第13章 生物碱类药物的分析(精品).ppt

第十三章第十三章 生物碱类药物的分析生物碱类药物的分析 第一节第一节 概述概述一、生物碱（一、生物碱（Alkaloids）生物碱是生物体内含氮有机化合生物碱是生物体内含氮有机化合物的总称物的总称分类：（1）苯烃胺类（2）托烷类（3）喹啉类（4）异喹啉类（5）吲哚类（6）黄嘌呤类典型药物的结构 二、生物碱类药物的通性二、生物碱类药物的通性 1.碱性 季铵碱脂肪胺、脂环胺芳胺、N-芳杂环酰胺 小檗碱麻黄碱、阿托品罂粟碱咖啡因 吗啡具酸碱两性 2.溶解性 游离生物碱不溶或难溶于水，能溶或易溶于有机溶剂，在稀酸中成盐而溶解 生物碱盐类易溶于水，不溶于有机溶剂 3.旋光性 一般多为左旋体有效。4.紫外吸收：多含不饱和双键。5.与生物碱沉淀试剂和显色试剂反应 一、一般鉴别反应一、一般鉴别反应（一）熔点测定法（二）沉淀反应 第二节第二节 鉴别试验鉴别试验 常用的生物碱沉淀试剂为：常用的生物碱沉淀试剂为：1.重金属盐类，如重金属盐类，如K2HgI4、KBiI4、I2KI、二氯化汞等；二氯化汞等；2.大分子酸类，如磷钼酸、硅钨大分子酸类，如磷钼酸、硅钨酸等。酸等。（三）显色反应 常用的显色试剂：浓硫酸、浓硝酸、钼硫酸、钒硫酸、硒硫酸、甲醛硫酸等（四）四）UV（五）五）IR（六）色谱法（六）色谱法 1.HPLC 2.TLC二、特征鉴别反应二、特征鉴别反应（一）双缩脲反应 侧链具有氨基醇结构（二）Vitali反应 托烷生物碱托烷生物碱（三）绿奎宁反应 硫酸奎宁、硫酸奎尼丁硫酸奎宁、硫酸奎尼丁 微酸性水溶液，滴加Br2或Cl2水，加过量氨水，呈翠绿色（四）Marquis反应 吗啡生物碱吗啡生物碱（五）官能团反应 吲哚生物碱吲哚生物碱 1.利血平利血平+新制香草醛新制香草醛玫瑰红色玫瑰红色2.（六）紫脲酸胺反应 黄嘌啉类生物碱黄嘌啉类生物碱（七）还原反应 吗啡与磷酸可待因的区分反应吗啡与磷酸可待因的区分反应 第三节第三节 特殊杂质检查特殊杂质检查一、利用物理性质差异一、利用物理性质差异1、溶解行为硫酸奎宁：氯仿-乙醇溶解法检查无机盐杂质含量。限量2mg/2g。吗啡：强碱溶液溶解法检查“其他生物碱”。2、旋光性差异 检查硫酸阿托品（消旋体）中的莨菪碱（有旋光性）3、吸光性差异 利血平氧化产物具有荧光，可用紫外吸光法检查4、吸附性质差异 硅胶G-TLC法检查硫酸奎宁中的“其他金鸡纳碱”。二、利用化学性质差异二、利用化学性质差异1、沉淀反应 如硫酸阿托品中“其他生物碱”的检查。2、显色反应 一、非水溶液滴定法（非水碱量法）一、非水溶液滴定法（非水碱量法）（一）原理 本类药物含有氮原子显碱性，在冰醋酸-醋酐溶液中可用高氯酸直接滴定。第四节第四节 含量测定含量测定BH+A-+HClO4=BH+ClO4-+HA 1.溶剂 酸性溶剂：冰冰醋醋酸酸、冰冰醋醋酸酸+醋醋酐酐、醋醋酐酐 惰性溶剂：苯、氯仿、四氯化碳苯、氯仿、四氯化碳 能强烈影响溶质的解离情况和酸碱强度的溶剂：硝基甲烷、丙酮、二氧六环硝基甲烷、丙酮、二氧六环2.滴定剂：高氯酸的冰醋酸溶液3.指示终点的方法 电位法：玻璃-甘汞电极系统 指示剂法：结晶紫、喹哪啶红等 有机碱及其盐类及有机酸碱金属盐类8pKb10 冰醋酸作溶剂10pKb12 冰醋酸+醋酐pKb12 醋酐（二）适用范围（三）生物碱盐类的滴定 无机酸在冰醋酸中的酸性次序为：高氯酸氢溴酸硫酸盐酸硝酸其它弱酸（磷酸、有机酸）1.游离生物碱 需用醋酐-冰醋酸（5：1）为溶剂。一般均预先在溶液中加入Hg(Ac)2 的冰醋酸溶液，以消除氢卤酸对滴定的干扰。理论量13倍 2.氢卤酸盐的测定 生物碱的硫酸盐，在冰醋酸介质中只能被滴定至生物碱的硫酸氢盐。3.硫酸盐的测定A.硫酸阿托品 HClO4直接滴定时，反应摩尔比为11（1）直接滴定B.硫酸奎宁 HClO4直接滴定时，反应摩尔比为13（2）加入高氯酸钡消除硫酸的干扰后滴定 硫酸奎宁 反应摩尔比为12 硫酸阿托品 一元碱不能滴定 因HNO3具有氧化性，可使指示剂变色，一般电位法指示终点。如硝酸士的宁、硝酸毛果芸香碱 4.硝酸盐的测定 弱酸，对滴定无干扰，能准确滴定，按常法测定，如磷酸氯喹、磷酸可待因 5.磷酸盐和有机酸盐的测定简便、快速、准确、取样量小，测定的是生理活性部分，尤其适合原料；专一性差，实际上是置换滴定，滴定阴离子。（五）特点（一）基本原理 在适当的pH介质中 二、酸性染料比色法二、酸性染料比色法 （适用于小剂量药品及制剂）（适用于小剂量药品及制剂）1.水水相相的的最最适适pH值值 如如果果水水相相pH值值过过小小，酸酸性性染染料料几几乎乎仍仍以以分分子子状状态态存存在在；如如果果水水相相pH值值过过大大，则则生生物物碱碱几几乎乎全全部部以以游游离碱的形式存在离碱的形式存在 2.有机溶剂的选择有机溶剂的选择 CHCl3、CH2Cl2、苯、苯、甲苯等甲苯等（二）影响定量分析的因素3.酸酸性性染染料料的的选选择择 常常用用溴溴甲甲酚酚绿绿、溴溴麝麝香草酚蓝（香草酚蓝（BTB）、溴甲酚绿等）、溴甲酚绿等5.有有色色杂杂质质的的排排除除 可可先先用用有有机机溶溶剂剂提提取取酸性染料中有色杂质。酸性染料中有色杂质。4.水分的影响水分的影响 严防水分的混入严防水分的混入 有有机机层层可可加加入入无无水水硫硫酸酸钠钠等等脱脱水水剂剂或或经干燥滤纸滤过经干燥滤纸滤过 6.共存物的影响共存物的影响 3.准确度差，不能用于原料药的测定，只能用于制剂分析（三）特点1.选择性高（选用适当pH缓冲液可消除干扰）2.灵敏度高、供试品用量少三、提取酸碱滴定法三、提取酸碱滴定法（一）原理与方法 生物碱盐类可溶解于水，不溶于有机溶剂游离生物碱不溶于水，易溶于有机溶剂依据性质1.基本原理2.操作操作3.测定方法 （1）直接滴定法直接滴定法 用于碱性较强的生物碱用于碱性较强的生物碱（2）剩余滴定法剩余滴定法 用于碱性较弱的生物碱用于碱性较弱的生物碱（3）酸滴定液返提后剩余滴定法酸滴定液返提后剩余滴定法 用于对热不稳定的生物碱用于对热不稳定的生物碱 1.碱化试剂：最常用氨水2.提取溶剂 （1）提取溶剂选择的原则（2）常用的提取溶剂：最常用氯仿（二）测定条件的选择l 含酯结构的药含酯结构的药物，在强碱条物，在强碱条件下易水解；件下易水解；l 含酚结构的药含酚结构的药物，与强碱成物，与强碱成盐易溶解于水，盐易溶解于水，难以用有机溶难以用有机溶剂提取；剂提取；l 含脂肪性共存含脂肪性共存物的药物，碱物的药物，碱化后易乳化，化后易乳化，提取不完全。提取不完全。（3）提取溶剂的用量及提取次数 通常应提取4次，第一次用量至少应为水液体积的一半，以后几次应各为第一次的一半 3.提取终点的确定 用合适的沉淀反应确定4.指示剂的选择（三）方法评价1.专一性：经分离后测定生物碱，有一定专一性。2.缺点：费时，繁琐；对挥发性或热不稳定性生物碱类药物不适用。例1.盐酸吗啡中应检查的特殊杂质为A.吗啡B.阿朴吗啡C.罂粟碱D.莨菪碱E.其它生物碱 例2用非水溶液滴定法测定盐酸吗啡含量时，应使用的试剂是A.5醋酸汞冰醋酸液B.盐酸C.冰醋酸D.二甲基甲酰胺E.高氯酸 例3非水溶液滴定法测定硫酸奎宁含量的反应条件为 A冰醋酸-醋酐为溶剂 B.高氯酸滴定液（0.1mol/L）滴定 C1mol的高氯酸与mol的硫酸奎宁反应 D.仅用电位法指示终点 E溴酚蓝为指示剂 例4.酸件染料比色法中，水相的pH值过小，则A.能形成离子对B.有机溶剂提取能完全C.酸性染料以阴离子状态存在D.生物碱几乎全部以分子状态存在E.酸性染料以分子状态存在 例5.生物碱类药物的一般鉴别试验包括A.熔点测定B.显色反应C.沉淀反应D.光谱法（紫外、红外）E.薄层色谱法 例6.能够发生Vitali反应的药物是A.盐酸吗啡B.硫酸奎宁C.磷酸可待因D.盐酸麻黄碱E.硫酸阿托品 例7.酸性染料比色法测定生物碱类药物，有机溶剂萃取测定的有色物是A.离子对和指示剂的混合物B.生物碱盐C.指示剂D.离子对E.游离生物碱