《大学分析化学教学课件》12第9章(1-2节).ppt

第第 9 章章 定量分析中的分离方法定量分析中的分离方法9.1 概述概述9.2 沉淀分离法沉淀分离法9.3 溶剂萃取分离法溶剂萃取分离法9.4 离子交换法离子交换法9.5 色谱分离法色谱分离法1定量分析过程定量分析过程取样取样溶样溶样消除干扰消除干扰 测定测定 计算计算 掩蔽掩蔽 原理原理 数据处理数据处理 分离分离 方法方法 结果结果9.1 概述概述2气液分离气液分离：挥发和蒸馏挥发和蒸馏 克氏定氮法，克氏定氮法，Cl2预氧化预氧化I-法法液液分离液液分离螯合物萃取螯合物萃取离子缔合物萃取离子缔合物萃取三元络合物萃取三元络合物萃取支撑型液膜支撑型液膜乳状液型液膜乳状液型液膜生物膜生物膜萃取分离萃取分离 液膜分离液膜分离其他分离方法其他分离方法：萃淋树脂、螯合树脂、浮选、萃淋树脂、螯合树脂、浮选、色谱分离法色谱分离法分离分析法分离分析法：气相色谱法，液相色谱法、电泳分析法：气相色谱法，液相色谱法、电泳分析法分分 离离 方方 法法固液分离固液分离沉淀分离沉淀分离离子交换分离离子交换分离氢氧化物：氢氧化物：NaOH、NH3硫化物：硫化物：H2S有机沉淀剂：有机沉淀剂：H2C2O4，丁二酮肟，丁二酮肟阳离子交换树脂阳离子交换树脂阴离子交换树脂阴离子交换树脂固相萃取固相萃取气固分离气固分离-超临界流体萃取超临界流体萃取3分离的意义：分离的意义：消除干扰、富集微量待测组分消除干扰、富集微量待测组分.对分离的要求：对分离的要求：1 1）干扰组分应减小至不再干扰被测组分的测定；）干扰组分应减小至不再干扰被测组分的测定；2 2）被测组分在分离过程中的损失要小到可以不计。）被测组分在分离过程中的损失要小到可以不计。被测组分被测组分A A的回收率（的回收率（R RA A）：）：A为主要组分：为主要组分：RA99.9%A在在1%：RA99%A为微量组分：为微量组分：RA95%或更低或更低A、B两组分分离效果的好坏用分离因数两组分分离效果的好坏用分离因数S 表示表示4 9.2.1 无机沉淀剂无机沉淀剂 1.氢氧化物沉淀氢氧化物沉淀：OH-:分离两性分离两性(Zn(II),Pb(II),Sn(II),Al(III)与非两与非两性物性物.蛋白质的分离蛋白质的分离-调调pH至等电点至等电点.NH3H2O:分离高价金属离子分离高价金属离子(Th4+,Al3+,Fe3+)与易生成与易生成 氨络合物的金属氨络合物的金属(Cu,Co,Ni,Zn,Cd,Hg,Ag).2.硫化物：硫化物：H2S(控制酸度以控制控制酸度以控制S2-浓度浓度)3.其他沉淀剂：其他沉淀剂：Cl-,SO42-,CrO42-,PO43-,F-等等.Ag+Ba2+,Pb2+Mg2+Ca2+容易共沉淀容易共沉淀,选择性不高选择性不高;应首先沉淀微量组分应首先沉淀微量组分.9.2 沉淀分离法沉淀分离法59.2.2 有机沉淀剂有机沉淀剂种类多种类多,选择性好选择性好,晶形好晶形好,可灼烧除去可灼烧除去.H2C2O4 用于用于 Ca2+,Ba2+,Sr2+,Th4+与与Fe3+,Al3+,Zr4+分分离离铜铁试剂铜铁试剂（N-亚硝基亚硝基-苯胲胺）苯胲胺）在在1:9的的H2SO4 中，中，Fe3+、Ti4+、V(V)与与Al3+、Co2+、Cr3+、Ni2+分离分离.N-ONH4N=O69.2.3 共沉淀分离富集共沉淀分离富集CaCO3(Pb),Al(OH)3,Fe(OH)3 选择性差选择性差,干扰下一步测定干扰下一步测定.有机共沉淀剂有机共沉淀剂:丹宁丹宁,动物胶等动物胶等,可灼烧除去可灼烧除去.例例:丁二酮肟丁二酮肟-Ni(内络盐内络盐)+惰性共沉淀剂惰性共沉淀剂+丁二酮肟二烷酯丁二酮肟二烷酯 (乙醇溶液乙醇溶液)+SCN-甲基紫甲基紫+(络合共沉淀剂络合共沉淀剂)Zn2+Zn(SCN)42-难溶三元络合物难溶三元络合物SCN-甲基紫甲基紫+(10 g/L)例例:OHONiN CON C CH3CH3HOCH3CCNNH3C居里夫妇与居里夫妇与钋和镭钋和镭9 2.利用络合掩蔽作用利用络合掩蔽作用 例例 Ca2+、Mg2+分离分离 (NH4)2C2O4过量过量,Ca2+沉淀沉淀,Mg2+生成生成Mg(C2O4)22-.例例 Pb2+、Ca2+分离分离在在EDTA存在下，控制存在下，控制pH2.84.9,CaC2O4,与与Pb2+分离分离.9.2.4 提高沉淀分离的选择性提高沉淀分离的选择性 在在KCN的氨性溶液中通入的氨性溶液中通入H2S，Cd2+被沉淀，被沉淀，Cu2+不沉淀不沉淀,Cu2+Cu(CN)32-1.控制酸度控制酸度:例例 Cu2+、Cd2+分离分离10用草酸盐沉淀用草酸盐沉淀分离分离Pb2、Ca2pCapPbpPbX 1.0pCa无无EDTAX6.110 8 6 4 2 0 pM(pM)024682.84.9pH6.88.7pCa 5pPb 2pCapPb pKsp(PbC2O4)=9.7,lgK(PbY)=18.0 pKsp(CaC2O4)=7.8,lgK(CaY)=10.7有有EDTAC2O4=0.1 molL-1 Y =0.01 molL-1113.利用氧化还原反应利用氧化还原反应,改变离子存在状态改变离子存在状态Fe3+Cr3+Mn2+Ca2+,Mg2+NaOHH2O2Fe(OH)3CrO42-MnO(OH)2Ca2+,Mg2+O2129.3 溶剂萃取分离法溶剂萃取分离法9.3.1 萃取原理与基本概念萃取原理与基本概念依据依据:“相似相溶相似相溶”,物质在极性不同的溶物质在极性不同的溶剂中剂中 溶解度不同溶解度不同.水水:极性极性,离子型化合物离子型化合物(亲水性亲水性)易溶易溶.有机溶剂有机溶剂(丙酮丙酮,CHCl3,CCl4,苯苯):有机化合物有机化合物(疏水性疏水性)易溶易溶.萃取萃取:将亲水性物质转化成疏水性化合物而将亲水性物质转化成疏水性化合物而 进入有机相进入有机相.反萃取反萃取:恢复亲水性恢复亲水性,再回到水相再回到水相.13分配平衡分配平衡示意图示意图1.分配系数分配系数在一定温度下在一定温度下,浓度不太大时浓度不太大时,KD为常数为常数,称称分配定律。分配定律。woA 有机相有机相A 水相水相 中性分子中性分子 1严格说：严格说：142.分配比分配比例：例：有有I-存在时存在时,I2在在CCl4H2O中的分配中的分配lgKDlgDlgI-163.萃取率萃取率相比相比 R17在不同在不同KI浓度下的浓度下的I2在在CCl4-H2O体系中的体系中的D和和E(R=1)lgI-0-1-2-3-4-5-6lgD-1.10.0130.981.681.901.931.94D0.0791.039.547.979.485.187.1E7.750.890.598.098.898.8598.85相比确定时相比确定时,分配比分配比D 越大越大,萃取率萃取率E 越高。越高。18分配比与萃取率的关系曲线分配比与萃取率的关系曲线DE/%150109110099100099.9100010010.01.00.100.01D0 20 40 60 80 100萃取率萃取率 (E/%)（VO=VW,R=1)19若若D=5，R=1 时，时，一次萃取率一次萃取率 E=83%若若D=5，R=1/3 时，一次萃取率时，一次萃取率 E=94%若若D=5，R=1 时，时，三次总萃取率三次总萃取率 E=99.5%用同量溶剂多次萃取效果好用同量溶剂多次萃取效果好.萃取次数与萃取率的关系萃取次数与萃取率的关系20m0为被萃取物总量，为被萃取物总量，m1为一次萃取后，水中剩余量为一次萃取后，水中剩余量.多次萃取时多次萃取时萃取率萃取率 E 的计算的计算21例例1 在在pH=7.0时时,以以8羟基喹啉羟基喹啉(Oxine)氯仿溶液氯仿溶液从从 水溶液中萃取水溶液中萃取La3+。已知已知:D=43,c(La3+)W=1.00 mg/mL,VW=20.0 mL.2.VOxine=5.0 mL n=2=43/(43+2)=96%1.VOxine=10.0 mL22 乙醚作用：生成乙醚作用：生成 盐盐,溶剂溶剂,萃取剂萃取剂.1.离子缔合物萃取离子缔合物萃取 萃取容量较大萃取容量较大,常用于分离基体元素常用于分离基体元素,如钢铁中的如钢铁中的FeFe3+3+.9.3.2 萃取类型与萃取平衡萃取类型与萃取平衡盐盐 萃入乙醚中萃入乙醚中FeCl4OH+C2H5C2H5OHC2H5C2H5FeCl423 Sb(V)在浓在浓HCl中生成中生成SbCl6-，可与碱性染料孔，可与碱性染料孔雀绿的阳离子生成缔合物，而被苯萃取，该体系用雀绿的阳离子生成缔合物，而被苯萃取，该体系用于萃取光度法测微量于萃取光度法测微量Sb。离子缔合物萃取离子缔合物萃取例例(H3C)2NN(CH3)2 SbCl6C24丁二酮肟镍丁二酮肟镍(电中性电中性)，从水中萃入，从水中萃入CHCl3.2.螯合物萃取螯合物萃取2Ni2CH3CCNOHNOHH3COHON iNCONCCH3CH3HOCH3CCNNH3C259.3.3 几种重要的萃取剂几种重要的萃取剂 乙酰丙酮乙酰丙酮lgKH(HL)=8.9，lgKD=0.77（C6H6H2O）萃取离子：萃取离子：Fe3BeCuAlThPbNiCo2+ZnMnHg噻吩甲酰三氟丙酮噻吩甲酰三氟丙酮lgKH(HL)=6.23，lgKD=1.6可在酸性溶液中萃取金属离子可在酸性溶液中萃取金属离子,主要用于锕系元素分离主要用于锕系元素分离.CH3COCH2CCH3OSCOCH2COCF3268-羟基喹啉羟基喹啉 铜铁试剂铜铁试剂lgKD=2.6，lgKH(HL)=9.9，lgKH(H2L)=5.0（CH2Cl2H2O）VO2+Fe3+Ga3+CuTiO2+BiNiAlTh Hg Co Zn CdPbMnCalgKH(HL)=4.16，lgKD=2.18（CHCl3H2O）Fe3,Ti,Zr,V,Nb,Bi,Cu,Th（酸性）（酸性）NOHN-ONH4N=O279.3.4 溶剂萃取的应用溶剂萃取的应用 1.萃取分离萃取分离 双硫腙能与双硫腙能与20余种余种M生成螯合物生成螯合物 稀无机酸溶液（稀无机酸溶液（0.10.5molL-1），可萃取），可萃取Hg、Ag、Au、Cu；萃取后；萃取后,用含用含EDTA的碱性溶液洗萃取液的碱性溶液洗萃取液,HgY被反萃到水相被反萃到水相,几乎无干扰几乎无干扰.弱酸性介质，可萃取弱酸性介质，可萃取Bi.中性或弱碱性，可萃取中性或弱碱性，可萃取Zn、Cd、Pb、Ni.2.萃取富集萃取富集 天然水中致癌物天然水中致癌物3、4-苯并芘的检测苯并芘的检测 用环已酮从大量水中萃取，浓缩到小体积，层析分离后用环已酮从大量水中萃取，浓缩到小体积，层析分离后 荧光法测定荧光法测定.28溶剂比水轻溶剂比水轻溶剂比水重溶剂比水重溶剂溶剂溶溶剂剂水溶液水溶液水水溶溶液液 冷凝器冷凝器 连续萃取装置连续萃取装置293.萃取比色萃取比色.合金钢中钒的测定合金钢中钒的测定三元络合物三元络合物紫红色紫红色萃取光度法萃取光度法=530nmV(IV)氧化剂氧化剂V(V)钽试剂钽试剂CHCl3V-钽试剂钽试剂-ClHCl(3.5molL-1)1 :2 :130+o+o+o+o+o+oo o oo+oo o oo o oo o o+o+o+oo+oo o oo o oo o oo o oo o oo o oo o o o+o+o+o o+o+K+H+淋洗淋洗交换上柱交换上柱溶液中的离子溶液中的离子与离子交换树与离子交换树脂发生离子交脂发生离子交换而分离换而分离.9.3 离子交换分离法离子交换分离法31A+BABAB柱层析柱层析离子交换层析法离子交换层析法将交换上去的离子，将交换上去的离子，用适当的洗脱剂依用适当的洗脱剂依次洗脱而分离次洗脱而分离.32CO O HCH2CHOHCH CH2CH CH2CH CH2CH CH2CH CH2CH CH2CH CH2CH CH2CH CH2CH CH3CH CH3CH CH2CH CH2CH CH2CH CH2CH CH2CH CH2CH CH2CH CH2CH CH2CH CH2CH CH3CH CH2CH CH2H2S O4S O3HS O3HS O3HS O3HS O3HS O3H+HC=CHHC=CHHC=CH（催催化化剂剂）n（分分散散剂剂）交联度交联度:w(交联剂交联剂)812%交换容量：交换容量：36 mmol/g(干）干）9.3.1 树脂的种类和性质树脂的种类和性质 网状高分子聚合物网状高分子聚合物33树脂类型树脂类型阳离子交换树脂阳离子交换树脂:含酸性活性基团的树脂。含酸性活性基团的树脂。强酸型：强酸型：RSO3H pH 0-14 不受酸度限制不受酸度限制交换交换洗脱洗脱 弱酸型：弱酸型：RCOOH pH4 ROH pH9.5 选择性好选择性好,可分离各种有机碱及氨基酸可分离各种有机碱及氨基酸34强碱型：强碱型：R N(CH3)3Cl pH 0-14弱碱型：弱碱型：R NH2，RNHCH3 pH 0-7 RN(CH3)2 pH 9.5螯合树脂：螯合树脂：含有特殊的螯合活性基团含有特殊的螯合活性基团交换交换洗脱洗脱 水化作用水化作用阴离子交换树脂阴离子交换树脂:含碱性活性基团的树脂含碱性活性基团的树脂 35 9.3.2 树脂对离子的亲和力顺序树脂对离子的亲和力顺序强酸型阳离子交换树脂强酸型阳离子交换树脂 对一价阳离子对一价阳离子 Li+H+Na+NH4+K+Rb+Cs+Ag+Tl+对二价阳离子对二价阳离子 Mg2+Ca2+Sr2+Ba2+Fe2+Co2+Ni2+Cu2+Zn2+水合离子半径越小亲和力越大水合离子半径越小亲和力越大强碱型阴离子交换树脂强碱型阴离子交换树脂 F-OH-Ac-HCOO-H2PO4-Cl-NO3-HSO4-CrO42-SO42-对不同价态离子对不同价态离子 Na+Ca2+Fe3+Th4+电荷数越高亲和力越大电荷数越高亲和力越大36阳离子交换分离阳离子交换分离（0.1molL-1 HCl为淋洗液）为淋洗液）0100200300400V洗洗(mL)cLi+Na+K+(2molL-1 HCl)K+亲和力大的先被交换上去亲和力大的先被交换上去,后被洗脱下来后被洗脱下来.379.3.3 离子交换分离操作技术离子交换分离操作技术1.树脂的选择和处理树脂的选择和处理2.装柱装柱3.交换交换4.洗脱洗脱5.树脂再生树脂再生离离子子交交换换树树脂脂玻璃纤维玻璃纤维交换柱交换柱389.3.4 离子交换分离法的应用离子交换分离法的应用1.水的净化水的净化:阳离子柱阳离子柱阴离子柱阴离子柱混合柱混合柱2.离子的分离与富集离子的分离与富集:Al3+、Fe3+与与SO42-分离分离;Cr(VI)与与Cr3+分离分离;Al3+与与Fe3+分离：分离：FeCl4-用阴离子交换树脂除去用阴离子交换树脂除去;Co2+Ni2+HCl9molL-1CoCl42-Ni2+阴离子交换树脂阴离子交换树脂39用强碱性阴离子交换树脂分离用强碱性阴离子交换树脂分离 Ni,Mn,Co,Cu,Fe,Zn (HCl 浓度浓度molL-1)020406080100洗脱剂体积，洗脱剂体积，mLNi2+Mn2+Co2+Cu2+Fe3+Zn2+12642.50.50.005洗脱曲线洗脱曲线403.氨基酸的分离氨基酸的分离(阳离子交换树脂阳离子交换树脂)用用pH递增的柠檬酸盐缓冲溶液洗脱递增的柠檬酸盐缓冲溶液洗脱侧链侧链pKa增大的氨基酸增大的氨基酸4.蛋白质、酶、核酸等生物活性物质的蛋白质、酶、核酸等生物活性物质的 分离、纯化和富集分离、纯化和富集.41 例例:测定含测定含Fe3+溶液中溶液中H3BO3的浓度的浓度 1.将溶液通过强酸型阳离子交换树脂除去将溶液通过强酸型阳离子交换树脂除去Fe3+;2.预中和溶液中的游离酸预中和溶液中的游离酸(MR),加入多元醇加入多元醇,用用NaOH 标准溶液滴标准溶液滴定定(PP).例例:用离子交换法测定用离子交换法测定NaAc的含量的含量 NaAc H-阳离子树脂阳离子树脂(NaOH滴定滴定,PP)HAcCl-阴离子树脂阴离子树脂NaCl(AgNO3滴定滴定,K2CrO4)NaOHOH-阴离子树脂阴离子树脂(HCl滴定滴定,MR,PP)42叶绿素叶绿素 叶绿素叶绿素叶黄素叶黄素，叶黄素叶黄素 茨维特色谱图茨维特色谱图（1906）叶绿素的石油醚溶液流经叶绿素的石油醚溶液流经装有装有CaCO3的柱子，然后的柱子，然后用石油醚淋洗用石油醚淋洗.CaCO3对叶绿素各成分吸对叶绿素各成分吸附能力不同，而分离成为附能力不同，而分离成为色带色带.9.4 色谱法色谱法439.4.1 柱色谱法柱色谱法 (Column Chromatograph)机理机理:吸附色谱吸附色谱吸附剂吸附剂:Al2O3,SiO2(硅胶硅胶),聚酰胺等聚酰胺等吸附剂和洗脱剂的选择吸附剂和洗脱剂的选择:物质极性物质极性 吸附活性吸附活性 洗脱剂极性洗脱剂极性 强强 小小 强强 弱弱 大大 弱弱装柱装柱加入样品加入样品层析后层析后常用洗脱剂极性次序常用洗脱剂极性次序:石油醚石油醚环己烷环己烷CCl4甲苯甲苯CH2Cl2CHCl3乙醚乙醚醋酸乙酯醋酸乙酯正正丙醇丙醇乙醇乙醇甲醇甲醇 0.02，A、B可分可分离离.溶剂前沿溶剂前沿起始线起始线（原点）（原点）展开剂展开剂yx2x1层析缸层析缸层层析析纸纸与标样比较可定性鉴定与标样比较可定性鉴定47定性检出氨基蒽醌试样中的各种异构体定性检出氨基蒽醌试样中的各种异构体样品：样品：氨基蒽醌氨基蒽醌固定相：固定相：-溴代萘附溴代萘附着于滤纸纤着于滤纸纤维素上维素上.展开剂：展开剂：吡啶吡啶:水水（1:11:1）1,7-氨基蒽醌氨基蒽醌1,6-氨基蒽醌氨基蒽醌1,8-氨基蒽醌氨基蒽醌1-1-氨基蒽醌氨基蒽醌硝基蒽醌硝基蒽醌溶剂前沿溶剂前沿原点原点48例：例：氨基酸混合液点在氨基酸混合液点在1515cm滤纸边滤纸边2cm处，风干，处，风干，展开剂用展开剂用CH3OH-H2O-吡啶（吡啶（20:5:1），当溶剂移动至，当溶剂移动至14cm处，取出风干。处，取出风干。（第一次展开）第一次展开）将滤纸折成筒状，将滤纸折成筒状，使斑点处于下方，再用使斑点处于下方，再用叔丁醇叔丁醇-甲基乙基酮甲基乙基酮-H H2 2O-O-二乙胺二乙胺(10:10:5:1)(10:10:5:1)展开至展开至14cm14cm，取出风干。，取出风干。(第二次展开第二次展开)显色：显色：茚三酮茚三酮-4-4-乙乙-2-2-甲氮苯甲氮苯-冰冰HAcHAc xx 第二次展开第二次展开双向纸色谱法双向纸色谱法第一次展开第一次展开49 氨基酸的氨基酸的Rf值值展开剂展开剂正丁醇正丁醇+吡啶吡啶+水水 0.20 0.29 0.60 0.20 0.33 0.24 1 :1 :1正丁醇正丁醇+醋酸醋酸+水水 0.23 0.23 0.70 0.28 0.22 0.11 12 :3 :5天天冬冬氨氨酸酸甘甘氨氨酸酸白白氨氨酸酸谷谷氨氨酸酸丝丝氨氨酸酸组组氨氨酸酸PC检测方法；检测方法；1.颜色颜色,2.显色显色(反应显色反应显色,I2蒸气蒸气,紫外灯照紫外灯照)3.剪下斑点，用适当的溶剂洗脱后测定剪下斑点，用适当的溶剂洗脱后测定(比色比色,荧光荧光)50薄薄层层板板玻璃板玻璃板上涂吸附剂层上涂吸附剂层SiO2Al2O3上行法上行法薄层板薄层板层层析析缸缸展开剂展开剂层层析析缸缸展开剂展开剂滤纸条滤纸条下行法下行法薄层板薄层板 9.4.3 薄层色谱法薄层色谱法(Thin Chromatography)51薄层色谱法点样及展开过程薄层色谱法点样及展开过程52展展开开后后的的薄薄层层板板53薄层层析法的应用薄层层析法的应用天然产物和有机化合物的分离与鉴定天然产物和有机化合物的分离与鉴定 (药物药物,香精香精,氨基酸及其衍生物氨基酸及其衍生物)发展发展:薄层层析胶片，薄层层析胶片，旋转薄层层析仪，旋转薄层层析仪，自动进样技术，光谱扫描技术等。自动进样技术，光谱扫描技术等。例例:3,4-苯并芘的检测苯并芘的检测 富集富集:环己酮或石油醚提取环己酮或石油醚提取,脱水后浓缩至脱水后浓缩至0.1mL;层析分离层析分离:制板制板,点样点样,展开展开;测定测定:截取截取-乙醚洗脱乙醚洗脱-蒸干蒸干-浓浓H2SO4溶解溶解,荧光法测定荧光法测定(对照标样对照标样).54习习 题题9.1 9.2 9.3 9.5 9.655