高三一轮复习生物:微生物的实验室培养与应用课件.pptx
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高三一轮复习生物:微生物的实验室培养与应用课件.pptx
专题专题2 微生物的培养与应用微生物的培养与应用课题课题1 1 微生物的实验室培微生物的实验室培养养 (第(第1 1课时)课时)核心问题:核心问题:1.1.如何在实验室中培养微生物?如何在实验室中培养微生物?2.2.如何保证在实验室培养微生物的过程中没有杂菌污染?如何保证在实验室培养微生物的过程中没有杂菌污染?核心问题:核心问题:1.1.如何在实验室中培养微生物如何在实验室中培养微生物?一、培养基一、培养基1、概念、概念2、基础成分、基础成分3、分类、分类核心问题:核心问题:1.1.如何在实验室中培养微生物如何在实验室中培养微生物?用于微生物分离、用于微生物分离、鉴定和活菌计数鉴定和活菌计数用于工业生产用于工业生产核心问题:核心问题:1.1.如何在实验室中培养微生物如何在实验室中培养微生物?一、培养基一、培养基1、概念、概念2、基础成分、基础成分3、分类、分类4、制备过程(以牛肉膏蛋白胨固体培养基为例)、制备过程(以牛肉膏蛋白胨固体培养基为例)核心问题:核心问题:1.1.如何在实验室中培养微生物如何在实验室中培养微生物?1.1.计算计算:依配方依配方计算计算100mL100mL培养基所需各培养基所需各成分的用量成分的用量。核心问题:核心问题:1.1.如何在实验室中培养微生物如何在实验室中培养微生物?2.2.称量称量:玻璃棒挑取牛肉膏于称量纸上称取玻璃棒挑取牛肉膏于称量纸上称取。3.3.溶化溶化:补:在加入琼脂之前调节补:在加入琼脂之前调节PHPH思考:琼脂的作用?为何要不断用玻棒搅拌思考:琼脂的作用?为何要不断用玻棒搅拌?作为凝固剂作为凝固剂防止琼脂糊底而防止琼脂糊底而导致烧杯破裂导致烧杯破裂1.1.计算计算:依配方依配方计算计算100mL100mL培养基所需各培养基所需各成分的用量成分的用量。核心问题:核心问题:1.1.如何在实验室中培养微生物如何在实验室中培养微生物?2.2.称量称量:玻璃棒挑取牛肉膏于称量纸上称取玻璃棒挑取牛肉膏于称量纸上称取。3.3.溶化溶化:补:在加入琼脂之前调节补:在加入琼脂之前调节PHPH4 4.灭菌:灭菌:思考:培养基用什么方法灭菌?培养皿呢?思考:培养基用什么方法灭菌?培养皿呢?1.1.计算计算:依配方依配方计算计算100mL100mL培养基所需各培养基所需各成分的用量成分的用量。核心问题:核心问题:1.1.如何在实验室中培养微生物如何在实验室中培养微生物?2.2.称量称量:玻璃棒挑取牛肉膏于称量纸上称取玻璃棒挑取牛肉膏于称量纸上称取。3.3.溶化溶化:补:在加入琼脂之前调节补:在加入琼脂之前调节PHPH4 4.灭菌:灭菌:5.5.倒平倒平板:板:思考:为何要待培养基冷却至思考:为何要待培养基冷却至50左右时左右时倒平板?为什么倒平板的整个操作过程要倒平板?为什么倒平板的整个操作过程要在酒精灯火焰附近完成?在酒精灯火焰附近完成?核心问题:核心问题:1.1.如何在实验室中培养微生物如何在实验室中培养微生物?1 12 23 34 41.1.计算计算:核心问题:核心问题:1.1.如何在实验室中培养微生物如何在实验室中培养微生物?2.2.称量称量:3.3.溶化溶化:4 4.灭菌:灭菌:5.5.倒平倒平板:板:思考:若整个过程严格按照每步流程思考:若整个过程严格按照每步流程操作,最后的平板中有无微生物繁殖操作,最后的平板中有无微生物繁殖?核心问题:核心问题:2.2.如何保证在实验室培养微如何保证在实验室培养微生物的过程中没有杂菌污染?生物的过程中没有杂菌污染?2.2.如何保证在实验室培养微生物的过程中没有杂菌污染?如何保证在实验室培养微生物的过程中没有杂菌污染?无菌技术无菌技术的关键:的关键:防止外来杂菌的污染防止外来杂菌的污染无菌技术无菌技术的操作:的操作:1.1.实验操作空间实验操作空间消毒消毒2.2.操作者的手、衣着操作者的手、衣着消毒消毒3.3.实验用具实验用具灭菌灭菌4.4.实验操作过程实验操作过程:酒精酒精灯火焰旁灯火焰旁操作操作操作操作超净工作台超净工作台2.2.如何保证在实验室培养微生物的过程中没有杂菌污染?如何保证在实验室培养微生物的过程中没有杂菌污染?2.2.如何保证在实验室培养微生物的过程中没有杂菌污染?如何保证在实验室培养微生物的过程中没有杂菌污染?思考:如果在倒完平板并将平板倒置一段时间后,思考:如果在倒完平板并将平板倒置一段时间后,发现平板中有微生物生长繁殖的现象,请你试着分发现平板中有微生物生长繁殖的现象,请你试着分析一下出现这种现象的原因?析一下出现这种现象的原因?思考:如果在倒完平板并将平板倒置一段时间后,思考:如果在倒完平板并将平板倒置一段时间后,发现平板中有微生物生长繁殖的现象,请你试着分发现平板中有微生物生长繁殖的现象,请你试着分析一下出现这种现象的原因?析一下出现这种现象的原因?1.1.对培养基和培养皿等器具灭菌不完全对培养基和培养皿等器具灭菌不完全对培养基和培养皿等器具灭菌不完全对培养基和培养皿等器具灭菌不完全2.2.将灭过菌的器具与其他未灭菌的器具接触将灭过菌的器具与其他未灭菌的器具接触将灭过菌的器具与其他未灭菌的器具接触将灭过菌的器具与其他未灭菌的器具接触3.3.倒平板操作并未在酒精灯火焰旁完成倒平板操作并未在酒精灯火焰旁完成倒平板操作并未在酒精灯火焰旁完成倒平板操作并未在酒精灯火焰旁完成4.4.倒平板时并未将锥形瓶瓶口通过酒精灯火焰灭菌倒平板时并未将锥形瓶瓶口通过酒精灯火焰灭菌倒平板时并未将锥形瓶瓶口通过酒精灯火焰灭菌倒平板时并未将锥形瓶瓶口通过酒精灯火焰灭菌 在完成在完成“制备培养基的过程制备培养基的过程”后,需要将培养基放后,需要将培养基放入恒温培养箱中培养一段时间,观察是否有微生物入恒温培养箱中培养一段时间,观察是否有微生物繁殖,繁殖,若没有,制备的培养基可用于培养需要的微若没有,制备的培养基可用于培养需要的微生物生物;若有,则制备的培养基不合格,灭菌后丢弃若有,则制备的培养基不合格,灭菌后丢弃。空白培养基空白培养基核心问题:核心问题:3.3.如何让自然界中的微生物在培如何让自然界中的微生物在培养基上繁殖呢?养基上繁殖呢?接种接种课题课题1 1 微生物的实验室培微生物的实验室培养养 (第(第2 2课时)课时)核心问题:核心问题:3.3.如何让自然界中的微生物在培养基上繁殖呢?如何让自然界中的微生物在培养基上繁殖呢?取样取样接种接种自来水、土壤等自来水、土壤等斜面接种斜面接种接种方法接种方法穿刺接种穿刺接种平板划线法平板划线法稀释涂布平板法稀释涂布平板法核心:防止杂菌的污染,保证培养物的纯度核心:防止杂菌的污染,保证培养物的纯度3.3.如何让自然界中的微生物在培养基上繁殖呢?如何让自然界中的微生物在培养基上繁殖呢?平板划线法平板划线法所用的材料及器具所用的材料及器具菌液菌液空白培养基空白培养基接种环接种环重难点:平板划线法的操作重难点:平板划线法的操作小组合作:小组合作:结合已学知识尝试去说明平板划线法操作过程中结合已学知识尝试去说明平板划线法操作过程中“为什么这么做为什么这么做”的目的。并用自己的语言将平板划线法的的目的。并用自己的语言将平板划线法的操作过程进行阐述和操作(要求:阐述内容必须包含相应操作过程进行阐述和操作(要求:阐述内容必须包含相应操作的目的)操作的目的)重难点:平板划线法的操作重难点:平板划线法的操作总结:总结:1.平板划线法的定义平板划线法的定义2.平板划线法的目的平板划线法的目的菌落菌落适宜温度下培养一段时间适宜温度下培养一段时间菌落(由一个细胞繁殖而来的肉眼可见的子细胞群体)菌落(由一个细胞繁殖而来的肉眼可见的子细胞群体)菌落特征:菌落特征:可以作为判别菌种的依据可以作为判别菌种的依据S型菌菌落:光滑型菌菌落:光滑R型菌菌落:粗糙型菌菌落:粗糙利用不同微生物的菌落特征:利用不同微生物的菌落特征:如何证明培养基上生长的微生物是因为接种而生长的,而如何证明培养基上生长的微生物是因为接种而生长的,而不是由于杂菌污染?不是由于杂菌污染?重难点:稀释涂布平板法的操作重难点:稀释涂布平板法的操作自主独立完成:自主独立完成:1.1.为何要将菌液进行一系列的梯度稀释?为何要将菌液进行一系列的梯度稀释?2.2.稀释菌液所用的水需要灭菌吗?为什么稀释菌液所用的水需要灭菌吗?为什么?3.3.稀释菌液过程中吸取菌液的工具是?稀释菌液过程中吸取菌液的工具是?4.4.涂布器的作用是?涂布器的作用是?5.5.请总结整个过程中哪些操作体现了无菌请总结整个过程中哪些操作体现了无菌技术?(至少两点)技术?(至少两点)重难点:稀释涂布平板法的操作重难点:稀释涂布平板法的操作菌液菌液菌液菌液所用的材料及器具(部分)所用的材料及器具(部分)重难点:稀释涂布平板法的操作重难点:稀释涂布平板法的操作稀稀稀稀释释释释101010104 4 4 4倍倍倍倍稀稀稀稀释释释释101010105 5 5 5倍倍倍倍稀稀稀稀释释释释101010106 6 6 6倍倍倍倍两种方法均可以用于接种和分离纯化微生物两种方法均可以用于接种和分离纯化微生物但但只有稀释涂布平板法只有稀释涂布平板法可用于微生物的可用于微生物的计数计数