实验四 叶绿体中色素提取和分离(精品).ppt

叶绿体中色素的提取和分离叶绿体中色素的提取和分离基质基质 基粒基粒类囊体类囊体叶绿体椭圆球形椭圆球形外膜、内膜、外膜、内膜、叶绿体基质叶绿体基质、基粒基粒(由由单层膜单层膜的类囊体垛叠构成的类囊体垛叠构成)叶绿体酶（光合作用有关）酶（光合作用有关）光反光反应的的酶 暗反暗反应的的酶 少量少量DNA和和RNA 色素色素叶绿体色素类囊体膜类囊体膜色素色素叶绿素叶绿素类胡萝卜素类胡萝卜素叶绿素叶绿素a a（蓝绿色蓝绿色）叶绿素叶绿素b b（黄绿色黄绿色）叶黄素叶黄素（黄色黄色）胡萝卜素胡萝卜素（橙黄色橙黄色）叶绿体色素选择选择吸收吸收光能，光能，传递和转化传递和转化光能光能叶绿素：主要吸收主要吸收红橙光红橙光和和蓝紫光蓝紫光类胡萝卜素：主要吸收主要吸收蓝紫光蓝紫光叶绿素叶绿素a a叶绿素叶绿素b b叶黄素叶黄素胡萝卜素胡萝卜素叶绿素叶绿素a a光合作用光合作用直接用于直接用于(转化转化光能光能)吸收和传递吸收和传递光能光能实验目的实验目的 掌握提取和分离叶绿体色素的方法，探究叶绿体中掌握提取和分离叶绿体色素的方法，探究叶绿体中色素的种类。色素的种类。实验材料实验材料叶绿体中色素的提取和分离叶绿体中色素的提取和分离材料材料：菠菜：菠菜药品药品：混合的层析液，无水乙醇，：混合的层析液，无水乙醇，二氧化硅，碳酸钙二氧化硅，碳酸钙 。用具用具：干燥滤纸，烧杯、研钵，：干燥滤纸，烧杯、研钵，玻璃漏斗，纱布，滴管，盖玻片，玻璃漏斗，纱布，滴管，盖玻片，剪刀，试管，培养皿，药匙。剪刀，试管，培养皿，药匙。实验原理实验原理 叶绿体中含有两大类色素（叶绿素和类胡叶绿体中含有两大类色素（叶绿素和类胡萝卜素），它们溶于有机溶剂，因此可选用萝卜素），它们溶于有机溶剂，因此可选用乙乙醇或丙酮醇或丙酮进行提取。进行提取。层析液是一种层析液是一种脂溶性脂溶性很强的有机溶剂，叶很强的有机溶剂，叶绿体内的色素在层析液中的溶解度各不相同，绿体内的色素在层析液中的溶解度各不相同，溶解度越高，在滤纸上的扩散速度越快，反之溶解度越高，在滤纸上的扩散速度越快，反之则慢，可以将叶绿体中的色素分离开来。因此则慢，可以将叶绿体中的色素分离开来。因此采用纸层析法进行分离。采用纸层析法进行分离。叶绿体中色素的提取和分离叶绿体中色素的提取和分离叶绿体中色素的提取和分离叶绿体中色素的提取和分离叶绿体中叶绿体中的色素的色素用天平称取用天平称取5 5克菠菜叶，剪碎克菠菜叶，剪碎少许二氧化硅、碳酸钙少许二氧化硅、碳酸钙+10mL+10mL无水乙醇无水乙醇 取干燥滤纸折叠，放入漏斗，取干燥滤纸折叠，放入漏斗，把漏斗放入试管，架到试管架上把漏斗放入试管，架到试管架上将研磨好的菠菜叶加到漏斗中过滤将研磨好的菠菜叶加到漏斗中过滤实验步骤实验步骤叶绿体中色素的提取和分离叶绿体中色素的提取和分离研钵研钵迅速、充分地进行研磨迅速、充分地进行研磨 提取：提取：注意：收集好的研磨液注意：收集好的研磨液及时用及时用棉塞塞紧棉塞塞紧。二氧化硅二氧化硅：为：为了使了使研磨充分研磨充分；碳酸钙碳酸钙：保护保护色素免受破坏色素免受破坏；无水乙醇无水乙醇：色：色素的溶剂。素的溶剂。铅笔画线，剪角铅笔画线，剪角用毛细吸管（盖玻片）吸取少量滤液用毛细吸管（盖玻片）吸取少量滤液 ，画线，重复，画线，重复2-32-3次次 烧杯中倒入层析液（不要没过滤液线），将滤纸条轻轻插入，烧杯中倒入层析液（不要没过滤液线），将滤纸条轻轻插入，培养皿盖住小烧杯培养皿盖住小烧杯 叶绿体中色素的提取和分离叶绿体中色素的提取和分离实验步骤实验步骤分离：分离：【注注】p画滤液线时尽量画滤液线时尽量画直、画细、画直、画细、画浓画浓p每次画完，要等滤液每次画完，要等滤液干时再干时再重复画重复画，以防滤液扩散开使，以防滤液扩散开使滤液线过宽，影响结果滤液线过宽，影响结果【注注】p放滤液条时，要放滤液条时，要避免避免滤液细线滤液细线浸没浸没到到层析液。不要让滤纸条贴在层析层析液。不要让滤纸条贴在层析管壁上。管壁上。p层析液中一些成分易挥发，要层析液中一些成分易挥发，要避免避免开放在空气中开放在空气中。叶绿体中色素的提取和分离叶绿体中色素的提取和分离实验结果实验结果实验结果记录实验结果记录叶绿体中色素的提取和分离叶绿体中色素的提取和分离 将在滤纸上所看到的结果将在滤纸上所看到的结果如实地如实地在实验报告在实验报告中画出来，并标明分别是中画出来，并标明分别是什么色素什么色素、色素扩散距色素扩散距离离、色素带宽度色素带宽度。