石蜡切片详细步骤之欧阳治创编.pdf

石蜡切片1.时间 2021.03.10创作：欧阳治2.仪器石蜡切片机、烘箱、显微镜、染色缸、小培养皿、镶子、毛笔、吸水纸、纱布、载玻片、盖玻片等。2.试剂FAA固定液（70%酒精90ml、冰醋酸5ml、福尔马林5ml）10%番红水溶液、0.5%固绿（用95%的酒精配制）、酒精（100%、95%、80%、70%、50%）、二甲苯、蒸镭水、甘油、中性树胶等。3.取材幼嫩的油菜植株叶片和茎4.方法与步骤（参照）1.固定：FAA固定液固定48小时以上。2.脱水：50%酒精70%酒精83%酒精95%酒精100%酒精一100%酒精。每级2h。100%酒精中1.5ho其中70%酒精处可长期保存。3.透明：1/2二甲苯+1/2无水乙醇（2h）纯二甲苯（1.5h）1.纯二甲苯（1.5h）欧阳治创编 2021.03.10创编 2021.03.10欧阳治4.浸蜡：将处理的材料置于1/2石蜡(固体粉末状)+1/2二 甲苯中，4()C烘箱敞口过夜。5.包埋：先提升恒温箱的温度至60C,换纯蜡3次，每 次l-2h,用硬的电光纸、牛皮纸叠纸盒，置于45-6()C的烫板上，倒入材料，摆放好材料，把标签(正面向外置于底部)，补足石蜡，倒好后轻轻的 置于冷水盆中，注意底面要接触盆中凉水，待石蜡 全部凝固后可取出晾干，也可在凉水盆中放置过 夜。6.切片对包埋的材料进行修块、粘块、整修后，保证 材料四周都有石蜡包围。但不可太多。切面的上、下边平行。用加热的解剖刀蘸取少许石蜡碎屑，并 迅速将石蜡块四周的碎屑烫平，使石蜡块牢固地粘 在台木上。检查切片机，安装切片刀、调整好刀的 角度，调整石蜡块与刀口之间的角度与位置后开始 切片。欧阳治欧阳治创编 2021.03.10创编 2021.03.10欧阳治创编 2021.03.10创编 2021.03.10欧阳治7.粘片将粘贴剂置簿玻片上，再取切片浮置粘片剂上，然后置烘片台上，使切片展开烫平，材料不现 皱纹为度。最后将切片依次排好，用滤纸吸去多余 水分，同时以记号笔在玻片上编号，放入温箱中烘 干，温度3()4()C中过夜。8.脱蜡脱蜡用二甲苯，把烤好的载玻片放于盛二甲苯的染缸中：纯二甲苯(10-20min)-纯二甲苯(5-l()min)9.染色将纯二甲苯脱蜡完全的材料，1/2二甲苯十1/2纯酒精-100%酒精9 5%酒精8 5%酒精-7()%酒 精-5()%酒精-1%番红染色(4h以上)-5()%酒精-70%酒精-85%酒精-95%酒精-0.5%固绿95%酒精-1()0%酒精一10()%酒精(未注明时间各级 均为3min)10.胶封滴加加拿大树胶封藏。11镜检，拍照时间 2021.03.10创作：欧阳治欧阳治欧阳治创编 2021.03.10创编 2021.03.10