两种方法检查新生儿溶血病的比较1(精品).ppt

新生儿溶血病两种检查方法的新生儿溶血病两种检查方法的比较分析比较分析第三军医大学西南医院输血科第三军医大学西南医院输血科肖瑞卿肖瑞卿 林武存等林武存等 新生儿母婴血型不合溶血病，是新生儿母婴血型不合溶血病，是由于孕妇与婴儿血型不合引起的溶血由于孕妇与婴儿血型不合引起的溶血病，主要包括病，主要包括ABOABO和和RhRh溶血病，主要溶血病，主要检测方法是患儿红细胞上直接抗人检测方法是患儿红细胞上直接抗人-IgGIgG（DATDAT）试验、血清游离抗体检测）试验、血清游离抗体检测及患儿红细胞放散液鉴定三项试验。及患儿红细胞放散液鉴定三项试验。我们用两种方法对母婴血型不合进行我们用两种方法对母婴血型不合进行检测并进行了比较，现将结果分析报检测并进行了比较，现将结果分析报道如下：道如下：1 1 材料与方法材料与方法 2.1 2.1 标本作标本作ABOABO及及RhRh（D D）血型鉴定，）血型鉴定，根据不同血型分为相合与不相合两组。根据不同血型分为相合与不相合两组。ABOABO血型不合的患儿标本，离心分出上清，将血型不合的患儿标本，离心分出上清，将红细胞洗涤三次，分别配成红细胞洗涤三次，分别配成3-5%3-5%的红细胞的红细胞混悬液及压积红细胞备用。混悬液及压积红细胞备用。2.2 ABO2.2 ABO不合三项检查：不合三项检查：患儿红细胞做患儿红细胞做DATDAT试验试验 患儿红细胞放散抗体患儿红细胞放散抗体 患儿血浆游离抗体患儿血浆游离抗体 20042004年以前用抗人年以前用抗人-IgGIgG试试验验(试管试管）法鉴定。）法鉴定。20042004年后检年后检测红细胞上不完全抗体，用测红细胞上不完全抗体，用DATDAT试验；患儿血浆游离抗体试验，试验；患儿血浆游离抗体试验，患儿红细胞放散及自身对照，用患儿红细胞放散及自身对照，用戴安娜卡式系统鉴定（抗体释放戴安娜卡式系统鉴定（抗体释放用用5656热放散法）。热放散法）。2.3 2.3 洗涤洗涤A A、B B、O O红细胞及红细胞及O O型谱细型谱细胞，分别配成胞，分别配成3-5%3-5%备用。备用。2.4 2.4 母婴母婴ABOABO血型相合，用卡式鉴定，血型相合，用卡式鉴定，母血清加患儿红细胞做母血清加患儿红细胞做交叉交叉配血试验，患儿配血试验，患儿自身对照，阴性即可停止试验。自身对照，阴性即可停止试验。试验阳性按试验阳性按ABOABO相合的要求，用相合的要求，用RhRh标准标准谱细胞做游离抗体与放散试验，谱细胞由上谱细胞做游离抗体与放散试验，谱细胞由上海血液生物医药有限公司提供。海血液生物医药有限公司提供。不相合按照不相合按照ABOABO血型不合的做三项试验。血型不合的做三项试验。2 2 结果结果 3.13.1585585例中例中ABOABO血型相合的血型相合的235235例，不合例，不合350350例，其中检测出抗例，其中检测出抗-A 106-A 106例，抗例，抗-B 58-B 58例。例。RhRh抗体抗体6 6例（抗例（抗-D 4-D 4例、抗例、抗CD1CD1例、抗例、抗cE1cE1例）例）,共检测出抗共检测出抗体体170170例，占例，占29%29%。无抗体。无抗体415415例，占例，占71%71%。RhRh血型抗体中，血型抗体中，2 2例例ABOABO血型不合，血型不合，4 4例例ABOABO血型相合，血型相合，3.2 3.2 用抗人用抗人-IgGIgG法检测法检测210210例，阳性例，阳性5151例，占例，占24.29%24.29%。用卡式检测用卡式检测375375例，阳性例，阳性119119例，例，占占31.7%31.7%，详细见表，详细见表1 1。表表1 1 两种方法检查新生儿溶血病的比较两种方法检查新生儿溶血病的比较方法 ABO Rh相合 ABO相合 ABO不相合 抗-A 抗-B 抗-D 抗CD 抗cE抗人-IgG 29 17 4 1 92 118戴安娜卡式 77 41 1 143 232 3.3 3.3 164164例例ABOABO阳性病例阳性病例分析分析 三项试验均为阳性三项试验均为阳性108108例，例，占占65.9%65.9%；DATDAT试验阳性试验阳性118118例，例，占占71.9%71.9%；放散试验阳性；放散试验阳性160160例，例，占占97.6%97.6%；游离抗体试验阳性；游离抗体试验阳性150150例，占例，占91.5%91.5%。详细结果表。详细结果表2 2。表表2 164例例ABO新生儿溶血病三新生儿溶血病三项试验项试验不同阳性比不同阳性比较较项目项目 AB O 抗抗-A 抗抗-B 合计合计 百分比百分比 直抗、游离、放散直抗、游离、放散 79 29 108 65.9 游离、放散游离、放散 15 23 38 23.2 直抗、放散直抗、放散 4 2 6 3.7 单独放散单独放散 5 3 8 4.9 直抗、游离直抗、游离 3 1 4 2.4注注:6例例Rh不合两种方法三项试验均是阳性不合两种方法三项试验均是阳性3 3 讨论讨论 新生儿血型不合溶血病，是新生儿血型不合溶血病，是指母、婴血型不合引起的新生儿指母、婴血型不合引起的新生儿同种免疫性溶血疾病。至今发现同种免疫性溶血疾病。至今发现的人类的人类2626个血型系统中，以个血型系统中，以A A、B B、O O血型不合新生儿溶血病为最常见，血型不合新生儿溶血病为最常见，其次为其次为RhRh血型系统。血型系统。上海血液中心曾报告检测上海血液中心曾报告检测834834例新生儿溶血病，其中例新生儿溶血病，其中A A、B B、O O溶溶血病血病712712例（例（85.385.3），），RhRh溶血病溶血病122122例（例（14.614.6）。我们检测）。我们检测ABOABO不合占不合占96.47%96.47%，RhRh血型不合占血型不合占3.5%3.5%。三项试验，以放散阳性比例最高，三项试验，以放散阳性比例最高，DATDAT试验阳性比例最低，可能为新生儿试验阳性比例最低，可能为新生儿由于发育不成熟，红细胞上由于发育不成熟，红细胞上A A、B B抗原抗原相对较少，相对较少，DATDAT试验常显阴性结果，红试验常显阴性结果，红细胞细胞DATDAT试验结果阴性，不等于没有结试验结果阴性，不等于没有结合合IgGIgG，只是抗体的数量还没有达到，只是抗体的数量还没有达到DATDAT试验阳性的要求。应以放散结果为试验阳性的要求。应以放散结果为准，如果单是准，如果单是DATDAT试验与游离抗体试验试验与游离抗体试验阳性应于临床症状结合予以治疗。阳性应于临床症状结合予以治疗。游离抗体和放散液鉴定结果：游离抗体和放散液鉴定结果：抗人抗人-IgGIgG法检测法检测210210例，阳性例，阳性5151例例(24.29%24.29%。卡式检测卡式检测375375例，阳性例，阳性121121例，例，占例占例31.7%31.7%。卡式阳性检出率明显高于传统卡式阳性检出率明显高于传统的抗人的抗人-IgGIgG法，结果同报道相符。法，结果同报道相符。卡式法是生物化学凝胶过卡式法是生物化学凝胶过滤技术和免疫学抗原抗体反应滤技术和免疫学抗原抗体反应相结合的产物，通过调节凝胶相结合的产物，通过调节凝胶的浓度来控制凝胶间隙的大小。的浓度来控制凝胶间隙的大小。使其间隙只能允许游离的使其间隙只能允许游离的 RBC 通过，抗原抗体结合的红细胞通过，抗原抗体结合的红细胞则不能通过，通过离心法，使则不能通过，通过离心法，使游离游离 RBC 与凝集与凝集 RBC 分离。分离。游离的红细胞通过离心游离的红细胞通过离心 RBC RBC 沉积在凝胶管底部，则表沉积在凝胶管底部，则表明明 RBC RBC 未发生凝聚凝集，呈未发生凝聚凝集，呈阴性反应。若阴性反应。若 RBC RBC 聚集在凝聚集在凝胶带上部或凝胶中，则表明胶带上部或凝胶中，则表明 RBC RBC 发生凝集，呈阳性反应。发生凝集，呈阳性反应。凝胶中已加抗人凝胶中已加抗人-IgGIgG，加入，加入样本即可，从而简化了操作。结样本即可，从而简化了操作。结果稳定且易保存，灵敏度高，能果稳定且易保存，灵敏度高，能检测到十分微弱的抗原抗体凝集检测到十分微弱的抗原抗体凝集反应。样本用量少，利于新生儿反应。样本用量少，利于新生儿及少血样本的检测，重复性好。及少血样本的检测，重复性好。操作标准化，减少了人员的随意操作标准化，减少了人员的随意性操作，是一种可靠的试验方法。性操作，是一种可靠的试验方法。HDNHDN应早检测、早诊断、早治疗，应早检测、早诊断、早治疗，减少因为溶血造成对脑组织的损害，减少因为溶血造成对脑组织的损害，RhRh血型不合如果治疗不及时，极容易引起血型不合如果治疗不及时，极容易引起核黄疸，核黄疸，ABO ABO 血型引起核黄疸的较少，血型引起核黄疸的较少，近年来也有个案报道。我们应为临床提近年来也有个案报道。我们应为临床提供可靠的诊断依据，使患儿得到及时的供可靠的诊断依据，使患儿得到及时的治疗，减少后遗症的发生。治疗，减少后遗症的发生。谢谢！谢谢！