高二下学期人教版（2019）选择性必修3 2.2.2单克隆抗体课件.pptx

动物细胞融合与单克隆抗体动物细胞融合与单克隆抗体本节聚焦：本节聚焦：什么是动物细胞融合技术？什么是动物细胞融合技术？单克隆抗体是如何制备的？在单克隆抗体是如何制备的？在临床上有哪些应用？临床上有哪些应用？.抗原抗原 反复注射动物反复注射动物从动物的从动物的血清血清中分离抗体中分离抗体这种方法的缺点是：这种方法的缺点是：产量低、纯度低，且抗产量低、纯度低，且抗体的特异性差、灵敏度体的特异性差、灵敏度低。低。抗体的传统生产方法抗体的传统生产方法.2 2、什么细胞能无限增殖？、什么细胞能无限增殖？癌细胞癌细胞3 3、有什么方法将这两种细胞的特点结、有什么方法将这两种细胞的特点结合起来？合起来？细胞融合细胞融合1 1、在体外培养的条件下，一个、在体外培养的条件下，一个B B淋巴淋巴细胞能不能无限增殖？细胞能不能无限增殖？不能无限增殖不能无限增殖.阅读教材，完成下列问题：4min1.动物细胞融合的概念动物细胞融合的概念2.诱导动物细胞融合的诱导动物细胞融合的方法方法3.灭活病毒诱导动物细灭活病毒诱导动物细胞融合的原理胞融合的原理4.动物细胞融合的原理动物细胞融合的原理5.动物细胞融合的意义动物细胞融合的意义一、动物细胞融合技术.一、动物细胞融合技术1.1.概念概念 动物细胞融合动物细胞融合也称细胞杂交，是指两个也称细胞杂交，是指两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的过程。或多个动物细胞结合形成一个细胞的过程。融合后形成的具有原来两个或多个细胞融合后形成的具有原来两个或多个细胞遗传信息的单核细胞，称为遗传信息的单核细胞，称为杂交细胞杂交细胞。2.2.诱导方式诱导方式物理法物理法：化学法：化学法：生物法：生物法：灭活的病毒灭活的病毒电刺激、振动、离心电刺激、振动、离心聚乙二醇（聚乙二醇（PEGPEG）.3.3.灭活的病毒灭活的病毒诱导动物细胞融合的原理？诱导动物细胞融合的原理？一、动物细胞融合技术.5.5.意义意义突破了突破了有性杂交方法的有性杂交方法的局限性局限性，使，使远缘杂交远缘杂交成为可能成为可能6.6.实例实例生物种类生物种类细胞来源细胞来源成功年代成功年代酵母菌-鸡原生质体-血红细胞1975年人-胡萝卜腹水癌细胞-原生质体1976年 人-鼠纤维肉瘤细胞-畸胎瘤细胞1978年4.4.动物细胞融合基本原理动物细胞融合基本原理细胞膜的流动性细胞膜的流动性一、动物细胞融合技术.动物细胞融合植物体细胞杂交比较项目制备单克隆抗体获得杂种植株用途物理、化学方法(同左)灭活的病毒物理(离心、振荡、电刺激).化学(聚乙二醇)诱导方法使细胞分散后诱导细胞融合去除细胞壁后诱导原生质体融合过程细胞膜的流动性细胞膜的流动性、植物细胞全能性原理植物体细胞杂交和动物细胞融合在原理、细胞融合的方法、诱导方法等方面有什么差异呢？3min融合后都需要进行筛选融合后都需要进行筛选.1.1.在飞船上，科学家进行了无人搭载的空间动在飞船上，科学家进行了无人搭载的空间动物细胞融合实验，该实验所依据的原理和促进物细胞融合实验，该实验所依据的原理和促进细胞融合的方法分别是细胞融合的方法分别是A.A.细胞的全能性、灭活病毒诱导融合细胞的全能性、灭活病毒诱导融合B.B.细胞的全能性、电刺激融合细胞的全能性、电刺激融合C.C.细胞膜的流动性、灭活病毒诱导融合细胞膜的流动性、灭活病毒诱导融合D.D.细胞膜的流动性、自然融合细胞膜的流动性、自然融合趁热打铁趁热打铁C2.2.既可用于既可用于基因工程基因工程又可用于又可用于细胞工程细胞工程的是的是 A A病毒病毒 B B氯离子氯离子 C C质粒质粒 D D聚乙二醇聚乙二醇A.一个B淋巴细胞(产生单一的抗A的抗体)骨髓瘤细胞能无限增殖杂交瘤细胞杂交瘤细胞动物细胞培养技术动物细胞培养技术设计方案：设计方案：动物细胞融合技术动物细胞融合技术单克隆抗体 既能产生特异性抗体，既能产生特异性抗体，又能大量增殖的细胞又能大量增殖的细胞1975197519751975年英国科学家年英国科学家年英国科学家年英国科学家米尔斯坦米尔斯坦米尔斯坦米尔斯坦和和和和柯勒柯勒柯勒柯勒的实验的实验的实验的实验.1 1、给小鼠注射特定的抗原、给小鼠注射特定的抗原蛋白目的是什么？蛋白目的是什么？获得已免疫的获得已免疫的B淋巴淋巴细胞细胞2 2、从小鼠体内提取的从小鼠体内提取的B B淋巴细淋巴细胞只有一种吗？为什么？胞只有一种吗？为什么？多种；小鼠接触过环境多种；小鼠接触过环境当中其它的抗原当中其它的抗原 二、单克隆抗体制备.问：诱导融合后有多少类杂交细问：诱导融合后有多少类杂交细胞（只考虑两两融合）？胞（只考虑两两融合）？骨髓瘤细胞骨髓瘤细胞-骨髓瘤细胞骨髓瘤细胞 B B淋巴细胞淋巴细胞-B-B淋巴细胞淋巴细胞B B淋巴细胞淋巴细胞-骨髓瘤细胞骨髓瘤细胞.（第（第1次筛选）次筛选）选选择性培养基择性培养基：选出选出杂交瘤细胞杂交瘤细胞问：两次筛选的目的和手段分别问：两次筛选的目的和手段分别是什么？是什么？抄在课本上，填空，五抄在课本上，填空，五颗星颗星第第2 2次筛选的目的：次筛选的目的：选选出能产生出能产生特定抗体特定抗体的杂的杂交瘤细胞交瘤细胞.方法-专一抗体检测法（抗体抗原特异性结合）.4 4、获得、获得大量大量单克隆抗体的方法单克隆抗体的方法有哪些？有哪些？体内培养体内培养体外培养体外培养.单克隆抗体单克隆抗体筛选二筛选二杂交细胞杂交细胞杂交瘤细胞杂交瘤细胞体外或体外或体内培养体内培养筛选一筛选一骨髓瘤骨髓瘤细胞细胞 诱导融合诱导融合分泌特异抗体分泌特异抗体的杂交瘤细胞的杂交瘤细胞杂交瘤细胞群杂交瘤细胞群提取提取已免疫的已免疫的B B淋巴细胞淋巴细胞动物动物动物动物细胞细胞细胞细胞融合融合融合融合技术技术技术技术动物动物动物动物细胞细胞细胞细胞培养培养培养培养技术技术技术技术单克隆抗体的制备 抄抄在在课课本本上上 既能大量繁殖既能大量繁殖既能大量繁殖既能大量繁殖又能产生专一抗体又能产生专一抗体又能产生专一抗体又能产生专一抗体注射注射抗原抗原(产生单一的抗A的抗体)（填空）.三、单克隆抗体的特点和应用1.1.特点特点特异性强特异性强灵敏度高灵敏度高可大量制备可大量制备阅读教材”思考与讨论”，并总结出单克隆抗体的特点和应用。3min。五颗星.诊断试剂诊断试剂治疗疾病治疗疾病运载药物运载药物三、单克隆抗体的特点和应用2.2.应用应用最广泛的应用最广泛的应用.三、单克隆抗体的特点和应用生物导弹单克隆抗体药物生物导弹单克隆抗体药物