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实验二培养基的制备第1页，共32页，编辑于2022年，星期五一、目的要求一、目的要求1.掌握培养基制备的原则；掌握培养基制备的原则；2.掌握培养基的制备方法。掌握培养基的制备方法。第2页，共32页，编辑于2022年，星期五二、实验原理二、实验原理1、培养基的概念？、培养基的概念？培养基是指由人工方法配合而成的营养基质，专培养基是指由人工方法配合而成的营养基质，专供微生物培养、分离、鉴别、研究和保存菌种用的供微生物培养、分离、鉴别、研究和保存菌种用的混合营养物制品。混合营养物制品。第3页，共32页，编辑于2022年，星期五2、必须具备五个条件、必须具备五个条件:含有细菌生长所需的物质含有细菌生长所需的物质含有细菌生长所需的物质含有细菌生长所需的物质：如：水分、养分（氮源、碳源、矿物质）等如：水分、养分（氮源、碳源、矿物质）等如：水分、养分（氮源、碳源、矿物质）等如：水分、养分（氮源、碳源、矿物质）等适宜的酸碱性：适宜的酸碱性：适宜的酸碱性：适宜的酸碱性：多数为多数为多数为多数为pH7.2-7.6pH7.2-7.6，有的为，有的为，有的为，有的为pH5.6-6.8 pH5.6-6.8。不含抑制细菌生长的物质；不含抑制细菌生长的物质；不含抑制细菌生长的物质；不含抑制细菌生长的物质；均质透明均质透明均质透明均质透明：便于观察细菌生长性状和引起培养基的变化，便于观察细菌生长性状和引起培养基的变化，便于观察细菌生长性状和引起培养基的变化，便于观察细菌生长性状和引起培养基的变化，严格灭菌，保证无菌。严格灭菌，保证无菌。严格灭菌，保证无菌。严格灭菌，保证无菌。配好配好立即立即高压灭菌，高压灭菌，并保证并保证新鲜新鲜。第4页，共32页，编辑于2022年，星期五3、培养基的分类、培养基的分类根据对培养基组成物质的根据对培养基组成物质的根据对培养基组成物质的根据对培养基组成物质的化学成分化学成分化学成分化学成分是否完全了解来区分：是否完全了解来区分：是否完全了解来区分：是否完全了解来区分：天然培养基天然培养基天然培养基天然培养基 合成培养基合成培养基合成培养基合成培养基 半合成培养基。半合成培养基。半合成培养基。半合成培养基。根据培养基的根据培养基的根据培养基的根据培养基的物理状态物理状态物理状态物理状态来区分：来区分：来区分：来区分：固体培养基固体培养基固体培养基固体培养基 液体培养基液体培养基液体培养基液体培养基 半固体培养基半固体培养基半固体培养基半固体培养基根据培养基的根据培养基的根据培养基的根据培养基的用途用途用途用途来区分：来区分：来区分：来区分：增菌培养基增菌培养基增菌培养基增菌培养基 选择培养基选择培养基选择培养基选择培养基 鉴别培养基鉴别培养基鉴别培养基鉴别培养基第5页，共32页，编辑于2022年，星期五中国农业出版社中国农业出版社陈天寿主编陈天寿主编第6页，共32页，编辑于2022年，星期五一些物质在培养基中的应用原理一些物质在培养基中的应用原理1.1.细菌生长的基础营养物质：细菌生长的基础营养物质：N N源：蛋白胨（源：蛋白胨（peptonepeptone）、酵母浸出物）、酵母浸出物 牛肉浸膏牛肉浸膏 C C源源 无机盐类无机盐类 水水 第7页，共32页，编辑于2022年，星期五一些物质在培养基中的应用原理一些物质在培养基中的应用原理2.2.具有抑菌作用的物质具有抑菌作用的物质 抑制抑制G G-菌的：菌的：葡萄糖、亚硫酸铋和煌绿葡萄糖、亚硫酸铋和煌绿 抑制抑制G G+菌的：菌的：结晶紫、胆盐结晶紫、胆盐 抑制肠道非致病菌的：抑制肠道非致病菌的：胆盐胆盐 第8页，共32页，编辑于2022年，星期五一些物质在培养基中的应用原理一些物质在培养基中的应用原理3.3.具有生化反应作用的具有生化反应作用的硫羟代乙酸钠（硫乙醇酸钠）、半胱氨酸、葡硫羟代乙酸钠（硫乙醇酸钠）、半胱氨酸、葡萄糖、肝块、肉渣、还原铁等还原剂萄糖、肝块、肉渣、还原铁等还原剂生化反应生化反应 第9页，共32页，编辑于2022年，星期五一些物质在培养基中的应用原理一些物质在培养基中的应用原理4.4.具有缓冲作用的具有缓冲作用的 磷酸盐磷酸盐 碳酸盐碳酸盐 第10页，共32页，编辑于2022年，星期五一些物质在培养基中的应用原理一些物质在培养基中的应用原理5.5.具有具有PHPH指示作用的指示作用的中性红指示液中性红指示液 变色范围变色范围 pH6.88.0（红（红黄）黄）孔雀绿指示液孔雀绿指示液 变色范围变色范围 pH0.02.0（黄（黄绿）；绿）；11.013.5(绿绿无色无色)石蕊指示液石蕊指示液 变色范围变色范围 pH4.58.0（红（红蓝）蓝）甲基红指示液甲基红指示液 变色范围变色范围 pH4.26.3（红（红黄）黄）刚果红指示液刚果红指示液 变色范围变色范围 pH3.05.0（蓝（蓝红）红）亮绿指示液亮绿指示液 变色范围变色范围 pH0.02.6（黄（黄绿）绿）结晶紫指示液结晶紫指示液 pH值值0.15（黄）（黄）0.32（绿），（绿），pH值值1.0（绿）（绿）1.5（蓝），（蓝），pH值值2.0（蓝）（蓝）3.0（紫）。（紫）。溴甲酚紫指示液变色范围溴甲酚紫指示液变色范围 pH5.26.8（黄（黄紫）紫）溴麝香草酚蓝指示液溴麝香草酚蓝指示液 变色范围变色范围 pH6.07.6（黄（黄蓝）蓝）第11页，共32页，编辑于2022年，星期五一些物质在培养基中的应用原理一些物质在培养基中的应用原理6.6.其它其它 硫酸亚铁硫酸亚铁 色氨酸色氨酸 脲酶脲酶第12页，共32页，编辑于2022年，星期五培养特性培养特性（一）体外培养的要求（一）体外培养的要求 营养、温度、营养、温度、PHPH、气体、培养时间、气体、培养时间（二）培养性状（二）培养性状 1.1.液体培养基液体培养基 需氧菌：菌膜需氧菌：菌膜 兼性厌氧菌：均匀浑浊兼性厌氧菌：均匀浑浊 厌氧菌：沉淀厌氧菌：沉淀 2.2.固体培养基固体培养基 菌落特点菌落特点:大小、颜色、边缘、湿润程度大小、颜色、边缘、湿润程度 3.3.色素色素 脂溶性：菌体有颜色（如金黄色葡萄球菌）脂溶性：菌体有颜色（如金黄色葡萄球菌）水溶性：菌体和培养基都有颜色（如绿脓杆菌）水溶性：菌体和培养基都有颜色（如绿脓杆菌）第13页，共32页，编辑于2022年，星期五4、培养基制备的基本方法、培养基制备的基本方法培养基配方的选定培养基配方的选定培养基配方的选定培养基配方的选定培养基的制备记录培养基的制备记录培养基的制备记录培养基的制备记录培养基成分的称取培养基成分的称取培养基成分的称取培养基成分的称取培养基各成份的混合和溶化培养基各成份的混合和溶化培养基各成份的混合和溶化培养基各成份的混合和溶化培养基培养基培养基培养基pHpH的调正的调正的调正的调正培养基的过滤培养基的过滤培养基的过滤培养基的过滤培养基的分装培养基的分装培养基的分装培养基的分装培养基的灭菌培养基的灭菌培养基的灭菌培养基的灭菌培养基的质量测试培养基的质量测试培养基的质量测试培养基的质量测试培养基的保存培养基的保存培养基的保存培养基的保存同一种培养基的配方在不同文同一种培养基的配方在不同文同一种培养基的配方在不同文同一种培养基的配方在不同文献中常存在某些差别。献中常存在某些差别。献中常存在某些差别。献中常存在某些差别。因此应尽量收集有关资料，加因此应尽量收集有关资料，加因此应尽量收集有关资料，加因此应尽量收集有关资料，加以比较核对，再依据自己的使用以比较核对，再依据自己的使用以比较核对，再依据自己的使用以比较核对，再依据自己的使用目的，加以选用，记录其来源。目的，加以选用，记录其来源。目的，加以选用，记录其来源。目的，加以选用，记录其来源。第14页，共32页，编辑于2022年，星期五4、培养基制备的基本方法、培养基制备的基本方法培养基配方的选定培养基配方的选定培养基配方的选定培养基配方的选定培养基的制备记录培养基的制备记录培养基的制备记录培养基的制备记录培养基成分的称取培养基成分的称取培养基成分的称取培养基成分的称取培养基各成份的混合和溶化培养基各成份的混合和溶化培养基各成份的混合和溶化培养基各成份的混合和溶化培养基培养基培养基培养基pHpH的调正的调正的调正的调正培养基的过滤培养基的过滤培养基的过滤培养基的过滤培养基的分装培养基的分装培养基的分装培养基的分装培养基的灭菌培养基的灭菌培养基的灭菌培养基的灭菌培养基的质量测试培养基的质量测试培养基的质量测试培养基的质量测试培养基的保存培养基的保存培养基的保存培养基的保存每次制备培养基均应有记录每次制备培养基均应有记录每次制备培养基均应有记录每次制备培养基均应有记录:包括名称、配方及其来源、包括名称、配方及其来源、包括名称、配方及其来源、包括名称、配方及其来源、pHpH值、值、值、值、消毒的温度和时间、制备的日期消毒的温度和时间、制备的日期消毒的温度和时间、制备的日期消毒的温度和时间、制备的日期和制备者等，以防发生混乱。和制备者等，以防发生混乱。和制备者等，以防发生混乱。和制备者等，以防发生混乱。第15页，共32页，编辑于2022年，星期五4、培养基制备的基本方法、培养基制备的基本方法培养基配方的选定培养基配方的选定培养基配方的选定培养基配方的选定培养基的制备记录培养基的制备记录培养基的制备记录培养基的制备记录培养基成分的称取培养基成分的称取培养基成分的称取培养基成分的称取培养基各成份的混合和溶化培养基各成份的混合和溶化培养基各成份的混合和溶化培养基各成份的混合和溶化培养基培养基培养基培养基pHpH的调正的调正的调正的调正培养基的过滤培养基的过滤培养基的过滤培养基的过滤培养基的分装培养基的分装培养基的分装培养基的分装培养基的灭菌培养基的灭菌培养基的灭菌培养基的灭菌培养基的质量测试培养基的质量测试培养基的质量测试培养基的质量测试培养基的保存培养基的保存培养基的保存培养基的保存必须精确称取，并注意防止错乱。必须精确称取，并注意防止错乱。必须精确称取，并注意防止错乱。必须精确称取，并注意防止错乱。可将配方置于傍侧，每称好一种可将配方置于傍侧，每称好一种可将配方置于傍侧，每称好一种可将配方置于傍侧，每称好一种成分即在配方上做出记号成分即在配方上做出记号成分即在配方上做出记号成分即在配方上做出记号,最后还应最后还应最后还应最后还应进行一次检查。进行一次检查。进行一次检查。进行一次检查。第16页，共32页，编辑于2022年，星期五4、培养基制备的基本方法、培养基制备的基本方法培养基配方的选定培养基配方的选定培养基配方的选定培养基配方的选定培养基的制备记录培养基的制备记录培养基的制备记录培养基的制备记录培养基成分的称取培养基成分的称取培养基成分的称取培养基成分的称取培养基各成份的混合和溶化培养基各成份的混合和溶化培养基各成份的混合和溶化培养基各成份的混合和溶化培养基培养基培养基培养基pHpH的调正的调正的调正的调正培养基的过滤培养基的过滤培养基的过滤培养基的过滤培养基的分装培养基的分装培养基的分装培养基的分装培养基的灭菌培养基的灭菌培养基的灭菌培养基的灭菌培养基的质量测试培养基的质量测试培养基的质量测试培养基的质量测试培养基的保存培养基的保存培养基的保存培养基的保存可先用温水加热并随时搅可先用温水加热并随时搅可先用温水加热并随时搅可先用温水加热并随时搅动、以防焦化。待大部分固体动、以防焦化。待大部分固体动、以防焦化。待大部分固体动、以防焦化。待大部分固体成分溶化后，再用较小火力使成分溶化后，再用较小火力使成分溶化后，再用较小火力使成分溶化后，再用较小火力使所有成分完全溶化，直至煮沸。所有成分完全溶化，直至煮沸。所有成分完全溶化，直至煮沸。所有成分完全溶化，直至煮沸。在加热溶化过程中，因蒸发在加热溶化过程中，因蒸发在加热溶化过程中，因蒸发在加热溶化过程中，因蒸发而丢失的水分，最后必须加以补而丢失的水分，最后必须加以补而丢失的水分，最后必须加以补而丢失的水分，最后必须加以补足。足。足。足。第17页，共32页，编辑于2022年，星期五4、培养基制备的基本方法、培养基制备的基本方法培养基配方的选定培养基配方的选定培养基配方的选定培养基配方的选定培养基的制备记录培养基的制备记录培养基的制备记录培养基的制备记录培养基成分的称取培养基成分的称取培养基成分的称取培养基成分的称取培养基各成份的混合和溶化培养基各成份的混合和溶化培养基各成份的混合和溶化培养基各成份的混合和溶化培养基培养基培养基培养基pHpH的调正的调正的调正的调正培养基的过滤培养基的过滤培养基的过滤培养基的过滤培养基的分装培养基的分装培养基的分装培养基的分装培养基的灭菌培养基的灭菌培养基的灭菌培养基的灭菌培养基的质量测试培养基的质量测试培养基的质量测试培养基的质量测试培养基的保存培养基的保存培养基的保存培养基的保存经加热煮沸，培养基各成分完全经加热煮沸，培养基各成分完全经加热煮沸，培养基各成分完全经加热煮沸，培养基各成分完全溶解溶解溶解溶解,待冷却接近室温时待冷却接近室温时待冷却接近室温时待冷却接近室温时,应进行应进行应进行应进行pHpH的调正。的调正。的调正。的调正。第18页，共32页，编辑于2022年，星期五4、培养基制备的基本方法、培养基制备的基本方法培养基配方的选定培养基配方的选定培养基配方的选定培养基配方的选定培养基的制备记录培养基的制备记录培养基的制备记录培养基的制备记录培养基成分的称取培养基成分的称取培养基成分的称取培养基成分的称取培养基各成份的混合和溶化培养基各成份的混合和溶化培养基各成份的混合和溶化培养基各成份的混合和溶化培养基培养基培养基培养基pHpH的调正的调正的调正的调正培养基的过滤培养基的过滤培养基的过滤培养基的过滤培养基的分装培养基的分装培养基的分装培养基的分装培养基的灭菌培养基的灭菌培养基的灭菌培养基的灭菌培养基的质量测试培养基的质量测试培养基的质量测试培养基的质量测试培养基的保存培养基的保存培养基的保存培养基的保存培养基必须均质透明。培养基必须均质透明。培养基必须均质透明。培养基必须均质透明。通常采用过滤以达到此项要求。通常采用过滤以达到此项要求。通常采用过滤以达到此项要求。通常采用过滤以达到此项要求。一般液体培养基可用滤纸过滤法。一般液体培养基可用滤纸过滤法。一般液体培养基可用滤纸过滤法。一般液体培养基可用滤纸过滤法。第19页，共32页，编辑于2022年，星期五4、培养基制备的基本方法、培养基制备的基本方法培养基配方的选定培养基配方的选定培养基配方的选定培养基配方的选定培养基的制备记录培养基的制备记录培养基的制备记录培养基的制备记录培养基成分的称取培养基成分的称取培养基成分的称取培养基成分的称取培养基各成份的混合和溶化培养基各成份的混合和溶化培养基各成份的混合和溶化培养基各成份的混合和溶化培养基培养基培养基培养基pHpH的调正的调正的调正的调正培养基的过滤培养基的过滤培养基的过滤培养基的过滤培养基的分装培养基的分装培养基的分装培养基的分装培养基的灭菌培养基的灭菌培养基的灭菌培养基的灭菌培养基的质量测试培养基的质量测试培养基的质量测试培养基的质量测试培养基的保存培养基的保存培养基的保存培养基的保存应按使用的目的和要求，分装应按使用的目的和要求，分装应按使用的目的和要求，分装应按使用的目的和要求，分装于适当容器内。于适当容器内。于适当容器内。于适当容器内。分装量一般超过容器装盛量的分装量一般超过容器装盛量的分装量一般超过容器装盛量的分装量一般超过容器装盛量的2/32/3。第20页，共32页，编辑于2022年，星期五4、培养基制备的基本方法、培养基制备的基本方法培养基配方的选定培养基配方的选定培养基配方的选定培养基配方的选定培养基的制备记录培养基的制备记录培养基的制备记录培养基的制备记录培养基成分的称取培养基成分的称取培养基成分的称取培养基成分的称取培养基各成份的混合和溶化培养基各成份的混合和溶化培养基各成份的混合和溶化培养基各成份的混合和溶化培养基培养基培养基培养基pHpH的调正的调正的调正的调正培养基的过滤培养基的过滤培养基的过滤培养基的过滤培养基的分装培养基的分装培养基的分装培养基的分装培养基的灭菌培养基的灭菌培养基的灭菌培养基的灭菌培养基的质量测试培养基的质量测试培养基的质量测试培养基的质量测试培养基的保存培养基的保存培养基的保存培养基的保存一般采用高压蒸汽灭菌方法一般采用高压蒸汽灭菌方法一般采用高压蒸汽灭菌方法一般采用高压蒸汽灭菌方法（121121，15min15min）。）。）。）。某些畏热成分，如糖类、血清等，某些畏热成分，如糖类、血清等，某些畏热成分，如糖类、血清等，某些畏热成分，如糖类、血清等，一般以过滤方法除菌，以后再用无一般以过滤方法除菌，以后再用无一般以过滤方法除菌，以后再用无一般以过滤方法除菌，以后再用无菌操作技术、定量加于培养基。菌操作技术、定量加于培养基。菌操作技术、定量加于培养基。菌操作技术、定量加于培养基。第21页，共32页，编辑于2022年，星期五4、培养基制备的基本方法、培养基制备的基本方法培养基配方的选定培养基配方的选定培养基配方的选定培养基配方的选定培养基的制备记录培养基的制备记录培养基的制备记录培养基的制备记录培养基成分的称取培养基成分的称取培养基成分的称取培养基成分的称取培养基各成份的混合和溶化培养基各成份的混合和溶化培养基各成份的混合和溶化培养基各成份的混合和溶化培养基培养基培养基培养基pHpH的调正的调正的调正的调正培养基的过滤培养基的过滤培养基的过滤培养基的过滤培养基的分装培养基的分装培养基的分装培养基的分装培养基的灭菌培养基的灭菌培养基的灭菌培养基的灭菌培养基的质量测试培养基的质量测试培养基的质量测试培养基的质量测试培养基的保存培养基的保存培养基的保存培养基的保存灭菌以后，应仔细检查，如发灭菌以后，应仔细检查，如发灭菌以后，应仔细检查，如发灭菌以后，应仔细检查，如发现破裂、水分浸入、色泽异常等、现破裂、水分浸入、色泽异常等、现破裂、水分浸入、色泽异常等、现破裂、水分浸入、色泽异常等、均应挑出弃去。均应挑出弃去。均应挑出弃去。均应挑出弃去。将全部培养基放入将全部培养基放入将全部培养基放入将全部培养基放入37 37 恒温箱恒温箱恒温箱恒温箱培养过夜，如发现有细菌生长，即培养过夜，如发现有细菌生长，即培养过夜，如发现有细菌生长，即培养过夜，如发现有细菌生长，即弃去。弃去。弃去。弃去。用已知菌株接种部分培养基用已知菌株接种部分培养基用已知菌株接种部分培养基用已知菌株接种部分培养基,培养培养培养培养2448h2448h。如无菌生长或生长不良，。如无菌生长或生长不良，。如无菌生长或生长不良，。如无菌生长或生长不良，应追查原因并重复接种一次，如应追查原因并重复接种一次，如应追查原因并重复接种一次，如应追查原因并重复接种一次，如结果仍同前，则该批培养基即应结果仍同前，则该批培养基即应结果仍同前，则该批培养基即应结果仍同前，则该批培养基即应弃去。弃去。弃去。弃去。第22页，共32页，编辑于2022年，星期五4、培养基制备的基本方法、培养基制备的基本方法培养基配方的选定培养基配方的选定培养基配方的选定培养基配方的选定培养基的制备记录培养基的制备记录培养基的制备记录培养基的制备记录培养基成分的称取培养基成分的称取培养基成分的称取培养基成分的称取培养基各成份的混合和溶化培养基各成份的混合和溶化培养基各成份的混合和溶化培养基各成份的混合和溶化培养基培养基培养基培养基pHpH的调正的调正的调正的调正培养基的过滤培养基的过滤培养基的过滤培养基的过滤培养基的分装培养基的分装培养基的分装培养基的分装培养基的灭菌培养基的灭菌培养基的灭菌培养基的灭菌培养基的质量测试培养基的质量测试培养基的质量测试培养基的质量测试培养基的保存培养基的保存培养基的保存培养基的保存应存放于冷暗处，最好放于普应存放于冷暗处，最好放于普应存放于冷暗处，最好放于普应存放于冷暗处，最好放于普通冰箱内；通冰箱内；通冰箱内；通冰箱内；平板培养基不宜超过平板培养基不宜超过平板培养基不宜超过平板培养基不宜超过3 3天；天；天；天；必须附有明显标签。必须附有明显标签。必须附有明显标签。必须附有明显标签。第23页，共32页，编辑于2022年，星期五三、实验材料三、实验材料1.1.量杯（量杯（量杯（量杯（1000mL1000mL和和和和500mL500mL各各各各1 1个）、玻璃棒、漏斗、三角瓶、个）、玻璃棒、漏斗、三角瓶、个）、玻璃棒、漏斗、三角瓶、个）、玻璃棒、漏斗、三角瓶、试管、玻璃瓶（试管、玻璃瓶（试管、玻璃瓶（试管、玻璃瓶（500mL500mL）等；）等；）等；）等；2.2.pHpH试纸、纱布、脱脂棉、滤纸、包装纸、扎线等；试纸、纱布、脱脂棉、滤纸、包装纸、扎线等；试纸、纱布、脱脂棉、滤纸、包装纸、扎线等；试纸、纱布、脱脂棉、滤纸、包装纸、扎线等；3.3.牛肉膏、蛋白胨、氯化钠、磷酸氢二钾、琼脂、葡萄糖、牛肉牛肉膏、蛋白胨、氯化钠、磷酸氢二钾、琼脂、葡萄糖、牛肉牛肉膏、蛋白胨、氯化钠、磷酸氢二钾、琼脂、葡萄糖、牛肉牛肉膏、蛋白胨、氯化钠、磷酸氢二钾、琼脂、葡萄糖、牛肉渣、蜡块、蒸馏水、渣、蜡块、蒸馏水、渣、蜡块、蒸馏水、渣、蜡块、蒸馏水、l mo1/L NaOHl mo1/L NaOH溶液和溶液和溶液和溶液和1 mo1/L HCl1 mo1/L HCl溶液等。溶液等。溶液等。溶液等。第24页，共32页，编辑于2022年，星期五四、实验内容四、实验内容1.普通肉汤的制备普通肉汤的制备：（1 1）常用配方）常用配方）常用配方）常用配方:牛肉浸膏牛肉浸膏牛肉浸膏牛肉浸膏 3-5g 3-5g蛋白胨蛋白胨蛋白胨蛋白胨 10g 10g氯化钠氯化钠氯化钠氯化钠 5g 5g磷酸氢二钾磷酸氢二钾磷酸氢二钾磷酸氢二钾 0.5g0.5g蒸馏水蒸馏水蒸馏水蒸馏水1000m1000mL L第25页，共32页，编辑于2022年，星期五四、实验内容四、实验内容1.普通肉汤的制备普通肉汤的制备：（2 2）配制方法）配制方法）配制方法）配制方法:取水取水取水取水600700mL600700mL，加热；，加热；，加热；，加热；按照配方称取各物品加入水中，边加热边搅按照配方称取各物品加入水中，边加热边搅按照配方称取各物品加入水中，边加热边搅按照配方称取各物品加入水中，边加热边搅拌，快沸时注意不要溢出，沸腾后停止加热；拌，快沸时注意不要溢出，沸腾后停止加热；拌，快沸时注意不要溢出，沸腾后停止加热；拌，快沸时注意不要溢出，沸腾后停止加热；冷却至室温；冷却至室温；冷却至室温；冷却至室温；用用用用pHpH试纸测定试纸测定试纸测定试纸测定pHpH并调至并调至并调至并调至7.2-7.7.2-7.6 6。若若若若pHpH 7.67.6，则用，则用，则用，则用0.1mo10.1mo1/L HClL HCl调低调低调低调低;若若若若pHpH 7.6pH7.6，则用，则用，则用，则用0.1mo1/L HCl0.1mo1/L HCl调低调低调低调低;若若若若pH7.2pH7.2，则用，则用，则用，则用0.1mol/L NaOH0.1mol/L NaOH调高调高调高调高.4 4.调好调好调好调好pHpH值后，各自再补足水量，再测值后，各自再补足水量，再测值后，各自再补足水量，再测值后，各自再补足水量，再测pHpH值。值。值。值。将将将将6 6支做厌氧培养基（共约支做厌氧培养基（共约支做厌氧培养基（共约支做厌氧培养基（共约30ml30ml），），），），200ml200ml装入小盐水瓶；取装入小盐水瓶；取装入小盐水瓶；取装入小盐水瓶；取20ml20ml再配再配再配再配0.4%0.4%琼脂的半固体琼脂的半固体琼脂的半固体琼脂的半固体培养基培养基培养基培养基6 6支；余下支；余下支；余下支；余下500ml500ml加加加加2%2%（10g10g琼脂）继续加热至充分融化，固体培养基中倒琼脂）继续加热至充分融化，固体培养基中倒琼脂）继续加热至充分融化，固体培养基中倒琼脂）继续加热至充分融化，固体培养基中倒6 6支斜支斜支斜支斜面，其余加入盐水瓶。面，其余加入盐水瓶。面，其余加入盐水瓶。面，其余加入盐水瓶。今天实验内容今天实验内容/每组每组每组每组：第32页，共32页，编辑于2022年，星期五