实验93 紫外分光光度法测定水果(或蔬菜)中的维生素C含量(精品).ppt

1/10在线答疑：在线答疑： S大大学学通通用用化化学学实实验验技技术术紫紫外外分分光光光光度度法法测测定定水水果果（或或蔬蔬菜菜）中中的的维维生生素素C C含含量量实验实验93 93 紫外分光光度法测定水果紫外分光光度法测定水果（或蔬菜）中的（或蔬菜）中的维生素维生素C C含量含量93.1 93.1 实验目的实验目的 (1)(1)掌握紫外分光光度计的工作原理及使用方法。掌握紫外分光光度计的工作原理及使用方法。(2)(2)掌握掌握水果（或蔬菜）中的水果（或蔬菜）中的维生素维生素C C含量的含量的测定方法。测定方法。2/10在线答疑：在线答疑： S大大学学通通用用化化学学实实验验技技术术紫紫外外分分光光光光度度法法测测定定水水果果（或或蔬蔬菜菜）中中的的维维生生素素C C含含量量93.2 93.2 实验原理实验原理 紫紫外外快快速速测测定定维维生生素素C C法法，是是根根据据维维生生素素C C具具有有对对紫紫外外产产生生吸吸收收和和对对碱碱不不稳稳定定的的特特性性，于于243 243 nmnm处处测测定定样样品品液液与与碱碱处处理理样样品品液液两两者者消消光光值值之之差差，通通过过查查标标准准曲线，即可计算样品中维生素曲线，即可计算样品中维生素C C的含量。的含量。3/10在线答疑：在线答疑： S大大学学通通用用化化学学实实验验技技术术紫紫外外分分光光光光度度法法测测定定水水果果（或或蔬蔬菜菜）中中的的维维生生素素C C含含量量（一）标准曲线的制作（一）标准曲线的制作1 1抗抗坏坏血血酸酸标标准准溶溶液液的的配配制制：用用分分析析天天平平准准确确称称取取抗抗坏坏血血酸酸10 10 mgmg，加加2 2 mL mL 10%10%盐盐酸酸，加加蒸蒸馏馏水水定定容容至至100 100 mLmL，混匀。此抗坏血酸溶液的浓度为，混匀。此抗坏血酸溶液的浓度为100 g100 gmLmL-1-1。93.3 93.3 操作步骤操作步骤4/10在线答疑：在线答疑： S大大学学通通用用化化学学实实验验技技术术紫紫外外分分光光光光度度法法测测定定水水果果（或或蔬蔬菜菜）中中的的维维生生素素C C含含量量 2.2.标准曲线的绘制标准曲线的绘制12345678标准抗坏血酸溶液加入体标准抗坏血酸溶液加入体积积/mL/mL0.10.20.30.40.50.60.81.09.99.89.79.69.59.49.29.0总体积总体积/mL/mL10.010.010.010.010.010.010.010.0抗坏血酸溶液浓度抗坏血酸溶液浓度/(g/(gmLmL-1-1）1.02.03.04.05.06.08.010.05/10在线答疑：在线答疑： S大大学学通通用用化化学学实实验验技技术术紫紫外外分分光光光光度度法法测测定定水水果果（或或蔬蔬菜菜）中中的的维维生生素素C C含含量量 3 3消消光光值值的的测测定定：以以蒸蒸馏馏水水为为空空白白，在在243 243 nmnm处处测测定定标标准准系系列列抗抗坏坏血血酸酸溶溶液液的的消消光光值值，以以抗抗坏坏血血酸酸的的含含量量（gg）为为横横坐坐标标，以以相相应应的的消消光光值值为为纵纵坐坐标标作作标标准准曲线。曲线。6/10在线答疑：在线答疑： S大大学学通通用用化化学学实实验验技技术术紫紫外外分分光光光光度度法法测测定定水水果果（或或蔬蔬菜菜）中中的的维维生生素素C C含含量量 （二）样品的测定（二）样品的测定 1 1样样品品的的提提取取：将将果果蔬蔬样样品品洗洗净净、擦擦干干、切切碎碎、混混匀匀。称称取取5.00 5.00 g g于于研研体体中中，加加入入2 25 5 mL mL 1%1%HClHCl，匀匀浆浆，转转移移到到25 25 mLmL容容量量瓶瓶中中，稀稀释释至至刻刻度度。若若提提取取液液澄澄清清透透明明，则则可可直直接接取取样样测测定定，若若有有浑浑浊浊现现象象，可可通通过过离离心心（10000 10000 g,g,10 10 minmin）来消除。来消除。2 2样样品品的的测测定定：取取0.10.10.2 0.2 mLmL提提取取液液，放放入入盛盛有有0.20.20.4 0.4 mL mL 10%10%盐盐酸酸的的10 10 mLmL容容量量瓶瓶中中，用用蒸蒸馏馏水水稀稀释释至至刻刻度度后后摇摇匀。以蒸馏水为空白，在匀。以蒸馏水为空白，在243 nm243 nm处测定其消光值。处测定其消光值。3 3待待测测碱碱处处理理液液的的制制备备：分分别别吸吸取取0.10.10.2 0.2 mLmL提提取取液液，2 2 mLmL蒸蒸馏馏水水和和0.60.60.8 0.8 mL mL 1 1 molmolL L-1-1 NaOHNaOH溶溶液液依依次次放放入入10 10 mLmL容容量量瓶瓶中中，混混匀匀，15min15min后后加加入入0.60.60.8 0.8 mL mL 10%10%HClHCl，混混匀匀，并并定定容容至至刻刻度度。以以蒸蒸馏馏水水为为空空白白。在在243 243 nmnm处处测测定定其其消消光值。光值。7/10在线答疑：在线答疑： S大大学学通通用用化化学学实实验验技技术术紫紫外外分分光光光光度度法法测测定定水水果果（或或蔬蔬菜菜）中中的的维维生生素素C C含含量量4 4由由待待测测样样品品与与待待测测碱碱处处理理样样品品的的消消光光值值之之差差和和标准曲线，即可计算出样品中维生素标准曲线，即可计算出样品中维生素C C的含量。的含量。5 5也也可可直直接接以以待待测测碱碱处处理理液液为为空空白白，测测出出待待测测液液的的消消光光值值，通通过过查查标标准准曲曲线线，计计算算出出样样品品的的维维生生素素C C的的含量。含量。8/10在线答疑：在线答疑： S大大学学通通用用化化学学实实验验技技术术紫紫外外分分光光光光度度法法测测定定水水果果（或或蔬蔬菜菜）中中的的维维生生素素C C含含量量93.4 93.4 计算计算 V V总总维生素维生素C C的含量（的含量（g/gg/g）=V V1 1W W总总式中：式中：从标准曲线上查得的抗坏血酸的含量从标准曲线上查得的抗坏血酸的含量（gg）V V1 1测消光值时吸取样品溶液的体积（测消光值时吸取样品溶液的体积（mLmL）V V总总样品定容体积（样品定容体积（mLmL）W W总总称样重量（称样重量（g g）9/10在线答疑：在线答疑： S大大学学通通用用化化学学实实验验技技术术紫紫外外分分光光光光度度法法测测定定水水果果（或或蔬蔬菜菜）中中的的维维生生素素C C含含量量93.5 93.5 问题讨论问题讨论（）除了本实验中的方法外，抗坏血酸还有哪些（）除了本实验中的方法外，抗坏血酸还有哪些测定方法测定方法?10/10在线答疑：在线答疑： S大大学学通通用用化化学学实实验验技技术术紫紫外外分分光光光光度度法法测测定定水水果果（或或蔬蔬菜菜）中中的的维维生生素素C C含含量量 （1 1）除了本实验中的方法外，抗坏血酸还有哪些测定方法）除了本实验中的方法外，抗坏血酸还有哪些测定方法?答：一、氧化还原法答：一、氧化还原法 1.1.直接碘量法直接碘量法 2.2,6-2.2,6-二氯酚靛酚滴定法二氯酚靛酚滴定法 二、分光光度法二、分光光度法 1.1.紫外快速测定法紫外快速测定法 2.2,4-2.2,4-二硝基苯肼法二硝基苯肼法 3.3.高铁还原法测定血浆中的抗坏血酸高铁还原法测定血浆中的抗坏血酸三、光电比浊法三、光电比浊法四、电化学法四、电化学法五、荧光分析法五、荧光分析法 1.1.抗坏铁酸的微量荧光测定法抗坏铁酸的微量荧光测定法 2.2.抗坏铁酸总量的荧光测定法抗坏铁酸总量的荧光测定法93.6 93.6 参考答案参考答案