洛克氏液琼脂培养基的制作培养阿米巴原虫.docx

洛克氏液琼脂培养基的制作（培养阿米巴原虫）:1 .固体部分 牛肝浸育3.5 g,蛋白陈5.5 g,琼脂粉15 g,洛克氏液1000ml。2 .洛克氏液成分 氯化钠8g,氯化钾0.2 g,氯化钙0.2 g,氯化镁0.01g,磷酸氢二钠2 g ,磷酸二氢钾0.3 g ,蒸储水1000mlo3 .操作方法：接种前在每培养管内加入洛克氏液34ml,灭活小牛血清0.5ml,消毒米粉 少许，青链霉素各3（）005000单位，最后加入虫种12滴即可。4 .所需物品及具体配制步骤1）准备蒸播水30005000ml； 2000ml和1000ml三角烧瓶各1个；2）取蒸馀水2000 ml,将1500 ml放入2000 ml的三角烧瓶内，加入氯化钠16g、氯化钾 0.4g、磷酸氢二钠4g、磷酸二氢钾0.6g；将另500 ml蒸谭水分装在已备的2个250 ml的三 角烧瓶内；3）取称量瓶2个，1个放入氯化镁0.02g,另一个放入氯化镁0.4g：再取2个500 ml的 盐水瓶，2个或3个100 ml的三角烧瓶，待消毒。4）将以上物品放入高压消毒炉内，经15磅，20分钟高压灭菌后，取出待所有液体冷却 后，分别将称量瓶中的氯化镁和氯化钙溶解在以上2个250 ml的三角烧瓶内，先将溶解的 氯化镁溶液加入盛有1500ml水的三角烧瓶内，然后再将溶解的氯化钙溶液缓慢加入其中， 即配制成2000ml经过消毒灭菌的洛克氏液。5）配制固体部分取洛克氏液1000ml,加入牛肝浸膏3.5g,蛋白陈5.5g,琼脂粉15g （或琼脂18g）,经 沸水浴使其完全溶化，趁热分装在己备的试管内，每管45 mL将分装好的试管经高压灭菌（15磅20分钟），取出后趁热放木条上制成斜面，冷却后 放入冰箱内储存备用。5.注意事项1）剩余的洛克氏液与培养基管放置在4冰箱保存；2）切记加氯化钙时，必须缓慢加入或滴入，最好在25以卜操作。