3.免疫应答的特点.ppt

免疫应答的特点及免疫调节免疫应答的特点及免疫调节n特异性特异性n记忆性记忆性n耐受性耐受性第一页，编辑于星期六：四点 十分。1第一节第一节 IRIR的特异性的特异性第二节第二节 IRIR的的记忆性记忆性第三节第三节 免疫免疫耐受性耐受性第二页，编辑于星期六：四点 十分。2第一节第一节 IRIR的特异性的特异性n n每一克隆的每一克隆的T T细胞细胞TCRTCR 、B B细胞的细胞的BCRBCR具有具有克隆特异性克隆特异性n nTCR or BCRTCR or BCR仅能识别一种抗原表位仅能识别一种抗原表位n n活化的效应活化的效应CTLCTL仅能杀伤表达激活它表位仅能杀伤表达激活它表位的靶细胞的靶细胞n n抗体仅能与激活它的表位发生反应抗体仅能与激活它的表位发生反应第三页，编辑于星期六：四点 十分。3BCR(Ig)BCR(Ig)多样性及其分子基础多样性及其分子基础研究证明：研究证明：BCRBCRBCRBCR基因在胚系以众多的、分隔的基因片段基因在胚系以众多的、分隔的基因片段存在，在淋巴细胞发生存在，在淋巴细胞发生分化分化过程中，通过过程中，通过过程中，通过过程中，通过重排重排重排重排(组合、拼接及高频突变等组合、拼接及高频突变等组合、拼接及高频突变等组合、拼接及高频突变等)的过程，从而获得了特的过程，从而获得了特的过程，从而获得了特的过程，从而获得了特异性的异性的异性的异性的V V基因，产生巨大数量的抗原受体以识别不基因，产生巨大数量的抗原受体以识别不基因，产生巨大数量的抗原受体以识别不基因，产生巨大数量的抗原受体以识别不同的抗原，同的抗原，同的抗原，同的抗原，BCRBCR的多样性可达的多样性可达的多样性可达的多样性可达101010101414，TCRTCRTCRTCR的多样性可的多样性可的多样性可的多样性可达达达达1010101016161616。第四页，编辑于星期六：四点 十分。4轻链轻链链基因位于链基因位于链基因位于链基因位于 2 2 2 2号染色体号染色体号染色体号染色体链基因位于链基因位于链基因位于链基因位于2222号号号号重链基因位于重链基因位于重链基因位于重链基因位于14141414号号号号 染色体染色体染色体染色体第五页，编辑于星期六：四点 十分。5BCRBCR的胚系基因结构的胚系基因结构 轻链轻链链基因位于链基因位于2 2号染色体分为号染色体分为V V、J J、C C三组基因片段三组基因片段轻链轻链链基因位于链基因位于2222号染色体分为号染色体分为V V、J J、C C三组基因片段三组基因片段重链基因位于重链基因位于1414号染色体号染色体V V、D D、J J、C C四组基因片段四组基因片段第六页，编辑于星期六：四点 十分。6（4040）（2525）（J4J4）（9 9）第七页，编辑于星期六：四点 十分。7 BCRBCR的基因重排及其机制的基因重排及其机制（gene rearrangement）lBCR(Ig)BCR(Ig)胚系基因中，胚系基因中，V V、（、（D D）、）、J J基因片段之间基因片段之间由内含子隔开，通过由内含子隔开，通过重链先发生基因重排，随后重链先发生基因重排，随后是轻链重排是轻链重排，形成，形成V V（D D）J J连接，再与基因片段连接，再与基因片段连接，才能编码完整的连接，才能编码完整的I I多肽链。多肽链。lIgVIgV区基因的重排主要通过区基因的重排主要通过重组酶重组酶（recombinaserecombinase）的作用实现。的作用实现。第八页，编辑于星期六：四点 十分。8DJDJ编码重链编码重链VDJVDJ(V(V基因基因)VDJCVDJC第九页，编辑于星期六：四点 十分。9Splicing of IgM and IgD RNASplicing of IgM and IgD RNASplicing of IgM and IgD RNASplicing of IgM and IgD RNACm1Cm2Cm3Cm4Cd1Cd2Cd3pA1VDJCm1Cm2Cm3Cm4Cd1Cd2Cd3VDJAAA RNA cleaved and polyadenylated at pA2VDJ CmIgM mRNARNA cleaved and polyadenylated at pA1AAAVDJ CdIgD mRNACg1Cg3CdCmVDJCm1Cm2Cm3Cm4Cd1Cd2Cd3DNApA1pA2VDJTwo types of mRNA can be made simultaneously in the cell by differential usage of alternative polyadenylation sites and splicing of the RNA第十页，编辑于星期六：四点 十分。10n nVJ(VVJ(V基因基因基因基因)n nVJCVJCn n编码轻链编码轻链编码轻链编码轻链第十一页，编辑于星期六：四点 十分。11uu等位基因排斥：在一对同源染色体的某一基因座位上，等位基因排斥：在一对同源染色体的某一基因座位上，等位基因排斥：在一对同源染色体的某一基因座位上，等位基因排斥：在一对同源染色体的某一基因座位上，二条染色体的等位基因中只有一个基因能表达。保证二条染色体的等位基因中只有一个基因能表达。保证二条染色体的等位基因中只有一个基因能表达。保证二条染色体的等位基因中只有一个基因能表达。保证了一个了一个了一个了一个B B B B细胞或细胞或细胞或细胞或T T细胞只能表达一种特异性的抗原受细胞只能表达一种特异性的抗原受细胞只能表达一种特异性的抗原受细胞只能表达一种特异性的抗原受体。体。体。体。uu同种型排斥：表达同一类型肽链的不同基因座位同种型排斥：表达同一类型肽链的不同基因座位之间的排斥。如表达之间的排斥。如表达L L链的链的链的链的链基因在第链基因在第链基因在第链基因在第2 2 2 2号染色体号染色体号染色体号染色体上，而上，而上，而上，而链基因在第链基因在第22222222号染色体上，在一个细胞号染色体上，在一个细胞号染色体上，在一个细胞号染色体上，在一个细胞内它们不能同时表达，只能表达其中之一，内它们不能同时表达，只能表达其中之一，内它们不能同时表达，只能表达其中之一，内它们不能同时表达，只能表达其中之一，/，：=65=65=65=65：35353535。等位基因排斥等位基因排斥(allelic exclusion)(allelic exclusion)和同种型和同种型排斥排斥(isotype exclusion)(isotype exclusion)第十二页，编辑于星期六：四点 十分。12抗原识别受体多样性产生的机制抗原识别受体多样性产生的机制 1.1.组合造成的多样性组合造成的多样性 众多的基因片段造成的多样性众多的基因片段造成的多样性众多的基因片段造成的多样性众多的基因片段造成的多样性重、轻链组合造成的多样性重、轻链组合造成的多样性重、轻链组合造成的多样性重、轻链组合造成的多样性第十三页，编辑于星期六：四点 十分。13组合组合多样性多样性-众多的基因片段众多的基因片段基因片段HV404030D25J654（J-C）1.9106第十四页，编辑于星期六：四点 十分。14抗原识别受体多样性产生的机制抗原识别受体多样性产生的机制 2.2.连接多样性连接多样性 CDR3CDR3CDR3CDR3区位于区位于区位于区位于V V V V、J J和和和和V V V V、D D D D、J J片段连接处，可丢片段连接处，可丢片段连接处，可丢片段连接处，可丢失或加入数个核苷酸失或加入数个核苷酸失或加入数个核苷酸失或加入数个核苷酸(N N N N插入插入插入插入)，在末端脱氧核苷酸，在末端脱氧核苷酸转移酶作用下，不需模板，直接加入核苷酸至转移酶作用下，不需模板，直接加入核苷酸至DNADNA断端，在断端，在断端，在断端，在V-D-JV-D-JV-D-JV-D-J之间，形成之间，形成之间，形成之间，形成VNDNJ VNDNJ 或或或或VNJ VNJ VNJ VNJ，而而而而显著增加了显著增加了显著增加了显著增加了CDR3CDR3CDR3CDR3的多样性的多样性第十五页，编辑于星期六：四点 十分。15抗原识别受体多样性产生的机制抗原识别受体多样性产生的机制 3.3.体细胞高频突变体细胞高频突变 外周淋巴组织生发中心内的成熟外周淋巴组织生发中心内的成熟外周淋巴组织生发中心内的成熟外周淋巴组织生发中心内的成熟B B B B细胞，在受到抗细胞，在受到抗细胞，在受到抗细胞，在受到抗原剌激后，已重排好的原剌激后，已重排好的原剌激后，已重排好的原剌激后，已重排好的V V V V区基因区基因(尤其尤其尤其尤其CDR3)CDR3)CDR3)CDR3)突变频率增突变频率增突变频率增突变频率增高，称体细胞高频突变，主要为点突变，非随机性。抗高，称体细胞高频突变，主要为点突变，非随机性。抗高，称体细胞高频突变，主要为点突变，非随机性。抗高，称体细胞高频突变，主要为点突变，非随机性。抗原对多株高频突变细胞的选择结果，使其表达的原对多株高频突变细胞的选择结果，使其表达的原对多株高频突变细胞的选择结果，使其表达的原对多株高频突变细胞的选择结果，使其表达的IgVIgVIgVIgV区区区区CDRCDRCDRCDR与抗原表位的互补性更优于原先分子，即为抗体的与抗原表位的互补性更优于原先分子，即为抗体的与抗原表位的互补性更优于原先分子，即为抗体的与抗原表位的互补性更优于原先分子，即为抗体的亲亲亲亲和力成熟和力成熟和力成熟和力成熟。第十六页，编辑于星期六：四点 十分。16抗原识别受体多样性产生的机制抗原识别受体多样性产生的机制 4.Ig4.Ig4.Ig4.Ig类别转换类别转换类别转换类别转换又称同种型转换，即B细胞在受抗原刺激后，首先 合 成IgM，然后转为合成IgG等类别的抗体。第十七页，编辑于星期六：四点 十分。17TCRTCR多样性及其分子基础多样性及其分子基础n nTCRTCRTCRTCR基因座相当于基因座相当于基因座相当于基因座相当于IgIgIgIg的轻链的轻链的轻链的轻链n nTCRTCRTCRTCR基因座相当于基因座相当于基因座相当于基因座相当于IgIgIgIg的重链的重链的重链的重链TCR基因染色体定位人小鼠 链14q11.1214 链7q326 链7p1513 链14q11.214第十八页，编辑于星期六：四点 十分。18n n先是先是先是先是TCRTCRTCRTCR链基因座的重排链基因座的重排链基因座的重排链基因座的重排,然后是然后是然后是然后是链链n n一个一个一个一个DDDD片段与一个片段与一个片段与一个片段与一个JJJJ片段连接，然后片段连接，然后片段连接，然后片段连接，然后D-JD-JD-JD-J与一个与一个与一个与一个VVVV片段相连，完成了片段相连，完成了VDJVDJ基因的重组。基因的重组。基因的重组。基因的重组。n nTCRTCRTCRTCR链初级的链初级的链初级的链初级的RNARNARNARNA转录本在重组的转录本在重组的转录本在重组的转录本在重组的VDJVDJVDJVDJ和和和和C C C C基因之间基因之间含有内含子。含有内含子。n nVDJVDJVDJVDJ与与与与C1C1C1C1或或或或C2C2C2C2的重排是随机的，目前尚未发现的重排是随机的，目前尚未发现的重排是随机的，目前尚未发现的重排是随机的，目前尚未发现CCCC类似类似类似类似IgIgIgIg重链类别转换那样从一个重链类别转换那样从一个重链类别转换那样从一个重链类别转换那样从一个CCCC基因转换到另基因转换到另基因转换到另基因转换到另一个一个一个一个CCCC基因上。基因上。基因上。基因上。第十九页，编辑于星期六：四点 十分。19N=52第二十页，编辑于星期六：四点 十分。20多样性机制多样性机制:n n胚系中有众多的胚系中有众多的胚系中有众多的胚系中有众多的V V V V、D D D D和和和和J J基因片段基因片段n n连接处连接的多样性连接处连接的多样性n nN N N N区的插入区的插入区的插入区的插入TCRTCRTCRTCR和和和和链基因均可发生链基因均可发生N N N N区的插区的插入。入。n nTCRTCRTCRTCR与与与与链的随机配对链的随机配对链的随机配对链的随机配对第二十一页，编辑于星期六：四点 十分。21IRIR的记忆性的记忆性n n记忆细胞产生记忆细胞产生-Tm,Bm.-Tm,Bm.长寿抗原特异性长寿抗原特异性细胞细胞.多数处于静止状态多数处于静止状态.n n再次应答再次应答-强而迅速强而迅速n n抗原原罪现象抗原原罪现象-记忆细胞作用的优先性记忆细胞作用的优先性第二十二页，编辑于星期六：四点 十分。22IRIR的记忆性的记忆性n n记忆记忆记忆记忆B B B B细胞特征细胞特征细胞特征细胞特征-高表达高表达高表达高表达MHC-IIMHC-II类类类类,B7;BCR,B7;BCR,B7;BCR,B7;BCR亲和力亲和力亲和力亲和力高高高高;对抗原更敏感对抗原更敏感.n n记忆记忆记忆记忆T T细胞特征细胞特征细胞特征细胞特征-表达表达CD44,CD45ROCD44,CD45ROCD44,CD45ROCD44,CD45RO，Bcl-2;Bcl-2;Bcl-2;Bcl-2;可分可分化为化为Th1,Th2,CTL;CD4+Th1,Th2,CTL;CD4+Th1,Th2,CTL;CD4+Th1,Th2,CTL;CD4+细胞细胞细胞细胞,IL-2,IL-2,IL-2,IL-2在在CD8+TmCD8+TmCD8+TmCD8+Tm细胞形细胞形细胞形细胞形成中起重要作用成中起重要作用成中起重要作用成中起重要作用.第二十三页，编辑于星期六：四点 十分。23免疫耐受性免疫耐受性Immunological ToleranceImmunological Tolerance第二十四页，编辑于星期六：四点 十分。24概概 述述n n概念：免疫耐受（概念：免疫耐受（概念：免疫耐受（概念：免疫耐受（immune toleranceimmune tolerance）是机体对是机体对是机体对是机体对某种抗原刺激表现为特异性免疫不应答状态。某种抗原刺激表现为特异性免疫不应答状态。某种抗原刺激表现为特异性免疫不应答状态。某种抗原刺激表现为特异性免疫不应答状态。n n免疫耐受具有免疫特异性免疫耐受具有免疫特异性n n不同于免疫缺陷或抑制不同于免疫缺陷或抑制n n自身耐受可以避免自身免疫病的发生自身耐受可以避免自身免疫病的发生自身耐受可以避免自身免疫病的发生自身耐受可以避免自身免疫病的发生第二十五页，编辑于星期六：四点 十分。25免疫耐受现象的发现及诱导免疫耐受现象的发现及诱导 天然免疫耐受天然免疫耐受OwenOwen于于19451945年首先年首先报道了在胚胎期接报道了在胚胎期接触同种异型触同种异型AgAg所致所致的免疫耐受现象。的免疫耐受现象。第二十六页，编辑于星期六：四点 十分。26异卵双生的牛（RBC chimeras）第二十七页，编辑于星期六：四点 十分。27MedawarMedawar等于等于19531953年进一步用实验证年进一步用实验证实了此一免疫耐受实了此一免疫耐受现象。从而指出，现象。从而指出，动物在成年期，接动物在成年期，接触触AgAg产生特异产生特异IRIR，在发育期，接触在发育期，接触AgAg，则导致特异则导致特异ITIT。第二十八页，编辑于星期六：四点 十分。28人工诱导的免疫耐受人工诱导的免疫耐受第二十九页，编辑于星期六：四点 十分。29 Burnet Burnet（19591959年）的克隆清除学说年）的克隆清除学说（clonal deletionclonal deletion）认为，自身反应性认为，自身反应性细胞克隆在胚胎期尚未成熟，此时与细胞克隆在胚胎期尚未成熟，此时与抗原物质接触，该克隆即被排除，出抗原物质接触，该克隆即被排除，出生后表现为对该抗原的特异性无应答，生后表现为对该抗原的特异性无应答，即免疫耐受。即免疫耐受。自身耐受为先天性耐受。自身耐受为先天性耐受。第三十页，编辑于星期六：四点 十分。30二、诱导免疫耐受形成的条件二、诱导免疫耐受形成的条件1、抗原性状：小分子、可溶性、抗原性状：小分子、可溶性、单体、高密度相同抗原决定簇单体、高密度相同抗原决定簇第三十一页，编辑于星期六：四点 十分。31抗原剂量过低，不足以激活T细胞低带耐受抗原剂量过高诱导Tr细胞活化抑制免疫应答高带耐受2、抗原剂量第三十二页，编辑于星期六：四点 十分。323 3、抗原免疫途径、抗原免疫途径第三十三页，编辑于星期六：四点 十分。33（二）机体方面因素MHC,TCR,BCR,性别遗传因素发育程度or年龄机体生理状态胚胎期新生儿期成年期身心状态、化疗、放疗、免疫抑制剂等第三十四页，编辑于星期六：四点 十分。34自身免疫耐受形成的机制中中 枢枢 耐耐 受受T T细胞在胸腺的阴性选择细胞在胸腺的阴性选择克隆排除学说克隆排除学说第三十五页，编辑于星期六：四点 十分。35Clonal deletion:negative selection Clonal deletion:negative selection in the thymusin the thymus第三十六页，编辑于星期六：四点 十分。36自身免疫耐受形成的机制中中 枢枢 耐耐 受受克隆排除学说克隆排除学说B B细胞在骨髓的不成熟阶段进行阴性选择细胞在骨髓的不成熟阶段进行阴性选择克隆排除凋亡克隆排除凋亡克隆校正克隆校正第三十七页，编辑于星期六：四点 十分。37Receptor editing among B cells第三十八页，编辑于星期六：四点 十分。38免疫隔离部位：脑、眼的前房、胎盘、精子等免疫隔离部位：脑、眼的前房、胎盘、精子等生理屏障生理屏障抑制性细胞因子如抑制性细胞因子如TGF-TGF-、IL-10IL-10等等自身外周免疫耐受形成自身外周免疫耐受形成外周自身反应性细胞克隆清除外周自身反应性细胞克隆清除Fas/FasLFas/FasL介导的介导的AICDAICD、CTLA-CTLA-4/B74/B7介导介导T T细胞凋亡细胞凋亡第三十九页，编辑于星期六：四点 十分。39AICD活化诱导的细胞死亡活化诱导的细胞死亡第四十页，编辑于星期六：四点 十分。40缺乏第二信号克隆无能缺乏第二信号克隆无能缺乏激活信号缺乏激活信号缺乏第一信号，缺乏第一信号，MHC-IIMHC-IICD8MHC Class IMHC Class II 3 2TcRTcRCD4第四十一页，编辑于星期六：四点 十分。41免疫忽视：免疫忽视：如组织特异性抗原浓度太低，不足以活化相应的自身反应性T细胞，这种自身反应性T细胞与自身组织特异性抗原共存，在正常情况下，不引起自身免疫病的发生，称为免疫忽视免疫忽视。AgAgAgAg浓度：绝大多数组织特异性抗原浓度太低，不足以活浓度：绝大多数组织特异性抗原浓度太低，不足以活浓度：绝大多数组织特异性抗原浓度太低，不足以活浓度：绝大多数组织特异性抗原浓度太低，不足以活化相应的自身反应性化相应的自身反应性化相应的自身反应性化相应的自身反应性T T T T及及B B B B细胞细胞细胞细胞分离耐受：自身抗原虽能活化自身反应性分离耐受：自身抗原虽能活化自身反应性分离耐受：自身抗原虽能活化自身反应性分离耐受：自身抗原虽能活化自身反应性B B细胞，但细胞，但细胞，但细胞，但ThTh耐受，不提供细胞因子，耐受，不提供细胞因子，耐受，不提供细胞因子，耐受，不提供细胞因子，B B B B细胞呈耐受状态。如细胞呈耐受状态。如细胞呈耐受状态。如细胞呈耐受状态。如旁路旁路旁路旁路ThTh细胞被活化，则引起细胞被活化，则引起细胞被活化，则引起细胞被活化，则引起AIDAIDAIDAID第四十二页，编辑于星期六：四点 十分。42旁路Th细胞活化第四十三页，编辑于星期六：四点 十分。43独特型网络的作用独特型网络的作用反馈调节反馈调节细胞因子（细胞因子（IL-4IL-4、IL-10IL-10、TGF-TGF-）抑制淋巴细抑制淋巴细胞增殖，抑制胞增殖，抑制MM活化及协同刺激因子表达活化及协同刺激因子表达第四十四页，编辑于星期六：四点 十分。44Antiidiotype antibody in tolerance第四十五页，编辑于星期六：四点 十分。45Tr细胞的作用细胞的作用其它其它 SAg其它免疫细胞在免疫耐受中的作用其它免疫细胞在免疫耐受中的作用第四十六页，编辑于星期六：四点 十分。46免疫耐受的维持与破坏一、免疫耐受的维持 耐受原的持续存在；多次重复接触；耐受原性质；免疫系统的成熟度；免疫抑制剂的应用等。第四十七页，编辑于星期六：四点 十分。47免疫耐受的维持与终止二、免疫耐受的终止二、免疫耐受的终止 中枢耐受的破坏；中枢耐受的破坏；外周性耐受的破坏：外周性耐受的破坏：隐蔽抗原隐蔽抗原隐蔽抗原隐蔽抗原;交叉抗原（交叉抗原（交叉抗原（交叉抗原（THTHTHTH细胞旁路活化）细胞旁路活化）细胞旁路活化）细胞旁路活化）;CKs;CKs;免疫调节细胞异常免疫调节细胞异常免疫调节细胞异常免疫调节细胞异常;超抗原及多克隆激活剂的作用。超抗原及多克隆激活剂的作用。第四十八页，编辑于星期六：四点 十分。48人工诱导免疫耐受 1.骨髓chimeras的建立 2.CD4 orCD8单抗封闭，诱导IT 3.可溶性Ag诱导 4.阻断第二信号 抗抗CD40LCD40L、抗抗LFALFA等等 5.口服Ag诱导IT 6.naivenaiveB细胞提呈抗原，诱导T细胞IT 7.其它第四十九页，编辑于星期六：四点 十分。49研究免疫耐受的意义研究免疫耐受的意义第五十页，编辑于星期六：四点 十分。50Thanks Thanks！第五十一页，编辑于星期六：四点 十分。51