药学毕业论文开题报告灰树花.doc

精选资料XXXXXXX学院本科毕业论文（设计）开题报告选 题灰树花培养基优化院 系XXXX专 业XXXXX学生姓名XXX指导教师XXX研究内容：灰树花，又名贝叶多孔菌、栗子蘑、佛菌以及重菇等，日本称之为“舞蘑”，隶属于担子菌亚门，层菌纲，非褶菌目，多孔菌属，树花菌属，是一种生长在亚热带至温带的珍贵的食、药兼用的大型真菌。灰树花的营养丰富，其子实体肉质鲜嫩可口，香气浓郁，干品则气味清香四溢，沁人心脾，是一种脍炙人口的营养美味食品。据国家农业部质检中心和中国预防医学科学院营养与食品卫生研究所检测，灰树花（干）含蛋白质315.0g/kg（其中含18种氨基酸，总量为186.6g/kg，人体必需氨基酸占45.5%），脂肪17.0g/kg，粗纤维107.0g/kg，碳水化合物496.9 g/kg，灰分64.1 g/kg及多种有益矿物质和维生素，是菌中之王。同时，灰树花性平味甘，有“益气补脾、补虚扶正”的功效，具有极高的医疗保健价值。据文献报导，它有抑制高血压和肥胖症的功效；由于富含铁、铜和维他命C，它能预防贫血、坏血病、白癜风，防止动脉硬化和脑血栓的发生；它的硒和铬含量较高，有保护肝脏和胰脏，预防肝硬化和糖尿病的作用；硒含量高使其还具有防治克山病、大骨节病和某些心脏病的功能；它兼含钙和维生素D，两者配合，能有效的防治佝偻病；较高的锌含量有利于大脑发育、保持视觉敏锐，促进伤口愈合；高含量的维生素E和硒配合，使之能抗衰老、增强记忆力和灵敏度。作为中药，灰树花和猪苓等效，可治小便不利、水肿、脚气、肝硬化腹水及糖尿病等，是非常宝贵的药用真菌。日本学者通过对灰树花发酵液成分的研究发现：其中灰树花多糖是主要的生物活性成分。大量的化学和药理分析发现，灰树花具有明显的降血糖、抗肝炎、抗HIV病毒等功效，尤其是灰树花中的2葡聚糖有明显的增强免疫和抑制肿瘤的作用。因此，目前已被开发成多种保健品，其中包括我国的保力生胶囊和维吉尔胶囊、日本的MAIEXT以及美国的Grifron系列产品。目前，灰树花多糖及有效成分均由子实体提取，由于中国农村人工栽培生产过程中原料品质、环境条件不易控制，易造成重金属超标，农药残留等问题；其次，灰树花子实体栽培周期长，费工时，暴露在环境中，易被杂菌污染。近年来，随着发酵工程的迅速发展，利用液体深层发酵技术生产灰树花的方法应运而生。液体深层发酵法可以通过调节培养基组成、发酵温度、时间等，在短时间内得到大量真菌菌丝体，使得灰树花生产产业化，质量稳定，而且液体深层发酵得到的食药用菌菌丝体不但具有子实体相当的营养及药用效果，还可得到胞外多糖等子实体所不具备的营养保健成分。研究液体发酵法制备灰树花液体菌种对加速灰树花的制种速度，提高灰树花产量促进农业、食品、医药工业的发展都具有一定的现实意义。研究方法、手段及步骤：国内对灰树花液体发酵的研究报道多数集中在营养生长的条件以及影响因素等方面。合理利用农副产品及其加工中的下脚料是最经济、最有效的食用菌液体深层发酵工业化生产趋势。本实验采用液体发酵法培养灰树花菌丝体，研究碳源、氮源、无机盐、维生素等培养基因素对灰树花液体发酵多糖产量的影响并选择多糖产量最多的3种碳源、3种氮源、3种无机盐、3种维生素，设计四因素三水平的正交实验，确定多糖产量最高的液体培养基配方，减少发酵生产中不必要的损失，节约成本，提高产量。对碳源而言，相关文献认为灰树花能利用多种碳源，如葡萄糖、番薯粉、马铃薯、玉米粉、可溶性淀粉、麦芽汁、大米粉、果糖和蔗糖等。对氮源而言，相关文献认为麸皮、花生粉、蚕蛹粉、蛋白胨和豆饼粉是较佳氮源。对无机盐而言，相关文献通过试验确定灰树花所需的无机盐磷酸二氢钾、碳酸钙、硫酸镁、硫酸铁、硫酸锌和硫酸铜。对生长促进剂而言，相关文献认为板栗壳煮汁、酵母膏和棉子壳煮汁较好。1.制备灰树花液体菌种培养方法 菌株活化：将保存的灰树花菌株分别转接在PDA加富斜面培养基上，于25生化培养箱中培养12d。固体斜面培养：将PDA加富培养基按常规方法制成斜面，斜面长度10cm，每一菌株设10次重复。在无菌条件下分别接入大小相同的0.5cm²的灰树花菌株，25恒温培养。当菌丝萌发后表现出良好的生长时，在试管壁上划线，观察并记录菌丝萌发情况、菌丝长势、菌丝长速、生长密度、满管天数。 一级摇瓶培养：在250mL三角烧瓶内装100mL一级摇瓶培养基，高压常规灭菌后，每瓶接种约1cm³的活化菌株3块，置于25恒温培养箱中静止培养24h后，于25以180r/min恒温振荡培养箱中培养710d。二级摇瓶培养：在250mL三角烧瓶内装100mL二级摇瓶培养基，经高压常规灭菌后，以5ml的接种量接入一级摇瓶培养的液体菌种，置于25，振速180r/min摇床振荡培养710d。2.制备不同单因素控制的培养基2.1 碳源的影响采用去葡萄糖的基础培养基为基质，以无碳源为对照，在基础培养基中分别加入麦芽糖、葡萄糖、乳糖、可溶性淀粉、蔗糖和糊精6种碳源，其浓度为2%，每种碳源3次重复，灭菌后按5ml的接种量接入液体菌种。2.2 氮源的影响以无氮源为对照，在基础培养基中分别加入蛋白胨、酵母提取物、尿素、硫酸铵、氯化铵5种氮源，其浓度为1% ，每种氮源3次重复，灭菌后按5ml的接种量接入液体菌种。2.3 无机盐的影响在基础培养基中分别加入硝酸钾、硫酸亚铁、硫酸锰、硫酸铜、硫酸锌5种无机盐，其浓度是0.1，每种无机盐3次重复，灭菌后接种，按按5ml的接种量接入液体菌种。2.4 维生素的影响在基础培养基中加入VC、VB、VB1、VB24种维生素，其浓度为0.002，每种维生素3次重复，灭菌后接种，按5ml的接种量接入液体菌种。3.培养一定时间，观察液体菌丝生长状况、形态，测定胞内多糖含量和胞外多糖产量液体深层培养灰树花，培养结束后收集菌丝体，菌丝体经过滤清洗，再经3000r/min离心15min，55烘干，经一系列的单元操作过程，得灰树花多糖。干菌丝体加石英砂研磨浸提离心沉淀物浸提 粗多糖沉淀物离心醇析浓缩上清液离心注：离心得到的沉淀物再经浸提离心上清液，并入上个过程，进行同一操作。4.正交实验：选择菌丝形态较好、产量最多的3种碳源、3种氮源、3种无机盐、3种维生素，设计四因素三水平的正交实验，确定菌丝体产量最高的液体培养基配方。5. 对所得的培养基配方进行验证实验。6.进行实验数据的统计分析整理，与对照组比较，列表画图，得出结论并进行讨论。参考文献：1边杉,叶波平,吴梧桐,等.灰树花多糖的研究进展.药物生物技术,2004,11(1):6063.2肖建辉,蒋侬辉,梁宗琦,等.食药用真菌多糖研究进展.生命的化学,2002,22(2):148151.3史宝军,张家骊,陶文沂,等.灰树花胞外多糖的分离纯化及其性质研究.药物生物技术,2003,10(5): 312316.4史美丽,宋爱荣,吕海涛,等.灰树花发酵液提取多糖的比较研究.中国食用菌,2003,22(3):4546.5冯慧琴,杨庆尧,糜可,等.灰树花液体培养菌丝产多糖的研究.食用菌学报,2000,7(2):510.6B.C.Lee,J.T.Bae,H.B.Pyo,et.al. Submerged culture conditions for the production of mycelial biomass and exopolysaccharides by the edible Basidiomycete Grifola frondosa. Enzyme and Microbial Technology,2004,35:369376.7刘伟民，黄达明，陈庶来.灰树花深层发酵培养基优化研究.工艺技术，2003，24（3）：998卜庆梅，倪艳波，黄清荣.灰树花液体发酵培养基的筛选试验.江苏农业科学，2003，6：1039汪维云，王继先.灰树花液体发酵及多糖提取工艺的优化研究.农业工程学报，2007，23（4）：27610马迅 雷红 李谦.灰树花子实体多糖的分子组成与降血糖作用.药物生物技术，2007，14(5)：328333注：本表放置在学生毕业论文（设计）封面后，作为毕业论文（设计）的一部分印刷。THANKS !致力为企业和个人提供合同协议，策划案计划书，学习课件等等打造全网一站式需求欢迎您的下载，资料仅供参考可修改编辑