成的冰冰晶小，细细胞质浓浓缩现象象减少，防防止细胞胞损伤；在0摄摄氏度保保证不解解冻的条条件下，高高度的冷冷冻干燥燥，低温温、封口口，使保保藏时间间延长。从微生物物角度分分析酸奶奶生产的的关键及及原因。酸奶制作：     关键：1、用消毒的牛奶，以防止因牛奶而带入杂菌；2、缩短延滞期；3、控制冷藏的温度、时间，温度过低会有多种菌生长，过低高会破坏牛奶中的蛋白质，缩短培养时间，卫生指标数；4、酸度，PH4.5，芽孢不再生长，否则芽孢繁殖，而超出奶份高度。试分析下下列现象象产生的的主要原原因是什什么？如如何防止止？    11）添加加有山梨梨酸钾防防腐剂的的面包出出现中心心发粘变变质的情情况。         原因：加有山山梨酸钾钾防腐剂剂的面包包抑制了了霉菌、酵酵母菌的的生长，但但可能还还存在细细菌菌，淀淀粉发生生水解，在在Aw<<0.885烘制制过程中中产生。       防止：控制面包烘制中的水分。    2）经高温高压杀菌的低酸性罐头出现变质，检测发现其中有大量的革兰氏阴性杆菌。       原因：G-杆菌不耐热，高温杀菌后仍存在，则说明密封不严，因外界进入G-杆菌。       防止：密封过程中应严格把关。    3）把酿酒酵母接入煮过的糯米中室温发酵，无法制得酒酿。       原因：酵母菌发酵单糖，而不能发酵糯米中的淀粉，故不能制得酒酿。       方法：加入淀粉酶，使淀粉分解为糖类，酵母菌分解糖类，产生酒酿。在检出缺缺陷型过过程中采采用夹层层培养法法，为什什么基本本培养基基倒成“三三明治”？          培培养皿上上倒一薄薄层不含含菌的基基本培养养基，再再加上一一层混有有经过诱诱变剂处处理的菌菌液的基基本培养养基，其其上再浇浇一薄层层不含菌菌的基本本培养基基培养。最底层基本培养基若无则菌会在培养皿底长成一层膜；上层基本培养基可防止细菌蔓延生长，防止营养物质的渗透。经培养后，首次出现的菌落用记号笔标在皿底。然后，再倒上第四层培养基（完全培养基，有营养）倒入后在铺开来。在经培养所出现的形态较小的新菌落，即营养缺陷型。试比较GG+和GG-在一一系列生生物学特特性上的的差异。比较项目目 G+细菌菌 G-细菌菌革兰氏染染色反应应能阻留结结晶紫而而染成紫紫色可经脱色色而复染染成红色色肽聚糖厚，层次次多薄，一般般单层磷壁酸多数含有有无脂多糖（LPS）无有类脂和脂脂蛋白含含量低（仅抗抗酸性细细菌含有有类脂）高鞭毛结构构基体上着着生两个个环基体上着着生4个个环产毒素以外毒素素为主以内毒素素为主对机械力力的抗性性强弱细胞壁抗抗溶菌酶酶弱强对青霉素素和磺胺胺敏感不敏感对链霉素素、氯霉霉素、四四环素不敏感敏感碱性染料料的抑菌菌作用强 弱对阴离子子去污剂剂敏感不敏感对叠氮化化钠敏感不敏感对干燥抗性强  抗性弱产芽孢有的产不产