《旋光度测定法》PPT课件.ppt

旋光度测定法旋光度测定法河南省食品药品检验所冯明霞2009-7-25旋光仪旋光仪n n旋光仪 又称旋光计，是药品检验工作中较早使用的仪器。早期的圆盘式旋光仪由钠光灯光源、起偏镜、测定管、检偏镜、半影板调零装置和支架组成。n n起偏镜是一组可以产生平面偏振光的晶体，称为尼科尔棱镜，是用一种天然晶体如方解石按一定方法切割再用树胶黏合心制成。n n现今则多采用在塑料膜上涂上某些具有光学活性的物质，使其产生偏振光。物质的旋光性物质的旋光性n n含有不对称碳原子的固体物质的溶液和液体物质等都具有旋光性。这种物质就叫做“旋光性物质”，例如葡萄糖，蔗糖，挥发油等。n n每种旋光性物质，由于它们具有不同的旋光程度，在一定的情况下，都能使通过尼科尔棱镜所得到的偏光旋转一定的角度，这个角度的大小也就是这种物质的物理常数，叫做“比旋度”。旋光度旋光度n旋光度测定法就是利用平面偏振光，在通过含有某些光学活性化合物的液体或溶液时，能引起旋光现象，使偏振光的平面向左或向右旋转，此种旋转在一定条件下有一定度数，称之为旋光度。旋旋 光光 仪仪n n早期的旋光仪是用人眼来观测的，误差较大，读数精度为0.05或0.01。n n20世纪80年代数显自动指示旋光仪和投影自动指示旋光仪相继出现，仪器的读数精度也提高到了0.02、0.01、0.005。中国药典2005年版规定使用读数精度达到0.01并经过检定的旋光仪。旋旋 光光 仪仪旋旋 光光 管管仪器的性能测试仪器的性能测试 n n中国药典2005年版附录规定准确度可用标准石英旋光管(十5与一1两支)进行校准，n n在规定温度下，重复测定6次，两支标准石英旋光管的平均测定结果均不得超出示值土0.01。n n测定管旋转不同角度与方向测定，结果均不得大于0.04。常用名词解释常用名词解释n n能使偏振光的偏振面向右旋的物质，叫做右旋物质；反之，叫做左旋物质。n n通常用“d”（拉丁文dextro的缩写，“右”的意思）或“+”表示右旋；n n用“l”（拉丁文laevo的缩写，“左”的意思）或“-”表示左旋。n n物质旋光性的大小可用比旋光度表示。旋光度测定法旋光度测定法n n平面偏振光通过含有某些光学活性的化合物液体或溶液时，能引起旋光现象，使偏振光的平面向左或向右旋转。n n旋转的度数，称为旋光度，用“”表示。n n偏振光透过长1dm并每1ml中含有旋光性物质1g的溶液，在一定波长与温度下测得的旋光度称为比旋度，用“”表示。旋光度测定法旋光度测定法n n测定比旋度（或旋光度）可以区别或检查某些药品的纯杂程度，亦可用以测定含量。n n中国药典旋光度测定法主要用于某些药品性状项下比旋度的测定，n n还用于一些制剂的含量测定。旋光度测定法旋光度测定法n n2005年版药典系用钠光谱的年版药典系用钠光谱的D线线(589.3nm)测定旋光度，测定旋光度，n n除另有规定外，测定管长度为除另有规定外，测定管长度为1dm（如使用（如使用其他管长，应进行换算），其他管长，应进行换算），n n测定温度为测定温度为20。n n测定旋光度时，用读数至测定旋光度时，用读数至0.01并经过检定的并经过检定的旋光计。旋光计。比旋度的测定比旋度的测定n n按各品种项下的规定进行操作。除另有规定外，供试液的测定温度应为20士0.5，使用波长5893nm的钠D线，n n纯液体样品测定时以干燥的空白测定管校正仪器零点，n n溶液样品则用空白溶剂校正仪器零点。比旋度的测定比旋度的测定n n供试液与空白溶剂用同一测定管，每次测定应保持测定管方向、位置不变。n n旋光度读数应重复3次，取其平均值，按规定公式计算结果。n n以干燥品(药品标准中检查干燥失重)或无水物(药品标准中检查水分)计算。旋光法的应用旋光法的应用n n旋光法多用于比旋度测定，n n药典规定的比旋度多有上下限度或最低限度，可根据计算公式得出供试品的比旋度，判断样品是否合格。n n测定含量时，取2份供试品测定，读数结果其极差应在002以内，否则应重做。试试 验验 举举 例例n n比旋度：取本品，精密称定，加甲醇溶解并制成每1ml中约含10mg的溶液，依法测定（中国药典2005年版二部附录VI E），比旋度应为+119+129。n n仪器编号：测定日期：n n温 度：湿 度：试试 验验 举举 例例n n葡萄糖注射液葡萄糖注射液:n n【含量测定】【含量测定】精密量取本品适量（约相当于葡萄糖10g），置100ml量瓶中，加氨试液0.2ml（10或10以下规格的本品可直接取样测定），用水稀释至刻度，摇匀，静置10分钟，依法测定旋光度（附录 E），与2.0852相乘，即得供试量中含有C6H12O6H2O的重量(g)。葡萄糖有变旋光现象n葡萄糖有变旋光现象，试验中加入葡萄糖有变旋光现象，试验中加入氨试液能使变旋光现象很快达到平氨试液能使变旋光现象很快达到平衡，因此加了氨试液只要放置衡，因此加了氨试液只要放置10分分钟就能测定，钟就能测定，10%以下的葡萄糖注以下的葡萄糖注射液射液，配制好后已经放置一段时，配制好后已经放置一段时间，本身旋光度已达平衡，故不需间，本身旋光度已达平衡，故不需再加氨试液。再加氨试液。旋光性和比旋光度比旋度比旋度若被测物质是纯液体，则：=lC 样品的旋光度C溶液的浓度（g/mL）l 管长（dm）=l 液体的密度注意事项注意事项 n n1、测定前应将仪器及样品置于20 0.5恒温室中，也可用温水浴保持样品室或样品测试管恒温1小时以上。n n2、通电开机之前应取出仪器样品室内的物品，各示数开关应置于规定位置。n n先用交流供电使钠光灯预热启辉，启辉后光源稳定约20分钟后再进行测定，n n读数时应转换至直流供电。连续使用时，仪器不宜经常开关。注意事项注意事项 n n3、测定前仪器调零时，必须重复按动复测开关，使检偏镜分别向左或向右偏离光学零位，通过观察左右复测的停点，可以检查仪器的重复性和稳定性。n n4、同一旋光性物质，用不同溶剂或pH不同，由于缔合、溶剂化和解离的情况不同，而使比旋度产生变化，甚至可能改变旋光方向。注意事项注意事项 n n5 5、测定空白和供试品时，均应读取读数、测定空白和供试品时，均应读取读数、测定空白和供试品时，均应读取读数、测定空白和供试品时，均应读取读数3 3次，取次，取次，取次，取平均值，测定后再次测定空白，观察零点是否漂平均值，测定后再次测定空白，观察零点是否漂平均值，测定后再次测定空白，观察零点是否漂平均值，测定后再次测定空白，观察零点是否漂移。移。移。移。n n6 6、测定应使用规定的溶剂。供试液如不澄清，测定应使用规定的溶剂。供试液如不澄清，测定应使用规定的溶剂。供试液如不澄清，测定应使用规定的溶剂。供试液如不澄清，应滤清后再用；加入测定管时，应先用供试液冲应滤清后再用；加入测定管时，应先用供试液冲应滤清后再用；加入测定管时，应先用供试液冲应滤清后再用；加入测定管时，应先用供试液冲洗数次；洗数次；洗数次；洗数次；n n如有气泡，应使其浮于测定管凸颈处；如有气泡，应使其浮于测定管凸颈处；如有气泡，应使其浮于测定管凸颈处；如有气泡，应使其浮于测定管凸颈处；n n旋紧测试管螺帽时，用力不要过大，以免产生应旋紧测试管螺帽时，用力不要过大，以免产生应旋紧测试管螺帽时，用力不要过大，以免产生应旋紧测试管螺帽时，用力不要过大，以免产生应力，造成误差；力，造成误差；力，造成误差；力，造成误差；n n两端的玻璃窗应用滤纸与镜头纸擦拭干净。两端的玻璃窗应用滤纸与镜头纸擦拭干净。两端的玻璃窗应用滤纸与镜头纸擦拭干净。两端的玻璃窗应用滤纸与镜头纸擦拭干净。注意事项注意事项 n n7、测定管不可置干燥箱中加热干燥，因为玻璃管与两端的金属螺帽的线膨胀系数不同，加热易造成损坏，用后可晾干或用乙醇等有机溶剂处理后晾干。n n注意，使用酸碱溶剂或有机溶剂后，必须立刻洗涤晾干，以免造成金属腐蚀或使螺帽内的橡胶垫圈老化、变黏。n n仪器不用时，样品室内可放置硅胶以保持干燥。注意事项注意事项 n n8、按规定或根据读数精度配制浓度适当的供试品溶液，通常是读数误差小于土10。n n如供试品溶解度小，应尽量使用2dm的长测定管，以提高旋光度，减小测定误差。n n供试液配制应及时测定，对于已知易发生消旋或变旋的供试品，应注意严格操作与测定时间。谢谢 谢！谢！