SDS–聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS–PAGE).ppt
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SDS–聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS–PAGE).ppt
SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDSPAGE)操操 作过程作过程(一)安装夹心式垂直板电泳槽(二)配胶及凝胶板的制备(三)样品的处理与加样(四)电泳(五)凝胶板剥离与固定(六)染色与脱色,观察结果具体过程见视频。具体过程见视频。试剂1.标准蛋白质(Mark)与待检测蛋白样品2.样品溶解液3.30%丙烯酰胺(丙烯酰胺Acr、甲叉双丙烯酰胺Bis)4凝胶缓冲液:SDS 0.2g,加0.2mol/L PH7.2磷酸盐缓冲液至100ml。5.1%TEMED(N,N,N四甲基乙二胺)6.10%过硫酸铵(AP)7电极缓冲液:0.1%SDS、0.1mol/L PH7.2磷酸盐缓冲液。81%琼脂:琼脂1g,用上述缓冲液溶解至100ml 4保存。9固定液:甲醇:冰乙酸:水为1:2:710染色液:考马斯亮蓝R250 0.25g加上述固定液500ml,过滤后应用。脱色液:冰乙酸:甲醇:水为2:9:9二 器材1夹心式垂直板电泳槽。2电泳仪。3微量加样枪。