上海理工大学医疗器械与食品学院-OLYMPUS-IX71倒置相差荧光显微镜使用说明.pdf

上海理工大学医疗器械与食品学院-OLYMPUS-IX71 倒置相差荧光显微镜使用说明-作者:_ -日期:_ OLYMPUS IX71 倒置相差荧光显微镜使用说明 一、明场方式的使用说明 1)打开明场卤素灯控制器（TH4）电源，“I”为打开，“o”为关闭。TH4 电源开关 TH4 光强调节旋钮 2)调节 TH4 上的光强调节旋钮，获得合适的光强度。4)选择合适的物镜并将聚光镜上的调节环至 BF 或空档位置。5)调节调焦旋钮，获得清楚的明场图像。6）进行拍照时，要将光路切换到目镜和软件里都可看的位置。光路切换旋钮 当前位置为完全目镜位置，光 100%到目镜，软件下看不到；若将旋钮逆时针旋转至最下方时，此时目镜下和软件里都可以看到，拍照时要将光路切换到此位置。二、相差方式的使用说明 1)选择合适的物镜和聚光镜中的相差环。4X 物镜用 PHL 10X、20X 物镜用 PH1 40X 物镜用 PH2 2)调节调焦旋钮，获得清楚的相差图像。3)20X、40X 的物镜上有矫正环，根据不同的培养容器需要调节矫正环，在聚焦到相对最清楚后调节矫正环至图像最清晰。*观察相差时，要使用与相差物镜放大倍数相匹配的相差环板。聚光镜（5 孔位）1 号孔位相差环 PHL 2 号孔位相差环 PH1 3 号孔位相差环 PH2 在聚光镜右侧旋转调节相差环，白点处的显示数字即代表相对应的相差环已放入光路 三、荧光方式的使用说明 1)打开汞灯光源控制器 U-RFL-T 的电源（开关在控制器前面板右下方）“I”为打开，“o”为关闭；2s 后“BURNER ON”指示灯点亮为绿色，荧光光源完全打开。注意：汞灯光源不要频繁开关，打开后至少使用半小时以上，关闭后至少等待半小时再打开。2）调节荧光滤色块转盘到合适的位置进行荧光观察。观察之前确保荧光滤色块转盘上的光闸 shutter 处于打开位置（“o”为打开，反之为关闭）。6 孔位荧光滤色块转盘 光闸 shutter I、调节荧光滤色镜转盘时，需要确认荧光滤色镜和标本所需的激发波长一致 UW蓝色荧光（DAPI、Hochest等）BWA绿色荧光（AlexFluo 488、GFP 等）GW红色荧光（TRITC、DsRed等）、为了防止标本的淬灭，观察或成像后请及时关闭荧光滤色镜转盘上的荧光光闸（SHUTTER）。显示汞灯灯泡已用小时数“BURNER ON”指示灯 汞灯光源控制器电源开关 四、DP2-BSW 软件使用 1）单张实时图像预览及图像采集 左侧为软件预览及采集界面，在该界面下可以调节单张采集时的各种参数：实时预览 图像采集 Movie 模式采集 曝光选项，分为手动曝光/自动曝光和超级荧光模式 曝光区域选择，有 0.1%/1%/30%和 Full Image 四种 灵敏度选择，一般选择 ISO200 曝光补偿,一般选择“0”预览分辨率选择，最高可选 1360X1024 采集分辨率选择，分辨率越高，图像越清晰，相应拍摄时间也略有会增加 图像对比度调节 2）图像添加标尺及标尺保存 I、拍照前在软件中选择正确的物镜倍率。、在 View 菜单下选择 Scale Bar 选项，标尺即会在图片上显示出来。、拍照以后如果想将标尺保存在图片中，则在 Image 菜单下选择Burn In Info 选项，然后保存图片。3）白平衡和黑平衡、在预览界面下可使用黑白平衡功能，根据标本类型不同，黑白平衡功能之一分别可用（明场观察时白平衡可用，荧光观察时黑平衡功能可用）。、点击黑（白）平衡按钮，然后在预览图片上选取合适的背景地方划一块区域，软件会自动完成黑（白）平衡。、执行完黑（白）平衡以后，若要恢复图像原来的色调，可通过点击“acquisition setting”找到”Camera”然后将其下拉菜单里的“color”的 RGB 值恢复初始状态即可。黑平衡 -THE END,THERE IS NO TXT FOLLOWING.-