心脏生化标志物检验.pptx

第十二章第十二章心脏生化标志物心脏生化标志物检验检验心脏生化标志物检验共53页，您现在浏览的是第1页!节节 概述概述心脏生化标志物检验共53页，您现在浏览的是第2页!心脏生化标志物检验共53页，您现在浏览的是第3页!心脏的传导系统主要由特殊分化的心肌细心脏的传导系统主要由特殊分化的心肌细胞组成，位于心壁内，具有胞组成，位于心壁内，具有产生兴奋、传导冲动产生兴奋、传导冲动和维持心脏正常节律性搏动的功能。和维持心脏正常节律性搏动的功能。心肌细胞富含多种酶类和蛋白质，有些酶心肌细胞富含多种酶类和蛋白质，有些酶在心肌的含量较高，有些蛋白质是心肌细胞特异在心肌的含量较高，有些蛋白质是心肌细胞特异的。的。心脏生化标志物检验共53页，您现在浏览的是第4页!心脏的功能心脏的功能 心脏的功能为泵血。心脏实际上是个血心脏的功能为泵血。心脏实际上是个血液泵，由起搏传导细胞和收缩细胞所组成，不液泵，由起搏传导细胞和收缩细胞所组成，不停地进行收缩和舒张，舒张时接纳来自静脉的停地进行收缩和舒张，舒张时接纳来自静脉的回流血，收缩时将接纳的血液等量地排入动脉，回流血，收缩时将接纳的血液等量地排入动脉，保证血液周而复始，循环不断。保证血液周而复始，循环不断。心脏生化标志物检验共53页，您现在浏览的是第5页!2.蛋白类标志物蛋白类标志物 心肌中含有诸多蛋白质，这些蛋白质在体心肌中含有诸多蛋白质，这些蛋白质在体内发挥着重要功能。但内发挥着重要功能。但作为反映心脏结构和心作为反映心脏结构和心肌损伤的蛋白类标志物主要有：肌红蛋白肌损伤的蛋白类标志物主要有：肌红蛋白（Mb）和肌钙蛋白（）和肌钙蛋白（cTn）。）。正常人血中正常人血中Mb含量很低，当心肌损伤时，含量很低，当心肌损伤时，血中血中Mb明显增高；肌钙蛋白是心肌的结构蛋白，明显增高；肌钙蛋白是心肌的结构蛋白，由三个亚单位组成，即肌钙蛋白由三个亚单位组成，即肌钙蛋白C(cTnC)、肌钙、肌钙蛋白蛋白I(cTnI)、肌钙蛋白、肌钙蛋白T(cTnT)，其中，其中cTnI是心是心肌损伤的特异指标。肌损伤的特异指标。心脏生化标志物检验共53页，您现在浏览的是第6页!1.经典酶组经典酶组特性特性CKCK-MBASTLDH-HBD开始升高时间（开始升高时间（h）3-62-46-128-1212-24达峰值时间（达峰值时间（h）20-3012-244824-4848-72升高幅度（对照值倍数）升高幅度（对照值倍数）2-204-202-102-65-7.5阳性率（阳性率（%）95100938998回复正常时间（回复正常时间（d）2-433-57-1411-16诊断价值诊断价值早期诊早期诊断及预断及预后后早期诊早期诊断及预断及预后后后期诊后期诊断（特断（特异性差）异性差）后期诊后期诊断（特断（特异性差）异性差）后期诊后期诊断（特断（特异性高）异性高）心脏生化标志物检验共53页，您现在浏览的是第7页!3.CK/LDH比值比值 测定测定AMI病人病人CK/LDH比值发现，其峰值在发比值发现，其峰值在发病后病后12-16h，明显早于，明显早于CK和和CK-MB，其诊断阳性，其诊断阳性率在率在9-24h内为内为100%，且有很高的特异性，是，且有很高的特异性，是对对AMI最有实用的酶学指标最有实用的酶学指标，而且测定方法简单易行。，而且测定方法简单易行。除此，糖原磷酸化酶同工酶组、肌酸激酶同除此，糖原磷酸化酶同工酶组、肌酸激酶同工酶亚型的检测与分析对工酶亚型的检测与分析对AMI的诊断液非常有价值。的诊断液非常有价值。心脏生化标志物检验共53页，您现在浏览的是第8页!（三）其他疾病（三）其他疾病 充血性心力衰竭但无心肌梗死病人充血性心力衰竭但无心肌梗死病人，其血清，其血清AST及及LDH活性常升高活性常升高，LDH活性升高主要是由活性升高主要是由LDH5升高所致；但升高所致；但血清血清CK活性正常活性正常，主要由于，主要由于心力衰竭引起肝淤血、缺氧、肝细胞受损害所致。心力衰竭引起肝淤血、缺氧、肝细胞受损害所致。这些病人还可有血清这些病人还可有血清ALT升高。升高。慢性肺心病患者慢性肺心病患者血清超氧化物歧化酶血清超氧化物歧化酶（SOD）明显升高，急性加重期患者又明显高于）明显升高，急性加重期患者又明显高于缓解期的病人。缓解期的病人。心脏生化标志物检验共53页，您现在浏览的是第9页!第二节第二节心脏酶类标志物心脏酶类标志物检验检验心脏生化标志物检验共53页，您现在浏览的是第10页!【参考范参考范围】速率法速率法 109-145U/L109-145U/L（3737）比色法比色法 190-437190-437金氏金氏单位位【临床意床意义】心肌梗死患者在发生胸痛后心肌梗死患者在发生胸痛后8-12h LDH开始升开始升高，高，24-48h达高峰，酶活性升高可维持达高峰，酶活性升高可维持7d左右或更左右或更长，可作为急性心肌梗死后期的辅助诊断指标。升高长，可作为急性心肌梗死后期的辅助诊断指标。升高水平通常为正常的水平通常为正常的3-4倍，最高可达倍，最高可达10倍。倍。LDH中度中度升高见于心肌炎。升高见于心肌炎。心脏生化标志物检验共53页，您现在浏览的是第11页!【参考范围参考范围】正常人血清中正常人血清中LDH同工酶活性大小顺序为：同工酶活性大小顺序为：LDH2 LDH1 LDH3 LDH4LDH5。LDH1 （28.4 5.3）%LDH2 （41.0 5.0）%LDH3 （19.0 4.0）%LDH4 （6.6 3.5）%LDH5 （4.6 3.0）%心脏生化标志物检验共53页，您现在浏览的是第12页!二、肌酸激酶及其同工酶二、肌酸激酶及其同工酶1.血清肌酸激酶血清肌酸激酶肌酸激酶主要存在于骨骼肌、心肌、脑组织中。肌酸激酶主要存在于骨骼肌、心肌、脑组织中。【参考范围参考范围】男性（男性（U/L）女性（女性（U/L）25 10-65 7-55 30 15-105 10-80 37 38-174 26-140心脏生化标志物检验共53页，您现在浏览的是第13页!3.心脏手术和非心脏手术后都将导致心脏手术和非心脏手术后都将导致CK活性的增高，且增高的幅度与肌肉的损活性的增高，且增高的幅度与肌肉的损伤范围的大小以及手术时间的长短密切相关。伤范围的大小以及手术时间的长短密切相关。4.在急性脑外伤、脑膜炎、恶性肿瘤、在急性脑外伤、脑膜炎、恶性肿瘤、肺梗死、甲状腺功能低下时，肺梗死、甲状腺功能低下时，CK可可增高。可可增高。心脏生化标志物检验共53页，您现在浏览的是第14页!【临床意义临床意义】血浆中血浆中CK-MB主要来自心肌，升高常被认主要来自心肌，升高常被认为心肌损害特异性指标，对为心肌损害特异性指标，对心肌梗死早期诊断很心肌梗死早期诊断很有价值。有价值。在急性心肌梗死发病在急性心肌梗死发病2-4h血清血清CK-MB即开即开始升高（大于始升高（大于15u/L），），12-24h达到峰值，如无达到峰值，如无并发症并发症3d后恢复正常水平。后恢复正常水平。心脏生化标志物检验共53页，您现在浏览的是第15页!三、天门冬氨酸氨基转移酶及其同工酶三、天门冬氨酸氨基转移酶及其同工酶1.1.天门冬氨酸氨基转移酶天门冬氨酸氨基转移酶 AST AST广泛分布于全身各组织器官，在心广泛分布于全身各组织器官，在心肌细胞内含量最多。肌细胞内含量最多。【参考范围参考范围】速率法速率法 8-40U/L8-40U/L（反应温度为（反应温度为3737）比色法比色法 8-288-28卡门单位（反应温度为卡门单位（反应温度为3737）心脏生化标志物检验共53页，您现在浏览的是第16页!2.2.天门冬氨酸氨基转移酶同工酶天门冬氨酸氨基转移酶同工酶 AST AST有两种受不同基因控制的同工酶，分别有两种受不同基因控制的同工酶，分别存在于细胞质（存在于细胞质（c-ASTc-AST）和线粒体（）和线粒体（m-ASTm-AST）中。）中。【参考范围参考范围】m-AST 15U/L m-AST 15U/L（3737）心脏生化标志物检验共53页，您现在浏览的是第17页!m-AST m-AST诊断心肌梗死的敏感性（为诊断心肌梗死的敏感性（为100%100%）和特异性（为）和特异性（为93.5%93.5%）均不低于）均不低于CK-CK-MBMB（分别为（分别为92.8%92.8%和和93.5%93.5%），且峰值时间较），且峰值时间较长，可作为诊断心肌梗死的新酶学指标。长，可作为诊断心肌梗死的新酶学指标。心脏手术前的预后判断：心脏手术前的预后判断：术前术前m-ASTm-AST值值在在20U/L20U/L以上时，术后死亡率升高；而术前以上时，术后死亡率升高；而术前m-m-ASTAST值在值在20U/L20U/L以下时，术后预后良好。以下时，术后预后良好。心脏生化标志物检验共53页，您现在浏览的是第18页!一、血清肌红蛋白一、血清肌红蛋白 肌红蛋白，是由一条肽链和一个血红素辅基肌红蛋白，是由一条肽链和一个血红素辅基组成的结合蛋白，是组成的结合蛋白，是肌肉内储存氧的蛋白质肌肉内储存氧的蛋白质，与，与氧的亲和力比氧的亲和力比Hb强，在极低的氧张力情况下，肌强，在极低的氧张力情况下，肌肉缺氧时，可释放氧供肌肉收缩的急需。肉缺氧时，可释放氧供肌肉收缩的急需。肌红蛋白是肌红蛋白是组成骨骼肌和心肌的主要蛋白质组成骨骼肌和心肌的主要蛋白质，当肌肉损伤时，可以从肌肉组织中漏到循环血液当肌肉损伤时，可以从肌肉组织中漏到循环血液中，使血清肌红蛋白浓度增加，该指标用于判断中，使血清肌红蛋白浓度增加，该指标用于判断是否发生肌肉损伤。是否发生肌肉损伤。心脏生化标志物检验共53页，您现在浏览的是第19页!测定方法测定方法：分光光度法、电泳法、层析法、：分光光度法、电泳法、层析法、免疫化学法。免疫化学法。现在普遍采用现在普遍采用乳胶增强透射比浊法乳胶增强透射比浊法 特点特点：灵敏度高、特异性好、测定速度快，：灵敏度高、特异性好、测定速度快，适用于各类型生化自动分析仪。适用于各类型生化自动分析仪。心脏生化标志物检验共53页，您现在浏览的是第20页!【试剂与器材试剂与器材】1.试剂试剂：甘氨酸缓冲液（甘氨酸缓冲液（pH9.0），），NaN31.0g/L2.试剂试剂：致敏乳胶悬液，兔抗人肌红蛋白致敏乳胶悬液，兔抗人肌红蛋白IgG 致敏乳胶颗粒，致敏乳胶颗粒，NaN31.0g/L3.校准品：校准品：Mb校准品校准品4.器材器材心脏生化标志物检验共53页，您现在浏览的是第21页!【计算计算】A=A2 A1 采用非线性多点定标模式，以不同浓度标采用非线性多点定标模式，以不同浓度标准品的准品的A，绘制标准曲线，用测定管，绘制标准曲线，用测定管A从标准从标准曲线上查出测定结果。曲线上查出测定结果。【参考范围参考范围】健康成人健康成人Mb 70ug/L 建议各实验室根据自己的条件，建立本地建议各实验室根据自己的条件，建立本地的正常参考范围的正常参考范围。心脏生化标志物检验共53页，您现在浏览的是第22页!3.由于由于Mb也存在于骨骼肌中，而且仅从肾也存在于骨骼肌中，而且仅从肾脏清除，所以急性肌肉损伤、急性或慢性肾衰脏清除，所以急性肌肉损伤、急性或慢性肾衰竭、严重的充血性心力衰竭、长时间休克及各竭、严重的充血性心力衰竭、长时间休克及各种原因引起的肌病患者、肌肉注射、剧烈的锻种原因引起的肌病患者、肌肉注射、剧烈的锻炼、某种毒素和药物摄入后，炼、某种毒素和药物摄入后，Mb都会升高。都会升高。因此，采用血清因此，采用血清Mb水平作为诊断水平作为诊断AMI的早的早期指标，仅限于那些没有上述疾病的患者。要期指标，仅限于那些没有上述疾病的患者。要注意鉴别注意鉴别Mb升高的真正原因升高的真正原因。心脏生化标志物检验共53页，您现在浏览的是第23页!Mb在在AMI中的判断中的判断应应用用 (1)由于由于Mb的分子量小，可以很快从破的分子量小，可以很快从破损损的的细细胞中胞中释释放出来，在放出来，在AMI发发病后病后12小小时时血中血中浓浓度迅速上升，度迅速上升，69小小时时达峰达峰值值，12小小时时内几乎所内几乎所有有AMI患者患者Mb都有升高，升高幅度大于各心都有升高，升高幅度大于各心肌肌酶酶，因此可以，因此可以作作为为AMI的早期的早期诊诊断断标标志物志物。在在AMI发发作后一天内即返回基作后一天内即返回基础浓础浓度，当有度，当有再梗死再梗死时则时则又迅速上升，形成又迅速上升，形成“多峰多峰现现象象”。心脏生化标志物检验共53页，您现在浏览的是第24页!二、肌钙蛋白二、肌钙蛋白I测定测定 肌钙蛋白是肌肉收缩的调节蛋白，由三个肌钙蛋白是肌肉收缩的调节蛋白，由三个结构不同的亚基组成，即肌钙蛋白结构不同的亚基组成，即肌钙蛋白T（cTnT）、）、肌钙蛋白肌钙蛋白I（cTnI）和肌钙蛋白）和肌钙蛋白C（cTnC）.心肌钙蛋白心肌钙蛋白T、I（CTnT、CTnI）由于分子）由于分子量小，分别为量小，分别为37000D和和24000D，所以发病后血，所以发病后血中浓度迅速升高。中浓度迅速升高。心脏生化标志物检验共53页，您现在浏览的是第25页!【试剂与器材试剂与器材】1.缓冲液：缓冲液：含增敏剂和表面活性剂，贮存于含增敏剂和表面活性剂，贮存于2-8，久置后可有部分沉淀，摇匀使用。，久置后可有部分沉淀，摇匀使用。2.胶乳试剂：胶乳试剂：含结合有特异抗含结合有特异抗-cTnI抗体的乳胶颗抗体的乳胶颗粒及叠氮钠，贮存于粒及叠氮钠，贮存于2-8，不可冷冻。，不可冷冻。3.校准品：校准品：cTnI校准品校准品4.器材器材心脏生化标志物检验共53页，您现在浏览的是第26页!【注意事项注意事项】1.样本可用血清或血浆（肝素抗凝），病人标样本可用血清或血浆（肝素抗凝），病人标本采集后需在本采集后需在4h内检测。标本贮存于内检测。标本贮存于2-8，可稳定，可稳定24h;-20以下冰冻可保持更长时间，但融化后必须以下冰冻可保持更长时间，但融化后必须离心，避免反复冻融。离心，避免反复冻融。2.本法本法敏感性为敏感性为0.3ug/L，线性范围可达线性范围可达25ug/L，标准曲线至少稳定，标准曲线至少稳定30d，如测定条件改变，如测定条件改变，应重新制备校准曲线。应重新制备校准曲线。3.严重溶血或黄疸可造成负干扰严重溶血或黄疸可造成负干扰，血液应充分，血液应充分凝固及时分离血清，以确保除去纤维蛋白和其他颗凝固及时分离血清，以确保除去纤维蛋白和其他颗粒物质。粒物质。心脏生化标志物检验共53页，您现在浏览的是第27页!cTnI的诊断特异性优于的诊断特异性优于CK-MB和和Mb，可用评价不稳定心绞痛，可用评价不稳定心绞痛，cTnI水水平升高预示有较高的短期死亡危险性，平升高预示有较高的短期死亡危险性，连续监测连续监测cTnI有助于判断血栓溶解和心有助于判断血栓溶解和心肌再灌注。肌再灌注。心脏生化标志物检验共53页，您现在浏览的是第28页!心脏生化标志物检验共53页，您现在浏览的是第29页!心脏的生化标志物心脏的生化标志物1.心脏的酶类标志物心脏的酶类标志物 血清中有多种酶，但各种酶的来源或组织、器血清中有多种酶，但各种酶的来源或组织、器官特异性不一。官特异性不一。其中血清其中血清CK、CK-MB、AST、LDH、-HBD等主要来自于心肌，一起组成心肌酶谱，对诊断心等主要来自于心肌，一起组成心肌酶谱，对诊断心脏疾病有重要意义。脏疾病有重要意义。但但作为心脏的酶类标志物主要有：作为心脏的酶类标志物主要有：LDH、CK、AST及其同工酶等及其同工酶等，这些酶在血清中的活性变化可，这些酶在血清中的活性变化可反映心脏功能的好坏和心肌细胞结构的完好程度。反映心脏功能的好坏和心肌细胞结构的完好程度。心脏生化标志物检验共53页，您现在浏览的是第30页!二、心脏疾病的实验诊断二、心脏疾病的实验诊断（一）急性心肌梗死（一）急性心肌梗死 基于基于AMI后梗死部位心肌细胞内的化学物后梗死部位心肌细胞内的化学物质将释放到外周血中的病理生理改变，通过对质将释放到外周血中的病理生理改变，通过对这些化学的测定可诊断这些化学的测定可诊断AMI。决定一种标志物血浓度变化的因素有该物决定一种标志物血浓度变化的因素有该物质的分子大小、在细胞内的分布（胞浆中的小质的分子大小、在细胞内的分布（胞浆中的小分子蛋白较结构蛋白更易进入血液循环）、释分子蛋白较结构蛋白更易进入血液循环）、释放率、清除率和心肌特异性等。放率、清除率和心肌特异性等。心脏生化标志物检验共53页，您现在浏览的是第31页!2.LDH同工酶组同工酶组同工酶比例应为：同工酶比例应为：LDH2LDH1 LDH3 LDH4 LDH5（小儿有时也出现（小儿有时也出现LDH1 LDH2），其中，其中LDH1/LDH2 0.7。AMI 发病后血清发病后血清LDH1和和LDH2显著升高，显著升高，约约95%的的病例病例LDH1/LDH2 1，且比值升高早于，且比值升高早于LDH总酶活性总酶活性，多在多在3-5d达峰值，持续时间越达峰值，持续时间越3周，可弥补周，可弥补CK（4d内）内）和和AST（1周内）活性升高时间短暂的不足；如周内）活性升高时间短暂的不足；如LDH1/LDH2 1，且出现，且出现LDH5增高时，提示并发肝脏淤血或肝增高时，提示并发肝脏淤血或肝功能衰竭，预后不良。功能衰竭，预后不良。心脏生化标志物检验共53页，您现在浏览的是第32页!（二）心肌炎（二）心肌炎 通过测定和分析病毒心肌炎病人血清酶组通过测定和分析病毒心肌炎病人血清酶组证实：血清证实：血清LDH、AST、-HBD、CK、CK-MB，等，等各种酶活性升高的幅度均远不如各种酶活性升高的幅度均远不如AMI患患者者，血清，血清CK和和CK-MB活性恢复较早活性恢复较早，而血清，而血清AST和和LDH恢复较慢恢复较慢，患者，患者心电图改变几乎与心电图改变几乎与心肌酶活性高低无关心肌酶活性高低无关。随病情好转上述酶活性。随病情好转上述酶活性逐渐恢复正常。逐渐恢复正常。心脏生化标志物检验共53页，您现在浏览的是第33页!（四）心脏手术（四）心脏手术 心脏手术包括心脏瓣膜置换术、二尖瓣成形术、心脏手术包括心脏瓣膜置换术、二尖瓣成形术、房间隔缺损修补术、室间隔缺损修补术、肺动脉狭窄房间隔缺损修补术、室间隔缺损修补术、肺动脉狭窄切开术、冠状动脉搭桥术等。切开术、冠状动脉搭桥术等。体外循环心脏手术需暂时阻断升主动脉和冠状体外循环心脏手术需暂时阻断升主动脉和冠状动脉，造成心肌缺血、缺氧、心肌细胞无法进行糖的动脉，造成心肌缺血、缺氧、心肌细胞无法进行糖的有氧分解。有氧分解。ATP显著减少，故显著减少，故CK活性代偿性增强活性代偿性增强，保，保证能量来自磷酸肌酸的分解；证能量来自磷酸肌酸的分解；心肌细胞缺氧时，心肌细胞缺氧时，细胞膜通透性增加细胞膜通透性增加，使，使CK、CK-MB、AST、LDH、-HBD漏至细胞外，导致血清漏至细胞外，导致血清中酶活性升高。中酶活性升高。心脏生化标志物检验共53页，您现在浏览的是第34页!一、乳酸脱氢酶及其同工酶一、乳酸脱氢酶及其同工酶1.乳酸脱氢酶乳酸脱氢酶 LDH属糖酵解酶，广泛存在于各种组织中，属糖酵解酶，广泛存在于各种组织中，以心肌、骨骼肌、肾脏、肝脏中含量最丰富，以心肌、骨骼肌、肾脏、肝脏中含量最丰富，LDH测定常用于诊断心肌梗死，肝病和某些恶测定常用于诊断心肌梗死，肝病和某些恶性肿瘤。性肿瘤。心脏生化标志物检验共53页，您现在浏览的是第35页!同工酶及其亚基同工酶及其亚基组成组成心肌心肌肝肝骨骼肌骨骼肌红细胞红细胞LDH1(H4)602442LDH2(H3M)336744LDH3(H2M2)7151710LDH(HM3)113164LDH4(M4)164561.0，LDH1/LDH2比值的比值的峰时约在发病后峰时约在发病后24-36h，然后开始下降，发病后，然后开始下降，发病后4-7d恢复正常。恢复正常。LDH1 LDH2也可出现在心肌炎、肺栓塞、也可出现在心肌炎、肺栓塞、巨细胞性贫血和溶血性贫血，但体外溶血通常不巨细胞性贫血和溶血性贫血，但体外溶血通常不会导致会导致LDH1 LDH2。心脏生化标志物检验共53页，您现在浏览的是第37页!【临床意义临床意义】1.CK测定临床上主要用于诊断心肌梗死。测定临床上主要用于诊断心肌梗死。急性心肌梗死后急性心肌梗死后3-6h就开始急剧升高，可高达就开始急剧升高，可高达正常上限的正常上限的10-12倍，倍，20-30h达高峰。达高峰。CK对诊对诊断心肌梗死较断心肌梗死较AST、LDH的的特异性高，但此酶特异性高，但此酶增高持续时间较短，增高持续时间较短，在在2-4d后就恢复正常。后就恢复正常。2.病毒性心肌炎时，病毒性心肌炎时，CK活性也可明显升高。活性也可明显升高。心脏生化标志物检验共53页，您现在浏览的是第38页!2.肌酸激酶同工酶肌酸激酶同工酶 肌酸激酶（肌酸激酶（CK）分子是由）分子是由M亚基和亚基和B亚基亚基组成的二聚体。在细胞质内共有三种同工酶：组成的二聚体。在细胞质内共有三种同工酶：即即CK-BB（CK-1）、）、CK-MB（CK-2）、）、CK-MM（CK-3）。）。【参考范围参考范围】CK-MB CK-MB 小于小于10U/L10U/L（3737）CK-MB/CKCK-MB/CK总活性总活性 小于小于5%5%心脏生化标志物检验共53页，您现在浏览的是第39页!胸痛发作胸痛发作3小时后用小时后用CK-MB诊断诊断AMI阳性率阳性率可达可达50%，6小时的诊断阳性率可达小时的诊断阳性率可达80%。一般认为一般认为CK-MB CK6%时为阳性。时为阳性。CK-MB对心肌并不完全特异，急性骨骼肌损对心肌并不完全特异，急性骨骼肌损伤时伤时CK-MB可一过性增高，但可一过性增高，但CK-MB/CK常常6%，可与心肌损伤鉴别。，可与心肌损伤鉴别。心脏生化标志物检验共53页，您现在浏览的是第40页!【临床意义临床意义】当心肌梗死时，血清中当心肌梗死时，血清中ASTAST活性增高，在发活性增高，在发病后病后6-12h6-12h之内显著增高，增高的程度可反映损害之内显著增高，增高的程度可反映损害的程度，在的程度，在48h48h达到高峰，约在达到高峰，约在3-5d3-5d恢复正常。恢复正常。心肌炎、胸膜炎、肾炎及肺炎等也可引起血心肌炎、胸膜炎、肾炎及肺炎等也可引起血清清ASTAST的轻度增高。的轻度增高。AST AST与与CK-MBCK-MB、LDHLDH等联合测定有助于对急性等联合测定有助于对急性心肌梗死的病程判断。心肌梗死的病程判断。心脏生化标志物检验共53页，您现在浏览的是第41页!【临床意义临床意义】m-AST m-AST一般要在细胞坏死、线粒体破坏后一般要在细胞坏死、线粒体破坏后才释放入血，当细胞不再破坏和修复时血清中才释放入血，当细胞不再破坏和修复时血清中m-ASTm-AST值很快降至正常水平。因此，值很快降至正常水平。因此，测定测定m-ASTm-AST有利于判定细胞坏死严重程度，也有利于推测有利于判定细胞坏死严重程度，也有利于推测患者预后。患者预后。m-AST m-AST的动态活性与病程密切相关，一般的动态活性与病程密切相关，一般在心肌梗死发生后在心肌梗死发生后12h12h明显升高（较明显升高（较CKCK晚），晚），24h24h达峰值并持续至达峰值并持续至48h48h。心脏生化标志物检验共53页，您现在浏览的是第42页!第三节第三节心脏蛋白类标志物心脏蛋白类标志物检验检验心脏生化标志物检验共53页，您现在浏览的是第43页!心脏生化标志物检验共53页，您现在浏览的是第44页!【原理原理】Mb致敏乳胶颗粒是大小均一的聚苯丙烯致敏乳胶颗粒是大小均一的聚苯丙烯乳胶颗粒悬液，颗粒表面包被有兔抗人乳胶颗粒悬液，颗粒表面包被有兔抗人Mb抗抗体。体。血清样本中的血清样本中的Mb与乳胶颗粒表面的抗体与乳胶颗粒表面的抗体结合后，使相邻的乳胶颗粒彼此交联，发生聚结合后，使相邻的乳胶颗粒彼此交联，发生聚集反应产生浊度集反应产生浊度。该浊度与样本中的。该浊度与样本中的Mb浓度浓度成正比，在成正比，在570nm处测定吸光度，可计算样本处测定吸光度，可计算样本中中Mb的浓度。的浓度。心脏生化标志物检验共53页，您现在浏览的是第45页!【实践步骤实践步骤】1.测定条件：温度、波长、光径、时间测定条件：温度、波长、光径、时间2.操作操作加入物（加入物（ml）测定管测定管标准管标准管空白管空白管试剂试剂0.20.20.2待检血清待检血清0.02-Mb校准品校准品-0.02-蒸馏水蒸馏水-0.02 混匀，混匀，37保温保温5min，空白管调零，读取各管吸光度，空白管调零，读取各管吸光度A1试剂试剂0.150.150.15 混匀，混匀，37保温保温5min，空白管调零，读取各管吸光度，空白管调零，读取各管吸光度A2心脏生化标志物检验共53页，您现在浏览的是第46页!【注意事项注意事项】1.本试剂应避光，于本试剂应避光，于2-8可保持可保持1年，年，-20可保持更长时间，但不宜反复冻融。可保持更长时间，但不宜反复冻融。2.若用半自动、全自动生化分析仪测定应严若用半自动、全自动生化分析仪测定应严格按照仪器说明书设定参数进行操作。格按照仪器说明书设定参数进行操作。心脏生化标志物检验共53页，您现在浏览的是第47页!【临床意义临床意义】血清血清Mb增高增高：见于急性心肌梗死早期、急：见于急性心肌梗死早期、急性肌损伤、肌营养不良、肌萎缩、多发性肌炎、性肌损伤、肌营养不良、肌萎缩、多发性肌炎、急性或慢性肾功能衰竭、严重充血性心力衰竭和急性或慢性肾功能衰竭、严重充血性心力衰竭和长期休克等。长期休克等。血、尿中肌红蛋白均升高血、尿中肌红蛋白均升高：见于急性心肌梗：见于急性心肌梗死、心绞痛、心源性休克、心肌病、肌疾病死、心绞痛、心源性休克、心肌病、肌疾病(进行进行性肌营养不良、多发性肌炎、重症肌无力性肌营养不良、多发性肌炎、重症肌无力)等。等。心脏生化标志物检验共53页，您现在浏览的是第48页!(2)由于由于Mb半寿期短半寿期短(15min)，胸痛发作后，胸痛发作后612小时不升高，有助于排除小时不升高，有助于排除AMI的诊断，是筛查的诊断，是筛查AMI很好的指标。很好的指标。(3)由于在由于在AMI后血中后血中Mb很快从肾脏清除，很快从肾脏清除，发病发病1830小时内可完全恢复到正常水平。故小时内可完全恢复到正常水平。故Mb测定有助于在测定有助于在AMI病程中病程中观察有无再梗塞或者梗塞观察有无再梗塞或者梗塞再扩展再扩展。Mb频繁出现增高，提示原有心肌梗死仍频繁出现增高，提示原有心肌梗死仍在。在。(4)Mb是溶栓治疗中是溶栓治疗中判断有无再灌判断有无再灌的较敏感的较敏感而准确的指标。而准确的指标。心脏生化标志物检验共53页，您现在浏览的是第49页!胶乳增强透射比浊法胶乳增强透射比浊法【原理原理】应用特异的抗肌钙蛋白应用特异的抗肌钙蛋白I（抗（抗-cTnI）抗体使）抗体使之与胶乳颗粒表面结合，血清标本与胶乳试剂在之与胶乳颗粒表面结合，血清标本与胶乳试剂在缓冲液中混合后，缓冲液中混合后，血清样本中的血清样本中的cTnI与乳胶颗粒与乳胶颗粒表面的抗体结合后，使相邻的乳胶颗粒彼此交联，表面的抗体结合后，使相邻的乳胶颗粒彼此交联，发生聚集反应产生浊度发生聚集反应产生浊度。该浊度与样本中的。该浊度与样本中的cTnI浓度成正比，在浓度成正比，在600nm处测定吸光度，可计算样处测定吸光度，可计算样本中本中cTnI的浓度。的浓度。心脏生化标志物检验共53页，您现在浏览的是第50页!【实践步骤实践步骤】【计算计算】【参考范围参考范围】cTnI 0.8ug/L 建议各实验室根据自己的条件，建立本地建议各实验室根据自己的条件，建立本地的正常参考范围及诊断标准。的正常参考范围及诊断标准。心脏生化标志物检验共53页，您现在浏览的是第51页!【临床意义临床意义】cTnI是心肌损伤的特异指标。是心肌损伤的特异指标。AMI发生后发生后4-8h血清中的血清中的cTnI水平即可水平即可升高，升高，12-14h达到峰值，达到峰值，6-10d恢复正常。恢复正常。即即出现早，和出现早，和CK-MB相当或稍早；消失慢，持相当或稍早；消失慢，持续时间超过续时间超过LD1，诊断的窗口期特别长，兼有，诊断的窗口期特别长，兼有CK-MB和和LD1的优点。的优点。心脏生化标志物检验共53页，您现在浏览的是第52页!在在AMI时，所有生化标志物的敏感时，所有生化标志物的敏感度都与时间有关。度都与时间有关。对于胸痛发作对于胸痛发作4h以内的患者，首先以内的患者，首先应测定应测定Mb水平；水平；3h后得到的血液标本，后得到的血液标本，应同时评价应同时评价Mb和和cTnI。所有阳性结果都所有阳性结果都可确认为可确认为AMI，所用阴性结果都可排除心所用阴性结果都可排除心肌损伤。肌损伤。心脏生化标志物检验共53页，您现在浏览的是第53页!