BioLumix快速微生物荧光光电检测系统.ppt

BioLumixTM微生物实时荧光光电快速检测系统微生物实时荧光光电快速检测系统 原理与应用原理与应用o食品安全和食源性疾病是全球面临的重要公共卫生问题。近年来，国际、国内食品安全事件不断发生，不安全食品对健康的危害越来越引起人们的关注。食源性疾病包括了由食品微生物污染和化学性物质引起的疾病，而由微生物引起的食源性疾病依然是食品安全的主要问题。o食源性病原微生物的检测对食源性疾病的预防和控制至关重要。针对目标微生物的有效检测需要快速、敏感和特异的方法。传统培养方法虽然具有较高的敏感性和特异性，但通常需要数天甚至一周以上的时间才能报告检测结果；因而无法对产品卫生状况做出及时快速的评估，难以满足政府监管部门和生产厂家的需求。种类繁多的微生物检测方法传统病源菌检测流程：前增菌前增菌 选择性培养选择性培养 血清学分型血清学分型 选择性增菌选择性增菌 生化鉴定生化鉴定 血清学确认血清学确认微生物快速检测的意义微生物快速检测的意义o微生物快速检测技术可以使政府监管部门及时有效的对产品卫生状况做出判断；对生产加工企业而言可以使产品快速放行、加快流通和资金周转；同时对产品生产、运输和销售过程中的质量监控也具有重要意义。因而对保障产品安全具有越来越重要的现实意义。RMM方法的应用依据方法的应用依据o一、2007年6月，美国FDA有关GMP的新的规章中要求营养保健品企业加强对微生物的检测，建议生产企业可以采用更为简便、快速的微生物检测方法。o二、2010年中国新版药典公布了“药品微生物检验替代方法验证指导原则”，明确指出相关微生物实验室经过验证后可以采用新的微生物检验技术。三、美国FDARiley博士撰文：四国家食品药品监督管理局文件2011年3月28日，国家食品药品监督管理局颁布国食药监食2011130号“关于印发餐饮服务食品安全检验机构技术装备基本标准和现场快速检测设备配备基本标准的通知”将BioLumix微生物实时检测微生物实时检测系统系统列入列入检验机构技术装备基本标准：附件1：餐饮服务食品安全检验机构技术装备基本标准(县级检验机构)名称：微生物实时检测系统名称：微生物实时检测系统主要用途：食品中致病微生物的快速检测主要用途：食品中致病微生物的快速检测性能要求：每个仪器在同一温度下可容纳性能要求：每个仪器在同一温度下可容纳32个样本；个样本；每每6分钟可以处分钟可以处理一批样本理一批样本Biolumix检测系统原理o微生物实时荧光光电快速检测系统是最新推出的微生物检测系统，其代表产品是Biolumix检测系统。该系统通过将染色技术、新的光源和光传感器相结合，使其能够用同一个检测器同步检测颜色和荧光的变化。当代谢过程发生时，试剂的光谱模式会发生改变，光传感器可及时检测到这些改变。原理图示Biolumix检测系统应用领域oBioLumixTM微生物实时快速检测系统可用于食品、饲料、保健品、乳制品、肉制品、饮料、化妆品、洗化产品和制药等工业领域和监管部门等使用的微生物快速检测系统。可以快速确定样本中细菌总数、大肠菌群/大肠杆菌以及沙门氏菌、金葡菌等致病菌和霉菌酵母菌的存在。Biolumix微生物实时微生物实时荧光光电快速检测系统荧光光电快速检测系统由三个部分组成：由三个部分组成：快速检测仪器快速检测仪器 一次性检测管一次性检测管软件软件 BioLumix系统的三个部件一次性检测管一次性检测管软件软件Instrument快速检测仪器快速检测仪器 BioLumix仪器o基本配置的模块化仪器基本配置的模块化仪器包括一个可孵育包括一个可孵育32个个样本管的检测仪样本管的检测仪o模块化的模块化的BioLumix系系统可自由串联组合并由统可自由串联组合并由一台电脑控制（最大可一台电脑控制（最大可控制控制32台）台）检测管技术o两个基本技术两个基本技术n膜技术n二氧化碳传感器膜技术具有重要的防干扰能力ABC产品有菌ANoYesBYesYesCNoNo加有暗褐色粉底霜的检测管加有暗褐色粉底霜的检测管检测原理o由于二氧化碳(CO2)是微生物生长过程中所产生的代谢产物，因而通过检测CO2浓度的变化可以判定微生物的生长状况。荧光光电检测系统通过在一次性检测管底部嵌入一个透明的CO2固体传感器来检测微生物生长过程中所释放的CO2。当有CO2进入时传感器会变色。只有气体可以穿透这个传感器，而液体、微生物和固体颗粒不能通过，从而避免了其它因素的干扰。o如图1所示，左o边是一个无菌的检o测管，右边是一个o阳性的带有黄色传o感器的检测管，表o示有二氧化碳产生o和微生物代谢生长。o检测微生物生长过程中产生的CO2是目前全球主流微生物检测技术，许多微生物检测系统都采用的是这项技术。如法国Biomereux公司在淘汰其BACTOMETER电阻抗系统后推出的临床应用的BacT/ALERT3D微生物检测系统，也通过CO2的产量来发现微生物。o除BioLumix和生物梅里埃公司外，美国BD公司用于临床微生物检测的BACTEC全自动血培养系统也是检测培养瓶内的CO2浓度变化。BioLumix系统优势与前一代产品对比仪器及检测管优势o与前一代pH检测系统相比，BioLumix采用的是一种新型和更加先进的技术：oBiolumix有黄色和蓝色两种两种LED灯，而前一代产品只有一个单色LEDoBioLumix具有荧光灯荧光灯oBioLumix在检测管底部配置有新型的CO2 传感器传感器。CO2传感器是一种可以检测所有细菌、酵母菌和霉菌的主流技术（因为所有的微生物代谢，包括好氧呼吸、厌氧呼吸以及发酵过程都会产生CO2）。oBioLumix采用的是可增添的设计，可同时在同一地点堆叠三台仪器以节约空间，一个软件可同时监控32台机器，1024个检测。细菌总数（TAC)检测管oBioLumix检测管包含一个CO2传感器，因此可以检测发酵和不发酵糖的微生物。而pH检测管只有一个pH指示剂，因此只能检测发酵糖并产酸的微生物，所以在检测总菌数的过程中可能会漏检部分不发酵糖的细菌如假单胞菌、微球菌和一些类型的杆菌等。BioLumix的CO2检测管操作同样非常简单，即只需将稀释或不稀释的样品加入检测管内即可，无需调节样本的PH值。酵母菌和霉菌检测管oBioLumix酵母菌和霉菌检测时间通常仅需要20-38小时，检测时间与前一代相比明显缩短。oBioLumix检测管使用前无需配任何试剂，操作极为简便:只需要将稀释样本加入检测管即可。o前一代产品使用前需配试剂，操作较复杂，且有造成假阳性的风险可能。大肠杆菌检测管oBioLumix大肠杆菌检测管采用MUG荧光检测技术，可以区分大肠杆菌和粪大肠菌群；oBioLumix检测管可以直接用来做吲哚实验，而前代产品需要转接到附加的培养基(胰蛋白胨肉汤)并且需要过夜孵育后方能做吲哚实验；oBioLumix大肠杆菌检测管孵育温度和TAC相同，为35，而前代大肠杆菌检测管需要的温度为43-44，因此不能和细菌总数、大肠菌群等细菌检测同时在一台仪器中做实验。沙门氏菌检测和蜡样芽孢杆菌、异养菌检测oBioLumix系统独有沙门氏菌检测管和蜡样芽孢杆菌管和异养菌检测管。可检测的项目可检测的项目:o细菌总数o大肠菌群o大肠杆菌o肠杆菌科o革兰氏阴性菌o沙门氏菌o酵母菌和霉菌o假单胞菌o葡萄球菌o卫生监控o保质期预测o无菌检验o抗生素残留o微生物限定检测o嗜热菌o嗜冷菌o蜡样芽胞杆菌o异养菌一次性检测管oBioLumix一次性检测管均为优化设计的专利产品，全部依照GMP要求采用全自动灌装设备生产，严格的质控确保了每批产品的可靠性。o与自行配置的检测管相比，一次性检测管无需用户准备干粉培养基，无需用户对不同品牌和/或批号的干粉培养基进行质控，无需用户过量购买或储存培养基，无需冷藏，减轻用户工作量。BioLumixTM系统的灵敏度和检测范围系统的灵敏度和检测范围o灵敏度为每个样本管内一个细菌或真菌的活细胞。一个细菌通常可在6-14个小时内检出一个酵母菌或霉菌可在20-48个小时内检出；菌数越多，检测时间越短o尽管系统可以检出少至每管一个细胞，但是生物体必须首先要增长到超过预先确定的明确的检测阈值。-细菌的检测阈值为每毫升100,000个细胞（105/ml）；-酵母菌/霉菌的检测阈值为每毫升10,000的细胞（104/ml）BioLumixTM系统检测系统检测时间时间o检测时间取决于样品中微生物的初始浓度。污染程度越高的样本检测得越快，并可迅速发出污染警告。Biolumix 系统检测时间表系统检测时间表检测项目检测项目限定标准限定标准传统方法检传统方法检测时间测时间BioLumixBioLumix系统系统 确定阴性结果时间确定阴性结果时间BioLumixBioLumix系统系统 阳阳性报警时间性报警时间总菌数Total Aerobic Count 10,00048 hours14 hours5 to 8 hours总菌数Total Aerobic Count 100048 hours16 hours8-10hours大肠菌群Coliform10024 hours12 hours6 to 10 hours大肠杆菌E.coli1024 hours20 hours6 to 10 hours大肠杆菌E.coli 25g 样本中不得检出72 hours35 hours20-28 hours霉菌酵母菌 Yeast&Mold1005 days48 hours10 to 36 hours沙门氏菌Salmonella25g 样本中不得检出4 days34-40 hours(包括前增菌的时间）8to 12hours金葡菌s.aureus25g 样本中不得检出3 days24 hours10 to 20 hours假单胞菌 25g 样本中不得检出2-4天30小时（包括12小时的预增菌时间）20 to 30 hours软件o基于Windows系统的分析软件控制系统的操作和用户界面。o可同时监控1000个以上的检测。o自动获取数据。o自动产生报告，可提供检查追踪功能、趋势分析和多种的客户专用化的报告模式o适用于GMP,HACCP,21CFR第11部分（在分析实验室中的应用）和ISO9000的标准o条形码读取功能o任何不合要求的样本屏幕上都显示为红色。污染程度愈高，结果显示愈快，从而确保用户能够采取迅速的纠正行动。合格或可接受的样本显示为绿色。附加软件功能包括：附加软件功能包括：o密码保护,保障安全o随机评估放入的样本o简便易懂的显示屏样本结果解读o轻松点击即可有效显示每个检测管的相关信息。o通过网络传输信息o实时污染警报o条码扫描日常维护oBiolumix系统无需日常维护,只需每月将配套校准管放入机器内校准一次即可,时间大约1小时。o发生突然断电时间不超过1.5小时时，正在检测的样品基本不受影响。且具有来电自动启动功能。简单的三步使用步骤：简单的三步使用步骤：o将样本、拭子或滤膜接种在制备好的检测管中（对于液体产品，1-5毫升的样本可以直接加到检测管中。对于固体样本，1-5毫升1：10的稀释液可直接加到检测管中）o-将检测管放在仪器中o-在系统中记录样品和化验鉴定结果。Biolumix系统检测方式o1、标准曲线：通过与平板法对比建立标准曲线，以CFU报告结果；o2、有/无：适用于菌量很少的样本（CFU)；o3、稀释至限定值：根据样本的放行标准进行预稀释，如检测有微生物生长表明样本超标；o4、无菌测试：适用于按标准规定不得含有微生物的样本，如UHT奶。o5、化妆品挑战试验标准曲线法o为了制备校准曲线，样本需要同时使用Biolumix方法和通用的标准方法例如平板计数方法等方法。需要至少5-6个稀释梯度范围的结果组成配对的DT和CFU/g数据来建立曲线。范围越广，得到的方程就越精确。标准曲线法BioLumix系统应用oBiolumix微生物快速检测系统自2009年引入中国以来，已在农业部北京乳品质量监督检验站进行了全面测评，并已被应用于2010年天津夏季达沃斯论坛食品安全保障、2010年亚运会食品安全保障；为数众多的保健品、食品、乳品、餐饮、化妆品、供水企业、高校、科研院所、政府机构都已经采用BioLumix实时快速微生物荧光光电检测系统。美国专利oBiolumix微生物检测系统已获得多项美国专利：oD623242:Four-leggedVialo7623242:DeviceandMethodforMonitoringMultipleChemicalSampleso7651867:MethodofMakingaTestDevice认证o年月，微生物检测系统获得美国食品药品监督管理局FDA认证注册（注册号：），可以用来替代药典USP的RMM（快速检测方法）。论文Biolumix微生物荧光光电检测系统在原料乳中应用评估o作者：张雪林o(北京市乳品质量监督检验站，北京100192)o摘要：本文将一种用于原料乳中荧光光电检测系统与传统国标培养方法进行比较，得出了两种方法结果基本一致的结论，而且该检测系统相对于传统检测法具有检测时间短、操作简单、可自动操作等优点。o关键词：微生物；荧光光电检测系统；原料乳o本文发表于“中国奶牛杂志中国奶牛杂志”2011年第3期谢谢大家！上海美凯纯生物科技有限公司上海美凯纯生物科技有限公司Shanghai 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