2014届高三生物一轮复习课件：动物细胞工程(苏教版必修3).ppt

第三节 动物细胞工程一、动物细胞培养与体细胞克隆一、动物细胞培养与体细胞克隆1.1.概念与操作流程概念与操作流程2.2.条件条件(1)(1)无菌、无毒：无菌、无毒：_无菌处理，添加无菌处理，添加_，定期更换培养液以清除代谢产物。，定期更换培养液以清除代谢产物。(2)(2)营养：除正常的有机和无机营养外，加入营养：除正常的有机和无机营养外，加入_。(3)(3)适宜的温度和适宜的温度和pHpH：温度为：温度为_(_(哺乳动物哺乳动物)，pHpH为为_。(4)(4)气体环境：含气体环境：含_的空气加的空气加_的混合气体。的混合气体。3.3.应用应用生物制品的生产、检测生物制品的生产、检测_、医学研究。、医学研究。对培养液和所有培养用具对培养液和所有培养用具抗生素抗生素动物血清动物血清3737左右左右7.27.27.47.495%95%5%CO5%CO2 2有毒物质有毒物质【点拨点拨】(1)(1)胰蛋白酶作用对象主要是细胞间质，以得到单个的胰蛋白酶作用对象主要是细胞间质，以得到单个的细胞。另外不能用胃蛋白酶替代的原因主要是胃蛋白酶的最适细胞。另外不能用胃蛋白酶替代的原因主要是胃蛋白酶的最适pHpH与细胞培养液的与细胞培养液的pHpH相差太大。相差太大。(2)(2)细胞培养液中添加动物血清的目的是弥补缺少的营养，因为细胞培养液中添加动物血清的目的是弥补缺少的营养，因为对细胞所需的营养物质还没有完全搞清楚，用血清来模拟体内对细胞所需的营养物质还没有完全搞清楚，用血清来模拟体内的细胞生活环境。的细胞生活环境。4.4.细胞核移植与动物体细胞克隆细胞核移植与动物体细胞克隆(1)(1)克隆：指遗传上完全相同的分子、细胞或来自同一祖先的克隆：指遗传上完全相同的分子、细胞或来自同一祖先的_的的_群体。群体。(2)(2)体细胞克隆：将供体体细胞的体细胞克隆：将供体体细胞的_与受体去核卵细胞的与受体去核卵细胞的_进行人工组合，借助于卵细胞的发育能力，经过培养进行人工组合，借助于卵细胞的发育能力，经过培养发育成胚胎进而形成个体的技术。其关键是发育成胚胎进而形成个体的技术。其关键是_。(3)(3)细胞核移植：利用细胞核移植：利用_技术等将某种动物细胞的技术等将某种动物细胞的_移入同种或异种动物的去除细胞核的成熟移入同种或异种动物的去除细胞核的成熟_内的内的技术。技术。生物个体生物个体无性繁殖无性繁殖细胞核细胞核细胞质细胞质细胞核移植技术细胞核移植技术显微操作显微操作胞核胞核细细卵细胞卵细胞(4)(4)克隆动物过程：克隆动物过程：(5)(5)克隆技术的意义：克隆技术的意义：在克服动物在克服动物_杂交繁殖障碍、创造杂交繁殖障碍、创造_等方面具有重等方面具有重要的科学意义和潜在的要的科学意义和潜在的_。体细胞体细胞融合的细胞融合的细胞种间种间新物种新物种经济价值经济价值二、细胞融合和单克隆抗体二、细胞融合和单克隆抗体1.1.细胞融合细胞融合(1)(1)含义：在一定的条件下将含义：在一定的条件下将_或或_细胞融合为一个细胞细胞融合为一个细胞的过程。的过程。a._a._：如电场法：如电场法(2)(2)融合方法融合方法 b.b.化学法：如化学法：如_法法 c.c.生物法：如生物法：如_法法(3)(3)应用：制备应用：制备_。物理法物理法聚乙二醇聚乙二醇仙台病毒仙台病毒单克隆抗体单克隆抗体2 2个个多个多个2.2.单克隆抗体技术单克隆抗体技术(1)(1)制备过程：制备过程：脾脏脾脏杂交瘤细胞杂交瘤细胞同种细胞同种细胞杂交细胞杂交细胞单克隆单克隆(2)(2)单克隆抗体的优点：单克隆抗体的优点：_强，纯度高，强，纯度高，_高，产高，产量大，容易标准化生产等。量大，容易标准化生产等。(3)(3)单克隆抗体的应用：单克隆抗体的应用：用于治疗肿瘤；用于治疗肿瘤；治疗免疫系统紊乱引起的疾病；治疗免疫系统紊乱引起的疾病；用于器官移植。用于器官移植。特异性特异性灵敏度灵敏度【点拨点拨】(1)(1)植物细胞融合获得的杂种细胞可形成杂种植株，而植物细胞融合获得的杂种细胞可形成杂种植株，而动物细胞融合获得的杂交细胞不会发育成个体。动物细胞融合获得的杂交细胞不会发育成个体。(2)(2)制备单克隆抗体时，需进行两次筛选，第一次是为了选出杂制备单克隆抗体时，需进行两次筛选，第一次是为了选出杂交瘤细胞，第二次是为了获得足够数量的能分泌所需抗体的杂交瘤细胞，第二次是为了获得足够数量的能分泌所需抗体的杂交瘤细胞。交瘤细胞。植物组织培养、动物细胞培养和核移植的比较植物组织培养、动物细胞培养和核移植的比较植物组织培养植物组织培养动物细胞培养动物细胞培养核移植核移植过过程程外植体外植体愈伤组织愈伤组织根、芽或胚状体根、芽或胚状体试管苗试管苗脱分化脱分化再分化再分化动物组织块动物组织块细胞悬液细胞悬液原代培养原代培养(细胞贴壁生长细胞贴壁生长)胰蛋白酶处理，胰蛋白酶处理，分瓶继续培养分瓶继续培养传代培养传代培养少数细胞获得少数细胞获得不死性不死性(癌细胞癌细胞)剪碎、胰蛋剪碎、胰蛋白酶处理白酶处理放入培养瓶放入培养瓶接触抑制接触抑制10105050代代供体供体 受体受体体细胞核体细胞核 卵母细胞卵母细胞重组细胞重组细胞早期胚胎早期胚胎个体个体导入导入 去核去核胚胎移植胚胎移植植物组织培养植物组织培养动物细胞培养动物细胞培养核移植核移植结结果果关关键键环环节节与外植体完全相同的个体与外植体完全相同的个体相同分化程度的细相同分化程度的细胞群胞群与供体基本相同的与供体基本相同的个体个体细胞的脱分化、再分化、细胞的脱分化、再分化、分化分化细胞分化、细胞癌变细胞分化、细胞癌变核融合、细胞分化核融合、细胞分化【高考警示钟高考警示钟】1.1.植物组织培养和动物细胞培养过程都存在细胞的培养过程，植物组织培养和动物细胞培养过程都存在细胞的培养过程，但植物细胞可以先分裂再分化，而动物细胞不分化只分裂。但植物细胞可以先分裂再分化，而动物细胞不分化只分裂。2.2.区分原代培养和传代培养的关键是是否分瓶培养。贴壁生长区分原代培养和传代培养的关键是是否分瓶培养。贴壁生长到一定程度需要用胰蛋白酶处理，然后再分瓶培养，原代培养到一定程度需要用胰蛋白酶处理，然后再分瓶培养，原代培养结束，开始了传代培养。结束，开始了传代培养。3.3.植物组织培养成的植株与提供外植体的植株完全相同，而动植物组织培养成的植株与提供外植体的植株完全相同，而动物细胞核移植形成的个体与供体大部分性状相同，也有部分性物细胞核移植形成的个体与供体大部分性状相同，也有部分性状与受体相同。状与受体相同。【典例训练典例训练1 1】(2012(2012靖江模拟靖江模拟)人的血清白蛋白人的血清白蛋白(HAS)(HAS)在临床在临床上需求量很大，通常从血液中提取。但由于艾滋病病毒等的威上需求量很大，通常从血液中提取。但由于艾滋病病毒等的威胁与日俱增，使人们对血液制品的使用顾虑重重。如果应用现胁与日俱增，使人们对血液制品的使用顾虑重重。如果应用现代生物科学技术，将人的血清白蛋白基因导入奶牛细胞中，那代生物科学技术，将人的血清白蛋白基因导入奶牛细胞中，那么利用牛的乳汁生产血清白蛋白就会安全、高效地满足人类需么利用牛的乳汁生产血清白蛋白就会安全、高效地满足人类需求。如图是利用奶牛乳汁生产人类血清白蛋白的图解，根据图求。如图是利用奶牛乳汁生产人类血清白蛋白的图解，根据图示回答：示回答：(1)(1)以上过程涉及的现代生物技术中，属于细胞工程的有以上过程涉及的现代生物技术中，属于细胞工程的有_。(2)(2)在基因工程中，我们称在基因工程中，我们称为目的基因，请举出获取目的基因为目的基因，请举出获取目的基因的主要方法：的主要方法：_(至少答两种至少答两种)。在。在进入进入之前要构建基因表达载体，这是基之前要构建基因表达载体，这是基因工程的核心，除目的基因外，基因表达载体还必须含有因工程的核心，除目的基因外，基因表达载体还必须含有_，将，将导入导入的常用方法是的常用方法是_。(3)(3)图中图中一般经过一般经过_处理可以得到处理可以得到，从，从到到的过程中一般利用未受精的卵母细胞去核后作为受体细胞，的过程中一般利用未受精的卵母细胞去核后作为受体细胞，对卵母细胞的去核处理一般选择在对卵母细胞的去核处理一般选择在_期进行。期进行。(4)(4)用用细胞进行培养发育成胚胎时，一般不超过细胞进行培养发育成胚胎时，一般不超过_代，代，原因是原因是_，此培养过程与植物细胞培养所用的培养基有何不同？此培养过程与植物细胞培养所用的培养基有何不同？_。【解题指南解题指南】1.1.考查实质：动物细胞核移植过程、基因工程操作过程。考查实质：动物细胞核移植过程、基因工程操作过程。2.2.解题关键：解题关键：(1)(1)明确明确过程是将目的基因导入受体细胞，过程是将目的基因导入受体细胞，的形成过程为核移植；的形成过程为核移植；(2)(2)明确细胞培养在明确细胞培养在1010代以内，细胞核型不会发生变化。代以内，细胞核型不会发生变化。【解析解析】(1)(1)图中形成图中形成的过程为核移植，由重组细胞发育成的过程为核移植，由重组细胞发育成的过程需经动物细胞培养。的过程需经动物细胞培养。(2)(2)获取目的基因的方法主要有获取目的基因的方法主要有PCRPCR扩增技术、人工合成法和从扩增技术、人工合成法和从基因文库中提取法，获取的目的基因导入动物细胞常用显微注基因文库中提取法，获取的目的基因导入动物细胞常用显微注射法。射法。(3)(3)动物组织分散成单个细胞常用胰蛋白酶处理，对卵母细胞的动物组织分散成单个细胞常用胰蛋白酶处理，对卵母细胞的去核处理一般选择在去核处理一般选择在MM时期。时期。(4)(4)动物细胞培养时，一般不超过动物细胞培养时，一般不超过1010代，超过代，超过1010代后细胞的核型代后细胞的核型可能会发生变化。可能会发生变化。答案：答案：(1)(1)核移植技术、动物细胞培养核移植技术、动物细胞培养(2)(2)基因文库中提取、基因文库中提取、PCRPCR技术扩增、人工化学合成技术扩增、人工化学合成(两种即可两种即可)复制区、复制原点、标记基因复制区、复制原点、标记基因 显微注射法显微注射法 (3)(3)胰蛋白酶胰蛋白酶 M(M(或减数第二次分裂中或减数第二次分裂中)(4)10(4)10 10 10代以内的细胞，细胞核型不发生变化代以内的细胞，细胞核型不发生变化此培养基中加入动物血清、血浆等此培养基中加入动物血清、血浆等 动物细胞融合与单克隆抗体动物细胞融合与单克隆抗体1.1.植物体细胞杂交与动物细胞融合的比较植物体细胞杂交与动物细胞融合的比较植物体细胞杂交植物体细胞杂交动物细胞融合动物细胞融合原理原理细胞膜的流动性、细胞的全能性细胞膜的流动性、细胞的全能性细胞膜的流动性细胞膜的流动性过程过程细胞细胞A A、B B 原生质体原生质体A A、B B 融合的原生质体融合的原生质体杂种细胞杂种细胞杂种植株杂种植株细胞细胞A A、B B杂交细胞杂交细胞多个相同多个相同杂交细胞杂交细胞去壁去壁融合融合植物组织培养植物组织培养有丝分裂有丝分裂融合融合植物体细胞杂交植物体细胞杂交动物细胞融合动物细胞融合相关酶相关酶纤维素酶和果胶酶纤维素酶和果胶酶胰蛋白酶胰蛋白酶融合方融合方法法物理法物理法:电场诱导法；电场诱导法；化学法化学法:聚乙二醇等试剂诱导聚乙二醇等试剂诱导除物理法和化学法外还除物理法和化学法外还可以用灭活的病毒诱导可以用灭活的病毒诱导结果结果杂种植株杂种植株杂交细胞杂交细胞意义意义克服了远源杂交的不亲和性克服了远源杂交的不亲和性,获获得杂种植株得杂种植株突破了有性杂交方法的突破了有性杂交方法的局限局限,使远源杂交成为可使远源杂交成为可能能2.2.单克隆抗体制备的关键环节单克隆抗体制备的关键环节(1)(1)取相应取相应B B淋巴细胞前必须先注射相应抗原，否则不能获得单淋巴细胞前必须先注射相应抗原，否则不能获得单克隆抗体。克隆抗体。(2)(2)细胞融合后需经二次筛选：细胞融合后需经二次筛选：第一次：在特定的选择性培养基上，未融合的亲本细胞第一次：在特定的选择性培养基上，未融合的亲本细胞(B(B淋巴淋巴细胞和骨髓瘤细胞细胞和骨髓瘤细胞)和融合的具有同种核的细胞和融合的具有同种核的细胞(BB(BB融合细胞、融合细胞、瘤瘤融合细胞瘤瘤融合细胞)都会死亡，只有融合的杂种细胞都会死亡，只有融合的杂种细胞(杂交瘤细胞杂交瘤细胞)才才能生长。这种杂种细胞的特点是既能迅速大量繁殖，又能产生能生长。这种杂种细胞的特点是既能迅速大量繁殖，又能产生单一的特异性抗体。单一的特异性抗体。第二次：经选择性培养的杂交瘤细胞并非都是能分泌所需抗体第二次：经选择性培养的杂交瘤细胞并非都是能分泌所需抗体的细胞的细胞(很多种杂交瘤细胞很多种杂交瘤细胞)，需经克隆化培养和抗体检测，经，需经克隆化培养和抗体检测，经筛选后才可获得足够数量的能分泌所需抗体的细胞。筛选后才可获得足够数量的能分泌所需抗体的细胞。【高考警示钟高考警示钟】1.1.植物体细胞杂交与动物细胞融合中酶的作用对象不同，纤维植物体细胞杂交与动物细胞融合中酶的作用对象不同，纤维素酶和果胶酶作用于细胞壁，而胰蛋白酶等作用于细胞间质。素酶和果胶酶作用于细胞壁，而胰蛋白酶等作用于细胞间质。2.2.灭活的病毒保持了其抗原性，但毒性消失。灭活的病毒保持了其抗原性，但毒性消失。3.3.植物杂交细胞在激素诱导下能表达出全能性，但动物杂交细植物杂交细胞在激素诱导下能表达出全能性，但动物杂交细胞的全能性不能表达。胞的全能性不能表达。【典例训练典例训练2 2】有性生殖的生物产生后代需进行受精作用，植物有性生殖的生物产生后代需进行受精作用，植物体细胞杂交要进行原生质体的融合，单克隆抗体的制备需进行体细胞杂交要进行原生质体的融合，单克隆抗体的制备需进行动物细胞融合，可见细胞的融合技术有着广泛的应用。下列为动物细胞融合，可见细胞的融合技术有着广泛的应用。下列为细胞融合的简略过程，据图回答相关问题：细胞融合的简略过程，据图回答相关问题：(1)(1)若若a a、b b分别是基因型为分别是基因型为HhrrHhrr、hhRrhhRr两个烟草品种的花粉，且两个烟草品种的花粉，且这两对基因分别位于两对同源染色体上。由于受一对隐性纯合这两对基因分别位于两对同源染色体上。由于受一对隐性纯合基因基因(rr(rr或或hh)hh)的作用，在光照强度大于的作用，在光照强度大于800 lx800 lx时都不能生长。时都不能生长。要想从融合细胞的培养液中分离出基因型为要想从融合细胞的培养液中分离出基因型为HhRrHhRr的杂种细胞，的杂种细胞，较为简便的筛选方法是较为简便的筛选方法是_。(2)(2)若若a a、b b表示两种植物体细胞，则由表示两种植物体细胞，则由d d细胞形成杂种植株的原细胞形成杂种植株的原理是理是_，这种育种方法的优点是，这种育种方法的优点是_。(3)(3)若若a a、b b分别为骨髓瘤细胞和分别为骨髓瘤细胞和B B淋巴细胞，则淋巴细胞，则d d细胞特点是细胞特点是_。由。由d d细胞产生的抗体与普通血清抗体相细胞产生的抗体与普通血清抗体相比较，具有比较，具有_的特点。生产上一般不的特点。生产上一般不能通过直接培养能通过直接培养B B淋巴细胞的方法生产单克隆抗体的主要原因是淋巴细胞的方法生产单克隆抗体的主要原因是_。(4)(4)下列各图表示单克隆抗体制备过程的各阶段图解，请用箭头下列各图表示单克隆抗体制备过程的各阶段图解，请用箭头把代表各图解的字母按单克隆抗体制备过程的顺序连接起来：把代表各图解的字母按单克隆抗体制备过程的顺序连接起来：_。【解题指南解题指南】1.1.考查实质：植物体细胞杂交与单克隆抗体的制备。考查实质：植物体细胞杂交与单克隆抗体的制备。2.2.解题关键：解题关键：(1)hr(1)hr是是a a、b b产生配子中相同的配子，另外两种配子分别是产生配子中相同的配子，另外两种配子分别是HrHr、hRhR。(2)(2)两个不同的细胞形成的杂种细胞发育成植株。两个不同的细胞形成的杂种细胞发育成植株。(3)(3)骨髓瘤细胞特点、骨髓瘤细胞特点、B B淋巴细胞特点与融合后的细胞具备的特淋巴细胞特点与融合后的细胞具备的特点之间的关系。点之间的关系。(4)(4)单克隆抗体产生的过程由细胞融合和杂交细胞的培养两部分单克隆抗体产生的过程由细胞融合和杂交细胞的培养两部分组成。组成。【解析解析】(1)a(1)a的花粉基因型为的花粉基因型为HrHr和和hrhr，b b的花粉基因型为的花粉基因型为hRhR和和hrhr，只有，只有HhRrHhRr的基因组合方式没有隐性纯合基因，所以杂种细胞的基因组合方式没有隐性纯合基因，所以杂种细胞HhRrHhRr能在光照强度大于能在光照强度大于800 lx800 lx时生长。时生长。(2)(2)植物体细胞杂交形成植株，是植物细胞全能性的表现，克服植物体细胞杂交形成植株，是植物细胞全能性的表现，克服了自然条件下物种之间的生殖隔离。了自然条件下物种之间的生殖隔离。(3)(3)在单克隆抗体产生过程中细胞在单克隆抗体产生过程中细胞d d是杂交瘤细胞，具备了融合前是杂交瘤细胞，具备了融合前两种细胞的优点，能无限增殖且产生特定抗体。而且反复筛选的两种细胞的优点，能无限增殖且产生特定抗体。而且反复筛选的细胞细胞d d产生的抗体品质优良。产生的抗体品质优良。B B淋巴细胞能产生特定抗体，但不能淋巴细胞能产生特定抗体，但不能无限增殖，无法得到大量的抗体。无限增殖，无法得到大量的抗体。(4)(4)只能注射特定抗原后才能得到特定的只能注射特定抗原后才能得到特定的B B淋巴细胞，再与骨髓瘤淋巴细胞，再与骨髓瘤细胞融合，经筛选后可体内培养也可体外培养以得到大量单克隆细胞融合，经筛选后可体内培养也可体外培养以得到大量单克隆抗体。抗体。答案：答案：(1)(1)给予大于给予大于800 lx800 lx的光照的光照(2)(2)植物细胞的全能性植物细胞的全能性克服了远源杂交不亲和的障碍克服了远源杂交不亲和的障碍(3)(3)既能无限增殖，又能产生特定抗体既能无限增殖，又能产生特定抗体特异性强、灵敏度高、化学性质单一特异性强、灵敏度高、化学性质单一B B淋巴细胞不能无限增殖淋巴细胞不能无限增殖(4)(4)1.(20121.(2012佛山模拟佛山模拟)下列不属于细胞工程基本技术的是下列不属于细胞工程基本技术的是()()A A细胞培养技术细胞培养技术B B细胞融合技术细胞融合技术C C细胞核移植技术细胞核移植技术D D转基因技术转基因技术【解析解析】选选D D。D D项属于基因工程。细胞工程是指应用细胞生物学项属于基因工程。细胞工程是指应用细胞生物学和分子生物学的方法，通过某种工程学手段，在细胞水平或细胞和分子生物学的方法，通过某种工程学手段，在细胞水平或细胞器水平上，按照人们的意愿来改变细胞内的遗传物质，从而获得器水平上，按照人们的意愿来改变细胞内的遗传物质，从而获得新型生物或特种细胞产品或产物的一门综合性科学技术。新型生物或特种细胞产品或产物的一门综合性科学技术。2.2.用动、植物成体的体细胞进行离体培养，下列叙述正确的是用动、植物成体的体细胞进行离体培养，下列叙述正确的是()()A A都需用都需用 COCO2 2培养箱培养箱 B B都需用液体培养基都需用液体培养基C C都要在无菌条件下进行都要在无菌条件下进行 D D都可体现细胞的全能性都可体现细胞的全能性【解析解析】选选C C。植物细胞培养用固体培养基，不需用。植物细胞培养用固体培养基，不需用COCO2 2培养箱；培养箱；植物细胞培养可得到完整的植物个体，体现了细胞的全能性，植物细胞培养可得到完整的植物个体，体现了细胞的全能性，动物细胞培养获得的是动物细胞或代谢产物，未体现细胞的全动物细胞培养获得的是动物细胞或代谢产物，未体现细胞的全能性；植物细胞培养和动物细胞培养均需要在无菌条件下进行。能性；植物细胞培养和动物细胞培养均需要在无菌条件下进行。3.(20123.(2012江苏联考江苏联考)如图是科学家新研发的制备单克隆抗体的如图是科学家新研发的制备单克隆抗体的过程，相关叙述错误的是过程，相关叙述错误的是()()A A该过程涉及基因工程和动物细胞融合技术该过程涉及基因工程和动物细胞融合技术B B经酶经酶A A处理后的处理后的与质粒具有相同的黏性末端与质粒具有相同的黏性末端C C若供体若供体DNADNA提供了提供了prGprG基因基因(无限增殖调控基因无限增殖调控基因)，则该过程中，则该过程中的的是已免疫的是已免疫的B B细胞细胞D D通过检测和筛选得到的通过检测和筛选得到的既能无限增殖又能分泌特异性抗体既能无限增殖又能分泌特异性抗体【解析解析】选选A A。该过程涉及基因工程，但没有涉及动物细胞融合。该过程涉及基因工程，但没有涉及动物细胞融合技术。技术。4.4.我国科学家在山东莱阳农学院培养出了克隆牛我国科学家在山东莱阳农学院培养出了克隆牛“康康康康”和和“双双双双”，其过程如图所示：，其过程如图所示：下列叙述中正确的是下列叙述中正确的是(多选多选)()()A.A.该过程利用了动物细胞核的全能性该过程利用了动物细胞核的全能性B.AB.A母牛和母牛和B B母牛与母牛与“康康康康”“”“双双双双”之间不存在真正意义上的之间不存在真正意义上的亲子代关系亲子代关系C.C.该过程体现的方法为拯救濒危动物提供了一种新思路该过程体现的方法为拯救濒危动物提供了一种新思路D.“D.“康康康康”、“双双双双”之间若进行器官移植，则会发生免疫排之间若进行器官移植，则会发生免疫排斥反应斥反应【解析解析】选选A A、B B、C C。细胞核移植技术产生动物个体的原理是利。细胞核移植技术产生动物个体的原理是利用动物细胞核的全能性；因为用动物细胞核的全能性；因为A A、B B母牛并没有将遗传物质传递母牛并没有将遗传物质传递给给“康康康康”、“双双双双”，故从遗传学角度来说，它们之间并没，故从遗传学角度来说，它们之间并没亲子代关系；细胞核移植亲子代关系；细胞核移植(克隆克隆)技术的应用之一是拯救濒危物技术的应用之一是拯救濒危物种，扩大其种群数量；种，扩大其种群数量；“康康康康”、“双双双双”的核遗传物质并没的核遗传物质并没有差别，若进行器官移植不会发生免疫排斥反应。有差别，若进行器官移植不会发生免疫排斥反应。5.(20095.(2009江苏高考江苏高考)动物器官的体外培养技术对于研究器官的动物器官的体外培养技术对于研究器官的生理、病理过程及其机制意义重大。如图是一个新生小鼠的肝生理、病理过程及其机制意义重大。如图是一个新生小鼠的肝脏小块培养装置示意图。请回答下列问题。脏小块培养装置示意图。请回答下列问题。(1)(1)肝脏切成小薄片，这有利于肝脏细胞肝脏切成小薄片，这有利于肝脏细胞_。(2)(2)气室中充入气室中充入5%CO5%CO2 2气体的主要作用是气体的主要作用是_。(3)(3)培养液中添加抗生素是为了抑制细菌生长，但要注意选择抗培养液中添加抗生素是为了抑制细菌生长，但要注意选择抗生素的生素的_，以保证抗生素对肝脏无害。，以保证抗生素对肝脏无害。(4)(4)有机物有机物X X有毒性，可诱发染色体断裂。利用上图所示装置和有毒性，可诱发染色体断裂。利用上图所示装置和提供的下列材料用具，探究肝脏小块对有机物提供的下列材料用具，探究肝脏小块对有机物X X是否具有解毒作是否具有解毒作用。用。材料用具：材料用具：肝脏小块，外周血淋巴细胞，淋巴细胞培养液，植物凝集素肝脏小块，外周血淋巴细胞，淋巴细胞培养液，植物凝集素(刺刺激淋巴细胞分裂激淋巴细胞分裂)；显微镜，载玻片，盖玻片，玻璃皿，滴管；显微镜，载玻片，盖玻片，玻璃皿，滴管；吉姆萨染液吉姆萨染液(使染色体着色使染色体着色)，有机物，有机物X X溶液等。溶液等。实验过程：实验过程：在淋巴细胞培养液中加入植物凝集素培养淋巴细胞，取在淋巴细胞培养液中加入植物凝集素培养淋巴细胞，取4 4等份，等份，备用。备用。甲甲乙乙丙丙丁丁步骤一：加入肝脏培养液步骤一：加入肝脏培养液步骤二：加入有机物步骤二：加入有机物X X溶液溶液步骤三：放置肝脏小块步骤三：放置肝脏小块利用甲、乙、丙、丁利用甲、乙、丙、丁4 4组上图所示装置，按下表步骤操作组上图所示装置，按下表步骤操作(“”(“”表示已完成的步骤表示已完成的步骤)。上表中还需进行的操作是上表中还需进行的操作是_。培养一段时间后，取培养一段时间后，取4 4组装置中的等量培养液，分别添加到组装置中的等量培养液，分别添加到4 4份备用的淋巴细胞培养液中继续培养。份备用的淋巴细胞培养液中继续培养。一段时间后取淋巴细胞分别染色、制片。在显微镜下观察一段时间后取淋巴细胞分别染色、制片。在显微镜下观察_，并对比分析。若丙组淋巴细胞出现异常，而甲组的淋，并对比分析。若丙组淋巴细胞出现异常，而甲组的淋巴细胞正常，则说明巴细胞正常，则说明_。【解析解析】本题考查动物细胞培养的相关知识。本题考查动物细胞培养的相关知识。(1)(1)把肝脏切成小薄片，有利于肝脏细胞的呼吸代谢，即吸收氧气把肝脏切成小薄片，有利于肝脏细胞的呼吸代谢，即吸收氧气和营养物质、排出代谢废物。和营养物质、排出代谢废物。(2)(2)气室中充入气室中充入5%CO5%CO2 2的作用是形成碳酸来维持培养液适宜的的作用是形成碳酸来维持培养液适宜的pHpH。(3)(3)同时也要注意选择抗生素的种类和剂量来抑制细菌生长。同时也要注意选择抗生素的种类和剂量来抑制细菌生长。(4)(4)乙组和丁组没有做处理，向乙乙组和丁组没有做处理，向乙(或丁或丁)组装置中放置肝脏小块作组装置中放置肝脏小块作为对照实验，有机物为对照实验，有机物X X有毒性，可诱发染色体断裂，所以要观察淋有毒性，可诱发染色体断裂，所以要观察淋巴细胞的染色体形态和数量是否变化。甲组添加肝脏小块，淋巴巴细胞的染色体形态和数量是否变化。甲组添加肝脏小块，淋巴细胞染色体正常，丙组没有添加，出现染色体异常，说明肝脏小细胞染色体正常，丙组没有添加，出现染色体异常，说明肝脏小块对有机物块对有机物X X具有解毒作用。具有解毒作用。答案：答案：(1)(1)吸收氧气和营养物质、排出代谢废物吸收氧气和营养物质、排出代谢废物(2)(2)维持培养液适宜的维持培养液适宜的pHpH(3)(3)种类和剂量种类和剂量(4)(4)向乙向乙(或丁或丁)组装置中放置肝脏小块组装置中放置肝脏小块染色体形态和数量染色体形态和数量 肝脏小块对有机物肝脏小块对有机物X X具有解毒作用具有解毒作用