Rh血型鉴定完整.pptx

二二.Rh.Rh血型系统血型系统Rh 血型系统的发现19371937年年-19391939年年 LandsteinerLandsteiner和和WienerWiener用恒河（用恒河（rhesusrhesus）红细胞免疫家兔和豚鼠得到的抗血清将人红细胞分为红细胞免疫家兔和豚鼠得到的抗血清将人红细胞分为RhRh阴性和阴性和RhRh阳性阳性19391939年年 LevineLevine和和StetsenStetsen在一患死胎的孕妇血清中在一患死胎的孕妇血清中检测到一种抗体，此为人类发现的第检测到一种抗体，此为人类发现的第一一例例RhRh抗体抗体1941-1945年 确定了人体红细胞上含有Rh系统的六种抗原，即D、d；E、e；C、c。D和d；E和e；C和c表现为对偶关系，但d抗原只是推测。第1页/共23页Rh血型的定义 根据红细胞上根据红细胞上DD抗原的有无可将人类抗原的有无可将人类红细胞分为红细胞分为RhRh阳性和阳性和RhRh阴性，即红细胞阴性，即红细胞上缺乏上缺乏DD抗原的人是抗原的人是RhRh阴性；红细胞有阴性；红细胞有DD抗原的人是抗原的人是RhRh阳性阳性Rh血型的遗传学说及命名Rh-HrRh-Hr命名法（命名法（WienerWiener学说）学说）CDECDE命名法（命名法（FisherFisher-RaceRace学说）学说）数字命名法数字命名法第2页/共23页3.Rh.Rh抗原抗原 Rh抗原有40多种，RhRh抗原的发育抗原的发育 RhRh抗原是胎儿早期就充分发育并维持整个一生，脐带血或抗原是胎儿早期就充分发育并维持整个一生，脐带血或新生儿的红细胞新生儿的红细胞RhRh血型与成人一样强。血型与成人一样强。与临床关系最密切：D、E、C、c、e 5种，D的抗原性最强。抗原强弱次序为抗原强弱次序为 D D E E C C c c e e 我国Rh频率约占人群中的0.34%二二.Rh.Rh血型系统血型系统医学全在线网站 第3页/共23页第4页/共23页Rh血型的 D变异型DD变异型的定义：变异型的定义：有些含有些含DD抗原的红细胞与某些抗抗原的红细胞与某些抗DD血清反血清反应，应，而与另一些抗而与另一些抗DD血清不反应，这些红细胞所含血清不反应，这些红细胞所含的的DD抗原可能缺少完整抗原可能缺少完整DD抗原的某些成份或者呈现抗原的某些成份或者呈现很很弱的抗原活性，这些弱的抗原活性，这些DD抗原统称为抗原统称为DD变异型。变异型。DD变异型包括变异型包括弱弱DD型型（DDu u）和）和不完全不完全DD型型（partial Dpartial D）第5页/共23页第6页/共23页DD变异型抗原的特点变异型抗原的特点 与一些抗与一些抗DD血清发生凝集反应，而与另一些血清发生凝集反应，而与另一些抗抗DD血清不发生凝集反应，要证实这种弱表现血清不发生凝集反应，要证实这种弱表现的的DD抗原，需用抗原，需用间接抗球蛋白试验间接抗球蛋白试验。第7页/共23页8.Rh.Rh系统抗体系统抗体 多是通过外来RBCRBC免疫刺激后产生，即通过通过输血输血或或妊娠免妊娠免疫疫而产生而产生。这些抗体均为IgGIgG。一般在初次免疫后一般在初次免疫后2 2 2 2 6 6 6 6个月内出个月内出现，经再次免疫后，现，经再次免疫后，3 3 3 3周内抗体浓度可达到高峰。大约周内抗体浓度可达到高峰。大约1/31/31/31/3的的RhRhRhRh阴性的人，经阴性的人，经RhRhRhRh阳性抗原免疫后，不产生抗阳性抗原免疫后，不产生抗D.D.D.D.非免疫的非免疫的RhRhRhRh抗体抗体极为罕见极为罕见.D D抗原是非ABOABO红细胞抗原中免疫性最强的抗原，可以引起抗D D的产生，抗D D与D D红细胞产生严重的溶血反应。第8页/共23页.Rh血型鉴定 常规情况下，红细胞只做常规情况下，红细胞只做RhRh（DD）定）定型，型，对供血者需鉴定对供血者需鉴定DD变异型，只有特殊情况下才变异型，只有特殊情况下才检查其它抗原。例如：家系调查、父权鉴定、检查其它抗原。例如：家系调查、父权鉴定、产前检查、确定纯合子或杂合子以及配血试产前检查、确定纯合子或杂合子以及配血试验中发现有不规则抗体存在等情况下才需做验中发现有不规则抗体存在等情况下才需做RhRh血型全部表现型的定型血型全部表现型的定型医学全在线网站 第9页/共23页10血型鉴定及方法学评价：Rh抗体属IgG不能在盐水介质中与RBC发生凝集。(1).低离子强度盐水试验 原理：降低介质的离子强度可减少RBC外围的离子云 促进IgG分子在两个RBC之间搭桥使之结合，能缩短抗原与抗体的反应时间，并提高其灵敏度。第10页/共23页11(2).抗人球蛋白法：又称Coombs试验直接法：可检查受检者的RBC是否已被不完全抗体致敏；间接法：可用于鉴定Rh血型及血清中是否存在不完全抗体。第11页/共23页12(3).酶介质法：原理：木瓜酶或菠萝酶可以破坏RBC表面的唾液酸，使RBC膜失去电荷，缩小RBC间的距离；酶可以部分地改变RBC结构，使某些隐蔽的 抗原得以暴露，增强凝集性(4).聚凝胺法：本法用于临床配血是切实可行的。第12页/共23页2.Rh血型鉴定可能出现假阳性的原因受检细胞直抗阳性受检细胞直抗阳性 高蛋白试剂引起缗钱状凝集高蛋白试剂引起缗钱状凝集纤维蛋白造成的凝块纤维蛋白造成的凝块定型试剂中存在的其它抗体定型试剂中存在的其它抗体多凝集细胞造成的假阳性多凝集细胞造成的假阳性鉴定器材和试剂血清被污染鉴定器材和试剂血清被污染医学全在线网站 第13页/共23页血型鉴定可能出现假阴性的原因受检细胞悬液浓度太高，与试剂血清比例失受检细胞悬液浓度太高，与试剂血清比例失调。调。漏加或错加定型试剂漏加或错加定型试剂观察结果时摇动用力过度，摇散弱凝集。观察结果时摇动用力过度，摇散弱凝集。试剂血清保存不当引起变质试剂血清保存不当引起变质第14页/共23页15.RH.RH血型的临床意义：血型的临床意义：1.与输血关系：RhRh第一次接受RhRh血液不溶血，产生抗体 RhRh第二次接受Rh血液产生大量的抗体，溶血 2.与新生儿溶血病的关系：孕妇血浆中如有孕妇血浆中如有RhRh抗体，抗体，妊娠妊娠RhRh血型不配合胎儿时，其中血型不配合胎儿时，其中IgGIgG类的类的RhRh抗体可以通抗体可以通过胎盘进入胎儿体内。过胎盘进入胎儿体内。第15页/共23页16三、其它红细胞血型系统三、其它红细胞血型系统MNSsU血型系统血型系统 有有40个抗原，基因表达个抗原，基因表达产物为产物为MN唾液酸糖蛋白、唾液酸糖蛋白、Ss唾液酸糖蛋白唾液酸糖蛋白P血型系统血型系统 Kell血型系统血型系统Kidd血型系统血型系统Lewis血型系统血型系统第16页/共23页17【原理【原理 （principleprinciple）】(盐水法)（五）（五）.交叉配血交叉配血无凝集 无凝集1000-2000 rpm 1-2min 观察。室温5min后室温盐水介质天然IgMIgM类血型抗体对应的红细胞抗原凝集献血员血清 主次 病人血清病人病人2%RBC献血员2%RBC病人血清献血员2%RBC病人病人2%RBC献血员血清第17页/共23页18【报告方式】【报告方式】1.如两管均无凝集，则报告：病人XX（X型）血清献血者XX（X型）红细胞 有或无凝集溶血病人XX（X型）红细胞献血者XX（X型）血清 有或无凝集溶血 （XX配血法）2.任何一管或两管有凝集或溶血:立即复查血型或查明其他原因如实报告，并与病室 联系，决不能随便输血。第18页/共23页19盐水法盐水法评价安全输血包括检测ABO相合与否，也包括免疫性抗体的检测。最初的交叉配血以盐水介质为主，而盐水介质实验只能发现ABO不配合，不能检出IgG抗体，所以血库标准不要求盐水介质实验的配血，而要求在血清学配合实验中使用能展示ABO不配合和在37有活性的、有临床意义重要抗体的方法。从安全输血的角度和今后发展趋势分析，盐水介质法将会和其他技术联合运用。第19页/共23页20凝聚胺法凝聚胺法 【原理】【原理】红细胞膜表面的唾液酸带有的大量的负电荷，可避免其发生自发凝聚，使红细胞保持最大的表面面积，增加氧的转移能力和气体扩散。红细胞悬浮在电解质内，阳离子被红细胞的负电荷吸引，红细胞被扩散的双层离子云围绕，形成zeta电位，它决定红细胞之间的排斥作用。医学全在线网站 第20页/共23页21凝聚胺法步骤凝聚胺法步骤Polybrene技术首先利用低离子介质（LIM），介质的离子强度是影响抗体结合红细胞原能力的重要理化条件之一，正负离子相互作用力-即静电力显著影响抗体与红细胞的反应。减低介质的离子强度，减少了红细胞周围的阳离子云，从而促进带正电荷的lgG与带负电荷的红细胞发生反应，以促进红细胞和血清（血浆）中的抗体结合。其后，加入凝聚胺（Polybrene）试剂。凝聚胺是一种高价阳离子季胺盐多聚物，溶解后能产生很多正电荷，可以中和红细胞膜表面的唾液酸带有的负电荷，使红细胞的zeta电位降低，红细胞之间距离减少，使红细胞发生凝聚。最后，加入复悬液（Resuspending）。复悬液有中和Polybrene的作用。使正常红细胞可逆性的非特异性凝聚散开。如果是抗体致敏的红细胞被凝聚胺凝集，则凝集不可逆，为阳性结果。第21页/共23页22Discussion：1.是不是交叉配血结果阴性，就一定不会出现输血反应？医学全在线网站 第22页/共23页23感谢您的观看！第23页/共23页