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GS试剂制备组织切片的染色效果分析,病理学论文常规病理技术常用的固定剂为 4%甲醛，脱水、透明的主要试剂为乙醇和二甲苯。已有研究中证实，常规病理技术应用中相关的试剂多具有较强的刺激性和挥发性，不但病理技术应用存在一定局限，且还会对相关人员的身体健康造成不良影响。因而，寻找一种对人体无毒、无害且安全的替代品已成为病理技术工作者的一种迫切愿望。本研究分别通过 GS 试剂和传统试剂制备组织切片，并将其分别应用在病理自动化染色的经过中，比拟不同方式方法、不同试剂制备的组织切片的染色效果，现报道如下。 1 资料与方式方法 1.1 一般资料 选取湘乡市人民医院自 2020 年 5月2021 年 2 月期间临床送检的不同活体组织病理标本共计4014 例，包括乳腺、结直肠、食管、胃、甲状腺肿物、淋逢迎、皮肤、胆囊、脂肪、子宫宫颈、肝脏、扁桃体及肾穿刺组织等不同部分的新鲜病理组织，每份标本都取材 2 个组织块组织块的大小为1.5 cm 1.0 cm 0.2 cm，并分别采用 GS 环保套液石蜡制片法和传统的石蜡制片法对组织进行处理制片固定、脱水、透明、浸蜡，然后将其进行病理自动化染色，将采用 GS 环保套液处理的标本作为观察组，将传统试剂处理的标本作为对照组，比拟两组组织标本的制片、染色效果。 1.2 方式方法 采用同一型号全自动脱水机、石蜡切片机、生物组织自动包埋机以及全自动染色机等。GS 环保套液由哈尔滨格林公司研究开发生产的。 1.2.1 对照组 本组组织样本所采用的是经传统石蜡制片法制片并采用传统 HE 染色法染色方式方法。制片方式方法为：采用 4%的中性甲醛或者 95%的乙醇和甲醛溶液以 91 的比例配成固定液对组织进行固定，经乙醇脱水经浓度为 70%、80%、95%的乙醇和无水乙醇进行梯度脱水，二甲苯透明，浸腊后使用石蜡包埋。将其切成 45 m 厚的切片。染色方式方法为：切片 70烤片 10 min;分别使用二甲苯和二甲苯脱蜡各 5 min,然后使用无水乙醇、95%乙醇、80%乙醇梯度脱水各 2 min,自来水冲洗3 min;苏木精染色 8 min,自来水冲洗 3 min;1%盐酸分化液分化 7 s,自来水冲洗；蓝化液 1 min,自来水冲洗 1 min;1%伊红染色 3 min,自来水冲洗 7 s;70%乙醇、95%乙醇各 10 s;无水乙醇、无水乙醇各 3 min;二甲苯、二甲苯各 3 min;中性树胶封固。 1.2.2 观察组 本组组织样本所采用的是经过 GS 环保染色试剂制片并采用全自动 HE 染色方式方法。制片方式方法为：采用 GS无醛固定液对组织进行固定，分别采用脱水液、透明液、浸蜡液分别进行脱水、透明和包埋，采用石蜡切片机进行切片处理。对于标本体积较小的肾穿刺标本而言，需要采用手工单独处理的方式方法进行制片1,制片的步骤同上。染色方式方法为：切片 70烤片10 min;分别使用 GS 脱蜡液和 GS 脱蜡液脱蜡 5 min;然后使用无水乙醇、95%乙醇脱水各 30 s,自来水冲洗 2 min;苏木精染色 4 min,自来水冲洗 1 min;1%盐酸酒精分化 5 s,自来水冲洗 3 min;蓝化液染色 1 min,自来水冲洗 1 min;1%伊红染色2 min,自来水冲洗 10 s;除浮染液 10 s;无水乙醇 1 min;除水透明 1 min;透明 1 min;无苯封片胶封固。 1.3 统计学处理 用 SPSS.17.0 统计软件进行数据处理，计量资料采用 x s 表示，组间比拟采用 t 检验；计数资料用例数n表示，计数资料组间率%的比拟采用 2检验；以 P 0.05 为差异有统计学意义。 2 结果 4014 例患者的病理组织经 GS 环保套液制片与经传统石蜡制片法制片后，比拟其组织切片可见，观察组经 GS 环保套液制片的组织切片效果愈加良好，均未出现脱水不完全，组织变脆和变硬的情况；2 种方式方法制片后经 HE 染色，经 GS 环保套液染色的时间更短P 0.05，且经 HE 染色后，染色愈加均匀，组织细胞的结果清楚明晰，细胞间的裂隙较少。见表 1. 3 讨论 在常规的病理技术工作中，常需要对病理组织样本进行制片染色来对其进行分析和研究，但是在脱水、固定等经过中常用的试剂，如甲醛、二甲苯等都具有特别强烈的挥发性和刺激性2-5,不仅对实验室工作人员的身体健康会产生较大的危害，还会对环境造成很大的污染6.因此，寻找性能稳定的能够代替甲醛、二甲苯等有害试剂的无毒、环保试剂对于病理技术工作人员和环境保卫都具有特别重要的意义，GS 环保试剂应运而生。 本研究采用了哈尔滨格林公司7开发研制的 GS 环保试剂和传统的甲醛、二甲苯试剂对不同部位的病理组织标本进行制片和染色，结果可见 GS 试剂不仅在制片经过中具有更强的浸透性，且能够有效缩短染色经过中的脱水时间，保证组织的细胞能保持原有的构造，不会发生过度脱水而致收缩的现象；由于 GS 环保套液中的苏木精染液着色迅速，分化后冲洗时间短，也提高了染液的稳定性。在切片的时候，不管对切片的厚度要求如何，都能发现切片中的组织染色均匀完好，且在显微镜下细胞核和细胞质的颜色分明，色泽特别亮丽鲜艳，有利于愈加清楚明晰直观的观察病理组织的细胞构造8. 综上所述，在病理技术工作中，采用 GS 环保试剂代替传统的甲醛和二甲苯具有无毒、无污染、无异味释放的优点，染色效果愈加满意，且安全性好，制片和染色时间短，值得在病理技术工作中进行推广。 以下为参考文献： 1 郭效忠，苗志风，刘春荣，等。GS 环保试剂在病理制片中的应用体会J.诊断病理学杂志，2020,73：32. 2 寇雪梅，赵玉莹。GS 环保套液在病理技术工作中的应用J.黑龙江医学，2020,369：676-677. 3 田玉旺，朱红艳，苗金红，等。GS 环保试剂在病理制片技术中的应用J.诊断病理学杂志，2018,184：312-313. 4 宋一民，高冬玲，郝志伟。GS 环保染色套液在病理常规染色中的应用J.诊断病理学杂志，2020,214：256. 5 易红梅，李艳春，钟仁华，等。GS 环保型试剂在病理技术工作中的应用体会J.临床与实验病理学杂志，2020,304：463-464. 6 苗金红，田玉旺，朱红艳。GS 环保试剂在特殊染色中的应用J.诊断病理学杂志，2020,2011：736-737. 7 朱卫国，刘春玲，寇雪梅，等。格林组织标本制备及切片染色套液在病理实验室中的应用J.武警医学，2020,237：610-611. 8 孙廷谊，谢红建，孔令非。GS 试剂在病理自动化染色中的应用J.诊断病理学杂志，2020,204：254-255.
