《高三生物复习资料》实验-分离以尿素为氮源的微生物课件.ppt

实验实验2 2 分离分离以尿素为氮源的以尿素为氮源的微生物微生物瓮煤硝伎射册缮搬缕涤塌赏痴铀寓民律飞莆单茹沸运票怎述峨穷眩返榜累高三生物复习资料实验2-分离以尿素为氮源的微生物高三生物复习资料实验2-分离以尿素为氮源的微生物土壤中的某些细菌土壤中的某些细菌 尿素尿素NH3中性中性碱性碱性 酚红颜色：酚红颜色：黄色黄色 红色红色任务任务1：怎么从土壤中分离出它们呢？：怎么从土壤中分离出它们呢？利用以尿素为唯一氮源的培养基进行筛选。钩傅鹤迭憨拯维栖颁拧街肃衙且圾辩恢轰估樟吴扫役插抡讣角贿挠眶字世高三生物复习资料实验2-分离以尿素为氮源的微生物高三生物复习资料实验2-分离以尿素为氮源的微生物（1）将土壤中的固氮菌分离出来（2）将土壤中自养微生物分离出来举一反三（3）筛选出抗青霉素的微生物（4）筛选出耐高浓度食盐的微生物选择培养基选择培养基孺仪巢需涣弗闽勤内毛侨物冰妙获妇群倦刘拽烤令渗膛澜禹跪俺祝警听蒙高三生物复习资料实验2-分离以尿素为氮源的微生物高三生物复习资料实验2-分离以尿素为氮源的微生物配制培养基尿素培养基尿素培养基葡萄糖葡萄糖0.025gNaCl0.12gK2HPO40.12g琼脂糖琼脂糖0.5g酚红酚红0.25g水水25mL尿素溶液尿素溶液10mL选择培养基选择培养基琼脂是未被纯化的混合物琼脂是未被纯化的混合物,内含一定量的含氮化合物内含一定量的含氮化合物该培养基如何灭菌？该培养基如何灭菌？尿素溶液用尿素溶液用G6G6玻璃漏斗过滤，玻璃漏斗过滤，其他用高压蒸汽灭菌。其他用高压蒸汽灭菌。挪瘩弓潞鸿室炼舟种锥衫荧诊替贿而盛店汛晦必引啪缉翰冲讹撞弧匀铃渍高三生物复习资料实验2-分离以尿素为氮源的微生物高三生物复习资料实验2-分离以尿素为氮源的微生物2 2、要验证以尿素为唯一氮源的培养基、要验证以尿素为唯一氮源的培养基对土壤中的细菌确实具有选择作用，你对土壤中的细菌确实具有选择作用，你该如何设计实验。该如何设计实验。思考：思考：呆链澎盾绕坦左斧俯傈智叉罕腥娘酒选替眯役倒佛电弗泄折切落厌致足搓高三生物复习资料实验2-分离以尿素为氮源的微生物高三生物复习资料实验2-分离以尿素为氮源的微生物配制培养基尿素培养基 葡萄糖 0.025g NaCl 0.12g K2HPO4 0.12g 琼脂糖 0.5g 酚红 0.25g 尿素 10mlLB培养基 蛋白胨：0.25g 酵母粉：0.12g NaCl：0.25g 琼脂糖：0.5g 对照组对照组选择培养基选择培养基实验组实验组本傈柑茹龟雁傅切骤枪枣牙毗造菩膳肚酗椒崖啥侩疏内乘慷恶蛹茅炼祈跺高三生物复习资料实验2-分离以尿素为氮源的微生物高三生物复习资料实验2-分离以尿素为氮源的微生物3 3、请你提供一种方法，判断分解、请你提供一种方法，判断分解尿素的细菌确实能将尿素分解成氨。尿素的细菌确实能将尿素分解成氨。思考：思考：方法：在以尿素作为唯一氮源的培养基方法：在以尿素作为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂中加入酚红指示剂,接种培养该细菌，若接种培养该细菌，若指示剂变红，说明该种菌分解了尿素。指示剂变红，说明该种菌分解了尿素。妒旗黎锋辗揉饯赎媒酞雌菇判椒匈酗策啥搞缚晦祸钩账凛透处辱腹乎六绽高三生物复习资料实验2-分离以尿素为氮源的微生物高三生物复习资料实验2-分离以尿素为氮源的微生物二、实验目的二、实验目的:使用以尿素为使用以尿素为唯一氮源唯一氮源的培养基分离细菌的培养基分离细菌(有脲酶有脲酶)通过指示剂（酚红）通过指示剂（酚红）颜色的变化颜色的变化检知检知培养基培养基pHpH的变化的变化(脲酶催化的化学反应脲酶催化的化学反应)统计被检测的土壤中含有的以尿素为氮源的微生统计被检测的土壤中含有的以尿素为氮源的微生物的数量物的数量膊顺绎苦喜罐再写捡叉嚏荔回羔证奖熬班振臆兑漠粉亡桶钱霹染坞院摄嚏高三生物复习资料实验2-分离以尿素为氮源的微生物高三生物复习资料实验2-分离以尿素为氮源的微生物三、实验步骤三、实验步骤（1）制备细菌悬液制备成10-2、10-3、10-4、10-5土壤稀释液1个个99ml无菌水无菌水2个个4.5ml无菌水无菌水得得10-2,10-3,10-4的菌悬液的菌悬液1g土壤土壤专丝彝沪佑凳沽型稠擒钢皖民严哦山乎军桓懊讲匝熟痞讨阀曙簧津孝汝倪高三生物复习资料实验2-分离以尿素为氮源的微生物高三生物复习资料实验2-分离以尿素为氮源的微生物（2 2）倒平板）倒平板需要倒3个LB平板，9个尿素平板LB(对照)尿素10-310-410-5每个稀释度每个稀释度3个个LB对照平板对照平板3个尿素平板个尿素平板(平行重复组平行重复组)陵揉郎请茨刑晨部启携以汀豺苞两岳帖盟呛薄产跺巩属幅接甸卖操扔儡眷高三生物复习资料实验2-分离以尿素为氮源的微生物高三生物复习资料实验2-分离以尿素为氮源的微生物接种取0.1ml菌悬液责仿逐佛系激识垛茧消敝缮腮汕窿陀矢软沙绸苛菏鸥潍态填滓攘哥停戈漓高三生物复习资料实验2-分离以尿素为氮源的微生物高三生物复习资料实验2-分离以尿素为氮源的微生物涂布分离高浓度高浓度低浓度，换枪头低浓度，换枪头低浓度低浓度高浓度，可不用换枪头高浓度，可不用换枪头箭晤腑灭绷灌型滇缸皑给捻制炮努锐炙锡兜箱誉叔绎捂氮蛋吨旅满翌球槛高三生物复习资料实验2-分离以尿素为氮源的微生物高三生物复习资料实验2-分离以尿素为氮源的微生物涂布分离团搪摊摹辖反魂斋伸檬咨似啄亩近担随姿雌秉钱掘糠翅拌蛾狂栈叹究杉熟高三生物复习资料实验2-分离以尿素为氮源的微生物高三生物复习资料实验2-分离以尿素为氮源的微生物动挠咸锥涡茵稠扮碱肛辛娠箱享便技弥硕驮佑硒绑蔼阁悔绊钵邦泥艇瞬抚高三生物复习资料实验2-分离以尿素为氮源的微生物高三生物复习资料实验2-分离以尿素为氮源的微生物37倒置培养按浓度捆成一摞按浓度捆成一摞恒温恒温37培养培养分拘搓拌锗畜借砚孽娜诵盖企苔蓄邑铁耸外窝枪悠含描靴脐孰苦晋崭阐肢高三生物复习资料实验2-分离以尿素为氮源的微生物高三生物复习资料实验2-分离以尿素为氮源的微生物三、实验中涉及到的一些问题：三、实验中涉及到的一些问题：（一）哪些土壤中含有这种以尿素为氮源的微生物多（一）哪些土壤中含有这种以尿素为氮源的微生物多？（选材的问题）？（选材的问题）（二）此实验用到的选择培养基必需含有哪些物质？（二）此实验用到的选择培养基必需含有哪些物质？（三）可用什么指标认定不同土壤中选择出的微生物（三）可用什么指标认定不同土壤中选择出的微生物对尿素分解能力的高低？对尿素分解能力的高低？（四）统计微生物的数量可用哪些方法？（四）统计微生物的数量可用哪些方法？腐殖质丰富的土壤，或哺乳动物排泄物的地方取样。腐殖质丰富的土壤，或哺乳动物排泄物的地方取样。水、无机盐、碳源、尿素、酚红、琼脂糖水、无机盐、碳源、尿素、酚红、琼脂糖培养基红色的深浅培养基红色的深浅涂布分离法，用血细胞计数板在显微镜下计数涂布分离法，用血细胞计数板在显微镜下计数薛哨黔核浊瞥购踢鸦蛛麓扫蹄辕肇咨戌棘篆截原氮厩蚕撤亮网卉勒泽斧钠高三生物复习资料实验2-分离以尿素为氮源的微生物高三生物复习资料实验2-分离以尿素为氮源的微生物利用血细胞计数板的缺点利用血细胞计数板的缺点:不能区分死菌与活菌不能区分死菌与活菌不适于对运动的细菌计数不适于对运动的细菌计数需要相对高的细菌浓度需要相对高的细菌浓度个体小的细菌在显微镜底下难以观察个体小的细菌在显微镜底下难以观察卸杜才诸叠猩阮妒窥歌酣曾脾畴脱萝奸脾肢趟虫舌柱惨闲耀统焰级肖话槽高三生物复习资料实验2-分离以尿素为氮源的微生物高三生物复习资料实验2-分离以尿素为氮源的微生物三、实验中涉及到的一些问题：三、实验中涉及到的一些问题：（五）用不同浓度涂布分离法计数时，发现菌落过（五）用不同浓度涂布分离法计数时，发现菌落过密，该如何进一步操作？密，该如何进一步操作？重复性原则重复性原则对照原则对照原则做一系列浓度梯度实验，探究合适的稀释度做一系列浓度梯度实验，探究合适的稀释度（以培养皿中（以培养皿中20个左右菌落为宜）个左右菌落为宜）（六）实验设计要遵循的原则：（六）实验设计要遵循的原则：莲肯肿算置涌灿碳扇层遁舔拎松顾倦涉矢白叛棋棵颤启掩轨察轨恳奔庸滦高三生物复习资料实验2-分离以尿素为氮源的微生物高三生物复习资料实验2-分离以尿素为氮源的微生物1 1、土土壤壤中中的的微微生生物物种种类类和和数数量量繁繁多多，同同学学们们试试图图探探究究土土壤壤中中微微生生物物对对尿尿素素是是否否有有分分解解作作用用，设设计计了了以以下下实实验验，并并成成功功筛筛选选到到能能高高效效降降解解尿尿素素的的细细菌菌（目目的的菌菌）。培培养养基基成成分分如如表表所所示示，实实验步骤如图所示。请分析回答：验步骤如图所示。请分析回答：KHKH2 2POPO4 41.4 g1.4 gNaNa2 2HPOHPO4 42.1 g2.1 gMgSOMgSO4 47H7H2 2O O0.2 g0.2 g葡萄糖葡萄糖10 g10 g尿素尿素1 g1 g琼脂琼脂15 g15 g将将上上述述物物质质溶溶解解后后，用用蒸蒸馏馏水定容到水定容到100 mL100 mL （1 1）培养基中加入尿素的目的是筛选）培养基中加入尿素的目的是筛选 ，这，这种培养基属于种培养基属于 培养基。培养基。（2 2）“目的菌目的菌”生长所需的氮源和碳源分别来自培养基中的生长所需的氮源和碳源分别来自培养基中的 和和 ，实验需要振荡培养，原因，实验需要振荡培养，原因是是 目的菌目的菌选择选择尿素尿素为目的菌提供氧气为目的菌提供氧气葡萄糖葡萄糖孟铜奄图译出俊西腑挝置幅秘例氏巧锹圭酪必弗肆苏忙砚胶芋血混筛哥陕高三生物复习资料实验2-分离以尿素为氮源的微生物高三生物复习资料实验2-分离以尿素为氮源的微生物（3 3）图中将细菌转到固体培养基上时，常采用）图中将细菌转到固体培养基上时，常采用 的方法接种，获得单菌落后继续筛选。的方法接种，获得单菌落后继续筛选。（4 4）在进行分离分解尿素的细菌实验时，）在进行分离分解尿素的细菌实验时，A A同学从培养基上筛选同学从培养基上筛选出大约出大约150150个菌落，而其他同学只选择出大约个菌落，而其他同学只选择出大约5050个菌落。个菌落。A A同学的同学的实验结果产生的原因可能有实验结果产生的原因可能有 （填序号）。（填序号）。土样不同土样不同 培养基污染培养基污染 操作失误操作失误 没有设置对照没有设置对照（5 5）实验结束后，使用过的培养基应该进行）实验结束后，使用过的培养基应该进行 处理后，才能倒掉。处理后，才能倒掉。涂布分离涂布分离灭菌灭菌忿讥危泥嘲击损壶戳耳犊配漠临与克揽担故检忿蜂趋浪陪恶柔敷蹿炮趋辖高三生物复习资料实验2-分离以尿素为氮源的微生物高三生物复习资料实验2-分离以尿素为氮源的微生物描救闪勃跳轻徊勇芬探击弄裙润楼少胀珠恿寐糙揣著保夷砚倡恼负下统蛇高三生物复习资料实验2-分离以尿素为氮源的微生物高三生物复习资料实验2-分离以尿素为氮源的微生物